《阿霉素肾病大鼠肾小管间质smads表达与细胞凋亡》由会员分享，可在线阅读，更多相关《阿霉素肾病大鼠肾小管间质smads表达与细胞凋亡（39页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、武汉大学 硕士学位论文 阿霉素肾病大鼠肾小管间质Smads表达与细胞凋亡 姓名：尤燕舞 申请学位级别：硕士 专业：内科学 指导教师：丁国华 20040401 麓要 目的探讨阿霉素肾瘸大鼠肾小管间质S m a d 3 、S m a d 7 袭达改变与肾小管上 皮缨照疆亡熬关系，著双察盘管紧张素转换酶掺制裁( A C E I ) 苯那善裂对 S m a d 3 、S m a d 7 表选和肾小管上皮细胞凋亡的影响。 方法清洁级S D 雄整大鬣3 6 灵，隧撬分为3 组：弩瘸组、治疗组藩静踩 一次性注射阿霉素7 5 m g k g 1 ；注射后第2 天治疗组给予苯那普利1 0 m g k g 。1
2、d o 灌霄；第3 组为正常对照组。分剐于第2 、第4 、第7 周测2 4 小时尿蛋白定 量，燕4 、第7 周测体重、紧重、血渍腿酹。荠取孥皮质，暹过光镜、电镜鼹察 肾脏病理改变。R T - P C R 半定量分析肾皮质中S m a d 7m R N A 的表达水平。免疫组 亿分撰T G F ，l 、S m a d 3 、S m a d 7 蛋鑫懿定继葶羹表达。T U N E L 法分辑缝鼹凋亡， 相关数据用S P S S l l 0 统计软件分析。 绪梁褥病组、治疗续大鬣一般情况蓑；弩病缀出现大量蛋自稼，脊羹，体 重僮升高，肾小球、小管间质损害；药物治疗后尿蛋白减少( P 0 0 5 ) ，
3、肾爨体 重值降低( p O 0 5 ) ，肾小球、小管间质损誊减轻。S m a d 7m R N A 较对照组上调 ( P 0 0 5 ) ，与弩小黪土皮缀庭凋亡星正攘关 4 周融r 僮为瞧9 4 0 ，7 周黠r 壤戈 O 9 7 4 ，P 0 ，0 1 ) 。T G F 一1 31 、S m a d 3 、S m a d 7 主要表达于肾小管上皮细胞，肾病 缍中隧痪交秀器重S m a d 7 蛋鑫表这较对照组上调( p 哟，0 5 ) ，与蕾S F 。| 表达整歪 相关( 4 周时r 值为0 8 9 7 ，7 周时r 值分别为O 8 2 0 ，P 0 0 5 ) ，与肾小管上皮细 胞礴亡呈
4、正栩关( 4 周时r 德为O ，9 5 2 ，7 周时r 值为O 9 9 1 ，P 0 0 1 ) ，而S m a d 3 蛋自表达下调与肾小鸷上皮绷胞凋亡呈受提关( 4 周融r 值为一O 9 6 1 ，7 尉对r 值为一O 9 7 7 ，P 0 0 1 ) 。苯那酱利可抑制S m a d 7 的上调和S m a d 3 的下调( P O 0 5 ) ， 减少缍戆骥亡( 艮0 0 5 ) 。 结论在阿霉素肾病大鼠肾小瞥病变进展中，S m a d s 起麓重要作用。S m a d 3 、 S m a d 7 表这与管小管上皮绍施凋亡穗关。A C E I 可班通过调节S m a d s 的表达衙降
5、 低肾小管上皮细胞凋亡而实现肾脏保护作用。 芙键词阿霉素肾病；S m a d s ：细胞凋亡 A b s t r a c t O b j e c t i v eT oi n v e s t i g a t et h er e l a t i o n s h i pb e t w e e nt h ee x p r e s s i o n o fS m a d 3a n d S m a d 7a n da p o p t o s i si nr e n a lt u b u l o i n t e r s t i t i u mo fr a t sw i t ha d r i a m y c i
6、 nn e p h r o p a t h y a n dt h ee f f e c to f a n g i o t e n s i n c o n v e r t i n ge n z y m e i n h i b i t o r b e n a z e p r i l o nt h e e x p r e s s i o n o fS m a d 3a n dS m a d 7a n da p o p t o s i s M e t h o d sA n i m a l sw e r er a n d o m l ya s s i g n e dt o t h r e e g r o
7、 u p s ：n o r m a lc o n t r o l ， a d r i a m y c i nn e p h n o s i s ( A D N ) ，a n d A D Nt r e a t e dw i t h b e n a z e p r i l ( 10 m gk g - 1 d 一1 ) U r i n a r yp r o t e i n ，b o d yw e i g b ，r e n a lw e i g ha n ds e r u mc r e a t i n i n ew e r em e a s u r e d T h e r e n a lp a t h
8、 o l o g i cc h a n g e sw e r ee v a l u a t e db yl i g h tm i c r o s c o p ya n de l e c t r o nm i c r o s c o p y E x p r e s s i o n o fS m a d 7W a se v a l u a t e d b y R T P C Ra n di m m u n o h i s t o c h e m i s t r y E x p r e s s i o n o fS m a d 3w a se v a l u a t e db yi m m u n
9、o h i s t u c h e m i s t r y A p o p t o s i sw a s d e t e c t e db yT U N E Lm e t h o d R e s u l t sM a s s i v e p r o t e i n u r i aa n ds i g n i f i c a n ts t r u c t u r a la l t e r n a t i o ni ng l o m e r u l u sa n d t u b u l o i n t e r s t i t i u mw e r eo b s e r v e di nA N D
10、r a t s E x p r e s s i o no fS m a d 7m R N A a n d p r o t e i n i nA N Dr a t sw a s s i g n i f i c a n t l yu p r e g u l a t e d ，w h i c h s h o w e da p o s i t i v e c o r r e l a t i o nw i t ht u b u l a rc e l l a p o p t o s i s E x p r e s s i o n o fS m a d 3 p r o t e i n w a s d o w
11、 n r e g u l a t e d w h i c hs h o w e dan e g a t i v ec o r r e l a t i o nw i m t u b u l a rc e l la p o p t o s i si n t u b u l o i n t e r s t i t i u mo fA D N r a t s B e n a z e p f i ls u p p r e s s e d t h eu p r e g u l a t i o no fS m a d 7a n d t h ed o w n r e g u l a t i o no fS m
12、 a d 3a n dd e c r e a s e dt u b u l a rc e l la p o p t o s i s C o n c l u s i o nAr e c i p r o c a la l t e r n a t i o ni ne x p r e s s i o no fS m a d 7a n dS m a d 3w a S c o r r e l a t e dw i mt u b u l a rc e l la p o p t o s i si nr a t sw i t ha d r i a m y c i nn e p h r o p a t h y B
13、 e n a z e p r i l m a y r e d u c ea p o p t o s i sa n dp r e v e n tr e n a ld a m a g et h r o u g ht h er e g u l a t i o no fS m a d 7a n d S m a d 3 e x p r e s s i o n K e y w o r d s A d r i a m y c i nn e p h r o p a t h y ；S m a d s ；A p o p t o s i s 郑重声明 本人的学位论文是在导师指导下独立撰写并完成的，学位论文没有剽窃、
14、抄 袭、造假等违反学术道德、学术规范和侵权行为，本人愿意承担由此而产生的法 律后果和法律责任，特此郑重声明。 学位论文作者( 签名) ： 心嵫 卿年参翩日 萼|言 S m a d s 鬣白是转纯生长黼子B ( T G F 8 ) 超家族细胞内信号传蜉途径中的一 类调节蛋白。掇据结梅和功将S m a d s 分为3 类：鼬S m a d s ( t h er e c e p t o r - r e g u l a t e d S m a d s ) ，它包括S m a d l 、S m a d 2 、S m a d 3 、S m a d 5 和S m a d 8 ；C o S m a d s (
15、 廿1 e c o m m o n S m a d s ) ，嚣 ；蓍在嚷襄动蘩中笈臻懿纹有S m a d 4 ；运蠢- S m a d s ( t h ei n h i b i t o r yS m a d s ) ， 包括S m a d 6 和S m a d 7 。 研究表鞠S m a d s 可参与多种缩腕的溺亡过程。农入类正常l 审上波缨腿系中， T G F B1 存在时，S m a d 3 过量表达可诱导细胞凋亡【2 。在B E A S 2 B 上皮细胞中S m a d 3 的过擞表达可诱导细胞凋亡糊。在M l 和H e p 3 B 细胞中，s m a d 3 显著负性突变体 秘S
16、m a d 7 戆避量表达部捧铡T G F - 诱导的掇亡【3 】。在T G F ，1 31 转纂因小鬣的足 细胞中S m a d 7 表达明晟上调，并伴有其细胞凋亡，足细胞凋亡的高峰时间与T G F 一 1 、S m a d 7 瓣表这穗一致鞠。在壤葬鹃系蒺缁藏孛，S m a d 7 哥夯导T G F 诱导翡 细胞凋亡，S m a d 7 反义寡聚核营酸可防止T G F e 诱导的细胞凋亡 5 1 。这些研究证 实了S m a d s 猩介导礴亡中豹蘸要作用。然而S m a d 3 、S m a d 7 在进行性肾损害时的 表达变化以及其与肾缀织细臌凋亡关系的研究较少。 阿霉素肾病是用于研究肾硬化的经典实验动物模型。在实验性肾硬化的进展 迸疆中，已经涯实了凝实霞缀瑰凝亡爨冬存在，僵诱导淫亡戆分子壤载携然不渗楚。 本研究旨在大鼠阿霉素肾病模型中评价肾小管间质S m a d 3 、S m a d 7 表达与细 胞礴
