性染色质:人体X-染色质观察讲解

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1、1/20 遗传学实验 实验01 植物染色体常规压片技术及核型分析 实验02 减数分裂与配子形成 实验一 果蝇的形态、生活周期及其饲养 实验二 遗传学中的人类味觉研究 实验三 果蝇唾腺染色体标本的制备和观察 实验四 性染色质:人体X-染色质观察 实验五 果蝇的单因子杂交实验 实验六 果蝇的伴性遗传 实验七 实验五的检验 实验八 实验六的检验 实验九 植物有性杂交技术 实验十 人工诱发多倍体植物 实验十一 诱变物质的微核测试 实验十二 简易法提取植物总DNA 2/20 性染色质:人体X-染色质观察 一、实验目的: l通过实验掌握鉴定人类x染色质的方法,在显微 镜下正确识别Barr小体的特征及其所在

2、的位置 。 l了解X染色体失活的有关理论假说及失活染色体 上的基因所控制的遗传性状的特点。 l了解“剂量补偿效应” 的有关内容; 3/20 性染色质:人体X-染色质观察 二、实验原理: l 在雌性个体的细胞中的2条染色体,在间期,有一条 呈松散状态,参加细胞生理活动;另一条保持异固缩 状态,我们称之为Barr小体。 l 由于Barr小体是处于失活状态,所以一般位于细胞核 内边缘。形状多样(微凸形、三角形、卵形、短棒形 等)。 4/20 性染色质:人体X-染色质观察 二、实验原理: l一般,在正常女性细胞中可能出现一个Barr小体,正 常男性细胞中不可能出现Barr小体;(正常女性口腔 粘膜细胞

3、中约3050%有一个Barr小体。在不同实验 室中计数的差别较大,而在男性中则仅只偶尔可见不 典型者这是环境引起代谢的暂时现象,约2%以下 )。对于性染色体畸变的个体。 lBarr小体数 = 细胞内X染色体数 1 。 5/20 性染色质:人体X-染色质观察 二、实验原理: lBarr小体特征及位置:它是处于失活状态的X染色体, 一般位于细胞核膜内侧边缘的一个深染区(较细胞核 要小),形状多样。 l剂量补偿效应:是指XY型性别决定的生物,由X染色 体上的基因决定的性状在两性的表现几乎相同。即X染 色体上的基因的表达产物在雌、雄细胞中是等量的。 补偿的实现途径:1、X染色体转录速率的差异性,雄 性

4、细胞中的X染色体转录速率雌性细胞中2条X染色 体的转录速率;2、雌性细胞中有一条染色体失活。 6/20 性染色质:人体X-染色质观察 二、实验原理: l 染色体失活假说:在正常的雌性哺乳动物的体细胞 中,一条染色体在遗传上有活性,而另一条处于失 活状态。这种失活发生在胚胎发育的早期,失活是随 机的。 7/20 性染色质:人体X-染色质观察 三、实验材料 : l上皮粘膜细胞、带有毛根的头发 8/20 性染色质:人体X-染色质观察 四、实验用具药品 1.仪器用具:显微镜、载玻片、盖玻片、剪刀、镊子、 酒精灯、牙签 2.药品试剂:改良品红、醋酸洋红、50%醋酸、蒸 馏水 9/20 性染色质:人体X-

5、染色质观察 五、实验步骤: 1. 口腔颊部粘膜细胞的观察 用牙签从女性口腔两侧颊部刮取上皮粘膜细胞,在 原位刮取2-3次,分别涂抹在干净载片上,待稍干后 ,滴加1-2滴1%醋酸洋红染液,常温下染色2-5分钟 ,勿使干燥,压片后镜检。 要点:先漱口 10/20 性染色质:人体X-染色质观察 五、实验步骤: 2、毛发根部细胞的观察 拔取一根带有毛根的头发,在毛根部加一滴50%醋 酸,低倍镜下观察。待毛根鞘软化后,拔去毛干,吸 干醋酸,重新加一滴染液,盖片,在酒精灯上轻微加 热后,静置5分钟,压片后镜检。(勿使干燥) 11/20 性染色质:人体X-染色质观察 五、实验步骤:X染色质的辨认 l 低倍镜

6、下检出典型的可数细胞: 标准:A、核质呈网状或细颗粒状分布;B、核膜清晰, 核无缺损;C、染色适度;D、周围无杂菌; l 高倍镜下观察:1、核膜内侧边缘;2、核仁附近;3 、染色质中间游离部位。(正常女性口腔粘膜细胞中 约30-50%有一个Barr小体。在不同实验室中计数的 差别较大,而在男性中则仅只偶尔可见不典型者 这是环境引起代谢的暂时现象,约2%以下) 12/20 性染色质:人体X-染色质观察 六、关注点: l一般在一个可看到Barr小体的雌性个体的细胞核中, 可能会存在多个深染区域,而只有在细胞核膜内侧边 缘附近的一个较小的深染区域才可判断为Barr小体。 l人体口腔内膜细胞形状多不规

7、则。在压片时要注意尽 量把细胞打散,以便于观察。 13/20 性染色质:人体X-染色质观察 14/20 性染色质:人体X-染色质观察 六、关注点: l证据:葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 葡萄糖-6磷酸脱氢酶(G-6PD)的活性在男女间没 有区别。根据淀粉凝胶电脉的差异,可分为A型和B型。 由X上一对等位基因GdA和GdB控制。只有一个氨基酸 的差异。杂合体AB显示两条带。但从皮肤上取很小一片 ,用胰蛋白酶处理,使细胞分散,单独培养,发现,有 的细胞群显示A型,有的显示B型,但没有显示两条带的 。 15/20 X染色体数与Barr小体数 16/20 X染色体数与Barr小体数 17/20 染色体失活机制研究进展 18/20 染色体失活机制研究进展 19/20 染色体失活机制研究进展 20/20 性染色质:人体X-染色质观察 实验作业: l观察中选绘4-5个典型细胞,示明X-染色质的形态部位 ; l思考:什么是剂量补偿效应及补偿途径?

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