细胞生物学实验剖析

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1、实验一、几种光学显微镜 的使用 一、实验目的 : 了解几种光学显微镜的结构、使用 方法、工作原理等。 掌握使用普通光学显微镜提高分辨 率的方法。 二、实验原理 1、基本原理 一般光学显微镜主要是由目镜、物 镜、聚光器以及反光镜等构成。 各种光学显微镜的放大原理基本相同 ,各种特殊用途的显微镜只是在主要 器件上进行了稍微改动而已。 2、几种光学显微镜 1、普通复式光学显微镜:其重要的性能参数是分辨率。 2、暗视野显微镜:具有特殊的聚光器。光源中心束不直 入物镜,所以视野灰暗。而被检测细胞由于光的衍射及反 射而较亮 3、相差显微镜:利用光的干涉原理。在物镜与聚光器上 做了改动。把肉眼看不见的相位差

2、改为可见的振幅差, 使人能够看清楚。 4、荧光显微镜:是在光镜水平上对细胞内特异的蛋白 质、核酸、糖类、脂质以及某些离子等组分进行定性定 位研究的有利工具。 普通复氏显微镜 暗视野显微镜 相差显微镜 荧光显微镜 3、如何提高显微镜 分辨率 1、数片孔径:孔径愈大,显微镜能力俞强。 2、分辨率:分辨率以分辨俩点之间的最小距离表 示。目镜与显微镜的分辨率无关,物镜的分辨率即为 显微镜的分辨率,照明光线波长越短,物镜的数值孔 径越大显微镜的分辨率的越大。 3、放大率:总放大率超过物镜数值孔径的1000倍时 ,细微结构分辨不清,为空的放大, 低于500倍时由于放大率过低,肉眼难以分辨。 4、焦点深度:焦深加大,总放大率提高。 三、实验器材 观察材料(草履虫,洋葱内表皮,紫鸭趾 草等花粉,菠菜叶),普通光学显微镜, 暗视野显微镜,相差显微镜,荧光显微镜 ,载玻片,盖玻片,吸管,镊子,剪刀 等。 四、实验方法 1观察草履虫的外形、运动、纤毛、食物泡等。 取少许棉花纤维或擦镜纸纤维,放于载玻片上,在 其上滴一滴草履虫悬液,然后加盖玻片观察。 2洋葱表皮细胞和菠菜叶的细胞核、叶绿体的观 察在载玻片上滴一滴水,撕洋葱鳞茎内表皮或菠菜 下表皮一小块放于其中,使其展开,然后加盖玻片 观察。 3紫鸭趾草花粉外形、表面突起的观察在载玻片 上滴一滴水,取紫鸭趾草雄蕊在其中沾几下,然后 盖片观察。

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