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1、水生生态系统藻类毒性试验 1 不常用词解释 半对数坐标纸 横坐标或纵坐标轴是按照相等的指 数变化来增加的 距离来说 如果每1cm代表 10的1次方增加 则坐标轴刻度依次为0 10 100 1000 10000 内插法 一般是指数学上的直线内插 利用等比关 系 是用一组已知的未知函数的自变量的值和与 它对应的函数值来求一种求未知函数其它值的近 似计算方法 是一种未知函数 数值逼近求法 2 实验原理 生物测试能够弥补化学和物理的检验的不足 目 前水生生态系统藻类毒理试验已经成为许多国家 对环境质量监测的标准方法之一而得到广泛应用 影响藻类生长的主要因子包括阳光 二氧化碳 温度 PH及氮 磷 微量元
2、素等营养成分 水 环境中的这些生态因子的变化会刺激或抑制藻类 的生长 而导致水体初级生产力的变化 如果外 来有毒有害化学物质进入水体 藻类的生命活动 就会受到影响 生物量也随之发生变化 3 试验方法 1 水样的加工制备 利用滤膜在减压条件下过滤 以除去水样中原有的藻类生 物 在108kPa和121oC之下持续30min 高压处理水样 杀灭水样中所有生物 以便测定水样中的全部营养 2 藻类培养基的配制 分别取常量营养盐的每一种化合物储备液1mL和微量元素 EDTA的混合液1mL加入去离子水中 定容至1000mL得标 准培养基 高压灭菌后分装三角瓶中备用 3 藻类预培养 将事先准备的藻种移种至盛有
3、培养基的三角瓶中 在试验 确定的温度和光强条件以及无菌条件下 培养2 3周 使 藻类达到同步生长阶段 用离心机离心收集培养物中的藻 细胞 去除上清液 在沉积的藻细胞中加入 10mLNaHCO3溶液 15g L 使藻细胞悬浮于此溶液中 再次离心 悬浮 再离心 悬浮 经此处理的藻悬浮物作 为试验藻接中原 4 4 预备试验 目的在于探明毒物对藻类影响的半数有效浓度 EC50 的 范围 为正式试验打基础 5 正式试验 1 试验浓度的选择 按等对数间距取5 7个毒物浓度 其中必须包括EC50并在 此浓度上下至少各设2个浓度 另设一个不含毒物的空白 对照 各浓度组均设3个平行样 2 种的制备和接种量 取上
4、述达到同步生长的藻类培养液充分摇匀 取样计数细 胞密度后 用吸管转移相应体积的细胞悬浮液到受试水样 中 3 生物量的测定测定藻类生长的指标有多种 要考虑所 有相关的环境因素以及自己试验的目的和条件来选择指标 5 常用的测试指标有 干重 光密度 细胞计数 叶绿素a 含量的测定 减压过滤一定体积的藻类培养液到玻璃纤维 滤片上 加入1mL的MgCO3悬浮液后将水抽滤干净 把滤片 放到一个组织研磨管内的底部 加入2mL的90 的丙酮 弱 光下淹没1 2min 再用5mL的90 的丙酮把残留的样品洗入 15mL的有螺旋盖的离心管中 离心 2000g 1 5min 静 置于暗处1 2h 是色素充分被抽提 离心 将上清液在分 光光度计上 用1cm的比色皿分别读取750 663 645和 630波长处的吸收率 并以90 的丙酮作对照校正吸光度 依据P298的公式计算得叶绿素的浓度 6 实验结果与报告 计算EC50设各组平行样品生物量的平均值分别为V空白 V1 V2 V3 V4 Vn 在半对数坐标纸上以受试毒物浓 度为纵坐标y 以 V空白 Vn V空白为横坐标x 用内 插法计算生物量下降50 的毒物浓度 即相应时间段的EC50 7 8 9 10 此课件下载可自行编辑修改 供参考 感谢您的支持 我们努力做得更好 11
