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1、教材经典实验归类一 观察DNA和RNA在细胞中的分布 (必修一P26)实验原理：DNA遇甲基绿呈绿色，RNA可被吡罗红染成红色。实验步骤步骤器材与试剂作用与原理（1）制片将牙签刮下的口腔上皮细胞置于载玻片上0.9%的NaCl溶液滴载玻片烘干10.9%的NaCl溶液防止细胞破裂，维持细胞形态。2烘干使细胞固定在载玻片上（2）水解8%HCl中30保温5分钟盐酸能改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色体中的DNA与蛋白质分离。（3）冲洗用蒸馏水缓流冲洗10分钟（4）染色2滴吡罗红甲基绿染色5分钟甲基绿使DNA染上绿色吡罗红使RNA染上红色（5）观察显微镜下观察实验结果：细胞核呈绿色，细胞
2、质呈红色。分布：真核生物的DNA主要分布在细胞核中，线粒体和叶绿体内也含有少量的DNA；RNA主要分布在细胞质中。【注意事项】选材：口腔上皮细胞、无色的洋葱表皮细胞（或用紫色洋葱内表皮细胞），不能用紫色洋葱外表皮细胞或叶肉细胞，防止颜色的干扰。缓水流冲洗目的：冲洗掉解离液（酸性），防止其与染色剂（碱性）作用而影响观察结 果，且用缓水冲洗也防止细胞被冲走；3实验中几种试剂的作用0.9%NaCl溶液（生理盐水）：保持口腔上皮细胞正常形态。8%盐酸：a改变细胞膜等的通透性；b使染色体中DNA与蛋白质分开。蒸馏水：a配制染色剂；b冲洗载玻片。甲基绿吡罗红染液：混合使用且现配现用。4先低倍镜观察，选择染
3、色均匀、色泽浅的区域，移至视野中央，调节清晰后才换用高倍物镜观察。5DNA和RNA在细胞核和细胞质中都有分布，只是量的多少不同。故结论中强调“主要”而不能说“只”存在于细胞核或细胞质中。二检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质(必修一P18) 实验原理：可溶性糖中的还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖），与斐林试剂发生作用，可以生成砖红色的CU2O沉淀。脂肪可以被苏丹染成橘黄色。蛋白质与双缩脲试剂发生作用，可以产生紫色反应。（蛋白质中的肽键，在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用，产生紫色络合物）1还原糖的检测还原性糖：有还原性基团游离醛基或酮基的糖；如葡萄糖、果糖、麦芽糖。（1）材料的选取
4、：还原糖含量高，白色或近于白色，如苹果，梨，白萝卜。（2）试剂：斐林试剂（甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液），现配现用。（3）步骤：取样液2mL于试管中加入刚配的斐林试剂1mL（斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入）水浴加热2min左右观察颜色变化（浅蓝色棕色砖红色）2脂肪的检测（1）材料的选取：含脂肪量越高的组织越好，如花生的子叶。（2）步骤：制作切片（切片越薄越好）将最薄的花生切片放在载玻片中央 染色（滴苏丹染液23滴切片上23min后吸去染液滴体积分数50%的酒精洗去浮色吸去多余的酒精） 制作装片（滴12滴清水于材料切片上盖上盖玻片） 镜检鉴定
5、（显微镜对光低倍镜观察高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒）3蛋白质的检测（1）试剂：双缩脲试剂（A液：0.1g/mL的NaOH溶液，B液：0.01g/mL的CuSO4溶液）（2）步骤：试管中加样液2mL 加双缩脲试剂A液1mL，摇匀 加双缩尿试剂B液4滴，摇匀 观察颜色变化(紫色)【注意事项】1.还原糖检测：选材要用含糖较高、颜色为浅色 的生物组织提取液；使用斐林试剂时必须将甲、乙两液等体积混合均匀，切勿分别加入组织样液中进行检测。加入斐林试剂后，需要水浴加热。2.脂肪检测：切片要尽可能的薄（实验时也可刮取组织碎屑）；染色后一定要用50%的酒精处理，目的是洗去浮色；观察时找最薄处，最好只有12层细
6、胞。3.蛋白质检测：双缩脲使用时，应先加1mL A液造成碱环境，再加4滴B液。 4.斐林试剂与双缩脲试剂的区别.三用高倍镜观察线粒体和叶绿体 （必修一P47）1材料：新鲜藓类叶、黑藻叶或菠菜叶，口腔上皮细胞临时装片2原理：叶绿体在显微镜下观察，绿色，球形或椭球形。 用健那绿染液染色后的活细胞中线粒体成蓝绿色，细胞质接近无色。步骤操作方法目的与作用（1）取材新鲜的藓类的叶菠菜叶下表皮略带一些叶肉藓类叶为单层细胞下表皮容易撕取，要略带些叶肉（2）制片注意叶片不能太干了，保持有水的状态以免影响细胞活性（3）观察叶绿体呈椭圆形，可随细胞质的流动而流动。叶绿体在弱光下以最大面积（长轴）转向光源，在强光下
7、以最小面积（短轴）转向光源。（1）取材漱口，口腔内侧壁上轻刮几下（2）染色将口腔细胞放在健那绿液滴上（3）观察盖上盖玻片，显微镜下观察，线粒体被染成蓝绿色问题1为什么不用植物细胞来观察线粒体？植物线粒体相对较少，叶绿体颜色易掩盖线粒体被染成的蓝绿色。2如果观察发现染色不足，如何补色？在盖玻片一侧滴加健那绿液，另一侧用吸水纸吸。注意：临时装片保持有水状态。因叶绿体本身含色素，呈绿色，观察时不需染色。健那绿是活细胞染色剂。四观察植物细胞的质壁分离和复原（必修一P61）原理：细胞液浓度细胞外溶液浓度时，细胞吸水；细胞液浓度细胞外溶液浓度时，细胞失水 细胞壁与原生质层的伸缩能力不同。1条件：细胞内外溶
8、液浓度差，活细胞，大液泡2材料：紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞（具紫色大液泡），质量浓度0.3g/mL的蔗糖溶液，清水等。3步骤： 制作洋葱鳞片叶外表皮细胞临时装片观察盖玻片一側滴蔗糖溶液，另一侧用吸水纸吸引观察(液泡由大到小，颜色由浅变深，原生质层与细胞壁分离)盖玻片一側滴清水， 另一側用吸水纸吸引观察(质壁分离复原)4结论：细胞外溶液浓度 细胞内溶液浓度，细胞失水 质壁分离细胞外溶液浓度 细胞内溶液浓度，细胞吸水 质壁分离复原【注意事项】1所选植物细胞必须要有大液泡，液泡的颜色最好较深，如：紫色的洋葱鳞片叶外表皮。2试剂的选择：使质壁分离的试剂不只蔗糖溶液，只要对细胞无毒害作用，如NaCl、KN
9、O3。但使用0.3 g/mL KNO3会出现质壁分离，但能自动复原。因为K和NO3-可被细胞吸收，使细胞液浓度增大，细胞渗透吸水、复原。一定浓度的尿素、甘油等也可3若使用质量浓度为0.5 g/mL的蔗糖溶液，质壁分离明显，但不能复原。因为溶液浓度过高，细胞过度失水，导致细胞死亡。4若使用质量浓度为1mol/L的醋酸溶液，细胞不发生质壁分离及复原现象。因为醋酸能杀死细胞，使原生质层失去选择透过性。【创新拓展】1判断细胞的死活。2测定细胞液的浓度。3比较不同植物细胞液的细胞液浓度。4比较未知溶液浓度的大小，5验证原生质层和细胞壁伸缩性的大小五叶绿体色素的提取和分离（必修一P97）1原理：( 1 ）
10、叶绿体中的色素能溶解在有机溶剂无水乙醇（或丙酮）中，所以用无水乙醇可提取叶绿体中的色素。（ 2 ）不同的色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的色素分子随层析液在滤纸条上扩散得快，溶解度低的色素分子随层析液在滤纸条上扩散得慢，因而可用层析液将不同色素分离。2步骤：3结果分析：从色素带的宽度可知色素含量的多少依次为：叶绿素a 叶绿素b 叶黄素 胡萝卜素； 从色素带的位置可知色素在层析夜中溶解度大小依次是：胡萝卜素 叶黄素 叶绿素a 叶绿素b ； 在滤纸上距离最近的两条色素带是叶绿素a 与叶绿素b ，距离最远的两条色素带是胡萝卜素与叶黄素。4实验创新：在本实验中在圆形滤纸中央点上叶绿体色素的提取液进行
11、层析，会得到近似同心的四个色素环，由内到外依次是黄绿色、蓝绿色、黄色、橙黄色。【注意事项】(1）色素分离和提取的原理经常考察，易混淆。(2）在研磨时加入碳酸钙的作用是防止色素被破坏，加入二氧化硅的作用是有助于研磨。过滤时用的是单层尼龙布。 (3）画滤液细线时，用力要均匀，速度要适中。 (4）研磨要迅速、充分。 a因为丙酮容易挥发； b为了使叶绿体完全破裂，从而能提取较多的色素； c叶绿素极不稳定，能被活细胞中的叶绿素酶水解而被破坏。 (5）制备滤纸条时，要将滤纸条的一端剪去两角，这样可以使色素在滤纸条上扩散均匀，便于观察实验结。 （6）放置滤纸时，滤液细线必须在层析液上面。 六 观察细胞的有丝
12、分裂（必修一P115）【实验原理】1植物的分生组织细胞有丝分裂较为旺盛。2有丝分裂各个时期细胞内染色体变化不同，根据各个时期内染色体的变化情况，识别该细胞处于有丝分裂的哪个时期。3细胞核内的染色体易被 染料染色。【材料】：洋葱根尖（葱，蒜）【步骤】：（一）洋葱根尖的培养（二）装片的制作 制作流程：解离 漂洗 染色 制片1解离：药液： 质量分数为15%的盐酸，体积分数为95%的酒精(1 ：1混合液)。时间：35min；目的：使组织中的细胞相互分离开来。2漂洗：用清水漂洗约3min。 目的：洗去药液，防止解离过度，并有利于染色。3染色：用质量浓度为0.01g / mL或0.02g / mL的龙胆紫
13、溶液(或醋酸洋红液)染色35min 目的： 使染色体着色，利于观察。4.制片： 将根尖放在载玻片上，加一滴清水，并用镊子把根尖弄碎，盖上盖玻片，在盖玻片上再加一片载玻片，然后用拇指轻轻地按压载玻片。 目的：使细胞分散开来，有利于观察。（三）观察1先在低倍镜下找到根尖分生区细胞：细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞正在分裂。2换高倍镜下观察：分裂中期分裂前、后、末期分裂间期。（注意各时期细胞内染色体形态和分布的特点）。其中，处于分裂间期的细胞数目最多。【注意事项】1先漂洗再染色，这两步不能颠倒，否则影响实验效果。2使根尖细胞互相分散的方法解离，盐酸可破坏细胞壁的果胶层，使组织细胞分离；制片时用镊子捣
14、碎；压片。3显微镜下观察的都是死细胞，不能看到细胞分裂动态变化，若视野中找不到某一时期的细胞，可通过移动装片从邻近的区域中找。4在显微镜下观察到 细胞数目最多，中期最少。原因是间期历时最长，中期历时最短。【创新拓展】可用于判断染色体的异常（如染色体形态或数目的变异）七探究影响酶活性的因素（必修一P78、P83）原理：淀粉遇碘后，形成蓝色的复合物。淀粉酶可以可以使淀粉水解成麦芽糖，麦芽糖遇碘后，不形成蓝色的复合物。1材料：新配置的淀粉酶溶液，新鲜肝脏研磨液，可溶性淀粉溶液，过氧化氢溶液等。2步骤：（1）探究温度对酶活性的影响步骤项目试管1试管2试管31加入可溶性淀粉溶液2mL2mL2mL2放置在不同温度环境下5分钟0100603加入新配置的淀粉酶溶液1mL1mL1mL4滴入碘液2滴2滴2滴5观察结果变蓝变蓝不变蓝在温度对酶活性的影响的实验中，三支试管的条件，除温度外均相同。3号试管处在60的温度条件下，酶活性最大，试管中的淀粉被分解，滴入碘液后不会变蓝；2号试管的温度条件是100， 这样高温度条件下，淀粉酶已失去活性；1号试管的温度条件是O，低温抑制淀粉酶的活性。
