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1、红斑狼斑狼疮检查v系统性红斑狼疮( SLE ) 是一种常见自身免疫性疾病。v患者的血液中存在着红斑狼疮因子,简称LE因子,是一种抗细胞核抗体。一、概述一、概述2021/4/272 其发生率:国外 约50 / 10万人我国 70 / 10万人黑人及亚裔人群发病率高于欧美人2021/4/273v特 点累及多系统、多脏器 皮肤、肾脏、血液、神经系统等具有多种自身抗体多见于青年女性,男女之比约为 1:9发病年龄高峰 1340 岁,60岁约5%2021/4/274临床表现v发热:可为唯一首发症状v皮肤:面部蝶形红斑、盘状红斑v骨、关节:骨无菌性坏死v消化系统:口腔黏膜溃疡2021/4/2752021/4
2、/276面部蝶形红斑面部蝶形红斑2021/4/277目前仍未真正明了,多因素参与免疫机制缺陷v自身抗体、免疫复合物形成和沉积、免疫调节障碍等遗传因素雌激素环境因素v病毒感染、药物、阳光和紫外线2021/4/278测定方法及评价v1.LE细胞显微镜检查 LE细胞1948年由Hargraves首先在狼疮患者骨髓细胞内发现。 2021/4/279原原 理理v 血液中存在的抗细胞核抗体,在体外可使受损的白细胞核DNA解聚,核溶解和破坏失去原有的致密结构变模糊而形成形成一种圆形云雾状的均匀体。均匀体同时吸引数个有吞噬功能的白细胞在其周围形成花形细胞簇,在补体的作用下,被其中一个白细胞所吞噬,而形成LE细
3、胞。2021/4/27101、去纤维蛋白法v静脉采血 5ml,置含几颗小玻珠的瓶中,摇动15min,直至纤维蛋白完全绕拌在玻珠为止。置 37C孵箱中2小时,再将血标本转入小口径试管中,以 10O0rmin 离心5 min,使白细胞适当集中,吸取白细胞至温氏管内,以2000rmin离心沉淀10 min取白细胞层涂片,Wright染色后镜检。 2021/4/27112、血块法、血块法v静脉采血5ml,置小试管内,待其凝固后,竹签捣碎血块,然后移入小口径试管中,以 1000rmin离心 5min,使白细胞适当集中,置 37C孵箱中 2h。再将白细胞层移入温氏管内,以2000rmin离心10min,取
4、出白细胞层涂片,Wright染色后镜检。 2021/4/2712报告方式报告方式v用“找到LE细胞”和“未找到LE细胞”报告。若仅见游离均匀体或花形细胞簇,不能作为找到LE细胞的依据,须反复多次检查,找到典型的LE细胞才能报告阳性。2021/4/2713LE形成需要的条件v患者血清中存在LE因子v受损或退变的细胞核,即被LE因子作用的核v具有吞噬活性的白细胞2021/4/2714LE的三种形态 必须找到典型的吞噬体才能报告阳性结果游离均匀体 (前期)花形细胞簇 (花簇期)吞噬体 (吞噬期)2021/4/2715LE细胞细胞2021/4/2716LE细胞细胞LE细胞2021/4/27172021
5、/4/27182021/4/27192021/4/27202021/4/27212021/4/27222021/4/27232021/4/27242021/4/2725自身抗体:多种多样v抗核抗体v抗ds-DNA抗体v抗Sm抗体2.免疫学检查法2021/4/2726注意事项注意事项v1、采血后应立即检查,不能放置过久,否则游离均匀体或LE细胞退化,造成假阴性。 v2、孵育时间要适当,一般37C 2h为宜,时间过短,LE细胞均匀体未能形成,染色不佳,检出率低,易造成假阴性结果;时间过长,则由于细胞退化,溶解而消失或识别困难也会出现假阴性结果。 v3、应多检查几张涂片,以提高阳性率,特别注意涂片的
6、尾部和边缘,最好先用低倍镜或高倍镜寻找,再用油镜鉴定。2021/4/2727v发现LE细胞,结合临床表现方可诊断SLEv系统性红斑狼疮病人,LE细胞阳性率一般为7090,对该病的诊断具有一定意义。v通常在活动期容易找到,在缓解期不易找到,使用激素治疗后往往消失,病情严重者,在血液、骨髓、胸腹水直接涂片中,亦可找到LE细胞。vLE细胞的形成,为一种抗核抗体的免疫反应,除系统性红斑狼疮外,其他自身免疫性疾病,如风湿热、类风湿性关节炎、硬皮病等亦可偶见LE细胞,因此,发现LE细胞,尚需结合临床表现及抗核抗体的检查等,才能确诊为系统性红斑狼疮病。临床意义临床意义2021/4/2728v未找到LE细胞,并不能否定红斑性狼疮的诊断,应进一步作其他有关免疫学检查。 2021/4/2729E N D咸阳卫校临检实验室2021/4/2730谢谢!