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1、实验十 杀菌剂的生物测定-生长速率法,一、实验目的,学习并掌握杀菌剂的生物测定方法之一-生长速率法,二、实验原理,生长速率法是杀菌剂毒力测定的常规方法之一,适用于不长孢子而菌丝生长较快的真菌,是通过菌落生长的速度快慢来衡量药剂的毒力大小,生长速率法又叫含毒介质法,它是将供试药剂与培养基混合,以培养基上菌落的生长速度来衡量化合物的毒力大小。一般多用于那些不产孢子或孢子量少而菌丝较密的真菌,菌落生长速率的表示方法,菌落达到一个给定的大小所需要的时间(天或小时),在单位时间内菌落直径的大小,生长速率法常用的菌种,棉花枯萎病菌(Fusarium oxysporium),苹果腐烂病菌(Valsa mal
2、i),小麦纹枯病菌(Rhzoctonia solani ),葡萄白腐病菌(Coniothyrium diplodiella),小麦全蚀病菌(Gaeumannomyces graminis),辣椒疫霉病菌(Phytophthora capsici),三、试剂和仪器设备,高压灭菌锅、超净工作台、酒精灯、接种针、纱布、吸管、消毒培养皿、打孔器、无菌小烧杯,PDA培养基,病原菌(苹果腐烂病菌),供试杀菌剂(多菌灵),四、实验步骤,将培养基加热溶化,冷却至45-50,加入供试药液制成含药液的培养基,并分别倒入培养皿中冷却,以无菌操作手续,用打孔器打取圆形菌块后用接种针挑至培养皿中央,然后将培养皿置于培养箱(27)中培养即可,于处理后不同时间观察测定菌丝的生长情况,五、实验数据及其处理,纯生长量=菌落平均直径-菌饼直径,抑菌率(%)=(对照菌落纯生长量-处理菌落纯生长量/对照纯生长量100%,50%多菌灵对苹果腐烂病菌的抑制作用(生长速率法),六、问题讨论,根据实验结果比较各种供试药剂之间对病原菌菌丝生长的抑制作用,