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1、孕酮1 包被缓冲液，（1）碳酸盐缓冲液（PH9.6 +0.2 0.05M） 激素酶免疫测定技术石老师编著Na2CO3 1.59gNaHCO 3 2.93g加蒸馏水至 1000ml。（2）tris 缓冲液（0.05mol/L）50ml 0.1mol/L（Tris）溶液与 x ml 0.1mol/L 盐酸混匀后，加水稀释至 100ml 酶免疫测定技术杨立国等编著各种 pH 值的 Tris 缓冲液的配制所需 pH 值（25） 0.1mol/L HCl 的体积71 45772 44773 43474 42075 40376 38577 36678 34579 32080 2928. 1 26.28.2
2、 22.98.3 19.98.4 17.28.5 14.78.6 12.48.7 10.38.8 8.58.9 7.0某一特定 pH 值的 0.05mol/L Tris 缓冲液的配制：将 50ml 0.1mol/L Tris 碱溶液与上表所示相应体积（单位：ml）的 0.1ml/L HCl 混合，加水将体积调至100ml0.1mol/L 盐酸的配置：买来的浓盐酸是 12 mol/L 的，以配制 1L 0.1mol/L 的盐酸为例：先用量筒量取 8.3 mL 的浓盐酸倒入容量瓶，然后将溶液加蒸馏水稀释至体积为 1 L，此时的溶液就是 0.1mol/L 的盐酸。0.1mol/Ltris 的配置：0
3、.1 mol/L 溶液为 12.114 g/L则 配制 600mlTris 缓冲液的方法：三羟甲基氨基甲烷： 3.6g浓盐酸： 2.09ml3）0.02mol/L 磷酸盐缓冲液(pH7.4)磷酸二氢钾 0.2g 磷酸氢二钠 2.90g氯化钠 8g加去离子水定容到 1000ml。2 洗涤缓冲液（pH7.4 0.15mol/L） 激素酶免疫测定技术石老师编著0.05%Tween-20 0.5ml加在 PBS 缓冲液 1000ml 中。PBS 缓冲液：KH 2PO4 0.2gNa 2HPO412H2O 2.9gNaCl 8.0gKCl 0.2g加蒸馏水至 1000ml。3 测定缓冲液(Ph7.0 含
4、 0.87NaCl 和 0.1BSA 的 0.1M 磷酸缓冲液)用于标准孕酮，孕酮酶标物及奶样的稀释。 激素酶免疫测定技术石老师编著Na2HPO412H2O 21.85gNaH2PO42H2O 6.08gNaCl 8.70gBSA 1.00g溶于 1000mL 蒸馏水中4 封闭缓冲液牛血清白蛋白(BSA) 2% 2g（或 5%脱脂奶粉）加洗涤缓冲液 100 ml。0.05mol/L 碳酸盐缓冲液(pH9.6)+2.0%BSA2.0gBSA 加配好的 0.05mol/L 碳酸盐缓冲液溶解定量至 100ml5 底物缓冲液（pH5.4）磷酸盐-柠檬酸缓冲液0.2M Na2HPO4(无水 28.4g/
5、L，带 12 结晶水 71.7g/L) 取 25.7ml0.1M 柠檬酸(无水 19.2g/L，带 1 结晶水 21.01g/L) 取 24.3ml加蒸馏水至 100ml。或 柠檬酸（C6H8O7H 2O） 0.47gNa2HPO412H2O 2.00g6（1） TMB(四甲基联苯胺)显色液（蓝色）A 液(3 ，3 ，5，5- 四甲基联苯胺， TMB):称取 TMB20mg 溶于 10ml 无水乙醇中，完全溶解后，加双蒸水至 100ml。B 液(0.1mol/L 柠檬酸-0.2mol/L 磷酸氢二钠缓冲液，pH5.0-5.4):称取Na2HPO412H2O14.34g，柠檬酸 1.87g 溶于
6、 180ml 双蒸水，加 0.75%过氧化氢尿素 1.28ml，定容至 200ml，调 pH 至 5.0-5.4。将 A 液和 B 液按 1：l 混合后即成 TMB-过氧化氢尿素应用液或TMB(2mg/ml 水) 0.05ml底物缓冲液 0.95ml30% H2O2 0.001ml总体积 1ml。（2）OPD(邻苯二胺)显色液（黄棕色） （现配避光）OPD（干粉） 0.004g底物缓冲液 10ml30% H2O2 0.015ml总体积 10ml。 （3）TMBS 底物液（用于显色） 激素酶免疫测定技术 石老师编著10mg 四甲基联苯胺硫酸盐（TMBS）的二甲基亚砜溶液，用底物缓冲液配成 0.2mg/ml 的 TMBS 底物液。用前加 H2O2 溶液 30左右。7 终止液 2mol/LH2SO4 用于终止反应在 178.3ml 水中，逐滴加入浓硫酸(18M，约 98%)21.7ml，边加边摇。（浓 H2SO4：蒸馏水 =1:9）
