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1、第二节 蛋白质的越膜运输一一. 蛋白质的定位安装蛋白质的定位安装 蛋白分检蛋白分检Protin sorting 蛋白质的运输蛋白质的运输trafficking二二. 导肽导肽(Leader sequence) 核糖体可分为游离的和膜结合的两类核糖体可分为游离的和膜结合的两类翻译后转运翻译后转运post-translation translocation共翻译转运共翻译转运co-translatonal rtanslocation信号肽信号肽(signal sequence) 整合膜蛋白整合膜蛋白integral membrane protein三导肽的构造和功能三导肽的构造和功能导肽通常是疏水
2、的，20aa由非电负性氨基酸构成，中间夹有碱性氨基酸，而没有酸性氨基酸，羟基氨基酸含量高易构成双亲螺旋轮amphiphilic helix;不同的前导顺序缺乏同源性，意味什么？这意味着和识别有关的信号不是一极构造的序列，而是氨基酸的性质。四导肽在线粒体叶绿体中决议蛋白位四导肽在线粒体叶绿体中决议蛋白位 (一) 线粒体的蛋白转运 基质导向信号matrix-targeting signal 膜导向信号membrane-targeting sigmal (二) 叶绿体蛋白的转运 基质stroma 类囊膜thylakoid membrane 腔lumen(三)核蛋白的转运 输入和输出(基质)类囊体五信
3、号肽的构造和功能五信号肽的构造和功能 (一)信号假设的建立1972年Milstein等发现IgG 轻链前体比成熟的Ig N-端多20 aa美国Bloble完成三项实验支持了以上推测：1将IgG的mRNA在无细胞系统中，以游离核糖体在体外合成的是IgG前体；假设在无细胞系统中参与狗胰细胞的RER，就能产生IgG成熟蛋白。成熟的IgG轻链蛋白和前体蛋白相差疏水性20aa，阐明什么？2参与蛋白水解酶不能使正在合成的IgG水解，而同时参与去垢剂就可以使其水解。此阐明什么?3用去垢处置骨髓瘤后所获得的多核糖体与膜分别，然后在离体的条件下继续进展新生肽的合成。经短时温育得到的是成熟的IgG，而长时温育得到
4、的是前体IgG，此阐明什么?5 3 SRP 7S RNA的两个功能域细菌中蛋白质的越膜转运 核蛋白的转运入境： Histones Nonhistones Ribosomal proteis (核蛋白体蛋白) 出境： Ribosomal subunit mRNA 出入核的多种途径1.自在途径2.浸透途径3.信号途径核定位信号帽接合复合体帽接合复合体核输出信号核输出信号具有输出和输入信号的蛋白载体载体载体蛋白和底物结合，带底物穿过核孔，然后前往核中，循环运用。 核定位信号多形瘤 T 抗原核定位信号核定位信号NLS具有碱性的残基具有碱性的残基卵卵核质蛋白核质蛋白NLS的特点：1.无保守序列；2.有一
5、段短的碱性氨基酸序列；3.常存在Pro,可抑制碱性氨基酸的上游形 成螺旋；4.有的NLS有两个分开的短的簇5.一切的NLS序列都可被“入境系统所识别。“入境分二步： 停靠，移位转位的成分核蛋白核孔胞质成分入境蛋白核相关蛋白-GTP核孔停靠入境蛋白-结合核蛋白入境蛋白-结合底物移位核孔GTP和Ran的结合形状控制核蛋白是“进还是“出 Nuclear export signal Nuclear localization signal从核转移到胞质中的蛋白的共同特点是存在一NES(10aa的信号)一个亚基上的NES可使另一个蛋白从核中转运出带有一个NES的蛋白可使一个RNA从核中转运出cAMP依赖性蛋白激酶
