肠易激综合征小肠黏膜肠嗜铬细胞和肥大细胞的病理表现

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1、1肠易激综合征小肠黏膜肠嗜铬细胞和肥大细胞的病理表现作者:王深皓,董蕾,罗金燕,龚均,李路,韩水平,陈明霞 【摘要 】 目的:探讨肠易激综合征( IBS)患者小肠黏膜肠嗜铬细胞(EC) ,肥大细胞(MC)的数量和分布以及 EC 合成与储存 5HT 的功能改变. 方法:将符合罗马 III 标准的 38 例 IBS 患者分为:便秘型 IBS 18 例(A 组) ,腹泻型 IBS 20 例(B 组) ,另选20 例因各种原因接受结肠镜和小肠镜检查均未见明显病变的健康者作为对照组(C 组). 通过小肠镜及结肠镜分别取小肠不同部位黏膜,应用免疫组织化学方法检测 EC 和 MC,并用电子显微镜观察 EC

2、的功能. 结果: A 组和 B 组每高倍镜视野下 EC 数量十二指肠降段黏膜分别为 9.43.9, 10.23.7,近端空肠黏膜为 6.72.6, 6.22.4, 回肠末端黏膜为 2.71.4, 3.21.9, 与 C 组各个部位EC 数量 10.53.4, 6.63.4,3.11.7 相比差异均无统计学意义(P0.05). A 组和 B 组十二指肠降段黏膜 EC 功能比末端回肠活跃,与 C 组相似 . A 组和 B 组每高倍镜视野下末端回肠黏膜MC 数量 38.79.4,35.85.5 与 C 组 29.84.4 相比明显升高(P0.05). A 组和 B 组十二指肠降段黏膜 MC 数量分别

3、为19.64.7, 18.56.3,近端空肠黏膜 MC 数量为218.85.8, 19.74.8,与 C 组 MC 数量 19.23.3,20.06.9 相比差异无统计学意义(P0.05). 结论:IBS 患者小肠黏膜 EC 无明显改变,而末端回肠黏膜 MC 增多. IBSC 和 IBSD 小肠黏膜 EC 和MC 的病理变化相似. 【关键词】 显微镜检查,电子;嗜铬细胞;肠易激综合征;肥大细胞;5 羟色胺;肠黏膜;小肠 【Abstract】 AIM: To investigate the distributions and numbers of enterochromaffin cells (

4、EC) and mast cells (MC), and the functional status of EC in the small intestinal mucosa of patients with irritable bowel syndrome (IBS). METHODS: Eighteen constipationpredominant IBS patients (group A), 20 diarrhea predominant IBS patients (group B) and 20 healthy normal controls (group C) were sele

5、cted as subjects according to Rome III criteria. They all underwent colonoscopies and small intestinal endoscopies, and their mucosa samples at the descending part of duodenum, proximal end of jejunum and terminal ileum were obtained in the meantime. Immunohistochemical methods were used to detect E

6、C and MC. EC were also observed under electron microscope for their functional status. RESULTS: For each high power visual field, the numbers of EC in group A and B at the descending part of duodenum were 9.43.9 and 310.23.7 respectively, 6.72.6 and 6.22.4 at proximal end of jejunum, 2.71.4,3.21.9 a

7、t terminal ileum. Compared with those in group C (10.53.4,6.63.4,3.11.7 respectively), they did not have significant differences (P0.05). Observed under electron microscope, EC in group A and B at the descending part of duodenum were of more active functional status, compared with those at terminal

8、ileum, which was similar to group C. The numbers of MC in group A and B at terminal ileum were 38.79.4 and 35.85.5 respectively, which were significantly more than those in group C (29.84.4, P0.05). The numbers of MC at the descending part of duodenum in group A and B were 19.64.7 and 18.56.3 respec

9、tively, 18.85.8 and 19.74.8 at proximal end of jejunum. Compared with those in group C (19.23.3,20.06.9 respectively), they did not have significant differences(P0.05). CONCLUSION: Enterochromaffin cells show no significant change in small intestinal mucosa and mast cells increase at terminal ileum

10、in patients with IBS. The pathological changes of EC and MC in the small intestinal mucosa of the patients with 4constipationpredominant IBS are similar to those in ones with diarrheapredominant IBS. 【Keywords】 electron microscope; chromaffin cells; irritable bowel syndrome; mast cell; serotonin; in

11、testinal mucosa; intestine, small 0 引言 肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)是最常见的功能性胃肠疾病1. 胃肠道黏膜的肠嗜铬细胞(enterochromaffin cell,EC)所分泌的 5羟色胺(serotonin,5HT ) ,在调节胃肠道运动和感觉功能中起重要作用2. 胃肠道黏膜的肥大细胞(mast cell, MC)释放多种生物活性介质,包括生物胺、酶和白三烯等,影响胃肠道的神经和平滑肌功能3. 目前国内、外有关 IBS 患者肠道黏膜 EC 和 MC 数量、分布以及 EC 合成、储存 5HT 功能的研究结论尚不

12、一致,且报道较少,为此我们进行了这方面的研究,以探讨 IBS 的病理机制. 1 材料和方法 1.1 材料 200607/200702 从西安交通大学第二附属医院消化科门诊患者中选取符合罗马 III 标准4并且年龄18 岁的 IBS 患者 38例分为便秘型 IBS(constipation predominant IBS, IBSC)患者组(A 组)18 (男 9,女 9)例,年龄(41.515.1)岁;腹泻型IBS(diarrhea predominant IBS, IBSD)患者组(B 组)20 (男512,女 8)例,年龄(48.716.6)岁. 同一时期从西安交通大学第二附属医院内镜室选

13、取因各种原因接受结肠镜和小肠镜检查均未见明显病变的健康者 20(男 9,女 11)例,年龄(39.919.5)岁,作为正常对照组(C 组) . 结肠镜(日本潘太克斯公司,型号 EC 3830F) ;小肠镜(日本富士能公司,型号 EP 450/p) ;兔抗人5HT 抗体( 北京中衫金桥公司,编号 ZA0231, 稀释度 1100);鼠抗人胰蛋白酶抗体(福州迈新公司,编号 MAB0125,稀释度1100) ;SP9000 免疫组化染色试剂盒(北京中衫金桥公司) ;透射式电子显微镜(日本日立公司,型号 H600). 1.2 方法 1.2.1 小肠黏膜组织的获取 A 组,B 组和 C 组患者均在检查前

14、至少 1 wk 停止一切可能影响胃肠运动的药物和治疗. 先接受肠镜检查,在回肠末端取 6 块黏膜. 休息 12 d 后再行小肠镜检查(通过口腔插入小肠镜) ,在十二指肠降段和近段空肠各取 6 块黏膜. 6 块黏膜中 3 块立即放入40 g/L 甲醛,以备免疫组织化学检查. 另 3 块放入 40 mL/L 的戊二醛固定液,以备电镜观察. 1.2.2 免疫组化染色及观察 将选取的上述黏膜标本用常规方法进行石蜡包埋和 SP 法免疫组化染色,EC 和 MC 分别用兔抗人 5HT 抗体和鼠抗人胰蛋白酶抗体做为一抗. 二抗试剂盒采用 SP9000 免疫组化染色试剂盒. 随后在高倍光镜下观察, 每张切片随机

15、选 6 个不重叠的高倍视野( 4006倍) ,计算 EC 和 MC 的总数. EC 和 MC 的计数以平均每高倍视野的EC 和 MC 的个数表示. 1.2.3 透射电镜下 EC 的形态学观察 将小肠黏膜标本从固定液中取出,10 g/L 四氧化锇固定 2 h,乙醇梯度脱水,700 mL/L 乙醇醋酸双氧铀块染色 2 h 或过夜,环氧树脂 Epon812 浸透、包埋,聚合后进行超薄切片, 醋酸铀、柠檬酸铅染色后,透射式电子显微镜下观察、拍照. 观察 EC 个体大小及形态,细胞内分泌颗粒的数量和形态变化. 统计学处理:采用 SPSS 13.0 软件包进行数据分析,计量资料以 xs 表示. A 组,B 组和 C 组之间 EC 和 MC 的数量比较采用方差分析. P0.05). A 组,B 组和 C 组十二指肠降段黏膜的 EC 数量比近端空肠黏膜显著增多(P0.05),近端空肠黏膜的 EC 数量又比末端回肠黏膜显著增多(P0.01),小肠黏膜 EC的分布均表现为从十二指肠降段至末端

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