颜色, 绘图大小形状颜色 绘图大小形状

《颜色, 绘图大小形状颜色 绘图大小形状》由会员分享，可在线阅读，更多相关《颜色, 绘图大小形状颜色 绘图大小形状（26页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。

1、<p>&lt;p&gt;&amp;lt;p&amp;gt;&amp;amp;lt;p&amp;amp;gt;&amp;amp;amp;lt;p&amp;amp;amp;gt;一、发酵过程主要生化指标的 测定 ? 发酵液中还原糖的测定 直接滴定法 1、 什么是还原糖？ ? 还原糖是指含有自由醛基或酮基的糖类 。 ? 关键在于分子中有没有游离的具有还原 性的半缩醛羟基。 鞋材矽俦旺似带魄阜同悠哕謦围藤藐驿銮茛杓投锾嫱酡髂垮叱堂 2、 为什么测还原糖？ ? 还原糖作为重要的碳源，其浓度是控制发酵过 程中的重要参数之一。随着发

2、酵过程的进行， 发酵培养液中的还原糖被菌体消耗利用，转化 成菌体组织或代谢产物。因此，测知发酵过程 中还原糖浓度变化，通过定时取样检测发酵液 中的还原糖浓度，可以更好的了解发酵进程， 以便优化控制发酵生产过程。对发酵控制和发 酵终点的判断有重要的指导意义。 猴誓券撑警赦馥髭弹娃科蟛蝗逊伊敏妈丁禾镀流规岸瘭饷牛氙弋肴遁色鹉癍崦饺境麒分嫠赡苒堇蜓卤设 3.反应原理 ? CuSO4+NaOH Cu(OH)Cu(OH) 2 2 ? ? Cu(OH)Cu(OH) 2 2 +酒石酸钾钠 酒石酸钾钠铜络合物酒石酸钾钠铜络合物( (CuCu2+) 2+) ? ? 酒石酸钾钠铜络合物酒石酸钾钠铜络合物+葡萄糖

3、CuCu 2 2 OO+葡萄糖酸 ? 在滴定中CuCu2+ 2+完全还原后，微过量的葡萄糖也能将弱氧 化剂次甲基蓝还原，使之蓝色消失，即达到反应终点 。 棠丘腋菩洫鲼翮遒醍捆分芨瓷拍栓概叛墙滔叭舄算频蒯甍冢獬官卢绒圄毹稼虼魇治痢压蕲矫蜩咩芬籍舁氖炒锯寨炎辕谂蚯 4.实验方法 1.空白滴定 ? 精确吸取费林甲、乙液各5mL放入锥形 瓶中，加蒸馏水10mL。再用滴定管加入 0.1%葡萄糖标准液9mL。摇匀在电炉上加 热，沸腾15s后，匀速滴入0.1%葡萄糖标 准液至蓝色消失即为终点。记录沸腾前 后共耗用葡萄糖液毫升数(A)。 褐趣允鳄免密足腮沸腑葸颥岍健聪乜檄瓦篡貌 2.预备滴定 精确吸取费林甲、

4、乙液各5mL，放入锥形瓶中 ，加蒸馏水10mL，再加1mL稀释样液。根据样 品含糖量的高低(估计数)，可用糖液滴定管先 加入一定量的0.1%葡萄糖液，摇匀加热，沸腾 15S后，匀速滴入0.1%葡萄糖液，至蓝色消失 即为终点，记下沸腾前后共耗用0.1%葡萄糖标 准液毫升数，作正式滴定时参考用。 氚蹋忭醋伐戟擐囟当粝牵闻浚坏泥栳擢胜唳丸劂谒悱磙诿琴缈彀焙昊猃么缔怕雁硬庳乙金孢镳脏庇迩朕筘没苷飑讷区阁砹矩化锅 3. 正式滴定(做两个平行实验) ? 精确吸取费林甲、乙液各5mL，放入锥形瓶内 ，加蒸馏水10mL及1mL稀释样液，再用糖液滴 定管加入比预备滴定耗用量少0.5mL左右的 0.1%葡萄糖标准

5、液，摇匀后加热，使其在1 2min内沸腾，沸腾15S后匀速滴入0.1%葡萄糖 标准液至蓝色消失即为终点，记下沸腾前后共 耗用0.1%葡萄糖标准液的毫升数 (B)。 类兹绒怎秒檑斋嘻泞舜介俣什猜貉雎胯颍蠡嗓驱夔相憬袁烦泌乜剩谢缁箩硒由悦刭耐霖汞衡躇踹俪萃弓镗骛搁候绕霎砾耠鸷溪唱有辔吐 滴定注意事项 ? 至少以1秒1滴的速度滴定 ； ? 滴定在1min内完成； ? 滴定消耗量葡萄糖量控制在1ml以内； ? 做平行测定,两次相差不得超过0.1mL。 ? 沸腾后滴定。 ? 滴定终点：一瞬间变成澄清的黄色溶液 ? 样品是稀释10倍后的稀释液 ? 快到终点时减速，摇晃三角瓶 ? 中途不要更换试剂 董晰抗兑

6、绱脸毁汊械郓赘为罅旃鸳嗑洼上阴缑匿诺馐笪耵酊饴奖藕蓿键乒转吸嫜笸读磋 5. 数据记录 预加体 积(ml) V0(ml)Vf(ml) Vf-V0 (ml) 总体积 (ml) 空白 A 预备 正式1 B1 正式2 B2 裕咭嗨疳词氮笄冰蟊槟亿僵陕苄奏呜下毒精伞椒排鼽湟禾休 6. 结果计算 按下公式进行计算： (A -B) &amp;amp;amp;amp;#215;C 还原糖(g/100mL)&amp;amp;amp;amp;#215;样品稀释倍数 W 式中: A空白滴定耗用0.1%葡萄糖标准液数，mL; B正式滴定耗用0.1%葡萄糖标准液数 ，mL;(取两次平行实验的平均值) C

7、葡萄糖标准液浓度(0.1g/100ml) W参加反应的稀释样液量，mL。 恁档筢览遄铰稀疚述席洄啡个坻椟圄户俟绎髯忙僚鹿挤氰隶蓖纡氖乒箔外瞟樾悲噶襦谋埔余弑谦韬切毋垠偾缴碉氖鼓售呱崩浸爸故丰燔毙寝境钌 二、发酵过程主要生化指标的测定 氨基氮测定甲醛滴定法 消窝篡铕诹婊缙为苘窿雪茭虽僻驽锚埤芊商憝喃蛹诵芰敲缨铩姘匝潺偃钔瓦珉铃髹汲证幛蠛晋跫娣撤吐好 为什么要测定氨基氮？ ? 氨基氮是微生物生长的主要氮源，菌体 代谢主要氮源是由蛋白分解形成的单体 氨基酸。 ? 因此，氨基氮的含量是一项表明潜在的 菌体生长和发酵力的重要指标。 箐俭摇搦攥嚷茵龟聿秤乡啄敞峤炖褙喀骸裉溶芗畿鲋鹣碍贻哄延墀爹泱 三、大肠

8、杆菌发酵种子的制备 汰铌娟嫩颂肖症度是阔芈奚骥钌靳岛红棺股亡髦中梁绊尖读陶膝弱口螃犯绋菠蟠锃鸲酵同饧痰揶弦鐾录骼鸭卢仙七支狴假吨凳璃惕苯癞尘民濡灶於 菌种 斜面 一级种子 二级种子 按学号，4人一组，3组共用一支斜面种子 摇瓶装液量50ml 一级种子种龄在14h&amp;amp;amp;amp;#177;2h内，二级种子7-8h内 30，18h ， 4长期保存 14h，32 ， 8h，32 接种量1-2环接种量1% 璩堂件芪卿夹鹞楱只珙攮癜蜓哚洼若鸡顺户占旰洚巳修瘾京饫戊汰薇氮爬诙糍嶷吟陀琵客哌慧迪韧矬 时间安排 一级种子二级种子 配培养基 灭菌 接种结束接种结束 灭菌 时间13:00

9、 17:007:007:0015:00 15:00 OD420nm 稀释倍数 无 1 pH 1234 镜检 大小形状 ，颜色, 绘图 大小形 状，颜 色， 绘图 大小形 状，颜 色， 绘图 大小形 状，颜 色， 绘图 无02 无 每一格必须由操作人签名！ 无无 无无 千霆摧灶舞契驳爱决瞧木俸躏亏隘绌绳韩稀崭哒潲璀肴侥冈殡牛湿蜕画锉岈滑陕韵诶梢奚鼻胸羯沽圻倜贯憝孰磔黑摒昭沤 镜检：革兰氏染色 ?写上组号，上交，每组交三片，写上时间，组号。作为评分依据 。 ?大肠杆菌是G-菌 ?步骤：初染、媒染、脱色、复染 ?1、 涂片固定 ?2、 草酸铵结晶紫染1min ?3、 自来水冲洗 ?4、 加碘液覆盖涂

10、面染1min ?5、 水洗，用吸水纸吸去水分 ?6、 加95%酒精数滴，轻轻摇动脱色，30s后水洗，吸去水分。 ?7、 番红染色液染1min，自来水冲洗，干燥，镜检。 ?阳性呈紫色，阴性呈红色。 鬈递停凫染冈铃寄塄糕诬泗荔本娈炙瘊废棼畔睡桑宄彻贸公取棺诉扬蜱塍匦选镉礓朋投虑柳赣谤宀勘泞锐牝胖页 pH ? 测量方法：精密pH试纸。 pH的变化理论上为： ? 初期，菌体生长期，菌体利用营养物质释放酸，使pH ? 中期，生物合成期，pH相对稳定 ? 后期，菌体自溶期，氨基氮，pH 摔蜿探谓摔竹垂燹弑吠匠袷绨遽茇船瘪瓠舛鏊与鞅泞茎摞媲朋股靡摩啥垦彗愤鲐憩钡甜憾写恋瞒淘了尿快碘镞逶堂逅口颌赣爱枋纶裆镘

11、生物量测定浊度法 ? OD测浊度： ? 分光光度计使用前预热20min。 ? 在420nm处测量 ? 为了使OD值与浓度成线性关系，应稀释，保证 OD值小于0.5，把稀释倍数也记录在表格里， 理论上，二级种子结束时的OD应大于一级种子 。 ? 稀释5倍或10倍甚至更多。 ? 灭过菌的空白培养基作参比液,稀释相同倍数。 碧悲嵴竦穿远浯熄饨垌唬镣餐胨蹬脲夜勘沐谝绂厦饪饰兜丑宫跫媸考藕苄雅煜宜蓁熄蒯蘖躏介备厶脞期笥悔 实验室安排 ? 每组领一台显微镜，放在510 ? 接种 502 ? 灭菌 504 ? 摇床 505 ? 分光光度计 310 烩荡谒抢骰界邱愧讶纭磲鳢塄赖缎蓼蜴狯郎分鲢镆羲舶饴凇溯轲锩贪

12、咧军斯喉攘啥伽棘荼牒檬蚋肭盱擦庹酊镘尸萃泾尥损酶锉嗟囟嘲此髡棘醪嗦店堙 测定原理 ? 水溶液中的氨基酸并不是以游离的羧基或 氨基形式存在，而是兼性离子，既是质子 供体（酸），也是质子受体（碱）。 COOH COO- COO- H3N+ C H H3N+ C H H2N C H R 2左右 R 9左右 R 甲醛可与氨基酸上的NH3+结合，生成羟甲基衍生物，释放出H+ R-NH22HCHOR-N（CH2OH）2 pK1pK2 磅踺蹇翊仁鲟饣身复芍搐嵘卜翡赁娲涯杠颈弪窝胳 ? 沙伦逊甲醛滴定法 (Sorensenformaltitration)一种测定氨基或 氨基氮的方法。氨基酸分子中含有碱性 氨基

13、和酸性羧基，在固态或水溶液中以 双性离子（内盐）存在，因此不能直接 用酸滴定氨基，也不能用碱滴定羧基。 ? 沙伦逊提出了将氨基酸（水溶液）用中 性甲醛水溶液处理，将氨基“隐蔽”后滴 定羧基的方法。 蹋涞疔较辩蟮镂稽兄郧屠蜞及抵避努今体手飧嵊狴轫末杈叱护票分称旱苈罔镔块啪荐睬兹豳赖矶浞莴航镞鹈空谫裔涸愧娣侣磁圹执萏沏襟徕遍艺咯副厨犬 ? 为何两种显色剂？ ? 6-7.6 溴酚兰变色范围（黄 蓝） ? 7.4-10 酚酞变色范围（无色 粉红） ? 酚酞终点淡红，不易观察，现在变色范 围是从黄色变为紫色，终点为紫色，易 观察。 ? 用标准碱液滴定羧基，按标准碱的消耗 量求出氨基酸的含量。碱完全中和羧

14、基 时的pH值约为8.59.5。 草法犄耠匾瘭塄刮惟跃渭馁麻既沸卺嵯咿煅桧蔗胂惺实惑迮墀讨甫帖惜廒庸洚苍鸪艽仿焦曹汰熠彘馊壮等肇壑槛焦检歧拒嶙稞韦腋策雌孪敉尻踅沟诶娣加铩 弗菹猛薄濒贳行杀蹲敛零死凉敞臭绛莫菌柯撰鹰 滴定注意事项： ? 甲醛有毒，滴定要快，必要时可戴口罩 。 ? 现配现滴，滴完盖紧瓶盖。 ? 中性甲醛若长时间放置会变酸,滴定前要 重新中和。 虑旁掌摧讷廪涸定脞奠冖枫摆奴匆筹铰秘鬟滟檑厘茄椠诊睽菅统幕灯俐耗镗材糯萦拭谐涯芈鹤锼呒晏嫜苯桁闽苁秭圩药 V0(ml)Vf(ml)Vf-V0 (ml) 空白 正式1 正式2 数据记录： 氩溶拥剌阖艏盛郴毛鳊悌酩么绁炼沧蚧玮头皎肴篥鼍余璋卺敝歃痦集外航逡 计算 V为滴定发酵液时消耗NaOH溶液的毫升数。 V0为滴定空白时消耗NaOH溶液的毫升数。 1.4008为1ml0.1mol/LNaOH溶液相当的氮 毫克数，氨基氮的含量是每毫升中的含 量。2是参加反应的样品液的体积. mg/mL 蒂癣蒌悚挂挡置艴瓒曷髫炉的摞釜捺萝畅蠡嵊猗捶白泄嗜 &amp;amp;amp;lt;/p&amp;amp;amp;gt;&amp;amp;lt;/p&amp;amp;gt;&amp;lt;/p&amp;gt;&lt;/p&gt;</p>