温度对鲁米诺—过氧化氢体系化学发光的影响及牛血清白蛋白的测定研究

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1、四川大学 硕士学位论文 题目堂盟釜鲞壹二:过氢也曼渔圣丝堂蕉连鲍影晌卫 生查渣自量自曲捌定塑究一一 作者j 丑篮也一完成E t 期一:Q Q j ! 生兰且! Q 旦 ;旨导教师一一髫旦:扎攫一 习尹 、少一 应旦_ 王L 堂一一 研宅方向丝翌一立。直一 授予学位1 2 期2 2 Q ! 生L 且一 四川大学硕士学位论文 温度对鲁米诺一过氧化氢体系化学发光的影响及 牛血清白蛋白的测定研究 应用化学专业 研究生:杨发树指导教师:肖丹 在化学发光过程中,溶液中参与反应的化学环境对分子化学发光反应产生 很大的影响。了解和利用这些环境因素,可以提高化学反应发光的强度及量子 产率,从而提高检测的灵敏度和

2、选择性。本文系统的研究了重要的化学反应环 境之一:温度对鲁米诺一过氧化氢化学发光体系的影响。 总的说来,影响化学发光的化学环境主要有:反应的介质、溶液的p H 值、 表面活性剂和温度。前人在前三个方面做了大量的研究。但是,温度对化学 发光的影响的研究却比较少。通常衡量温度与化学发光强度的关系是采用 r a n t sH o f f C o e f f i c i e n t :Q 。0 - I ,。I ,即每隔1 0 时,两者之间的化学发光比值, 并用比值的大小来描述化学发光受温度的变化情况。但是该公式不能从整体 上衡量所研究的化学发光体系受温度影响的变化情况。因此,找到一个温度 与化学发光强

3、度的定量关系有很大的实际意义。 本文选用最常见的鲁米诺一过氧化氢化学发光体系,研究了相同的鲁米诺 一过氧化氢混合溶液的最大化学发光强度与温度的关系。结果发现,其最大发 光强度的对数与温度的倒数成线性关系l nI 。= - 0 3 3 9 2 T + 6 0 8 9 6 ,相关系 数为0 9 9 2 6 ,连续检测5 次的相对标准偏差小于5 。同时,我们也研究了温 度对金属离子一鲁米诺一过氧化氢的影响。我们选择C o ( I I ) 、C u ( I I ) 、C r ( I I I ) 、 F e ( I I ) 和M n ( I I ) 作催化剂,研究在不同温度条件下对鲁米诺一过氧化氢化 学

4、发光的催化能力。结果发现随着温度的升高,C o ( I I ) 、C u ( I I ) 和c r ( I ) 催 化鲁米诺一过氧化氢后产生的化学发光强度是先升高后降低;且C o ( I I ) 、C r ( I I I ) 在4 0 “ C 左右时对鲁米诺一过氧化氢的化学发光的强度出现最大值,c u ( I I ) 在 6 0 左右时化学发光的强度出现最大值。而F e ( I I ) 、M n ( I I ) 催化的结果却 I 璺型查堂堡主堂垡丝苎 与此相同,随着温度的升高,化学发光的强度却一直升高。这一现象对我们今 后运用金属离子一鲁米诺一过氧化氢的化学发光体系具有指导意义。在实验允 许的

5、条件下,我们可以选择恰当的温度,来提高化学发光的灵敏度。 另一方面,我们还研究了金属离子一鲁米诺一过氧化氢的化学发光反应机 理:在碱性条件下,金属离子会与氢氧根离子形成沉淀,同时又与鲁米诺形成 六元环的螫合物,二者在反应过程中相互竞争,然后六元环的金属螯合物被过 氧化氢氧化成反应的中间体叠氮醌,最后被氧化成激发态的3 一氨基邻苯二甲 酸根离子而发光。 另外,我们以邻苯二腈、硫酸锌为原料,采用微波固相法合成了锌酞菁。将 锌酞菁磺化所得的磺酸基锌酞菁溶液与牛血清白蛋白作用将导致共振瑞利散射 显著增强。在4 7 0 h m 处存在一共振散射强峰,牛血清白蛋白在O 2 5 2 0 u g m L 的浓

6、度范围内与散射强度( I ) 呈线性关系,磺酸基锌酞菁溶液对牛血清白蛋 白的检测限为O 1 7 u g m L ,并且方法有较好的选择性。由此建立了一种用共振 散射光谱测定牛血清白蛋白的简便、快速的新方法。 关键词:温度:鲁米诺;过氧化氢;化学发光:金属离子;牛血清白蛋白; 共振瑞利散射 I I 四川大学硕士学位论文 E f f e c to ft e m p e r a t u r eo nc h e m i l u m i n e s c e n c eo fl u m i n o l - H 2 0 2 s y s t e ma n dd e t e r m i n a t i o no

7、 fb o v i n ea l b u m i n M a j o ri na p p l i e dc h e m i s t r y G r a d u a t e :F a - s h u Y a n gS u p e r v i s o r :D a nX i a o T h el u m i n e s c e n c ei s s t r o n g l yi n f l u e n c e db yc h e m i c a lc o n d i t i o n si ns o l u t i o n d u r i n gt h er e a c t i o no fc h

8、e m i l u m i n e s c e n c e W ec a l le n h a n c et h es e l e c t i v i t ya n d s e n s i t i v i t yo fl u m i n e s c e n c et h r o u g hi n v e s t i g a t i o no nt h e s ef a c t o r s ,s u c ha ss o l v e n t , p H ,s u r f a c t a n ta n dt e m p e r a t u r e se t c T h i sp a p e ri s

9、s t u d i e do nt h er e l a t i o n s h i po f b e t w e e nt e m p e r a t u r e sa n dc h e m i l u m i n e s c e n c eo f l u m i n 0 1 壬2 0 2s y s t e m I ti sr e p o r t e dt h a tc h e m i l u m i n e s c e n c ei sm a i n l yi n f l u e n c e db yf o u rf a c t o r s ,s u c h a st h es o l v

10、 e n to fr e a c t i o n ,t h ev a l u eo f p H ,s u r f a c t a n ta n dt e m p e r a t u r e se t c ,M a n y r e s e a r c h e r sh a v es t u d i e do nt h ef o r m e rt h r e ef a c t o r s ,b u tt h ee f f e c to f t e m p e r a t u r eo n c h e m i l u m i n e s c e n c eo fl u m i n o l I - 1

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13、 n c e :O n ei Sw h e nt e m p e r a t u r ei sa d d e d1 t h e i n t e n s i t yo fC Lw o u l db ei n c r e a s e d2p e r c e n t ;t h es e c o n di st h er a n t SH o f f C o e f f i c i e n tQ l o = I T + I o I T W h e r e a s ,t h et w od e s c r i b e da l en o tc l e a r l ya te f f e c to f t

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