纳米型nmda对肥育猪生长和胴体组成的影响及nmda调控生长机理研究

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1、浙江大学动物科学学院 博士学位论文 纳米型NMDA对肥育猪生长和胴体组成的影响及NMDA调控生长机 理研究 姓名:冯杰 申请学位级别:博士 专业:动物营养与饲料科学 指导教师:许梓荣 20040501 致谢 论文歇笔在即,身心于不知觉中徐徐释然放松,但绷紧的心弦仍强而有力不愿 停歇的颤动,数年来的学习、工作、生活的点点滴滴在弦际流淌,油然而生的万千 感慨,使其难以平静。是的,论文的诞生凝集了太多的感激与感动。 本论文是在导师许梓荣教授的悉心指导下完成的。从论文的选题、设计、实施 至论文的写作,无不凝聚了导师大量的心血。老师渊博的学识,敏锐的思维,严谨、 求真求实的治学,尤其是他皂q 新的意识和

2、极其强烈的事业心,使我受益非浅,并将 深刻影响着我将来的学习和工作。回首从硕士学习至今天博士论文的完成,老师在 学习、工作和生活上给予的一切,学生矢志难忘。在此谨向老师表示最诚挚的谢意 和最美好的祝愿! 本研究的完成得到了浙江大学饲料科学研究所老师大力支持,特别感谢夏枚 生、李卫芬副研究员,在试验过程中给予我悉心指导和热情帮助;感谢施俊轶老师 在动物解剖和细胞培养试验中详细和精心的指导和关心;衷心感谢孙建义、汪以真、 邹晓庭、俞颂东、胡彩虹、钱利纯、王敏奇、贾仁清老师给予的帮助和良好的建议, 研究所的老师们对本课题都给予实验指导和技术支持,在此并感谢。 本研究也得到了研究所诸多研究生的鼎力帮助

3、,特别感谢李奎、刘欣硕士在整 个研究中所付出的辛勤的劳动,感谢吕文平博士、郭彤博士、亓立峰博士、金海丽 硕士、朱金娈硕士、訾乃涛硕士、付亮剑硕士、冯建雷硕士、周理红硕士、杨海涛 硕士、陆平硕士、江霞硕士、熊丽硕士给予的帮助。 感谢浙江省卫生厅分析实验中心吴平谷副研究员和浙江中医学院动物实验中 心陈民利副研究员对本研究所给予的帮助和关心。 感谢浙江海宁浙农饲料有限公司和海宁三联养殖场在动物饲养试验中的大力 支持和协助。 我的父母,他们对本研究的完成给予我足够的精神鼓励,他们为我付出了太多, 我的爱人,她对我的学习和工作给予了充分的理解和支持,感谢他们为我付出的一 切。 感谢所有关心和帮助我的老师

4、、同学和朋友们,好人一生平安1 2 0 0 4 年5 月 浙江大学博士学位论义纳米型N M D A 对肥育猪生睦和胴体组成的影响及N M D A 涮控生眭机理研究 A D G A S P b n c A M P c D N A c G M P D N A E D T A F C S F G R G H G H R H H a n k s I G F I m R N A N M D A N 0 N O S P C R R N A R T ,P C R S S n 缩略词 A b b r e v i a t i o n s A v e r a g ed a i l yg a i n 日增重 A s

5、 p a r t a t e 天冬氨酸 B a s ep a i r 碱基对 C y c l i ca d e n y l i ca c i d C o m p l e m e m a r yD N A 互补D N A C y c l i cg u a n y l i ca c i d D e o x y r i b o n u c l e i ca c i d 脱氧核糖核酸 E t h y l e n eD i a m i n e t e t r a a c e t i cA c i a 乙二胺四乙酸 F a t a lc a t t l es c r l l m 胎牛血清 F e e d

6、g a i nr a t i o 料重比 G r o w t hh o r m o n e 生长激素 G r o w t hh o r m o n e r e l e a s i n gh o r m o n e 生长激素释放激素 H a n k sb a l a n c e ds a l tm i x t u r e H a n k s 平衡盐 I n s u l i n l i k eg r o w t h f a c t o r I 胰岛素样生长因子I M e s s a g eR N A 信使R N A N m e t h y l D a s p a r t a t eN - 甲基D

7、天冬氨酸 N i t r i cm o n o x i d e 一氧化氮 N O s y n t h a s e 一氧化氮合酶 P o l y m e r a s ec h a i nr e a c t i o n 聚合酶链式反应 R i b o n u c l e i ca c i d 核糖核酸 R e v e r s et r a n s c r i p t i o nP C R 反转录P C R S o m a t o s t a t i n 生长抑素 T r i i o d o t h y r o n i n e 三碘甲腺原氨酸 T e t r a - i o d o t h y r

8、o n i n e 四碘甲腺原氨酸 浙江大学博上学位论文:纳米型N M D A 对肥育猪生长和胴体组成的影响及N M D A 润控生长= 机理研究 摘要 本课题以N 甲基D 天冬氨酸( N M D A ) 为试验材料,以“杜洛克x 长白大自” 肥育猪为试验对象,研究普通型、吸附型( 纳米硅酸盐为载体) 和钠米型( 纳米级) N M D A 对猪生长性能、胴体组成和内分泌水平的影响,探讨了N M D A 对猪生长激 素和生长抑素动态分泌模式、腺垂体生长激素( O H ) m R N A 丰度和下丘脑生长激 素释放激素( G H R H ) m R N A 丰度的影响,并通过体外细胞培养试验,研究

9、N M D A 对腺垂体生长激素和下丘脑细胞信使物质分泌的影响。饲养试验中每种形式 N M D A 均以5 0 ,1 0 0 ,1 5 0m g k g 剂量添加于基础日粮。选择3 0 0 头体重接近的肥 育猪,随机分为1 0 组,每组3 个重复,每个重复1 0 头,公母各半。其中一组设为 对照,其余分别饲喂上述相应试验日粮,饲养试验为期6 周。饲养试验结束前,从 对照组及生长最佳组分别选取试验猪6 头,喂食相应试验日粮,l h 后,分别耳静 脉采血,试验于1 3 :0 0 至1 6 :0 0 ,1 5 r a i n 间隔采样一次,并分别制备血清进行生 长激素及生长抑素动态分泌模式研究;饲养

10、试验结束后,分别从对照及不同形式 N M D A 处理生长最佳组中各选取体重接近的肥育猪( 公母各半) 1 2 头,共4 8 头, 屠宰,进行胴体分割,并取血清及组织样品进行内分泌、腺垂体G Hm R N A 、下丘 脑G - H R t tm R N A 车度及相关代谢指标分析。体外腺垂体和下丘脑细胞培养中 N M D A 设置1 0 一,1 0 ,1 0 4 m o l L3 个浓度梯度,每个浓度设6 个重复,并设一个 空白浓度,分别测定生长激素及细胞信使物质水平。试验获得以下主要结果: l 、饲养试验表明,各形式N M D A 均不同程度改善了肥育猪日增重,并且在 不同形式N M D A

11、 的三个剂量设置中,均呈现1 0 0 m g k g 剂量效果优于同形式其他 剂量组,但仅1 0 0 m g k g 纳米型N M D A 促生长达到显著水平,较对照组比较提高 了9 1 5 ( P O 0 5 ) ,吸附型1 0 0 m g k g N M D A 组日增重提高了3 7 1 ( P 0 ,0 5 ) ,纳米型t 0 0 m g k g N M D A 促生长效果最佳,日增 重较对照组提高了9 1 5 ( P O0 5 ) ,在 纳米N M D A 处理中,1 0 0 和1 5 0 m g k g N M D A 均显著改善了剌重比,分别较对照组 降低了2 4 5 ( P 0

12、0 5 ) 和2 7 5 ( P O 0 1 ) ,同时,从料重比亦可以看出纳米处 理效果优于普通型和吸附型N M D A 。 各形式N M D A 处理对猪只日采食量未产生显著影响,但与目增重相对应,生 长速度较快的处理,与对照组比较,采食量有增加的趋势。 浙江犬学博士学位论文:纳米型N M D A 对肥育猪生长和胴体组成的影响及N M D A 调控生长机理研究 表2 - 3N M D A 对肥育猪生长性能的影响 T a b l e2 - 3E f f e c to f N M D Ao ng r o w t hp e r f o r m a n c ei nf i n i s h i n

13、gs w i n e N M D A 添加水平 不同形式N M D A ( m g k g ) 普通型吸附型 纳米型 0 5 28 7 + 6 4 8 5 2 8 7 _ + 6 4 8 5 2 8 7 _ + 64 8 5 05 2 9 0 + 5 5 3 5 28 0 _ + 5 7 0 5 3 0 7 _ + 69 6 1 0 05 34 3 _ + 4 8 1 5 2 8 0 - - 5 7 05 3 0 3 + 54 2 15 0 5 2 9 0 + _ 6 2 35 3 5 0 + 59 1 5 313 6 8 1 终重2 ( k g ) 0 8 6 1 3 + _ 6 8 9 8

14、 61 3 + 6 8 9 8 61 3 6 8 9 5 0 1 0 0 8 6 3 3 7 8 3 8 6 5 3 70 5 8 8 4 3 9 7 5 8 7 5 7 6 8 5 8 73 0 6 3 7 8 9 3 4 7 8 2 1 5 0 8 6 3 7 8 6 2 8 7 1 0 士9 1 7 8 88 2 1 0 3 7 日增重口1f g d ) O 7 7 3 6 4 8 6 3 6b 7 7 3 6 4 8 6 3 6b 7 7 3 6 4 8 6 3 6b 5 0 1 0 0 7 7 7 5 2 _ - 2 9 8 6 1b 7 8 45 0 3 55 9 b8 2 2 4

15、 8 3 98 7 。b 7 9 3 8 0 6 4 6 7 a b 8 0 23 3 9 76 7a b 8 4 44 3 9 3 ,8 4 。 兰 7 7 8 3 8 3 6 5 2b 7 8 1 4 0 1 7 7 3b 8 3 0 0 0 3 9 1 5a b = 一 日采食量m ( k g d 1 一 O 2 5 3 0 0 7 2 5 3 0 0 7 2 5 3 00 7 5 0 1 0 0 2 5 4 0 0 2 2 5 5 0 0 8 2 6 4 0 0 7 2 5 8 0 2 2 2 5 8 019 2 6 9 0 17 1 5 0 2 5 5 01 4 2 5 6 0 1 9 2 6 4 0 1 7 二i 一料重比 3 】 0 3 , 2 7 0 0 3 a3 2 7 00 3 。 3 2 7 0 0 3 。 5 0 1 0 0 3 2 6 _ + 0 0 6a 3 2 5 0 0 3 。b3 2 1 00 3a b 。 3 2 5 0 0 2a b 3 2 2 0 O l 。b c3 1 9 0 0 5b 。 1 5 0 3 2 7 0 0 5a 3 2 8 0 0 2 。 318 O 0 7 2 1 每一数据为3 个重复,每个重复I

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