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1、第一章 绪论1.Cell Biology（细胞生物学）;是研究细胞结构 功能及生活史等生命活动基本规律的一门科学2.Cytology（细胞学）是对细胞形态，特别是染色体形态的观察3.Mitosis 有丝分裂 ：有丝分裂，又称为间接分裂，特点是有纺锤体染色体出现，子染色体被平均分配到子细胞，这种分裂方式普遍见于高等动植物（动物和高等植物）。是真核细胞分裂产生体细胞的过程。4.Miosis 减数分裂：减数分裂是生物细胞中染色体数目减半的分裂方式。性细胞分裂时，染色体只复制一次，细胞连续分裂两次，染色体数目减半的一种特殊分裂方式。减数分裂不仅是保证物种染色体数目稳定的机制，同且也是物种适应环境变化不
2、断进化的机制。5.细胞生物学研究3层次 显微水平（细胞整体水平）超微水平 分子水平6四个主要的阶段：第一阶段 16世纪末显微镜的发明到19世纪30年代。第二阶段 19世纪30年代细胞学说提出到20世纪中期。第三阶段 20世纪30年代电子显微镜技术的出现到20世纪70年代。第四阶段 20世纪70年代分子克隆技术的成熟到当前，细胞生物 学与分子生物学的结合愈来愈紧密，80年代建立分子细胞生物学。7. 1665英国人罗伯特胡克(Robert Hooke, 16351703)在其显微图谱一书中，第一次描述了植物细胞的构造，并首次采用拉丁文cella（小室)这个词来称呼他所看到的蜂巢状的封闭状小室8.
3、1680荷兰人列文虎克(Anthony Van Leeuwenhoek ，1632 -1723) ，提高了显微镜放大倍数，使复合式显微镜真正显示出它的威力；用自制显微镜显微镜观察了许多动物、植物的活细胞。第二章细胞的统一性与多样性1.原核细胞（prokaryotic cell）没有核膜，遗传物质集中在一个没有明确界限的区域，称为拟核（nucleoid）。DNA为裸露的环状双螺旋分子，、没有恒定的内膜系统，核糖体为70S型。2.内膜系统：由膜围成的各种细胞器，如核膜、内质网、高尔基体、线粒体、叶绿体、溶酶体等在结构上形成了一个连续的体系，称为内膜系统。内膜系统将细胞质分隔成不同的区域，即所谓的区
4、隔化，它不仅使细胞内表面积增加了数十倍，各种生化反应能够有条不紊地进行，而且细胞代谢能力也比原核细胞大为提高。3.eukaryotic cell,（真核细胞）：结构复杂，具有典型的细胞核的细胞。真核细胞的三大结构体系：1）生物膜结构体系 2）遗传信息表达结构体系 3）细胞骨架体系4.细胞是生命活动的基本单位：结构单位 代谢与功能单位 生长与发育单位 遗传单位，具有发育的全5.细胞的共性 1 细胞膜2 两种核酸3 核糖体4 分裂5 相似的化学组成6. 细胞的大小一般规律“10倍规律” 最小最简单的细胞是支原体典型细菌细胞12m 大多数动植物细胞直径在2030m间 病毒（小到大） 支原体 细菌 动
5、植物细胞 原生动物大：鸵鸟蛋卵黄直径可达5cm长：动物的运动神经元细胞，如人的坐骨神经细胞可长达1m。小：最小的支原体只有0.1m。7.原核细胞膜多功能性： 1）膜内侧具电子传递链与氧化磷酸化酶系（线粒体功能）；2）一些行光合作用的原核生物质膜内褶形成结合有色素的内膜（叶绿体功能），与捕光反应有关；3）内膜含酶与核糖体共同合成与分泌蛋白质（内质网与高尔基体功能）；4）一些革兰氏阳性细菌内膜内陷成中膜体，与DNA复制的支持和分裂时DNA分配有关8.真核细胞三大结构体系： 1） 生物膜结构体系 2）遗传信息表达结构体系 3）细胞骨架体系9.10.原核生物和真核生物膜系统的比较原核细胞膜系统：无内膜
6、系统，缺乏膜性细胞器，含有丰富的酶系，执行许多重要的代谢功能。真核细胞膜系统：具有发达的内膜系统，包括：线绿体、叶绿体、内质网、高尔基体、溶酶体。11.细胞的四个共性及其作为共性的理由1） 细胞膜：使细胞与周围环境保持相对的独立性，造成相对稳定的细胞内环境，并通过细胞膜与周围环境进行物质交换与信号传递，同时也是细胞能量转换的基地。2 ） 两种核酸：作为遗传信息复制与转录的载体3 )核糖体：合成蛋白质4 ) 分裂：生命繁殖的基础与保证12.思考：细胞由简单到复杂的进化主要体现在哪些方面？1） 细胞膜系统地分化与演变：首先分化为两个独立的部分-核与质，然后又进一步分化出结构与功能更精细，更专一的各
7、种细胞器 2） 遗传信息量与遗传装置的扩增与复杂化3） 细胞体积增大，具有一个比较复杂的骨架结构第三章细胞生物学研究方法1.细胞株（cell strain） 从原代培养细胞群中筛选出的具有特定性质或标志的细胞群，能够繁殖50代左右，在培养过程中其特征始终保持2.细胞系（cell line）从肿瘤组织培养建立的细胞群或培养过程中发生突变或转化的细胞，.在培养条件下可无限繁殖。（考英文） 3.单克隆抗体技术名（monoclonal antibody）（考英文）4.原代培养 （primary culture） 从动物机体取出组织，用酶（胰酶或胶原酶）与EDTA处理分散后，进行培养的细胞群叫原代培养.
8、 原代培养的细胞生长比较缓慢，而且繁殖一定的代数后（一般10代以内）停止生长。5.传代或传代培养：将细胞从一个培养瓶转移到另外一个培养瓶即称为传代或传代培养。细胞形态结构观察方法显微技术6.免疫细胞化学（immunocytochemistry）根据免疫学原理，利用抗体同特定抗原专一结合，对抗原进行定位测定的技术。如果将抗体结合上标记物，再与组织中的抗原发生反应，即可在光镜或电镜下显示出该抗原存在于组织中的部位7.原位杂交（in situ hybridization）：使用标记探针进入组织或组织切片细胞内，检定细胞内特定DNA或RNA序列的存在或位置8.分子杂交：具有互补核苷酸序列的两条单链核苷
9、酸分子片段，在适当条件下，通过氢键结合，形成DNA-DNA,DNA-RNA或RNA-RNA杂交的双链分子。这种技术可用来测定单链分子核苷酸序列间是否具有互补关系。9.根据光源不同，显微镜可分为光学显微镜（分辨率0.2微米）和电子显微镜（分辨率0.2纳米）两大类。前者以可见光（紫外线显微镜以紫外光）为光源，后者则以电子束为光源。光学显微镜结构10.普通生物显微镜由3部分构成 照明系统 光学放大系统 机械装置2 显微镜分辨率（指区分开两个质点间的最小距离，正常人眼的分辨率是0.2mm） 普通光波长为400700nm，因此显微镜分辨力数值不会小于0.2m，人眼的分辨力是0.2mm，所以一般显微镜设计
10、的最大放大倍数通常为1000X一 特殊光学显微镜A 荧光显微镜细胞中有些物质，如叶绿素，受紫外线照射后可发出荧光；一些物质用荧光染料或荧光抗体染色后，经紫外线照射亦可发荧光，荧光显微镜可对这类物质进行观察。 光源为短波光（紫外光），分辨力高于普通显微镜。 用途 对荧光物质进行定性和定量研究。 B 相差显微镜相差显微镜的基本原理是，把透过标本的可见光的光程差变成振幅差，从而提高了各种结构间的对比度，使各种结构变得清晰可见。 用途 可观察未染色标本C 倒置显微镜组成和普通显微镜一样，只不过物镜与照明系统颠倒，物镜在载物台之下，照明系统在载物台之上。用于观察培养的活细胞，通常具有相差物镜。 D 激光
11、共聚焦扫描显微镜.光源为激光；快速扫描，瞬间成像；可聚焦不同位点（面）；计算机整合，可得立体图像；激光波长短，有较高的分辨力。光镜种类光源用途分辨结果样品要求结构特点荧光显微镜短波光（紫外光）荧光物质进行定性和定量研究分辨力高于普通显微镜受紫外线照射后可发出荧光相差显微镜可见光可观察未染色标本各种结构变得清晰可见未染色标本物镜后有一相差板倒置显微镜观察培养的活细胞活细胞组成和普通显微镜一样，只不过物镜与照明系统颠倒通常具有相差物镜。 激光共焦扫描显微镜激光集荧光 相差 摄影等于一体有较高的分辨力。无快速扫描，瞬间成像；可聚焦不同位点（面）；计算机整合，可得立体图像（此表比考）二电子显微镜（小题
12、）1 透射电子显微镜 电子显微镜与光学显微镜的成像原理基本一样，所不同的是前者用电子束作光源，电磁场作透镜。透射电子显微镜（transmission electron microscope，TEM）分辨力可达0.2nm，放大倍数可高达近百万倍2 扫描电子显微镜扫描电子显微镜（scanning electron microscope，SEM），用来观察标本的表面结构。为了使标本表面发射出次级电子，标本在固定、脱水后，要喷涂上一层重金属微粒，重金属在电子束的轰击下发出次级电子信号。扫描电镜分辨力为610nm，人眼能够区别荧光屏上两个相距0.2mm的光点，扫描电镜的有效放大倍率为20000X。三扫描
13、隧道显微镜分辨率 横向为0.10.2nm，纵向可达0.001nm。可直接观察生物大分子，如DNA、RNA和蛋白质等分子的原子布阵，和生物膜、细胞壁等生物结构的原子排列12.细胞组分分析方法显示方法Schiff反应 细胞中的醛基可使Schiff试剂中的无色品红变为红色。这种反应用于显示糖和DNA（Feulgen反应）。13.特异蛋白质的定性与定位免疫细胞化学14.特异核酸的定性与定位分子杂交技术A 原位杂交 B 印迹杂交列。15.PCR技术polymerase chain reaction聚合酶链式反应用途 : 获得基因 定性检测 定量分析反应体系: 引物(primer) 一对寡核苷酸链(约18
14、20核苷酸)，用于扩增夹在双引物与模板DNA互补区的区域；模板(templete) 含待扩增序列的DNA或RNA；底物(substrate ) 4种dNTP；酶(enzyme) 耐高温的DNA聚合酶(Taq DNA聚合酶)。反应过程:变性 高温(约94)使DNA解链；复性 降温至37，使引物与模板复性，形成双链片段；延长 升温至70-75，合成延长；重复 重复变性复性延长，约2030次循环。原理：用于PCR反应的DNA聚合酶是从一种嗜热水生菌(Thermus aquaticus)中分离出来的，命名为Taq DNA聚合酶。此酶最适作用温度为7580，但短时间在95下仍能不失活。 动物细胞细胞培养16.群体培养mass culture将含有一定数量细胞的悬液置于培养瓶中，让细胞贴壁生长，汇合(confluence)后形成均匀的单细胞层.17.克隆培养colonial culture将高度稀释的游离细胞悬液加入培养瓶中；各个细胞贴壁后，彼此距离较远，经过生长增殖每一个细胞形成一个细胞集落，称为克隆（clone）。一个细胞克隆中的所有细胞均来源于同一个祖先细胞18.悬浮培养：用大容量的圆培养瓶，在培养过程中不断地转动，使培养的细胞始终处于悬浮状态之中而不贴壁。 19.将细胞从一个培养瓶转移到另外一个培养瓶即称为传代或传代培养。原代培养的细胞生长比较缓慢，而且繁殖一定的代
