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1、 合欢花挥发油化学成分及提取液抑菌作用研究摘要：采用水蒸气蒸馏法提取合欢（ .）花挥发油，并用气相色谱质谱（）法进行分析，利用滤纸片法进行抑菌试验。结果表明，合欢花挥发油中共鉴定出种成分，包括二十一烷（）、植酮（）、二十八烷（）、二十四烷（）和棕榈酸甲酯（）。合欢花提取液对鳗弧菌、哈维氏弧菌、灿烂弧菌、高卢弧菌、巨大芽孢杆菌均有抑制作用，其作用随浓度升高而增强。关键词：合欢（ .）；挥发油；气相色谱质谱联用；提取液；抑菌作用 in ， ， （ ， ， ， ， ）： . ， （）， ， ， （）， （）， （） ， （）； ， . ， . ， . ： .； ； ； ； 合欢花为豆科合欢属植物合欢
2、（ .）的干燥花序，是一种较为常见的中药，具有宁神作用，主要用于治疗心神不安、忧郁失眠、郁结胸闷、活血消肿。药理研究证明，合欢花水提液具有明显的镇静、催眠和抗抑郁作用。本试验通过法分析了水蒸气蒸馏法获得的合欢花挥发油挥发成分，并采用滤纸片法分析了提取液的体外抑菌效果，以期为合欢花在化工、食品添加剂以及抗菌药物等方面的开发应用提供参考。 材料与方法 主要试剂与材料合欢花，产自江苏某地，鲜样自然阴干后，粉碎待用；牛肉膏蛋白胨培养基（牛肉膏 ，蛋白胨 ，氯化钠 ，琼脂 ，水 ， ），培养基（蛋白胨 ，酵母膏 ，硫酸亚铁 ，琼脂 ，陈海水 ， ）；（体积分数，下同）分析纯乙醇。 仪器安捷伦气相色谱质谱
3、联用仪（美国安捷伦科技公司）；挥发油提取器；旋转蒸发仪；恒温培养箱等。 菌种巨大芽孢杆菌（ ）、鳗弧菌（ ）、哈维氏弧菌（. ）、灿烂弧菌（. ）、高卢弧菌（. ），由山东大学威海分校海洋学院微生物实验室提供。 方法 挥发油的提取， 称取合欢花 于挥发油提取器中，加入 水， 下回流 ，所得挥发油于低温下保存，待测。 气相色谱条件 色谱柱为 （ ） 弹性石英毛细管柱，升温程序为：初温 ，保持 ，以 升至，保持 ，再以升至 ，保持 ，进样口温度为 ，载气为氦气，柱前压为 ， 进样量为 ，流速为 。 质谱条件 离子源为源，离子源温度为 ，电子能量 ，接口温度 ，溶剂延迟时间 ，扫描质量范围为 。 提
4、取液的制备 称取 合欢花，置于圆底烧瓶中，加入 乙醇， 回流 ，过滤，收集滤液；滤渣加入 乙醇同条件提取 ，过滤，合并提取液，减压蒸发，获得提取液。 抑菌试验 活化菌种后，用灭菌棉棒蘸取少量菌落在固体培养基上密集划线。用打孔器将滤纸打成直径为 的滤纸片，湿热灭菌后备用。然后用体积分数为95%的乙醇将合欢花提取液原液配成系列浓度，用镊子夹取滤纸片放入溶液中，浸泡 后置于固体培养基上。每个培养皿中等距离摆放个滤纸片，每个供试菌种作组平行，用乙醇作空白对照，放入培养箱中。巨大芽孢杆菌于 下倒置培养 ，鳗弧菌、哈维氏弧菌、灿烂弧菌和高卢弧菌于 下倒置培养 ，测量抑菌圈直径，取平均值。 结果与分析 挥发
5、油成分对合欢花挥发油进行分析，其总离子流见图，共检测出个峰，所得质谱经标准谱库数据系统分析处理，确定种组分，按照面积归一法确定各组分的相对百分含量，结果见表。 抑菌试验抑菌试验结果如图所示，由图可知，合欢花乙醇提取液对种供试菌均有抑制作用，且随着提取液浓度增加抑菌圈直径增大。当提取液浓度小于 时，对灿烂弧菌和高卢弧菌的抑制作用较巨大芽孢杆菌、鳗弧菌和哈维氏弧菌明显；当提取液浓度大于0 时，对鳗弧菌和哈维氏弧菌的作用有所提高；当提取液浓度大于 时，对几种供试菌的抑制作用均明显增强。合欢花乙醇提取液对种菌的抑制作用有所不同，对种海洋弧菌的抑制作用明显强于巨大芽孢杆菌。 讨论从合欢花挥发油中共鉴定出
6、种成分，其中含量较高的是二十一烷（26）、植酮（）、二十八烷（）、二十四烷（）和棕榈酸甲酯（）。在这种组分中，二叔丁基对甲苯酚具有抗氧化性，可作为食品中的抗氧化剂，邻苯二甲酸二异丁酯是常用增塑剂，亚甲基双（甲基叔丁基苯酚）简称，是合成橡胶和石油产品中的常见抗氧添加剂，。抑菌试验选取的菌株包括鳗弧菌、哈维氏弧菌、灿烂弧菌、高卢弧菌和巨大芽孢杆菌，既有革兰氏阴性菌又有革兰氏阳性菌，因此通过抑菌试验，可较为全面地评价合欢花提取物的抑菌作用。此外，鳗弧菌、哈维氏弧菌和灿烂弧菌是3种常见的海洋致病菌。鳗弧菌是一种对鱼类危害较大的病原菌，其流行范围广，在水产养殖中引起的危害也最大。哈维氏弧菌和灿烂弧菌会导
7、致鱼、虾、贝、刺参等染病，给水产养殖业造成损失。长期以来，国内外均以化学农药或者兽药作为渔药药源，而多数药物不仅难以降解，还会在水产动物体内富集，因此对生态环境具有较大的负面影响。中草药的天然成分副作用小，且多数有较好的杀菌效果，可以作为新鱼药的药源进行开发。本结果表明，合欢花提取液对常见海洋致病菌均有较好的抑菌作用，将为合理开发和利用合欢花资源提供了科学依据和参考。参考文献： 吕金顺，左国防，王缠定 合欢属植物的化学成分及药用价值研究 天水师范学院学报，（）： 单国存，石磊虹 合欢花与南蛇藤果实水煎剂镇静、催眠作用的比较 中药材，（）： 李作平，赵 丁，任雷鸣，等 合欢花抗抑郁作用的药理实验
8、研究初探 河北医科大学学报，（）： 项昭保，陈海生，夏晨燕，等 木姜子挥发油的化学成分及抑菌活性研究 中成药，（）： 徐 琅，贾元超，龚祝南 一年蓬挥发油的气相色谱质谱分析及体外抑菌活性研究 时珍国医国药，（）： 古丽扎尔阿布都克依木，萨代提古丽马合木提，拉孜古丽买买提，等 红果龙葵茎和叶的抑菌作用研究 生物技术通讯，（）： 袁履冰，周宁章 叔丁酚类的性质、用途及合成 辽宁化工，（）： 袁海婷 邻苯二甲酸二异丁酯及马来酸二异丁酯合成的研究 北京化工，（）： 张 萍，杨清华，史翠花，等 抗氧剂在生产中的应用 合成橡胶工业，（）： 张天永，池立峰，夏文娟，等 抗氧剂的合成研究 化学工业与工程，（）： 莫照兰 养殖牙鲆细菌性疾病调查及鳗弧菌致病性研究 青岛：中国科学院海洋研究所， 覃映雪，池信才，苏永全，等网箱养殖青石斑鱼的溃疡病病原 水产学报，（）： 王国良，金 珊，薛良义 海水网箱鲈鱼
