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1、 湖 南 省 疾 病 预 防 控 制 中 心 Hunan Provincial Center for Disease Control and Prevention 呼吸道病毒标本采集运输、保存 与实验室结果判读 湖南省疾病预防控制中心 微生物检验科 黄一伟 2015-12-10 湖 南 省 疾 病 预 防 控 制 中 心 Hunan Provincial Center for Disease Control and Prevention 相关呼吸道病毒概况 湖 南 省 疾 病 预 防 控 制 中 心 Hunan Provincial Center for Disease Control and
2、 Prevention 呼吸道病毒 呼吸道病毒是指一大类能侵犯呼吸道引起呼 吸道局部病变，或仅以呼吸道为入侵门户，主要 引起呼吸道外组织器官病变的病毒。拒统计， 90%以上的急性上呼吸道感染由病毒引起。 湖 南 省 疾 病 预 防 控 制 中 心 Hunan Provincial Center for Disease Control and Prevention 呼吸道病毒的分类 l 正粘病毒科 流感病毒（A、B、C） l 副粘病毒科 副流感病毒（I-IV）、呼吸道合胞病毒、 偏肺炎病毒、麻疹病毒、腮腺炎病毒 l 小RNA病毒科 肠道病毒（脊髓灰质炎病毒、柯萨奇病毒、 埃可病毒）、鼻病毒、心病
3、毒 l 腺病毒科 腺病毒 l 冠状病毒科 SARS-CoV, 229E, OC43, NL63, HKU1 l 细小病毒 博卡病毒（1-4） l 呼肠孤病毒科 正呼肠孤病毒属 l 疱疹病毒科 单纯疱疹病毒、巨细胞病毒、EB病毒 水痘带状疱疹病毒、 l 披膜病毒科 风疹病毒 l 多瘤病毒 WU、KI 湖 南 省 疾 病 预 防 控 制 中 心 Hunan Provincial Center for Disease Control and Prevention 呼吸道病毒感染的特点 l 病毒的多样性和变异性； l 在引起成人感冒的病毒群中：鼻病毒占30%-35%，冠状病毒占20%-30% ，其他病
4、毒占10%-15%。 l 大部分情况下，病毒入侵部位、入侵后繁殖部位、由此引发的组织和 免疫病理改变以及表现出的临床症状和体征的部位基本在呼吸道，表 现的病情较轻； l 一般无病毒血症； l 有些病毒还可引起肠道感染； l 免疫力不持久； 湖 南 省 疾 病 预 防 控 制 中 心 Hunan Provincial Center for Disease Control and Prevention 正粘病毒的基本特征 流行性感冒病毒（简称流感病毒）： 是一种造成人类及动物患流行性感冒的RNA病毒，在分类 学上，流感病毒属于正黏液病毒科 理化特性： 对热敏感,5630min可灭活；最适pH为7.
5、08.0，3.0 和10.0感染力很快被破坏；对紫外线敏感；对乙醚、氯 仿、丙酮等有机溶剂均敏感。 湖 南 省 疾 病 预 防 控 制 中 心 Hunan Provincial Center for Disease Control and Prevention 流行性感冒概述 流行性感冒（简称流感）： 是由甲（A）、乙（B）、丙（C）三型流感病毒分别 引起的急性呼吸道传染病。 临床表现： 起病急、高热（3840）、肌痛、头痛伴有严重不 适、干咳、咽喉痛或鼻炎，多数患者可在一到两周内恢 复。 潜伏期短（1 - 3天）、经呼吸道飞沫传播，传播迅 速，抗原易变异，人群对变异株普遍易感，控制难度大 ，
6、流感流行呈一定季节性。 湖 南 省 疾 病 预 防 控 制 中 心 Hunan Provincial Center for Disease Control and Prevention 流感病毒概述 分型与命名 根据流感病毒感染的对象，可以将病毒分为人类流感病 毒、猪流感病毒、马流感病毒以及禽流感病毒等类群。 根据病毒粒核蛋白（NP）和膜蛋白（MP)抗原特性及其 基因特性的不同，可以将病毒分为甲（A）、乙（B）、丙（ C）三型。 甲型流感病毒根据其表面结构（H和N）及其基因特性的 不同可分为多种亚型。 湖 南 省 疾 病 预 防 控 制 中 心 Hunan Provincial Center
7、for Disease Control and Prevention 目前已从甲型流感病毒的 天然宿主水禽中分离到16 种HA与9种NA亚型的甲型 流感病毒。 湖 南 省 疾 病 预 防 控 制 中 心 Hunan Provincial Center for Disease Control and Prevention 禽流感病毒H5N1、H9N2、H7N7以及H10N7等均有感染人的 报道。 血清学的证据表明H4、 H6以及H11亚型 AIVs也可能感染 过人。 根据禽流感病毒对鸡致病性的不同，AIVs可以分为低致病 性禽流感病毒（LPAIV）和高致病性禽流感病毒（HPAIV） 。 近几十年
8、，不断有HPAIV和LPAIV感染人的报道，均是由禽 直接传给了人，并没有病毒能在人群中有效传播的证据。 H7亚型AIVs也可按照地域不同分为两个基因谱系：北美谱 系和欧亚谱系，且均有感染人的报道 湖 南 省 疾 病 预 防 控 制 中 心 Hunan Provincial Center for Disease Control and Prevention 副粘病毒的基本特征 l 副粘病毒科(Paramyxoviridae)拥有2个病毒亚科6个属。 l 副粘病毒的基因组为单股负链RNA，不分节段。基因组约 1520kb，编码的蛋白811个或更多。 l 副粘病毒毒粒直径约150350nm，含有螺
9、旋状核壳。病毒 颗粒呈多形性，但通常为圆形，均有包膜。即使在同一种 病毒，毒粒的大小也不相同。细胞浆内复制。 湖 南 省 疾 病 预 防 控 制 中 心 Hunan Provincial Center for Disease Control and Prevention 湖 南 省 疾 病 预 防 控 制 中 心 Hunan Provincial Center for Disease Control and Prevention 小RNA病毒的基本特征 l 小RNA病毒(Picornavirus) 小RNA病毒有9个属，其中已 知5个含有人类病原。小RNA病毒颗粒每个含有4种蛋白（ VP1-V
10、P4），各有60个拷贝，呈二十面体对称结构，直径 大约30nm，无包膜。 l 小RNA病毒基因组为单股正链RNA分子，大小约8kb，能 够在细胞浆内翻译出病毒复制所需的所有病毒蛋白，因此 具有感染性。 湖 南 省 疾 病 预 防 控 制 中 心 Hunan Provincial Center for Disease Control and Prevention Cox 肠道病毒 感染特点感染特点 l 非脊髓灰质炎肠道病毒（NPEV），主要包括Cox、 ECHO和一些新型肠道病毒； l 感染广泛，仅在美国每年症状性感染达500万1000万。 感染主要发生在夏秋季节，发病率和严重程度与年龄成反 比
11、，幼儿是主要受害者； l 可引起普通感冒、心肌炎、无菌性脑膜炎、脑炎等多种疾 病。绝大部分感染是无症状性的，很难与鼻病毒感染区 分。 湖 南 省 疾 病 预 防 控 制 中 心 Hunan Provincial Center for Disease Control and Prevention l 在液体中稳定； l 脑脊液、血清、全血、尿可以放在原始采集管中送交 实验室；直肠或咽拭子、鼻洗液等放入VTM； 样本采集样本采集 肠道病毒 湖 南 省 疾 病 预 防 控 制 中 心 Hunan Provincial Center for Disease Control and Prevention
12、 鼻病毒 l 病毒复制及症状特征主要在鼻部，人普通感冒有1/31/2由鼻病毒引 起； l 1960年代分离成功，至1987年已经鉴别了100血清型；根据基因特征 可将这些血清型分为A、B两属；2007年发现C属，目前不能培养 l 温带地区感染高峰为每年9月，春天有第二次感人那高峰，夏天可持 续发生； l 无组特异性抗原，型见可有交叉，血清型变化频繁； l 病毒经呼吸道分泌物从人传播到人； l 潜伏期23d, 病毒排出高峰期与急性鼻炎一致；45d时检测不到病 毒或维持低滴度达2周，症状一般维持7d; l 下呼吸道感染也常发生。尤其是对于婴幼儿、老年人、慢性病患者或 原有肺病患者，常与RSV感染不
13、易区分； l 没有胞膜，对有机溶剂有抵抗力。 感染特点感染特点 湖 南 省 疾 病 预 防 控 制 中 心 Hunan Provincial Center for Disease Control and Prevention l 症状出现后16d均可分离到病毒，病毒排泌13 d明显； l 标本应在鼻部采集而不是咽部采集； l 鼻洗液是鼻病毒分离最好的标本；样本4可保存2448h 。 鼻病毒 样本采集样本采集 湖 南 省 疾 病 预 防 控 制 中 心 Hunan Provincial Center for Disease Control and Prevention l 线型双链DNA，不分节
14、段，基因组长3000042000bp， 编码约30种蛋白； l 病毒无包膜，二十面立体对称，直径约7090nm，具 12个顶角和纤维刺突。 腺病毒 湖 南 省 疾 病 预 防 控 制 中 心 Hunan Provincial Center for Disease Control and Prevention l 潜伏期58d； l 通常为局部感染； l 约5%的儿童急性呼吸道疾病及约10%的婴幼儿腹泻由腺病毒 引起； l 咽炎，急性呼吸系统疾病（3，4，7，21，1，2，5，6），滤 泡性结膜炎，流行性角膜结膜炎，咽结膜热，尿路感染（子 宫颈炎、尿道炎、出血性膀胱炎）以及无症状持续感染； l
15、脑膜脑炎可为腺病毒呼吸道感染的并发症。 腺病毒 感染特点感染特点 湖 南 省 疾 病 预 防 控 制 中 心 Hunan Provincial Center for Disease Control and Prevention 湖 南 省 疾 病 预 防 控 制 中 心 Hunan Provincial Center for Disease Control and Prevention 湖 南 省 疾 病 预 防 控 制 中 心 Hunan Provincial Center for Disease Control and Prevention l 鼻咽拭子或抽出物、鼻拭子或抽出物、眼分泌物拭
16、子、粪 便或直肠拭子、尿、尿道或宫颈拭子以及活检或尸检组织 都是可根据病人症状获得的合适标本。 l 疾病早期正确收集样品并立即冷冻送往实验室可大大提高 病毒检出率。 l 用血清学方法建立或证实诊断需要配对的血样。第一份样 品在症状出现后应立即尽快收集，第二份应在2-4周后收 集。 样本采集样本采集 腺病毒 湖 南 省 疾 病 预 防 控 制 中 心 Hunan Provincial Center for Disease Control and Prevention 冠状病毒 l 单股正链RNA，27-31KD,5端甲基化“帽子”，3端polyA尾。 l 根据基因序列和血清学，分成三组，感染人类的分属于I和II 组，包括229E、NL63、OC43、HKU1和SARS-CoV。 Woo, et al. Exp Biol Med. 2009, 234:11171127 湖 南 省 疾 病 预 防 控 制 中 心 Hunan
