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1、 QA 霉菌、酵母菌检验一、 试剂1、 马铃薯葡萄糖琼脂培养基 称取39克马铃薯葡萄糖琼脂培养基，用少量蒸馏水混和，然后稀释到1升，加热完全溶解，用高压消毒锅在121恒温15分钟进行消毒。使用前冷却到46并混和好。用后须放冰箱保存。2、75乙醇溶液二、 仪器1、 无菌1ml或10 ml吸管用脱脂棉塞住已晾干的吸管管口，用牛皮纸包扎严实，放于160恒温箱恒温1.5小时，冷却后使用。2、 无菌玻璃培养皿。将干燥的培养皿用牛皮纸包扎好后按上法消毒。 3、恒温箱 361 551 461 4、冰箱 04 5、酒精灯 6、灭菌镊子 7、放大镜三、 操作步骤1、 紫外灯照射操作台及微检室至少0.5小时。2、
2、 洗手,用75%乙醇棉球擦拭操作台。3、 用75酒精棉球擦拭操作台。4、 按顺序摆好待检品并用75酒精棉球擦拭被检样表面。5、 在培养皿上记录检样编号，一个样记两个皿。6、 点燃的酒精棉球灼烧取样口。7、 震摇样品后，以无菌操作开盖，用烧过管口的吸管吸取1ml样液于已标号的相应灭菌平皿中，一个样吸两组。8、 及时将凉至46的琼脂培养基（可放于461恒温箱中保温）注入平皿约15ml，转动平皿使混合均匀。倒一个没加样液的平皿作空白对照。9、 待琼脂凝固后，翻转平皿，一组放371恒温箱培养，另一组放551恒温箱培养。10、 填写检验单附于该两批检样中（检验单样式见后）。两组检样均培养5天。11、 恒
3、温到期后计算菌落数，报告每1 ml样品中所含的霉菌和酵母数，在统计时，若菌落数太多，可先数出一定区域内出现的菌落，再乘以一定的系数大致算出整个平皿的菌落数。四、 注意事项1、 因我司霉菌和酵母数的内控指标为5个ml，因此检验过程中无须对样品进行稀释。2、 工作期间必须穿上清洁的实验工作服和带帽，衣袖卷起。工作时不要咳嗽，打喷嚏或带有其它污染源，以免污染样品。3、 吸管在用后须放入塑料容器或吸管盆中，加入200ppm氯溶液浸泡。4、 在用前将吸管较快通过火焰，不要在火焰上停留太久，因这样会使吸管过热而杀死样品中细菌。5、 当吸样或倒培养基进培养皿时，略为打开皿盖，方便于吸管或装琼脂的容器倒入即可，这可减少空气中有机物的潜在污染。6、 盛培养基的瓶子在打开前先灼烧瓶盖和瓶颈，打开后也要灼烧瓶口。瓶盖用小手指握住并保持向下方向；绝不能放在枱上或其它表面上。7、 在取样前，将样品尽可能彻底摇匀，因为样中的微生物会沉到瓶底，充分且效的摇匀保证每ml样中含有正确比例的微生物数量。8、 无菌吸管及培养皿可使用一次性的。附检验单样式： 品种生产日期恒温温度恒温起止取样点检验员备注
