《基于《伤寒论》瘀、热、毒证治理论探讨抗炎宝逆转胃癌细胞多药耐药研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《基于《伤寒论》瘀、热、毒证治理论探讨抗炎宝逆转胃癌细胞多药耐药研究（40页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、R e s e a r c ho n9 0 0K Y Br e v e r s a lo f g a s t r i cc a n c e r c e l lm u l t i d r u gr e s i s t a n c eb a s e do nt h et h e o r yo f s t a s i s ，h e a ta n dt o n x i ni nS h a n gH a nL u n AD i s s e r t a t i o nS u b m i t t e df o rt h eM a s t e r SD e g r e e C a n d i d a t e
2、：Z h a n gH u i ju n A d v i s e r ：P r o f Z h o uC h u n x i a n g N a n ji n gU n i v e r s i t yo fC h i n e s eM e d i c i n e ，N a n ji n g ，C h i n a 学号：2 0 0 9 2 0 4 1 硕士学位论文 m 0 4 哪咖 Y 2 12 4 6 6 5 基于伤寒论瘀、热、毒证治理论探讨抗炎宝 逆转胃癌细胞多药耐药研究 作者姓名张德峻申请学位级别硕士 指导教师姓名周春祥 学科专业中医临床基础 学习时间自2 0 0 9 年9 月1 日 职称
3、 研究方向 起至 教授 伤寒论理法方药研究 2 0 1 2 年7 月1 日止 论文提交日期2 0 1 2 年4 月5 日论文答辩日期2 0 1 2 年6 月3 日 学位授予单位南京中医药大学学位类型 医学科学学位 原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取 得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或 撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标 明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。 学位论文作者( 需亲笔) 签名：寺轰峻五协年月p 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作
4、者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国 家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权南京中 医药大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、 缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。 保密口，在一年解密后适用本授权书。本学位论文属于不保密d 。 ( 请在以上方框内打“”) 学位论文作者( 需亲笔) 签名：燃知，2 年6 月g 日 导师( 需亲笔) 签名： 加，1 年月8 日 南京中医药大学硕士学位论文 目录 中文摘要i i i A B S T R A C T v 引言1 第一章肿瘤发病机制与瘀、热、毒相关性探讨
5、2 第一节瘀、热、毒与肿瘤2 1 瘀、热、毒病理相关2 2 热与毒邪致肿瘤机制2 3 瘀与毒邪致肿瘤机制2 4 毒邪致肿瘤机制探讨3 第二节伤寒论瘀、热、毒相关证治理论探讨4 第二章清热、化瘀、解毒逆转肿瘤细胞多药耐药的效应机制研究7 第一节肿瘤多药耐药研究进展7 1 肿瘤细胞M D R 机制研究7 1 1 基因编码P 糖蛋白( P g P ) 转运药物7 1 2 多药耐药相关蛋白( M I o ) 过度表达7 1 3 热休克蛋白( H S P s ) 滞留化疗药物8 1 4 肺耐药蛋白( L I 冲) 调整药物转运8 1 5 拓扑异构酶I Ia ( T o p oI Ia ) 含量降低8 1
6、 6 核糖体蛋白L 2 3 、S 1 3 ( R P L 2 3 、R P S l 3 ) 抑制细胞凋亡8 1 7 抑癌基因P 5 3 的突变9 1 8 凋亡相关蛋白( B c l 一2 与B a x ) 平衡失调9 1 9 膜蛋白F a s F a s L 信号传递失调9 1 1 0 环氧合酶2 ( C O X 2 ) 过度表达9 2 肿瘤细胞M D R 逆转研究进展1 0 2 1 西医药逆转肿瘤细胞M D R 研究进展1 0 2 2 基因治疗逆转肿瘤细胞M D R 研究进展1 0 2 1 3 中医药治疗逆转肿瘤细胞M D R 机制进展l1 第二节抗炎宝加味丸逆转胃癌细胞多药耐药的效应机制研
7、究1 3 i 目录 1 实验材料与方法1 4 1 1 细胞株1 4 1 2 药品与试剂1 4 1 3 主要溶液配制1 4 1 4 仪器设备1 5 1 5 药物配制1 5 1 6 实验分组1 5 1 7 细胞培养1 6 1 8 抗炎宝加味丸干预胃癌细胞存活率测定1 6 1 9 胃癌细胞耐药指数测定1 6 1 1 0 抗炎宝加味丸干预后顺铂的耐药逆转指数测定1 7 1 1 1 抗炎宝加味丸对细胞内顺铂浓度的影响测定1 7 1 1 2 抗炎宝加味丸对细胞内P - g P 表达的影响测定1 7 1 1 3 统计方法1 7 2 实验结果1 8 2 1 抗炎宝加味丸干预胃癌细胞存活率测定1 8 2 2 胃
8、癌细胞耐药指数测定1 8 2 3 抗炎宝加味丸干预后顺铂的耐药、逆转指数测定1 8 2 4 抗炎宝加昧丸对细胞内顺铂浓度的影响测定1 9 2 5 抗炎宝加味丸对细胞内P g P 表达的影响测定2 0 3 讨论2 0 结论2 2 参考文献2 3 致谢2 5 作者简介2 6 南京中医药大学硕士学位论文 中文摘要 热邪，瘀血、毒邪三者之间密切相关。热能蕴毒、瘀血蕴久亦可化毒，从而形成热瘀 毒交夹的病理状况。因此也增加了疾病的急骤性，缠绵性和疑难性。治疗方面，既要热毒 瘀三者并治，又需分清其孰轻孰重、孰先孰后，寻因隶本，抓主要矛盾。 热灼津液，津液停留而成痰浊，血行被遏而成瘀血，层层相固，凝聚成块，日
9、以积大， 形成瘸瘕、肿块、结节等。瘀热毒交结，有形成积聚、瘾瘕的病理特点。 伤寒论中存在对热邪，瘀血、毒邪三种病邪及其之间密切相关的大量阐释，并运用在 疾病的治疗过程中。通过本课题理论探讨发现热邪、瘀血、毒邪三者之问密切相关，瘀热 毒交结是形成积聚、瘾瘕的重要病机。同时，热邪、瘀血、毒邪与肿瘤病理进程中肿瘤细 胞多药耐药病理机制密切相关。 此外，本课题进一步探讨了肿瘤细胞多药耐药产生的原因及病理机制。对当前肿瘤多 药耐药的治疗现状进行了梳理。肿瘤细胞的耐药性是导致化疗失败的重要因素。多药耐药 机制是多方面的，目前已知的肿瘤多药耐药主要机制有药物隔离外排，如P 糖蛋白( P g p ) 的高表达
10、；药物代谢，如谷胱甘肽转移酶解毒作用增强；药物靶位点改变，如拓扑异构酶 I I 水平降低；细胞凋亡调控，如野生型p 5 3 基因的缺乏或突变等。 目前，肿瘤多药耐药的逆转主要有三种措施：西药逆转、基因治疗及中药逆转。西药 逆转剂由于毒副作用大、疗效不肯定，还不能推广到临床进行大规模应用；基因治疗尚停 留在实验室研究水平，没有临床研究报道，离临床应用尚有时日；而中药恰好相反，药性 缓和，毒副作用小，且较多研究表明一些中药对化疗具增效减毒作用，因而可能从中药中 找到高效低毒的M D R 逆转剂。 基于此，本课题研究选取人胃癌普通细胞株S G C 7 9 0 1 和耐药细胞株S G C 7 9 0
11、1 D D P 。 其中S G C 7 9 0 1 D D P 细胞是通过逐量顺铂( D D P ) 诱导而成，对D D P 有较明显的耐受性， 能在含O 5 m g L 1 顺铂的培养液中持续增殖，且对阿霉素、长春新碱均产生明显耐药，具有 显著多药耐药特征。本实验用M T T 法测定普通株S G C 7 9 0 1 细胞及其耐药株S G C 7 9 0 1 D D P 细胞对D D P 的敏感性，D D P 治疗S G C 7 9 0 1 的I C 5 0 为0 3 2 6m g L ，S G C 7 9 0 1 D D P 细胞的 I C 5 0 为1 5 7 1m g L ，其对D D
12、P 的耐受性是S G C 7 9 0 1 细胞的4 8 2 倍，表明S G C 7 9 0 1 D D P 细胞对D D P 有较明显的耐受性，符合耐药细胞株特点，说明本研究已成功构建多药耐药 细胞模型。进而经9 0 0 抗炎宝加味丸干预肿瘤细胞的细胞毒性测定研究发现，当K Y B 在 培养体系中的浓度为1 1 0 一g m l 。时，S G C 7 9 0 1 及S G C 7 9 0 1 D D P 细胞的存活率分别为 中文摘要 9 1 4 9 和9 4 2 6 ，即在此剂量时K Y B 对S G C 7 9 0 1 和S G C 7 9 0 1 D D P 细胞无明显毒性。因 此，确定以1 x l O g m l 1 作为K Y B 非细胞毒性药物浓度，在此浓度下观察K Y B 干预胃癌 细胞多药耐药的效应及其机制。 当1 1 0 。g m l
