《依达拉奉对小鼠蛛网膜下腔出血早期erk12调控海马神经元调亡及vegf介导脑动脉内皮细胞凋亡的影响》由会员分享，可在线阅读，更多相关《依达拉奉对小鼠蛛网膜下腔出血早期erk12调控海马神经元调亡及vegf介导脑动脉内皮细胞凋亡的影响（122页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、河北医科大学 学位论文使用授权及知识产权归属承诺 本学位论文在导师( 或指导小组) 的指导下，由本人独立完成。本学位论文研 究所抉的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学 位论文进行交流、公丌和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文，第一署 私帷位为河北医科大学，试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北 医科人学所有。否则，承担相应的法律责任。，。：“吃 。t 二7 一r 耽一：辫雠：耥撇蠢釉 掣糍眨月，同 河北医科大学 研究生学位论文独创性声明 本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加 以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表
2、或撰写的研究成果，指导教 ! J 1 j 对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。 研究生签名：丑吾少 导师签名： 洲D 年月f 同 I ，t 附图附表0 0 0 00 0 2 4 讨论“”一“”一”2 7 小结“”一”“一”一一”2 9 参考文献2 9 第二部分小鼠蛛网膜下腔出血早期E R K l 2 、B a x 、c a s p a s e 3 调控海马 神经元凋亡及依达拉奉的治疗作用 前言”一”3 2 刖舌一一一”一“”一“一一“”一”“”“一”一”。j Z 材料与方法3 3 结果- - 一”“一”一”4 2 附图附表4 6 讨论“一”一”5 5 小结- ”5 8 参考文献5
3、8 第三部分小鼠蛛网膜下腔出血早期血管痉挛与V E G F 介导的脑动脉内 皮细胞凋亡的关系及依达拉奉的治疗作用 前言”一”“一“一”“一”一”一“”一“一”“一”一”一一”0 2刖舌”一”“”“一”“一”一”“”“”“一”一”“一” 材料与方法6 2 结果”7 0 附图附表7 3 讨论7 8 小结I b Q I b OQOOODO I I b l - 7 9 参考文献7 9 结论- 8 2 综述蛛网膜下腔出血早期脑损伤的实验研究进展8 3 致谢10 4 个人简历1 0 5 中文摘要 依达拉奉对小鼠蛛网膜下腔出血早期E R K l 2 调控海马神经元 凋亡及V E G F 介导脑动脉内皮细胞凋
4、亡的影响 摘要 第一部分 小鼠蛛网膜下腔出血模型制备及评价 目的：制作小鼠血管内插线致蛛网膜下腔出血模型，并对该模型的 死亡率、神经学改变及蛛网膜下腔出血的程度进行评价。 方法： 1 实验动物及分组体重2 8 9 3 2 9 雄性昆明小鼠3 0 只，随机分为假手术 组6 只、模型组2 4 只。 2 模型制备采用血管内插线法建立小鼠蛛网膜下腔出血模型。手术显微 镜下行颈部正中切口，依次分离右侧颈总动脉、颈外动脉和颈内动脉。颈 外动脉结扎并剪断，与颈内动脉拉成直线，将头端打磨的5 - 0 单丝尼龙线 从颈外动脉送入颈内动脉，直至大脑前动脉与大脑中动脉分叉处，遇到阻 力后再将尼龙线向前送入3 r a
5、 m 以穿破分叉部，然后迅速退出尼龙线。假 手术组尼龙线只感到阻力但不穿破血管。 3 检测指标及方法麻醉醒后开始观察小鼠的一般状况和神经功能缺失 情况；2 4 h 进行神经功能评分，观察两组死亡率；处死小鼠判定蛛网膜下 腔出血严重程度并对出血等级进行判定。 结果： l 一般状态观察假手术组小鼠精神状态好，模型组小鼠精神萎靡，进食 量减少，出现全身抖动、动作减少甚至不动。 2 神经功能缺失体征的观察模型组小鼠表现为自主活动减少或消失，攀 爬差或不能，提起鼠尾时前肢伸展差或不能，躯干及触须反应减弱或消失。 假手术组小鼠无上述表现。2 4 小时神经学评分假手术组( 2 1 O o O ) ，模 型组
6、( 1 4 8 + 1 5 ) ，两组相比有统计学差异( 氏O 0 5 ) 。 中文摘要 3 大体观察模型组小鼠可见大脑半球肿胀，以手术侧为重；蛛网膜下腔 弥漫出血，以大脑中动脉与大脑前动脉分叉部为多。假手术组无出血。 4 出血评分结果出血2 级者4 只，3 级者8 只，4 级者1 2 只。 5 死亡率2 4 小时假手术组无死亡，模型组死亡9 只，死亡率为3 7 5 。 结论：模型组小鼠术后出现不同程度的神经缺失症状；大体可见蛛 网膜下腔出血，出血部位多集中在大脑前动脉及大脑中动脉分叉部，近似 临床。适合模拟人类动脉瘤性蛛网膜下腔出血的研究，造模成功。 第二部分 小鼠蛛网膜下腔出血早期E R
7、K I 2 、 B a x 、c a s p a s e 一3 调控 海马神经元凋亡及依达拉奉的治疗作用 目的：探讨E R K l 2 在蛛网膜下腔出血早期脑损伤中的作用，分析 P E R K l 2 与海马神经元凋亡的关系及其凋亡的级联启动机制，以及依达 拉奉对蛛网膜下腔出血后早期脑损伤是否有治疗作用及其可能的机制。 方法： l 实验动物及分组体重2 8 9 3 2 9 雄性昆明小鼠随机分为假手术组、模型 组、依达拉奉组。 2 模型及给药方法采用血管内插线法建立小鼠蛛网膜下腔出血1 2 h 、 2 4 h 、4 8 h 、7 2 h 模型。假手术组仅插线但不刺破血管。依达拉奉( 3 m g
8、k g 体重) 术后3 0 m i n 起腹腔注射，每1 2 h 注射一次，用药至处死的各时相点。 模型组，在相同时相仪注射等量的N S 。 3 检测指标及方法在预定时间点进行蛛网膜下腔出血评分；神经功能损 害评分；H E 染色观察光镜下组织学变化；免疫组织化学方法检测海马 p - E R K l 2 、B a x 、c a s p a s e 3 的表达及分布情况；W e s t e r nb l o t 法检测海马 p - E R K l 2 、B a x 、c a s p a s e 3 蛋白表达量的情况；T U N E L 法检测海马细胞 凋亡的变化规律。 4 定量测定及统计方法蛋白定
9、量将N C 膜用扫描仪进行扫描，经自动图 像分析系统测定条带平均光密度值进行半定量分析。实验中所得数据均用 中文摘要 i s 表示，用S P S S1 3 0f o rw i n d o w s 统计软件进行秩和检验、t 检验和单 因素方差分析，P e a r s o n 方法相关分析，以单侧P O 0 5 ) 。 2 神经功能学评价依达拉奉组各时间点神经学评分明显好于模型组小 鼠( P 1 0m mf r o mb i f u r c a t i o n w i t he x t e n s i o nt ot h e c o n t r a l a t e r a li n t e r n
10、 a lc a r o t i da r t e r y H e m o r r h a g e d e n s i t y w a ss c o r e da sf o l l o w s ： 1 = b r a i n p a r e n c h y m av i s u a l i z e d t h r o u g hc l o t ；2 = b r a i np a r e n c h y m an o t v i s u a l i z e dt h r o u g hc l o t H e m o r r h a g eg r a d e ( 2t o5 ) w a sd e f
11、 i n e da st h es u mo f s i z ea n dd e n s i t ys c o r e s ， 4N e u r o l o g i c a lS c o r e sa n d M o r t a l i t y T h en e u r o l o g i c a l s c o r e sw e r ee v a l u a t e di nab l i n d e df a s h i o na t2 4h o u m p o s t - S A H ，b a s e do nt h es c o r i n gs y s t e mo f G a r c
12、 i ae ta lw i t hm o d i f i c a t i o n s A m o t o rs c o r e ( 0t o12 ) w a sd e r i v e df r o ms p o n t a n e o u s a c t i v i t y s y m m e t r yo f l i m bm o v e m e n t s ，c l i m b i n g ，b a l a n c e ，a n d c o o r d i n a t i o n ，w i t he a c hs c or | e d0t o3 ， A s e n s o r ys c o
13、 r e ( 1t o9 ) w a sd e r i v e df r o me x a m i n a t i o no fb o d y p r o p r i o c e p t i o n a n d v i b r i s s a e ，v i s u a l ，o l f a c t o r y ，a n dt a c t i l er e s p o n s e st os t i m u l u s w i t he a c h p a r a m e t e rs c o r e do nas c a l eo f1t o3 A n i m a l sw e r eg i v e nas c o r eo f3t O 2 1 ( h i g h e
