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1、微生物学实验报告要求实验报告，就是在某项科研活动或专业学习中，实验者把实验的目的、方法、步骤、结果等，用简洁的语言写成书面报告。 实验报告必须在科学实验的基础上进行。成功的或失败的实验结果的记载，有利于不断积累研究资料，总结研究成果，提高实验者的观察能力、分析问题和解决问题的能力，培养理论联系实际的学风和实事求是的科学态度。 1、实验报告要求实验报告书写使用实验中心统一实验报告纸。主要内容有：（1）实验名称 要用最简练的语言反映实验的内容。（2）实验目的要明确，抓住重点，可以从理论和实践两个方面考虑。在理论上，验证定理定律，并使实验者获得深刻和系统的理解，在实践上，掌握仪器或器材的使用技能技巧
2、。 （3）实验原理要写明依据何种原理、定律或操作方法进行实验 （4）仪器和材料 选择主要的仪器和材料填写。如能画出实验装置的结构示意图，再配以相应的文字说明更好。 （5）操作步骤要写明经过哪几个具体实验操作步骤，也可用流程图说明；实验报告要简明扼要、字迹整洁。同预习报告一样左边写步骤，右边写实验现象。（6）实验结果 从实验中测到的数据计算结果，或从图像中观察实验结果。（7）分析与讨论 结果即根据实验过程中所见到的现象和测得的数据，做出结论。 讨论可写上实验成功或失败的原因，对实验中的异常现象、实验(设计)后的心得体会、改进建议等等。2、报告撰写时的注意事项写实验报告是一件非常严肃、认真的工作，
3、要讲究科学性、准确性、求实性。在撰写过程中，常见错误有以下几种情况：（1）观察不细致，没有及时、准确、如实记录。在实验时，由于观察不细致，不认真，没有及时记录，结果不能准确地写出所发生的各种现象，不能恰如其分。实事求是地分析各种现象发生的原因。故在记录中，一定要看到什么，就记录什么，不能弄虚作假。为了印证一些实验现象而修改数据，假造实验现象等做法，都是不允许的。 （2）说明不准确，或层次不清晰。（3）尽量采用专用术语来说明事物。例如：“用搅拌棒在混合物里转动”一语，应用专用术语“搅拌”较好，既可使文字简洁明白，又合乎实验的情况。（4）外文、符号、公式不准确，没有使用统一规定的名词和符号。（5）
4、学生应独立完成实验报告的书写，严禁抄袭、复印。一旦发现抄袭、复印的实验报告，该学生实验报告成绩为0分。实验一 显微镜油浸系物镜的使用一、实验目的和内容目的：复习显微镜低倍镜和高倍镜的使用技术，了解油浸系物镜的基本原理，掌握油浸系物镜的使用方法。内容：1、学习油浸系物镜的使用方法。 2、用油镜观察枯草芽孢杆菌或金黄色葡萄球菌染色装片。二、实验材料和用具枯草芽孢杆菌(Bacillus subitilis)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的染色装片。香柏油、二甲苯、显微镜、擦镜纸。三、操作步骤(一)观察前的准备1、将显微镜置于平稳的实验台上，镜座距实验台边沿约为4cm。
5、坐正，用左眼观察。2、调节光源：将低倍物镜转到工作位置，把光圈完全打开，聚光器升至与载物台相距约1mm左右。转动反光镜采集光源，光线较强的天然光源宜用平面镜，光线较弱的天然光源或人工光源宜用凹面镜，对光至视野内均匀明亮为止。观察染色装片时，光线宜强；观察末染色装片时，光线不宜太强。(二)低倍镜观察染色装片首先上升镜简，将枯草芽孢杆菌染色装片置于载物台上，用标本夹夹住，将观察位置移至物镜正下方，物镜降至距装片0.5cm处，适当缩小光圈然后两眼从目镜观察，转动粗调节器使物镜逐渐上升(或使镜台下降)至发现物像时，改用细调节器调节到物像清楚为止。移动装片，把合适的观察部位移至视野中心。(三)高倍镜观察
6、眼睛离开目镜从侧面观察，旋转转换器，将高倍镜转至正下方，注意避免镜头与玻片相懂。再由目镜观察，仔细调节光圈，使光线的明亮度适宜。用细调节器校正焦距使物镜清晰为止。将最适宜观察部位移至视野中心，绘图。不要移动装片位置，准备用油镜观察。(四)油镜观察1、提起镜筒约2cm，将油镜转至正下方。在玻片标本的镜检部位(镜头的正下方)滴一滴香柏油。2、从侧面注视，小心慢慢降下镜筒，使油镜浸在油中至油圈不扩大为止，镜头几乎与装片接触，但不可压及装片，以免压碎玻片，损坏镜头。3、将光线调亮，左眼从目镜观察，用粗调节器将镜筒徐徐上升(切忌反方向旋转)，当视野中有物像出现时，再用细调节器校正焦距。如因镜头下降未到位
7、或镜头上升太快末找到物像，必须再从侧面观察，将油镜降下，重复操作直至物像看清为止。仔细观察并绘图。4、再次观察 提起镜筒，换上金黄色葡萄球菌染色装片，依次用低倍镜、高倍镜和油镜观察，绘图。重复观察时可比第一次少加香柏油。(五)镜检完毕后的工作1、移开物镜镜头。2、取出装片。3、清洁油镜，油镜使用完毕后，须用擦镜纸擦去镜头上的香柏油，再用擦镜纸沾少许二甲苯擦掉残留的香柏油，最后再用干净的擦镜纸擦干残留的二甲苯。4、擦净显微镜，将各部分还原。将接物镜呈“八”字形降下，不可使其正对聚光器，同时降下聚光器，转动反光镜使其镜面垂直于镜座。最后套上镜罩，对号放入镜箱中，置阴凉干燥处存放。四、注意事项1、不
8、准擅自拆卸显微镜的任何部件,以免损坏。2、拿显微镜时，一定要右手拿镜臂，左手托镜座，不可单手拿，更不可倾斜拿。3、下降镜头时，一定要从侧面注视，切忌用眼睛对着目镜，边观察边下降镜头的错误操作，以免压碎玻片而损坏镜头。4、观察标本时，必须依次用低、中、高倍镜，最后用油镜。特别在使用油镜时，切不可使用粗调节器，以免压碎玻片或损伤镜面。使用油镜后，及时用二甲苯清洁油镜和载玻片。使用二甲苯擦镜头时，注意二甲苯不能过多，以防溶解固定透镜的树脂。5、注意保持显微镜的洁净，对金属部分要用软布擦拭，擦镜头必须用擦镜纸，切勿用手或用普通布、纸等，以免损坏镜头。6、显微镜应存放在阴凉干燥处，以免镜片滋生霉菌而腐蚀
9、镜片。五、实验报告分别绘出在高倍镜和油镜下观察到的枯草芽孢杆菌及金黄色葡萄球菌的形态，注明物、目镜放大倍数和总放大率。六、问题和思考1、使用油镜应特别注意哪些问题？为什么必须用香柏油？2、使用显微镜绘图时，眼睛的位置。3、镜检标本时，为什么先用低倍镜观察，而不是直接用高倍镜或油镜观察？4、转到高倍镜和油镜时，对照明度有何要求？应如何调节？显微镜的基本结构与原理普通光学显微镜由机械和光学两大部分组成。1、机械部分（1）镜筒镜筒上端装目镜，下端接转换器。镜筒有单筒和双筒两种。单筒有直立式和后倾式两种。双筒全是倾斜式的，其中一个筒有屈光度调节装置，以备两眼视力不同者调节使用。两筒之间可调距离，以适应
10、两眼宽度不同者调节使用。（2）物镜转换器 转换器装在镜筒的下方，其上有3个孔，甚至4个或5个孔，用于安装不同规格的物镜。 （3）镜台（载物台） 又称镜台，是放置标本的地方，多数为方形和圆形的平台，中央有一通光孔；载物台上有移动器，作用是夹住和移动标本，转动螺旋可使标本前后和左右移动，其上的刻度标尺可指明标本所在位置。（4）镜臂 镜臂支撑镜筒、载物台、聚光器和调节器。镜臂有固定式和活动式（可改变倾斜度）。 （5）镜座 镜座连接镜臂，支撑整台显微镜，其上有反光镜。（6）调焦装置 调节物镜和被观察物体之间距离的机件。有镜臂调节器和镜台调节器两种，前者通过升降镜臂来调焦距，后者通过升降载物台来调焦距。
11、包括大、小螺旋调节器各一个，前者又称粗调节器，后者也叫微调节器，通过调节器调焦，可清晰地观察到标本。 2、光学部分（1）物镜 是接近被观察物品（标本）的镜头，亦称接物镜。根据物镜的放大倍数和使用方法的不同，分为低倍物镜、高倍物镜和油镜三种，低倍物镜有4、10、20；高倍物镜有40和45；油镜有90、95和100等。数字越大，放大倍数越高。（2）目镜 是接近观察者的眼睛的镜头，亦称接目镜。把经物镜放大的实像再放大一次，并映入观察者的眼中。通常有5、10、16等规格。 （3） 聚光器 安装在载物台下，能将平行的光线聚焦于标本，增强照明度。聚光器可以升降。（4） 反光镜 是普通光学显微镜的取光设备，
12、使光线射向聚光镜，分平、凹两面。（5） 内光源 是较好的光学显微镜自身带有的照明装置，安装在镜座内部，由强光灯泡发出光线，通过安装在镜座的集光镜射入聚光镜。 油镜的基本原理（一）油镜头的辨认油镜头上常刻有OI(oil immersion)或HI（homogeneneous immersion）字样，有的还刻有一圈红线或黑线标记，在低倍物镜、高倍物镜和油镜3物镜中，油镜的放大倍数和数值孔径（numerical aperture）最大，而工作距离最短。（二）显微镜的分辨率显微镜性能的优劣不单是看它的总放大倍数，更重要的是看它分辩率的大小。分辨率是指显微镜能分辨出物体两点间最小距离（D）的能力。D值
13、愈小表明分辨率愈高。D值与光线的波长（）成正比，与物镜的数值孔径（NA）成反比。从上式可看出，缩短光波长和增大数值孔径都可提高分辨率。数值孔径指光线投射到物镜上的最大角度（称镜口角，）的一半正弦与介质折射率（n）的乘积； 影响数值孔径大小的因数，一是镜口角，二是介质的折射率。当镜与装片之间的介质为空气时，由于空气（n= 1.52）的折射率不同，光线会发生折射，不仅使进入物镜的光线减少，降低了视野的照明度，而且会减少镜口角（图52A）。当以香柏油（n=1.515）为介质时，由于它的折射率与玻璃相近，光线经过载玻片后可直接通过香柏油进入物镜而不发生折射，不仅增加了视野的照明度，更重要的是通过增加数
14、值孔径达到提高分辨率的目的。可见光的波长平均为0.55m。当使用数值孔径为0.65的高倍镜时，它能辨别两点之间的距离为0.42m；而使用数值孔径为1.25的油镜时，能辨别两点之间的距离则为0.22m。光学显微镜的成像原理（倒立的虚像）。介质为空气与介质为香柏油时光线通过的比较。油镜使用的原理 油镜，即油浸接物镜。当光线由反光镜通过玻片与镜头之间的空气时，由于空气与玻片的密度不同，使光线受到曲折，发生散射，降低了视野的照明度。若中间的介质是一层油（其折射率与玻片的相近），则几乎不发生折射，增加了视野的进光量，从而使物象更加清晰。实验二 细菌的革兰氏染色一、目的要求1. 学习并初步掌握细菌的革兰氏
15、染色法。2. 了解革兰氏染色法的原理及其在细菌分类鉴定中的重要性。二、实验材料1. 菌种：金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）大肠杆菌（E.coli）2. 试剂：草酸铵结晶紫、路哥氏碘液、95%乙醇、番红液3. 其他：显微镜、载玻片、接种环、酒精灯、无菌水、香柏油、二甲苯等。三、实验原理革染氏染色法是细菌学中最重要的鉴别染色法。是1884年由丹麦病理学家Christain Gram创立的。通过革兰氏染色可把细菌区分为两大类。革染氏染色的基本步骤：先用结晶紫初染、次经碘液媒染、再用95%乙醇脱色、最后用蕃红复染。经过此法染色后，细胞保留初染剂蓝紫色的细菌为革染氏阳性菌；如果细胞染上复染的红色的细菌为革染氏阴性菌。大肠杆菌是标准的革染氏阴性菌，金黄色葡萄球菌是标准的革染氏阳性菌。革染氏染色的机理，与细菌细胞壁的化学组成和结构
