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1、院院 系 生化环院系 生化环院 任课老师 吴雨龙任课老师 吴雨龙 任课班级 任课班级 09食品 行食品 行 09 食品食品 薹胁伟院系:生化环院任课老师:吴雨龙任课班级,09食品、行09食品刀南林政度学院s河1振月a河B吴2f仁i1捍坛町L加门I爻精子畸形试验是检测受试化学毒物能否破坏哺乳动物精子正常形态的实验方法。通过实验,学习和掌握小鼠精子暖形试验的原理和步骤。t1刃南林相庆学院E是指精子的形状异常和异常精子数量的增多。对化学毒物的作用,在其他系统还未出现毒性反应前,生殖系统可能已出现了损害作用。,哺乳动物的精液中也存在少量的畸形精子,但在某些化学毒物的作用下,特别是在可引起生殖细胞遗传性
2、损伤的化学毒物作用下,哺乳动物举丸产生的畸形精子数量可大量增加。因此,可以用检查雄性动的高低,来对生殖细胞化学毒全清楚。正形态发生过基因中的一发生突变,E物接触化学毒物后反映该化学毒物的和潜在的5物引起精子畸形的机制尚未完常情况下,精子的成熟和正常程受多种基因调控,一旦这些个或多个在化学毒物的作用下就会导致的大量增加。一般认为,常染色体上的基因控制E精子晴形,Y-性连锁基因控制畸形精子的表现。桅些特异的染色体重排,如,是化学毒物诱发哺乳动物畸形率增高的主要机制。由于精子畸形有可能影响生殖。因此,当受检物引起,即使不一定是化合物诱发生殖细胞突变的结果,但也表明受试物吴子,从而可能影响生殖。E实验
3、动物:体重18-22g小鼠。友实验器材:丶2灌胍针、注射器5套、眼科剪、眼训仪科镊、显徽镜、饲养笼等。实验试刻:j磷酸盐缓冲液、生理盐水、无水乙业a醇、2%伊红水溶液、甲基磺酸甲酬不T二或甲基磺酸乙酸或环磷酰胺。E河源口河命图二韦木曰交孔沥1.动物选择成熟的大鼠、小鼠均可使用。由于小鼠较为经济,且有大量实验证实小鼠在该试验系统中对化学毒物最为敏感,故一般采用,年龄宜在s2-剂量与分组试验至少应设组,并同时设立阳组和。接触化学毒物后每组至少应存活5只动物。最高剂量组5d总剂量应能使部分动物死亡。一般可采用,或预先给予化学毒物的LDso,以求得最高总剂量,然后以它的作为下一剂量组的接触剂量,依此类
4、推。刀南林放度学院2阳性对照可用或:,进行腹腔注射,每天一次,。阴性对照选用给予相同体积的溶剂。3.染毒与采样可采用一次或每天一次连续5d的方法进行染毒。染毒途径多用,也可采用与人体实际接触化学毒物相同的途径,一航认为精原细胞后期或初级精母细胞早期对化学诱变剂较为敏感,在接触化学毒物后R葛医深月特子明兄十最口,故法择在第一次染毒后第I菖进行采样。也可在染毒后和第沥源口命图二韦木曰交孔沥分三次采样,或者在染毒后每周采样一次,连续进行动态观察,直至精子形态恢复正常。4制片用处死小鼠,剪开腹腔,分离并摘取,将附睾放入盛有约3ml磷酸盐缓冲液或的小平皿中,以眼科副将附睾尾剪成小块,用炜管将悬浮液轻轻吹打,静置,用四层擦镜纸滤除组织碎片,吸取此精子悬液滴于清洁载玻片上,均匀推片,待玻片晾干后用甲醇固定5min,干燥后即可镜检观察精子形杏也可用后再作镜检。75.阅片在高倍镜下检查精子形态,可加上滤光片。每只小鼠检查完整的精子200,每个剂量组至少检查。精子畸形主要表现在精子的头部,可分为:s口及胖头等形态。失部重叠或全部重叠的精子无尾精子不进行计数。吴用E目厂理E河源口命图二韦朱曰交孙沥
