《液质联用和核磁共振技术在抗生素药物质量研究中的应用》由会员分享，可在线阅读，更多相关《液质联用和核磁共振技术在抗生素药物质量研究中的应用（100页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、中文摘要 在新药研究开发的药学研究和药物质量控制中， 药物基准物质的含量测定， 有关物质的结构鉴定和多组分抗生素中的组分控制等问题是其研究的重点。 木论 文中利用 L CM S 及N MR技术，对药物研究中常见的主成分、有关物质以及组 分的结构鉴定和含量测定等方面问题进行了研究。 以8 种 1 6元环大环内酌类抗生素为多组分抗生索的代表，其中必特螺旋 霉素为国家一类新药。 通过对己知结构组分的研究及总结， 得出此类化合物质if 裂解、色谱保留、 紫外光谱行为等方面的规律，采用L CMS 的方法对其中所含 组分结构进行了系统的研究， 发现了样品中一些未见报道过的小组分: 探讨了 采 用 MS直接
2、进样和 N M R法测定多组分抗生素组分含量的可 行性及应用的局限 性。 以木身结构不稳定的头抱菌素为例，采用L C / MS 的方法分别检测了 头抱硫 胖、 头抱吠辛酷、 头抱孟多酣钠的主要降解物。 推测头袍硫眯的2 个主要降解物 为去乙酸基头抱硫眯和头抱硫胖内醋， 头袍孟多醋的主要降解物为头抱孟多， 而 头抱吠辛酷的2 个主要降解物E - 异构体和 一 异构体采用L C / MS的方法无法鉴 别。同时为防止L C分析时因紫外响应不同引入误差，采用N MR法测定了头袍 孟多的校正因子， 无需头抱孟多对照品， 采用L C方法可方便可方便地测定头抱 孟多酷中降解物的含量。 以9 个哇诺酮类抗生素
3、为例，探讨如何建立N MR含量测定方法， 确定了 在溶剂、 内标、 外标物和用于定量计算的吸收峰选择、 图谱的测定、 数据处理及 计算方法等方面的基本规则， 对利用N M R 法测定含量进行了方法学考察， 并与 其它测定方法进行了比较， 证明N MR 法可满足基准品含量测定的准确度和误差 的要求。按建立的上述原则，同时测定了p 一 内酞胺类 5 个对照品，以及头抱孟 多酩钠中微量杂质头抱孟多的含量。 其中乳酸卡德沙星、 盐酸安妥沙星为国家一 类新药，法罗培南、头抱替哇、头袍孟多酩钠为首批对照品。 ABS TRACT T h e r e a r e m a n y q u e s t i o n
4、 s i n p h a r m a c e u t ic a l d e v e l o p m e n t a n d q u a l i t y c o n t r o l , s u c h a s d e t e r m i n a t io n t h e c o n t e n t o f r e f e r e n c e s u b s t a n c e a n d t h e r a t io o f a c t i v e p r i n c i p le i n m u l t i c o m p o n e n t s a n t i b i o t i c s ,
5、 id e n t if ic a t io n s tr u c t u r e o f r e la t e d s u b s t a n c e a n d m i n o r c o m p o n e n t s . I n t h is p a p e r , L C / MS a n d N MR w e r e u s e d t o s e t t l e m e n t t h o s e q u e s t i o n s f o c u s i n g o n d e d u c in g s t r u c u t r e a n d q u a n t it a
6、t i v e a n a l y s i s o f p h a r m a c e u t i c a l . 8 s i x t e e n - m e n t b e r e d m a c r o l i d e a n t i b i o t i c s w e r e t a k e n a s e x a m p l e s , i n w h ic h 4 “ - a c y l s p i r a m y c i n w a s o n e o f t h e f i r s t g r a d e n a t i o n a l n o v e l d r u g s .
7、 T h ro u g h t h e re s e a r c h m e n t o n t h e k n o w n c o m p o n e n t s i n m a c r o l id e a n t i b i o t ic s , t h e r e g u l a t io n o f t h i s s e r ie s c o m p o u n d s a b o u t M S f r a g a m e n t a t i o n p a t t e r n , a n d c h r o n i a t o g r a p h b e h a v i o r
8、 a n d U V s p e c t r u m h a d b e e n f o u n d o u t . 6 s i x t e e n - m e m b e r e d m a c r o l i d e a n t i b i o t ic s w e r e a n a l y z e d b y L C / M S , a n d s o m e c o m p o n e n t s w h i c h h a d n e v e r b e e n r e p o rt e d h a d b e e n f o u n d o u t . W e a t t e m
9、 p t e d t o d e t e r m i n a t e t h e c o n t e n t o f a c t i v e p r i n c i p l e b y M S a n d N MR . S a t i s f a c t i o n r e s u l t c o u l d a c h ie v e d i n s o m e s p e c i a l c o n d i t i o n s . T a k i n g u n s t a b le c e p h a l o s p o r i n a s e x a m p le , w e h a d
10、 i d e n t i 行t h e s t r u c t u r e o f m a i n d e g r a d a t i o n c o m p o u n d s i n c e p h a ia m i d i n e , c e f u r o x im e a x e l i l a n d c e f a m a n d o le n a f a t e b y L C / M S . T h e p r o p o s e d s t r u c t u r e s w e r e d e a c e t y l c e p h a i a m id i n e ,
11、c e p h a i a m id i n e l a c t o n e a n d c e f a m a n d o l e , b u t E - i s o m e r a n d A - i s o m e r o f c e f u r o x i m e a x t i l e c a n n o t b e i n d e n t i f e d b y L C / M S . I n o r d e r t o p r e v e n t i n g t h e e r r o r c o u r s e d b y t h e d i f f e r e n c e r
12、 e s p o n s e f a c t o r o f d i ff e r e n c e c o m p o u n d i n U V D , w e c a lc u la t e t h e c o r r e c t f a c t o r o f c e f a m a n d o l e b y N M R . T h e f e a s ib i l it y o f d e t e r m i n i n g t h e p u r it y o f r e f e r e n c e s u b s ta n c e b y H - N M R s p e c t
13、r o s c o p y w e r e d i s c u s s e d i n c h a p t e r 3 . 9 r e f e r e n c e s u b s t a n c e o f q u i n o lo n e a n t i b i o t ic s w e r e c h o o s e n a s e x a m p le s . A r e g u l a t i o n o f t h e c o l l e c t i o n o f N MR s p e c t r u m , t h e s e l e c t i n g o f s o l v
14、e n t , i n t e r n a l s t a n d a r d , e x t e r n a l s t a n d a r d a n d p e a k s u s i n g f o r c a lc u l a t i n g h a d b e e n e s t a b l i s h e d . T h e c o n t e n t o f 5 re f e r e n c e s u b s t a n c e a n d t r a c e i m p u r i t y i n c e f a m a n d o l e b y t h i s m e
15、t h o d . T h e r e s u l t s s h o w s t h a t i t s d e v i a t i o n o f t h i s m e t h o d i s a c c e p t a b l e . a n d i t i s s u i t a b l e f o r d e t e r m i n a t i o n r e f e r e n c e s u b s t a n c e c o n t e n t , b u t n o t s u it a b le f o r a l l t h e s a m p l e s 中国药科大学
16、硕士论文前言 前言 t 研究的目的和意义 根据中华人民共和国新药审评办法的有关规定1 1 ， 在新药的研究开发过程 中， 必须对药物的药学、 药理毒理、 临床等多方面进行研究， 在此基础上制定出 合理的质量标准，以便控制药物质量，以保障人民用药的安全有效。 新药审评所要求的药学研究部分t 2 包括生产工艺、结构确证、 质量研究、 稳定性等方面， 根据有关规定， 新药申报单位在申报新药时必须报送有关化学结 构的研究资料及文献资料， 不论是由合成、 半合成、 或从天然产物中提取的单体， 或多组分药物，均要求确证其化学结构;对化学一类新药中含量大于0 . 1 %的有 关物质也应确证其结构。 因此快速确定药物中所含主成分、有关物质以及组分的结构及含量，制定 完善的质量标准，对于保证药物研发质量有着重要的意义。 液质联用( L i q u i d C h r o m a t o g r a p h y - Ma s s S p e c t r o m e t ry, L C / MS ) 技术近年来发 展迅速 4 1 ， 它集L C的高分离能力与MS 的结构解析能力于一 体
