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1、第十七章第十七章 厌氧性细菌厌氧性细菌一、教学目的一、教学目的熟悉：厌氧芽孢梭菌、无芽孢厌氧菌的的实验诊断与熟悉：厌氧芽孢梭菌、无芽孢厌氧菌的的实验诊断与防治原则；致病条件、致病因素及所致疾病。防治原则；致病条件、致病因素及所致疾病。 应用：厌氧芽孢梭菌的致病因素与所致疾病。应用：厌氧芽孢梭菌的致病因素与所致疾病。了解：了解： 厌氧芽孢梭菌的种类；无芽孢厌氧菌的种类、厌氧芽孢梭菌的种类；无芽孢厌氧菌的种类、分布。分布。二、教学方法二、教学方法讲授、提问、讨论、教学互动讲授、提问、讨论、教学互动三、教学手段三、教学手段多媒体教学多媒体教学概述概述n必须在无氧环境下，才能生长繁殖必须在无氧环境下，
2、才能生长繁殖 n根据能否形成芽胞，可分为根据能否形成芽胞，可分为 厌氧芽胞梭菌属厌氧芽胞梭菌属 无芽胞厌氧菌无芽胞厌氧菌第一第一节 厌氧芽胞梭菌属氧芽胞梭菌属概述概述n严格格厌氧菌，革氧菌，革兰阳性阳性 n芽胞比菌体粗，菌体膨大呈梭状，抵抗力芽胞比菌体粗，菌体膨大呈梭状，抵抗力强 n周鞭毛，无周鞭毛，无荚膜（除膜（除产气气荚膜梭菌外）膜梭菌外） n致病菌致病菌产生外毒素致病，病情生外毒素致病，病情严重重 n防治：防治：类毒素与抗毒素毒素与抗毒素 （一）破（一）破伤风梭菌梭菌破破伤风的病原菌的病原菌生物学性状生物学性状n n形形形形态态与染色与染色与染色与染色 菌菌菌菌体体体体细细长长，芽芽芽芽
3、胞胞胞胞正正正正圆圆，位位位位于于于于菌菌菌菌体体体体顶顶端端端端，使使使使细细菌呈鼓槌状菌呈鼓槌状菌呈鼓槌状菌呈鼓槌状 n n培养特性培养特性培养特性培养特性 专专性性性性厌厌氧，常用疱肉培养氧，常用疱肉培养氧，常用疱肉培养氧，常用疱肉培养 基培养基培养基培养基培养 生物学特性生物学特性n n抵抗力抵抗力 芽胞抵抗力很芽胞抵抗力很芽胞抵抗力很芽胞抵抗力很强强 100 100 100 100 加加加加热热1 1 1 1小小小小时时可被破坏可被破坏可被破坏可被破坏 在干燥的土壤和在干燥的土壤和在干燥的土壤和在干燥的土壤和尘尘埃中可存活数十年埃中可存活数十年埃中可存活数十年埃中可存活数十年致病性与
4、免疫性致病性与免疫性所致疾病所致疾病- -破破伤风致病条件致病条件n n伤伤口需形成口需形成口需形成口需形成厌厌氧微氧微氧微氧微环环境境境境 n n无无无无侵侵侵侵袭袭力力力力，仅仅在在在在局局局局部部部部繁繁繁繁殖殖殖殖，其其其其致致致致病病病病作作作作用用用用完完完完全全全全有有有有赖赖于病菌所于病菌所于病菌所于病菌所产产生的外毒素生的外毒素生的外毒素生的外毒素 致病因子致病因子n n对对氧敏感的破氧敏感的破氧敏感的破氧敏感的破伤风伤风溶血毒素（能溶解溶血毒素（能溶解溶血毒素（能溶解溶血毒素（能溶解RBCRBCRBCRBC） n n质质粒粒粒粒编码编码的的的的破破破破伤风痉挛伤风痉挛毒素毒
5、素毒素毒素属神属神属神属神经经毒，毒性极毒，毒性极毒，毒性极毒，毒性极强强( ( ( (对对人致死量人致死量人致死量人致死量1g) 1g) 1g) 1g) 蛋白蛋白蛋白蛋白质质，不耐，不耐，不耐，不耐热热发病机理病机理破破伤风梭菌及芽胞梭菌及芽胞 机体机体 局部生局部生长繁殖繁殖 外毒素外毒素 脊髓前角，并可到达脊髓前角，并可到达脑干干 封封闭抑制性突触的抑制性突触的 介介质释放放 伸肌、屈肌同伸肌、屈肌同时强烈收烈收缩 强直直痉挛 伤口附近肌肉口附近肌肉痉挛， 嚼肌嚼肌痉挛(引起牙关引起牙关紧闭和吞咽困和吞咽困难); 躯干及四肢肌肉躯干及四肢肌肉强直直(呈特有的角弓反呈特有的角弓反张体征体征
6、); 膈肌膈肌痉挛，呼吸困，呼吸困难 窒息而死窒息而死 。创伤神神经纤维的的间隙隙淋巴液和血液淋巴液和血液n n典型的症状典型的症状典型的症状典型的症状 苦笑面容苦笑面容苦笑面容苦笑面容 牙关牙关牙关牙关紧闭紧闭颈项强颈项强直直直直角弓反角弓反角弓反角弓反张张 免疫性免疫性n破破伤风免疫属外毒素免疫，主要是抗毒素免疫属外毒素免疫，主要是抗毒素发挥中和作用（毒素与中枢神中和作用（毒素与中枢神经组织结合非常合非常牢固，一旦牢固，一旦结合即非抗毒素所能中和）合即非抗毒素所能中和） n病后不会病后不会获得牢固免疫力得牢固免疫力 n获得有效抗毒素的途径是人工主得有效抗毒素的途径是人工主动免疫免疫微生物学
7、检查法微生物学检查法n n一般不一般不一般不一般不进进行涂片行涂片行涂片行涂片镜检镜检和分离培养和分离培养和分离培养和分离培养 n n典型的症状和病史即可作出典型的症状和病史即可作出典型的症状和病史即可作出典型的症状和病史即可作出诊诊断断断断防治原则防治原则破伤风一旦发病，治疗困难，应以预防为主。破伤风一旦发病，治疗困难，应以预防为主。 预防：预防： （1 1）特异性预防：）特异性预防： 1 1）人工自动免疫：注射破伤风类毒素；）人工自动免疫：注射破伤风类毒素；儿童可儿童可接种百白破三联疫苗。接种百白破三联疫苗。 2 2）人工被动免疫：注射破伤风抗毒素（）人工被动免疫：注射破伤风抗毒素（TAT
8、） 治疗：治疗： （1 1）正确处理伤口及清创）正确处理伤口及清创（2 2）注射）注射TATTAT（3 3）应用抗生素）应用抗生素（4 4）对症治疗：若已确诊为破伤风时，应及时）对症治疗：若已确诊为破伤风时，应及时采取给予适当的镇静剂和肌肉解痉剂等措施，采取给予适当的镇静剂和肌肉解痉剂等措施，以减轻病人的痛苦和预防病人呼吸肌痉挛而以减轻病人的痛苦和预防病人呼吸肌痉挛而窒息死亡。窒息死亡。 生物学性状生物学性状形形形形态态与染色与染色与染色与染色n n两端平切粗大两端平切粗大两端平切粗大两端平切粗大杆菌杆菌杆菌杆菌 n n芽胞位于次极端，呈芽胞位于次极端，呈芽胞位于次极端，呈芽胞位于次极端，呈椭
9、圆椭圆形，不大于菌体形，不大于菌体形，不大于菌体形，不大于菌体 n n无鞭毛无鞭毛无鞭毛无鞭毛 n n体内有明体内有明体内有明体内有明显显的的的的荚荚膜膜膜膜（二）产气荚膜梭菌（二）产气荚膜梭菌培养特性培养特性专性厌氧专性厌氧 血琼脂平板上，双层溶血环血琼脂平板上，双层溶血环 代谢活跃代谢活跃 牛乳培养基中，可出现牛乳培养基中，可出现“汹涌发酵汹涌发酵”，此为，此为本菌具有特征性的生化试验。本菌具有特征性的生化试验。致病性致病性致病物致病物质：外毒素外毒素n n毒素毒素毒素毒素 n n、毒素毒素毒素毒素 n n肠肠毒素毒素毒素毒素 所致疾病所致疾病n n气性坏疽气性坏疽气性坏疽气性坏疽 n食物
10、中毒食物中毒 食入被大量食入被大量细菌菌污染的食物（多染的食物（多为肉肉类） 临床床表表现：腹腹痛痛、腹腹胀、水水样腹腹泻泻；1-21-2天自愈天自愈微生物学检查法 n直接涂片直接涂片镜检 深部深部创口取材涂片口取材涂片 n革革兰阳性大杆菌阳性大杆菌 n白白细胞少且不典型胞少且不典型 n伴有其它伴有其它杂菌菌 早期早期诊断能避免病人最断能避免病人最终截肢或死亡截肢或死亡 n分离培养及分离培养及动物物实验 接种血平板或庖肉培养基，接种血平板或庖肉培养基，镜检及生化及生化反反应鉴定定 动物物实验 如如怀疑食物中毒，在疑食物中毒，在发病后一日内，病后一日内，检出大于出大于10105 5病菌病菌/ /
11、克食品或克食品或10106 6病菌病菌/ /克克粪便可确立便可确立诊断断 防治原则防治原则n治治疗及及时处理理伤口，破坏和消除口，破坏和消除厌氧微氧微环境境注射多价抗毒素血清注射多价抗毒素血清使用大使用大剂量抗生素量抗生素 高高压氧氧舱疗法法 形态和染色形态和染色革兰阳性粗大杆菌革兰阳性粗大杆菌 有周身鞭毛，无荚膜有周身鞭毛，无荚膜 椭圆形芽胞椭圆形芽胞 -网球拍状网球拍状 专性厌氧专性厌氧 （三）肉毒梭菌（三）肉毒梭菌致病性致病性n致病物致病物质 肉毒毒素肉毒毒素 n剧毒（毒（对人致死量人致死量为0.1g) 0.1g) 功能和致病机制与破功能和致病机制与破伤风外毒素相似外毒素相似作用机制作用
12、机制n n作用于外周神作用于外周神作用于外周神作用于外周神经经肌肉接肌肉接肌肉接肌肉接头处头处，抑制外周神，抑制外周神，抑制外周神，抑制外周神经经介介介介质质乙乙乙乙酰酰胆碱胆碱胆碱胆碱的的的的释释放，放，放，放，导导致致致致弛弛弛弛缓缓性麻痹性麻痹性麻痹性麻痹 前体分子存在，可前体分子存在，可前体分子存在，可前体分子存在，可稳稳定定定定存在于外存在于外存在于外存在于外环环境和胃境和胃境和胃境和胃肠肠道。复合物道。复合物道。复合物道。复合物进进入小入小入小入小肠肠后，在碱性后，在碱性后，在碱性后，在碱性情况下解离，被吸收情况下解离，被吸收情况下解离，被吸收情况下解离，被吸收进进入血循入血循入血
13、循入血循环环 所致疾病所致疾病n食物中毒食物中毒 特点：（特点：（胃胃肠道症状少道症状少见，主要表，主要表现为头痛、痛、头晕及典型的肌麻痹及典型的肌麻痹） n婴儿肉毒病儿肉毒病 细菌菌进入入肠道，繁殖，道，繁殖，产生毒素而致病生毒素而致病 以以6 6个月以内的小个月以内的小婴儿居多儿居多 症状与肉毒食物中毒症状与肉毒食物中毒类似，便泌、吸乳、似，便泌、吸乳、啼哭无力啼哭无力 病死率不高病死率不高微生物学检查法微生物学检查法检出毒素检出毒素 -细菌分离培养细菌分离培养 -将可疑食物或呕吐物制成悬液，离心沉淀后取将可疑食物或呕吐物制成悬液，离心沉淀后取上清液做动物试验上清液做动物试验 防治原则防治
14、原则 加强食品管理和监督加强食品管理和监督 食品进食前加热煮沸食品进食前加热煮沸 治疗应尽早注射多价肉毒抗毒素血清治疗应尽早注射多价肉毒抗毒素血清细菌致病物质致病机理所致疾病破伤风梭菌 破伤风痉挛毒素毒素进入CNS，阻止抑制性神经介质的释放，造成强直性痉挛（受刺激时伸肌与屈肌同时强烈收缩，肌肉强直痉挛）破伤风产气荚膜梭菌外毒素和胞外酶肠毒素酶周围组织，感染发酵多种糖类气体气肿；毒素血管通透性影响血供组织坏死；毒素入血毒血症肠毒素破坏膜离子运输功能，改变膜的通透性腹泻 气性坏疽食物中毒肉毒梭菌肉毒毒素抑制乙酰胆碱释放，弛缓性麻痹 食物中毒婴儿肉毒病第二节第二节 无芽胞厌氧菌无芽胞厌氧菌G+G+和
15、和G-G-的球菌、杆菌的球菌、杆菌 专性厌氧，无芽胞专性厌氧，无芽胞 条件致病菌条件致病菌 类杆菌属类杆菌属G-G-杆菌，多形性杆菌，多形性 厌氧培养厌氧培养 在在20%20%胆汁培养基中生长良好胆汁培养基中生长良好 脆弱类杆菌：临床上最常见的无芽胞厌氧菌分离株脆弱类杆菌：临床上最常见的无芽胞厌氧菌分离株 l因手术、拔牙、肠穿孔等原因，使屏障作用受损，因手术、拔牙、肠穿孔等原因，使屏障作用受损，致细菌侵入非正常寄居部位。致细菌侵入非正常寄居部位。 l长期应用抗生素治疗使正常菌群失调。长期应用抗生素治疗使正常菌群失调。 l机体免疫力减退。机体免疫力减退。 l局部组织供血不足、组织坏死、或有异物及
16、需氧菌局部组织供血不足、组织坏死、或有异物及需氧菌混合感染，形成局部组织厌氧微环境。混合感染，形成局部组织厌氧微环境。 致病条件致病条件 感染特征感染特征发发生生在在口口腔腔、鼻鼻窦窦、胸胸腔腔、腹腹腔腔、盆盆腔腔和和肛肛门门会会阴附近的炎症、脓肿及其他深部脓肿。阴附近的炎症、脓肿及其他深部脓肿。 分泌会为血性或黑色，有恶臭。分泌会为血性或黑色，有恶臭。 分分泌泌物物直直接接涂涂片片镜镜检检可可见见细细菌菌，但但常常规规细细菌菌培培养养结果为阴性。结果为阴性。 使用氨基糖甙类抗生素长期治疗无效者。使用氨基糖甙类抗生素长期治疗无效者。 所致疾病所致疾病败血症败血症 中枢神经系统感染中枢神经系统感
17、染 脑脓肿脑脓肿 口腔与牙齿感染口腔与牙齿感染 齿槽脓肿和下颌骨髓炎齿槽脓肿和下颌骨髓炎 急性坏死性溃疡性齿龈炎（奋森咽峡炎）急性坏死性溃疡性齿龈炎（奋森咽峡炎） 约约30%30%的牙周病的牙周病呼吸道感染呼吸道感染 厌氧菌可感染上下呼吸道的任何部位厌氧菌可感染上下呼吸道的任何部位 腹部和会阴部感染腹部和会阴部感染 手术及损伤后感染手术及损伤后感染 女性生殖道感染女性生殖道感染 其他其他微生物学检查法微生物学检查法标本的采集标本的采集 从感染中心处采取从感染中心处采取 切取或活检得到的组织标本切取或活检得到的组织标本 从感染深部吸取的渗出物或浓汁从感染深部吸取的渗出物或浓汁 采取后立刻放入厌氧
18、标本瓶中，迅速送检采取后立刻放入厌氧标本瓶中，迅速送检 分离培养与鉴定分离培养与鉴定 厌氧培养厌氧培养 气相色谱法气相色谱法防治原则防治原则加强免疫力，减少诱发因素加强免疫力，减少诱发因素 甲硝唑、替硝唑或其他广谱抗生素甲硝唑、替硝唑或其他广谱抗生素 两两 类类 厌厌 氧氧 菌菌 感感 染染 的的 不不 同同 点点 项项 目目 厌氧芽胞杆菌感厌氧芽胞杆菌感染染 无芽胞厌氧菌感染无芽胞厌氧菌感染 感染类型感染类型 外源性感染为主外源性感染为主 内源性感染为主内源性感染为主 致病因素致病因素 以外毒素为主以外毒素为主, ,毒毒性强性强 以内毒素及侵袭因素以内毒素及侵袭因素为主为主, ,毒性弱毒性弱
19、 在临床厌氧菌感在临床厌氧菌感染中的比例染中的比例 10% 10% 90% 90% 感染发生的机体感染发生的机体条件条件 多数与机体一般多数与机体一般健康状态关系不健康状态关系不大大 与机体抵抗力降低密与机体抵抗力降低密切相关切相关 两两 类类 厌厌 氧氧 菌菌 感感 染染 的的 不不 同同 点点 项项 目目 厌氧芽胞杆菌感染厌氧芽胞杆菌感染 无芽胞无芽胞厌氧菌感染氧菌感染 在临床各在临床各科分布科分布 多见于外伤感染、食多见于外伤感染、食物中毒物中毒 分布临床各科分布临床各科, ,引起身引起身体各部位炎症体各部位炎症, , 脓肿脓肿, , 败血症败血症 临床病型临床病型 具有特殊临床病型具有特殊临床病型 无特殊临床病型无特殊临床病型 治治 疗疗 以抗毒素治疗为主以抗毒素治疗为主 以抗菌药物治疗为主以抗菌药物治疗为主 预预 防防 多数可用抗毒素紧急多数可用抗毒素紧急预防，以类毒素预防预防，以类毒素预防 增增强机体抵抗力机体抵抗力
