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1、荧光仪控制软件使用说明仪器准备检查实验用仪器配件是否齐全，至少应包括荧光仪、荧光仪内部引出的实验专用控制线、信号转接板、B型USB连接线、电源适配器。硬件驱动1. 将附带的“FT232 Driver.rar”解压到本地目录下。2. 将USB连接线到信号转接板上，并插入电脑。3. 电脑提示安装新硬件。在“设备管理器”中可查看到有一个未安装驱动的硬件。4. 右键点击该硬件，选择“更新驱动程序”，进入“硬件更新向导”。点击“从列表或指定位置安装”5. 勾选“在搜索中包括这个位置”，并通过“浏览”按钮，将路径选定到解压好的FT232驱动目录下，点击“确定”6. 点击下一步，直至完成即可。7. 完成后将
2、再次弹出未安装硬件提示，重复以上步骤即可。8. 从设备管理器中查看该硬件的串口号，如图所示为com4设置流程1. 将适配器接入荧光仪并开机，开机后运动模块会将试剂卡槽送入仪器内部。控制线接入信号转换板。2. 打开配套软件：华科瑞公司荧光仪调试程序。3. 在“通信端口”中，选择对应端口号，点击“打开”。4. 点击“控制测试”中的“出卡”按钮，然后将荧光强度较强的荧光试剂卡插入仪器。5. 点击“测试”按钮，仪器对试剂卡进行一次扫描，并将荧光亮度曲线画在软件窗口中，例如下图，图中，X轴为位置信息，Y轴为对应位置上的荧光亮度。左侧小波峰为荧光浓度较低的T线，右侧波峰为荧光浓度较高的C线。6. 如出现下
3、图的情况，说明“测量起始位”尚未调试，需按如下步骤调整参数设置。如图为同一张试剂卡，在扫描位置未做调试时有可能出现的偏移情况。Test_1(红线)为正常波峰，左边T峰、右边C锋对称分布，较合理。Test_2(绿线)为曲线偏左情况，曲线显示了C峰，左侧T峰未进入窗口。Test_3(加粗黄线)为曲线偏右，曲线显示了T峰，右侧C峰未进入窗口。调试方法： 进入“设置”选项卡，在“测量起始位置设置”中，点击“获取”以获取当前起始位置数据，根据该数值及波峰所在位置适当进行调整（设定值波峰所在位置），点击“设置”后生效，设定值将保存到仪器控制芯片中。 再次进入“曲线”选项卡进行测试，观察是否左移或右移到合适
4、位置。 重复以上两步直到C、T线对称为止。注：“测量起始位置”中的参数只需设置一次即可，之后的正常实验过程中不需要重新设定，除非因试剂条划线位置修改或其它原因造成C、T线位置不准确时，才需要再次修改。软件打开时，“测量起始位置”中显示的数值并非保存在仪器控制芯片中的设定值，所以在修改设定值之前，必须先点击“获取”，然后再根据获取到的设定值进行修改。7. 设置找峰范围：先用试剂卡进行一次测试，假设曲线如图：1调试软件规定，两个波峰都显示在曲线窗口中时，T线必须是左侧波峰，C线必须为右侧波峰。如互换将容易导致计算或写入项目标准曲线时的人为错误。如果观察到C线在左侧，可在“设置”选项卡中勾选“首尾数
5、据反向”，再次测试时，C、T峰将以X轴中点为中心轴做反转，将C峰转到右侧，T峰转到左侧。注：C、T峰可根据试剂条上已知的荧光强度区分，荧光强度越大，峰值越高。2观察T、C峰所在的大概X轴位置，如图T峰大约在80位置，C峰大约在210位置，则可大致确定为第1峰位置20140，第2峰位置150250。波峰宽度根据上图可大致设为50（具体设定值需通过后期实验确定）。根据以上设定值，在“设置”选项卡，把50填入波峰宽度，波峰数量填入2，第1峰位置填入20140，第2峰位置150250；找峰范围设置完毕，现在可点击“退出”按钮，退出程序的同时系统自动保存“设置”页面中的所有参数，下次打开自动恢复该参数。
6、实验流程1. 打开串口：插上信号转换板，仪器开机，在“设备管理器”中查看对应串口号，将该串口号输入“曲线”页面中的“端口”栏，点击打开，状态栏将显示串口打开成功。2. 点击“出卡”，让仪器开机时自动进入仪器内部的卡槽出仓。如点击无效，请检查串口是否打开，仪器控制线是否接上控制板。3. 预测试：插入试剂卡，点击“测试”，仪器将扫描一次，并将结果曲线显示到软件上。查看曲线T、C波峰位置，查看“设置”页面中的找峰范围是否正确，“首尾数据反向”是否正确。“波峰宽度”是否正确。4. 进入“计算”页面，查看“波峰1位置”是否正确，“波峰2位置”是否正确。如位置正确，软件即可正确计算面积比。5. 正常实验测
7、试插入试剂卡，点击“测试”按钮，在软件右下方，将显示该试剂卡面积比。用不同浓度的试剂卡不断测试，通过曲线窗口可直观观察出浓度的变化过程。测试完成后，点击“保存”按钮，将提示保存两次文件，分别为原始数据及面积比数据，文件名自动以日期时间命名，用户可根据实际需要修改名称。保存后的txt文件为面积比数据，用户可将该数据代入到标准曲线计算器中进行拟合计算。保存后的bat文件为原始数据，每一竖列为一次测量数据，将原始数据复制到Excel中，可通过插入折线图还原曲线。也可通过Excel复制其中的一列数据，粘贴到软件的“读入波形数据”中，点击“计算波形数据”，在软件中还原曲线并可重新计算或选择其它计算方式。
8、如不需要保存数据、曲线杂乱或错误，可点击“清除”按钮清除所有曲线。注意，清除后曲线数据、计算结果都将丢失。6. 拟合标准曲线将测到的面积比及已知的浓度代入到ELISACalc计算器中，可选择曲线模型，并计算出对应的拟合参数。详细过程请参考“ELISA Calc回归拟合计算程序使用教程”。7. 将ELISA Calc计算器算出的参数，复制到“计算”页面中的计算参数中，即可根据面积比，直接反算出浓度值。注：点击“退出”按钮，可将该计算参数保存到软件中，下次打开软件自动调入该参数。其它功能曲线页面 “图形显示窗口”：Y轴显示为所测到荧光强度，X轴为位置信息。Y轴会根据显示的曲线自动更改坐标轴的最大值
9、、最小值及刻度，所以查看荧光强度时需注意Y轴变化。 在图形窗口上，按住鼠标左键，向右下角方向画出一个方框，松开左键，可放大选中方框中的图形。 按住鼠标左键，向左上角方向随意画方框，松开左键，可恢复原始缩放比例。 按住右键，即可拖动坐标轴，便于观察曲线。“显示选择”：可选取连续多次测试中的某一次测试曲线，进行波形处理，包括滤波，基线调整等。常用于高亮显示某一条测试曲线，选取曲线后勾选“显示数据点”即可。“通信端口”：串口号选择。根据设备管理器中显示的串口号填入，点击“打开”即可激活该串口。每次打开软件后，都需要先打开串口再进行其它操作。“控制测试”“测试”：最常用功能，点击即开始一次扫描测试过程
10、。“开灯”：点击后激发光将点亮，用于检验激发光是否正常，该功能不常用。“关灯”：熄灭激发光。“测当前点”：读取当前传感器接收到的光强度AD值，显示到“当前点值”的方框中。该功能可用于观察某一固定点荧光变化的过程。点击“开灯”后，将卡槽推入一定的距离，点击“测当前点”。如当前点为试剂卡NC膜上划线位置，则可读取到该点值。如保持测量位置不变，每隔精确的1秒或若干秒点击一次，可观察到荧光强度随时间变化的规律（读取到的荧光值保存在“数据”页面）。“进卡”：将卡槽送入仪器内部。“出卡”：将卡槽送出。“数据处理”“清除”：用于清除显示在图形窗口中的曲线，包括原始数据和计算结果等，该操作不可逆。“滤波”：对
11、“显示选择”中选定的某条曲线做滤波处理，让曲线更加平滑。“保存”：将曲线原始数据、面积计算结果保存到电脑上。保存时会提示保存两次，保存为两个文件，其中后缀为bat的文件为原始数据，txt文件为面积及面积比。用户可将txt文件中的面积比数据，代入到标准曲线计算器中进行拟合计算。bat原始数据，每一竖列为一次测量数据，将原始数据复制到Excel中，可通过插入折线图还原曲线。也可通过Excel复制其中的一列数据，粘贴到软件的“读入波形数据”中，点击“计算波形数据”，在软件中还原曲线并重新计算或选择其它计算方式。“复制”：将所有测试的原始数据复制到系统剪切板中，可粘贴到Excel中保存。“波形处理”“
12、基线上移”：将“显示选择”中选取的某条曲线，整体上移下方文本框中填入的数值。“基线下移”：将“显示选择”中选取的某条曲线，整体下移下方文本框中填入的数值。“基线到0”：将“显示选择”中选取的某条曲线，整体下移至基线为0的程度。“显示数据点”：将“显示选择”中选取的某条曲线的每一个数据点显示出来，可将数据点进行小范围移动从而改变曲线。一般只作为高亮显示某条曲线功能。“退出”：将软件关闭，并将软件的设定值，如端口号、“设置”页中的设定值等进行保存，以便下次打开软件时不需要重新设定。右侧文本框：控制软件最大化后将显示，用于显示面积比，省去每次测试后需要在“计算”页才能看到面积比的麻烦。 数据页面 显
13、示原始数据及“测当前点”中的测试数据。计算页面 “面积比” “T/C”：面积比计算方式，T线面积除以C线面积。 “C/T”：面积比计算方式，C线面积除以T线面积。 “计算公式”提供多种数学模型，选定后使用该模型进行拟合反算。拟合参数则需要根据“ELISA计算器”中的计算结果填写。“计算参数”拟合回归的具体参数，根据“ELISA计算器”计算结果填写。“计算器”提供计算功能，根据选定的数学模型及参数，填入T/C，算出结果值。“计算测量结果”“峰面积处理”：有三种计算峰面积方式，现假定波峰宽度设定为50，则每种算法图例如下。图一为原始曲线，图二为“基线上面积”，图三为“整个波面积”，图四为“峰左右分
14、别计算面积”一般选取“基线上的面积”。“计算内容”“只计算T/C”：每次测试结束后的计算过程中，只计算面积比，不根据公式计算浓度值。“按公式计算结果”：计算完面积比后，再根据计算方程及参数，计算出浓度值。如计算参数不符合公式要求，如A,B,C,D都为1时，四参数方程没有意义，则会弹出计算错误窗口，计算结果无效。“计算结果”：除了每次测量结束后会自动计算一次结果外，还可以手动点击计算按钮，进行手动计算，在点击“计算”之前，可对找峰范围、波峰宽度、计算参数、峰面积处理、计算内容等参数进行修改。点击“计算”即可再次对最后一条曲线进行重计算。可直观看到修改的参数对计算结果产生的影响。设置页面“测量波形
15、设置” “首尾数据反向”：勾选后，下次检测后，C、T峰将以X轴中点为对称轴做反转。如图，红色线为没有勾选时的曲线，绿色线为勾选后的曲线。 “波峰宽度”、“第1峰位置”、“第2峰位置”等参数定义，请参考本文“设置流程”中的第7点。“下位机设置”“卡槽总长度”：运动导轨的总长，一般设定为1400。点击“获取”可读取到仪器内部控制芯片中已经存储的设定值。修改完成后，点击“设置”可将修改好的设定值传输并保存到仪器内部控制芯片中。该值出厂后，一般不需要进行修改。如误修改，恢复1400设定值即可。“测量起始位”：该参数控制传感器在试剂卡上扫描的起点位置，设定不同值，可观察到图形窗口中的曲线在向左或向右移动，移动至T、C峰对称分布时，为最佳状态。“测量窗长度”：控制传感器在试剂卡上扫描的范围，该值越大，扫描的试剂卡长度越大，图形界面中的X轴越大。但太大的扫描范围，将有可能扫描到吸水纸或玻璃纤维等不需要扫描的范围，一般设定为300既能满足绝大多数试剂需求。该值最大可设为600，超出600个点，将导致仪器控制器内存溢出。“基线减扣”：对基线进行处理，假定该值设定为10
