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1、1L 末处方与甲 壳胺溶液相比， 对药物透过细胞膜转运促进作用更强。在羊模型试验中， 对肤类药物( 戈舍瑞 林、 亮丙瑞林和甲 状旁腺素) ， 甲 壳胺粉末和微球的生物利用度达到2 0 %一 4 0 %。临床试验结果也证实了动 物试验结果。 与鼻腔吸收研究一致， 甲 壳胺也 能促进肤类药物9 一 脱甘氨酞胺- 8 - 精氮酸加压素溶液大鼠 肠圈给药的透 粘 膜吸 收。 S c h ip p e r 等 的试 验结果表明， 甲 壳胺对甘露醇穿透C a c o - 2 细胞的作用取决于 脱乙酞度和甲 壳胺 的 分子量。最近， 也有报道甲 壳胺溶液可增加布舍瑞林5 0 % 肠吸收。甲 壳胺的衍生物也
2、有相似的吸收促进 作用。 N 一 三甲氯化甲壳胺水溶性较好， 因 此比甲 壳胺本身更易于制备固 体口 服剂型。含有甲 壳胺的固体剂 型的研究较少成功， 是由于甲 壳胺以粉末形式溶解缓慢的原因。 甲壳胺能作为一种材料用于增强疫苗透粘膜途径如鼻腔给药的免疫反应。当通过鼻腔或注射给药时， 甲 壳胺本身 不能产生体液免疫反应。G i l l 等报道含有抗原血球凝集素丝( F H A ) 和百日 咳类毒素或只含有 ” 认的 百日 咳 疫苗， 与 甲 壳胺 结合 鼻腔给 药， 得到与腹膜内注射给药相似的血浆Ig G 水平， 在鼻腔洗液中得 到非常高的 分泌Ig A 水平。 相比 之下， 不含甲 壳 胺的
3、注 射处方， 在鼻腔 洗液中 检测不到I g A 水平， 而不含甲 壳胺的 鼻 腔处方， I g A 水 平很 低。 含 有甲 壳胺的 流感疫苗鼻腔给药， 与皮下注射相比， 发现相似的高度促进 免疫反应作用。 2 甲 壳胺的注册和毒理 最近甲 壳胺在日 本、 意大利和芬兰被批准用作食品添加剂。 将甲 壳胺收入欧洲药典的申 请已被考虑二 对甲 壳胺进行了 一系列毒性试验研究， 包括对豚鼠 应用2 8 天后对纤毛运动频率的影响; 对蛙愕和人鼻组织 清除率的 影响以 及对大鼠鼻粘膜的影响。在所有试验中， 毒性都可以忽略。兔子 1 0 天亚急性毒性研究显 示， 对器官或组织既无宏观也无微观的影响。甜味
4、清除试验发现， 每夭鼻腔使用甲 壳胺后， 人粘液纤毛清除 率不 受影响。 有 报道说 甲 壳胺的口 服毒 性为1 6 g / k ， 体重( L D P , ) o ( 参考文献略) 荧光法测定磁显葡胺脂质体的含量 王翔林陈红终立今刘茜陈联( 沈阳药科大学1 1 0 0 1 5 ) 吕锐杨晓慧 丹东市锦江制药厂; 解放军第2 3 0医院) 我们试制了 磁显葡 胺脂质体， 并进行了 动物实验 磁显葡胺脂质体经注射到体内， 较普通制剂提高肝、 胰、 脑等部位核磁造影清晰度。已报道磁显葡胺的含量测定方法有: 氧瓶燃烧法、 二阶导数紫外分光光度法 和高 效液相色谱法( H P L C ) 等， 国 外
5、标准和中华人民共和国卫生部药品标准均采用H P L C 法， 用荧光分光光 度法测定磁显葡胺脂质体含量未见报道。 .仪器与试剂 荧光分光光度计二 H I T A C H 1 6 5 0 - 6 0 : 2 5 型酸度计: 针喷酸葡胺: 上海淮海制药厂批号9 7 0 7 0 4 ; 葡甲胺: 上海 淮海制药厂批号9 7 0 7 0 4 ; 磷脂: 上 海油脂化学一厂批号9 6 1 1 0 4 ; 胆固醇: L 海油脂化 学一 厂批号%1 1 0 4 ， 其他 试剂均为分析纯。 2 方法与结果 2 . 1 脂质体的制备 空白 脂 质体: 用薄 膜 层衣法， 将磷脂 溶液( 磷 脂4 . 飞、 胆固
6、 醇I . 摊、 无 水乙醇I 5 m L ) 除去 乙醇 后， 加人 0 . 9 8 0 0 夕甲 胺， 再分散于5 0 rrd 磷酸 盐 缓冲 液( p H 7 . 4 ) 中， 即 得。 样品脂质体: 精密称取7 . 4 2 0 0 8 钝喷酸葡甲 胺溶于30c-1 磷酸 盐缓冲 液( p H 7 . 4 ) 中， 并定容至5 0 rn 1 ， 加人等量的土述磷脂溶液于.5 5 水浴中电 磁搅拌1 小时， 超声振荡3 分钟， 即得 22 实验条件的 选择 2 . 2 . 1激发光谱和发射光谱: 取磁显葡胺脂质体溶液 标示量为7 4 . 2 m g l m l ) 2 . S . L 至2
7、 5 m 1 量瓶中用水稀释 至刻度， 摇匀。移取 1 0 n i l 于分液漏斗中， 用3 0 n , 1 氯仿萃取_待分层后， 氯仿层用 2 0 m l 水洗， 合并水层于 5 0 m 1 量瓶中， 用 水稀释至刻度， 摇匀， 取水层分别扫描其激发光谱和发射光潜。结果最大激发波长为2 7 5 n m , 3 3 1|j翅撼有，一JJj刃翔， 最大发射波长为3 1 3 n m , 2 . 2 . 2 仪器狭缝选择: 取2 . 2 . 1 项下水层以亚沸水作空白， 当激发波长为2 7 5 n m , 激发狭缝S l i t E x = 1 O n m时， 改变发射狭缝S l i L E m为1
8、 0 n m , 5 n m , 2 n m ， 分别扫描其荧光光谱， 比 较发射狭缝对灵敏度影响。结果以S li t E m 2 n m为最佳。 2 . 2 . 3 制剂辅料影响: 取2 . 2 . 1 项下氯仿层扫描发射光谱， 同时做空白脂质体水层扫描发射光谱。结果表 明磁显 葡胺脂质体经氯仿萃取， 脂质体完全破坏， 磁显葡胺完全游离于水中。 磷脂、 胆固醇等类脂质被抓仿 萃取， 残留于水中的 类脂质不影响磁显葡胺含量测定 2 . 2 . 4 P H 值的 选 择: 准 确 量 取2 . 2 . 1 项 下水 层各2 . 5 m l 于1 0 只 干 燥 烧杯中. 用 稀N a O H 和
9、 稀H C 1 溶 液 分别 调P H 为1 . 0 , 2 . 0 , 3 . 0 , 4 . 0 , 5 . 0 ,6 . 0 , 7 . 0 , 8 . 0 , 9 . 0 , 1 0 .0 ， 对 应 定量 转 移于1 0 只2 5 m 1 量 瓶中， 均 用 亚 沸 水稀 释 至 刻度， 摇匀， 测定荧 光强度F 。 结果见图5 ， 选 用p H 6 . 0 一 8 . 0 , 荧光强度 较高， 且稳定。 2 . 2 . 5 荧光强度稳定性: 取2 . 2 . 1 项下水层测定1 0 , 3 0 , 6 0 , 1 2 0 , 1 5 0 , 1 8 0 m i n 时溶液的 荧光值
10、F 。同时将配置 好的溶液避光， 冷藏条件放置二 周后， 并测定荧光值F 。 结果表明磁显葡胺溶液连续照射 1 8 0 m i n 荧光强度 基本不发生改变， 荧光稳定。同时磁显葡胺溶液在冷藏， 避光条件下保存溶液稳定。 2 . 2 . 6工 作曲 线: 准确量 取9 .4 m g / rrml 磁显葡 胺标准 溶液0 , 0 . 1 , 0 . 5 , 2 . 0 , 5 .0 , 1 0 . 0 m 1 于6 只1 0 0 m l 量瓶中和 2 . 5 , 5 . 0 , 1 0 . 0 m 1 于3 只1 0 “量 瓶中 ， 均 调P H 至7 . 4 ， 用 亚 沸 水 稀 释 至 刻
11、 度， 摇 匀， 测 定 其 荧 光 值F ， 同 时 做 试 剂空白， 计算回归方 程为: C = 5 6 . 4 2 F 一 7 .9 6 , r = 0 . 9 9 8 9 , 结果表明 磁显葡 胺荧光法测定在9 . 4 P g l n d 一 ， . 4 * m l 时， 线性成立。 2 . 2 . 7 精密度试验: 取2 . 2 . 1 项下水层测定其荧光值F ， 重复测定四次， 计算相对标准偏差， 测定结果为: 7 3 . 4 , 7 4 . 2 , 7 4 . 5 , 7 3 . 9 , 7 3 . O m g , R S D = 0 . 8 % , 结果 显 示 本 法 具 有
12、良 好的 精 密 度。 2 . 2 . 8 回收率试验 取 磁显葡胺脂质体溶液( 标示量为7 4 . 2 m g / m L ) 稀释5 倍， 摇匀， 即得样品溶液。 分别 取2 . 5 m 1 至6 个 2 5 m 1 量 瓶中， 分别 加人5 m g / m l 磁显 葡 胺标准溶 液0 , 0 . 2 , 1 . 0 , 2 . 0 , 5 . 0 , 1 0 . 0 m 1 用水稀释至刻度， 摇匀。 分别 移取 l o m l 于分液漏斗中， 用3 0 m 1 氯仿萃取。待分 层后， 氯仿层用2 0 m 1 水洗， 合并水层于5 0 m 1 量瓶中定容， 分别测定L 述水层的荧光强度并
13、按回归方程计算回收率， 结果为: 9 8 . 9 %, 1 0 1 , 5 %, 9 9 . 9 %, 1 0 1 . 4 %, 9 9 . 5 %, 平均回收率X 二 1 0 0 . 2 % , R S D 二 1 . 1 % 2 . 3 磁显葡胺脂质体测定 取磁显 葡 胺脂质 体溶液( 标示 量为7 4 . 2 m g / m L ) 样品6 只， 混和， 按2 . 2 . 1 项下操作取水层测定其荧光值 F 。 按回 归方程计算样品中 磁显葡胺的含量， 同 法再测样品5 次， 同时与部颁标准H P L C 法比 较， 结果本法和 H P 立 二 测定的 结果分别为( 平均标准量%士 R
14、S D ) 1 0 0 . 3 士 1 . 3 ; 1 0 0 . 9 土 1 . 4 0 对两方法测定结果做统计学处理， 无显著性差异， 荧光分光光度法测定磁显葡胺含量的结果令人满意。 3 讨论 3 . 1荧光分光光度法中 常用硫酸哇琳作标准荧光试剂， 最大激发波长为3 2 0 m 最大发射波长为4 4 8 。 为可 见区， 而 磁显 葡 胺最 大激发 波长 为2 7 5 n m , 最大 发射波长为3 1 3 n m 近紫外区。由 稳 定性实验可知磁显荀 胺溶 液在2 7 5 n m 连续照 射1 8 0 m in 及 磁显葡 胺溶液在冷 藏、 避光条 件下 保存溶液 荧光 强度稳 定。 本文提出 采 用含 4 . 7 m g / m l 的磁显 葡 胺溶液 作该 方 法的 标 准荧光 试剂。 3 . 2经实 验表 明p H 6 . 0 一 8 . 。 时， 磁显 葡 胺 溶液 荧光 值不 随 葡甲 胺加 人量 变化 而改 变， 故 葡甲 胺不 影响 本 法 测定。( 参考文献略) 富月， j月闷 消炎贴经皮给药制剂的研究 陈 曦刘令勉( 黑龙江省中医药大学附属第一医院 1 5 0 0 4 0 ) 消炎贴是银翘双解栓的改革剂型， 原栓剂给药不方便， 半衰期短( 2 - 3 小时) ， 生物利用度低( 7 % n - 1 4 ，_ _ 舀 遏
