《Real-Time-PCR培训内部资料-4、数据分析--基线和阈值设定》由会员分享，可在线阅读，更多相关《Real-Time-PCR培训内部资料-4、数据分析--基线和阈值设定（12页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、1 The world leader in serving science Module 4 数据分析 基线和阈值设数据分析 基线和阈值设定定 陈陈涛涛 Field Application Scientist Tel 800 820 8982 400 820 8982 2 基线 阈值线 基线 阈值线 Ct值值 基线基线 阈值线阈值线 Ct 值值 Rn Cycles 3 基线就是扩增曲线的水平部分 基线基线 基线 对数图谱 基线 线性图谱 4 自动设置基线自动设置基线 软件为每个样品都设置独立的基线 对于浓度跨度较大的样品 自动设置基线功能也可以计 算出准确的基线范围 5 自动设置基线是否会失败
2、 自动设置基线是否会失败 Yes 如果背景信号过高 软件可能会将背景信号误认为扩 增信号 这时 基线的范围会被设置的很小 解决办法 手动设置基线 6 如何手动设置基线 如何手动设置基线 7 如何手动设置基线 如何手动设置基线 点击 选择基线设置不正确的反应孔 取消 Auto Threshold 和 Auto Baseline 选项 设置 Start End Cycle 为扩增信号出现的前一个循环 点击 8 阈值线阈值线 阈值是一个荧光强度值 穿过阈值与X轴平行的直线称为阈值线 告诉软件分析信号的位置 阈值线 Life Technologies 9 自动设置阈值线自动设置阈值线 软件会为每个基因设置一条阈值 这样是最理想的 因为不同的基因扩增出的信号大小和指数 期的位置会有所不同 10 如何手动设定阈值如何手动设定阈值 指数增长期 重复性最好的位置 11 如何手动设定阈值如何手动设定阈值 点击 选择基线设置不正确的基因 取消 Auto Threshold 设置 threshold 数值 点击 12 12 Questions
