曲霉菌cpcc 400518次级代谢产物的提取分离及其cla1上调活性的初步研究

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1、同等学力申请硕士学位 硕士学位论文 学校代码: 学号: 1 0 0 2 3 Z S 2 0 0 6 0 2 l 曲霉菌C P C C4 0 0 5 18 次级代谢产物的提取分离及其 C L A 一1 上调活性的初步研究 所院: 姓名: 指导教师: 导师小组: 学科专业: 研究方向: 完成日期: 北京协和医学院 医药生物技术研究所 刘伟 司书毅研究员 姜威副研究员 司书毅姜威甘茂罗 微生物与生化药学 心血管药理学 2 0 1 0 年1 2 月 独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研 究成果。论文中除了特别加以标注和致谢的地方外,不包含其他人已经发表或撰写

2、过的研究成果,也不包含为获得其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我 一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢 意。 学位论文作者签名: 爿牛 签字日期:叫。年I :2 呵f 鲴 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解j 匕塞协塑医堂院有关保存、使用学位论文的管理 办法。有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查 阅和借阅。本人授权j 匕宝迹塑医堂瞳可以将学位论文的全部或部分内容编入有 关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。 ( 保密的学位论文在解密后适用本授权书) 学位论文作者签名: 逍 签字

3、日期:知僻阻碍f 6 日 导师签名: 嗣席敞 签字日期呼J 哆月f 细 学位论文作者毕业后去向:北京协和医学院 工作单位:北京协和医学院医药生物技术研究所电话:0 1 0 一6 3 1 8 0 6 2 3 通讯地址:北京市崇文区天坛西里1 号医药生物技术研究所邮编:1 0 0 0 5 0 目录 缩略语一览表1 中文摘要3 英文摘要4 前言5 材料与方法8 实验材料8 实验方法1 1 结果与讨论1 8 结果1 8 讨论3 4 结论3 6 参考文献3 7 文献综述3 9 致谢5 7 附图5 8 北京协和医学院硕士学位论文缩略语 缩略语一览表 缩略名英文名 中文名 1 3 C N M R1 3 Cn

4、 u c l e a rm a g n e t i cr c s o n a n c e 核磁共振碳谱 1 H N M R lH n u c l e a rm a g n e t i cr e s o n a n c e 核磁共振氢谱 A p o B a p o l i p o p r o t e i nB 载脂蛋白B A p o Ea p o l i p o p r o t e i nE 载脂蛋白E A SA t h e r D s c l e r o s i s 动脉粥样硬化 b p b a s e p a i r 碱基对 B S Ab o v i n es e r u ma l b u

5、m i n 牛血清白蛋白 c D N A c o m p l e m e n t a 巧D N A互补D N A C E T P c h o l e s t e r o le s t e rt r 绷s f e rp r o t e i n 胆固醇酯转运蛋白 C H D c o r o n a 叮h e a r td i s e a s e 冠心病 C L A 1C D 3 6a n dL I M P I Ia n a l o g o u s - 1 人高密度脂蛋白受体 D E P C d i e t h y l p y r o c a r b o n a t e 焦碳酸二乙酯 D M S o

6、 d i m e t h y ls u l f o X i d e 二甲基亚砜 D N A d e o X y r i b o n u c l e i ca c i d 脱氧核糖核酸 E D T A e t h y l e n ed i a m i n ot e t r e a c e t i ca c i d 乙二胺四乙酸 e N o Se n d o t h e l i a ln i t r i co x i d es y n t h a s e 内皮细胞一氧化氮合 酶 E S I M S e l e c t r o s p r a yi o n i z a t i o n m a s s

7、s p e c t r u m 电喷雾电离质谱 F A B M Sf a s ta t o mb o m b a r d m e n t m a s ss p e c t r u m 快原子轰击质谱 F B Sf b t a lb o v i n es e r u m 胎牛血清 G C C I M S g a sc h r o m a t o g r a p h y c h e m i c a l i o n i z a t i o nm a s s气相色谱一化学电离 s p e c t r u m 质谱 g - C O S Yd o u b l e - q u a n t u mf i l

8、t e r e dC O S Y双量子滤波偶合相关 二维核磁共振 H D L h i g hd e n s i t yl i p o p r o t e i n 高密度脂蛋白 H D L C h i g hd e n s i t ) ,l i p o p r o t e i nc h o l e s t e r o l 高密度脂蛋白胆固醇 H M B CH e t e m n u c l e a rM u l t i p l e - B o n dC o r r e l a t i o n异核多键相关 H P L C h i g hp r e s s u r el i q u i dc h r

9、 o m a t o g r a p h y 高压液相色谱法 H S Q C h e t e r o n u c l e a rm u l t i p l eq u a n t u mc o h e r e n c e 异核多级量子相关 l Dk i l oD a l t o n 干道尔顿 北京协和医学院硕士学位论文缩略语 L C A Tl e c i t h i nc h o l e s t e r o la c y l t 豫n s f e r 嬲e卵磷脂胆固醇酰基转 移酶 L D Ll o w d e n s i t ) ,l i p o p r o t e i n 低密度脂蛋白 L P

10、 L “p o p r o t e i nl i p a s e 脂蛋白脂酶 L u cL u c i f e r a s e 萤火虫荧光素酶 N o S E YN u c l e a rO V e r h a u s e rE f r e c tS p e c t r o s c o p y 核欧沃豪斯效应 o x L D Lo x i d i z e dL D L 氧化低密度脂蛋白 P A G E p o l y a c 叫l a m i d eg e le l e c t r o p h o r e s i s 聚丙烯酰胺凝胶电泳 P B S p h o s p h a t eb u f

11、 r e r e ds a l i n e 磷酸盐缓冲液 P C R p o l y m e r a s ec h a i nr e a c t i o n 聚合酶链式反应 P P A R p e r o x i s o m ep r o I i f e r a t o 卜a c t i V a t e dr e c e p t o r过氧化物酶体增殖物 激活受体 R C Tr e V e r S ec h o 】e s t e r o lt r a n s p o r t 胆固醇逆转运 R N Ar - b o n u c l e i ca c i d 核糖核酸 R T P C Rr e V

12、 e r s et r a n s c r i p t i o nP C R逆转录聚合酶链式 反应 S D S s o d i u md e d e c y ls u l f t I t e十二烷基硫酸钠 S R B I s c a V e n g e rr e c e p t o rc l a s sBt y p eI清道夫受体B 族I 型 S R B I I s c a V e n g e rr e c 印t o rc l a s sBt y p eI I 清道夫受体B 族I I 型 S R E B P 1s t e r o lr e g u l a t o ye l e m e n t

13、b i n d i n gp r o t e i n l固醇调节元件结合蛋 白 T A ET r i s a c e t a t e E D T Ab u f f e rT A E 缓冲液 T B S T r i s - b u f r e r e ds a l i n eT r i s 盐缓冲液 T C t o t a lc h o I e s t e r o l总胆固醇 T E M E D N ,N ,N ,N 一t e t r 锄e t h y l e t h y l e n e d i a m i n e 四甲基乙二胺 T G T r i g I y c e r i d e 甘油三酯

14、T r i s T r i h y d r o x y m e t h y l 锄i n o m e t h a n e 三羟甲基氨基甲烷 U V V i sU V V i sa b s o 哦i o ns p e c t m m 紫外可见吸收光谱 2 北京协和医学院硕士学位论文中文摘要 中文摘要 心脑血管疾病在发达国家和大多数发展中国家是危害人类健康的主要杀手,而 动脉粥样硬化( a t h e r o s c l e r o s i s ,A S ) 是其主要病理基础。虽然许多资料表明高密度 脂蛋白( h i 曲d e n s 毋l i p o p r o t e i n ,H D L )

15、 的升高对降低胆固醇是有利的,但到目前 为止仍没有选择性针对H D L 的治疗方法。 研究表明,H D L 的抗A S 作用主要基于H D L 参与的胆固醇逆转运( r e v e r s e c h o l e s t e r o lt r a n s p o r t ,R C T ) 过程,并确定清道夫受体B l ( s c a V e n g e rr e c e p t o rc l a s sB 够p eI ,S R B I ) 为功能性的H D L 受体,人的高密度脂蛋白受体亦被称作C L A 1 。 S R B I C L A 1 在R C T 过程中起着关键作用,被认为是发现新型心血管药物潜在的 新靶标。I T 的增强将有利于A S 病灶积蓄的胆固醇减少和病变的逆转,因此可以 通过升高S R B I C L A 1 表达水平来加速R C T ,促进机体富余胆固醇酯的清除;能 升高S R B I C L A 1 基因表达的化合物有可能成为有效治疗动脉粥样硬化

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