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1、组织学与胚胎学 ( histology and embryology )第一章：组织学绪论第一章：组织学绪论组织学的定义和研究组织学的定义和研究内容内容石蜡切片、石蜡切片、HEHE染色染色组织化学和免疫组织组织化学和免疫组织化学化学 细胞培养与组织工程细胞培养与组织工程组织和器官组织和器官光学显微镜术和电子显光学显微镜术和电子显微镜术微镜术原位杂交原位杂交 组织学的学习方法组织学的学习方法内容提要 组织学的定义和研究内容组织学的定义和研究内容是研究人体的微细结构及其相关功能的一门科学，内容主要包括细胞、基本组织和器官组织。组织学又称显微镜解剖学或微细解剖学。 组织、器官和系统组织、器官和系统组
2、织组织 ：形态结构和生理功能相同或相似的细胞和：形态结构和生理功能相同或相似的细胞和细胞间质构成的具有一定形态结构和一定生理功细胞间质构成的具有一定形态结构和一定生理功能的细胞群体，称为组织。构成人体的基本组织能的细胞群体，称为组织。构成人体的基本组织有有4 4种，称四大基本组织，即上皮组织、结缔组织、种，称四大基本组织，即上皮组织、结缔组织、肌肉组织和神经组织。肌肉组织和神经组织。器官器官：由四大基本组织按着一定的规律组成的、：由四大基本组织按着一定的规律组成的、具有一定形态结构和生理功能的结构，称为器官。具有一定形态结构和生理功能的结构，称为器官。人体内有若干器官，如胃、心、肺、肾、肝、脾
3、人体内有若干器官，如胃、心、肺、肾、肝、脾等。等。 系统系统：结构和功能相关的一些器官，相互协同、：结构和功能相关的一些器官，相互协同、相互制约，共同完成某一方面的系列功能，称为相互制约，共同完成某一方面的系列功能，称为系统。系统。 组织学的研究方法和技术组织学的研究方法和技术 普通光镜组织标本的制备方法光学显微镜术 电子显微镜术 组织化学技术 组织培养术与组织工程 组织和细胞的定量术 普通光镜组织标本的制备方法普通光镜组织标本的制备方法制备能使光线透过的组织切片是组织学研究的基本方法，主要包括固定、包埋和切片、染色等步骤。组织学中最常用的染色方法是苏木精和伊红染色法，简称HE染色法。 染色目
4、的：使组织切片着色目的：使组织切片着色, ,便于观察。便于观察。碱性染料：含氨基、二甲氨基等碱性助色碱性染料：含氨基、二甲氨基等碱性助色团的染料。团的染料。酸性染料：含有羧基、羟基、磺基等酸性酸性染料：含有羧基、羟基、磺基等酸性助色团的染料。助色团的染料。染色染色嗜碱性：易被碱性染料着色易被碱性染料着色嗜酸性：易被酸性染料着色易被酸性染料着色中性：与两种染料的亲和力都不强与两种染料的亲和力都不强特殊染色特殊染色 银染甲苯胺蓝甲苯胺蓝普通普通HEHE染色照片染色照片普通光学显微镜术应用普通光镜观察组织切片是组织学研究的主要技术。 光镜的分辨率是指在光镜下所能分辨的两点间的最短距离，约为0.2 m
5、。分辨率决定图像的清晰度和细微度 。特殊光学显微镜特殊光学显微镜 荧光显微镜 用于观察组织、细胞中有自发荧光、诱发荧光或经荧光染料染色或标记的结构。 相差显微镜 主要用于观察体外培养中活细胞的形态结构。 激光共聚焦扫描显微镜 可对细胞内部非侵入式光学断层扫描成像，可进行一系列亚细胞水平的结构和功能研究 。激光共聚焦扫描显微镜激光共聚焦扫描显微镜激光共聚焦扫描显微镜图像激光共聚焦扫描显微镜图像CLSMCLSM显示上皮细胞显示上皮细胞电子显微镜电子显微镜透射电镜术透射电镜术Transmission electron microscopy，TEM 是用电子束穿透标本，经过电磁场的会聚、放大后，在荧光
6、屏上显像，或将影像投射到照相底片。 由于电子束穿透力弱，故经过固定的电镜标本需制成超薄切片（5080 nm） ，并用重金属盐如柠檬酸铅和醋酸铀等染色。 扫描电镜术扫描电镜术 Scanning electron microscopy，SEM 用于观察细胞、组织和器官表面的立体细微结构。需将小块组织经固定、脱水、干燥后，在其表面喷镀薄层碳膜和金属膜。 图像清晰，富有立体感 。电镜扫描图电镜扫描图肺巨噬细胞吞噬大肠杆菌肺巨噬细胞吞噬大肠杆菌电镜扫描图电镜扫描图电镜图（冷冻蚀刻）电镜图（冷冻蚀刻）组织化学和细胞化学技术组织化学和细胞化学技术 是应用化学反应及物理反应原理，检测组织和细胞内某种化学成份并
7、进行定位定量和细胞功能分析的一种实验技术，如用过碘酸Schiff反应检测多糖，用脂溶性染料显示脂类，用酶化学染色显示某种酶，用孚尔根反应显示DNA。 PAS染色示肝糖元染色示肝糖元PASPAS染色染色免疫组织化学和免疫细胞化学技术免疫组织化学和免疫细胞化学技术 是应用免疫学原理，通过抗原与抗体的特异性结合，显示组织内和细胞内的抗体或抗原成份。这种检测技术的特异性强、灵敏度高、应用广泛，是生物学和医学领域中的重要研究手段。通常需对已知抗原或抗体进行标记，用相应的显色和观察方法检测目的抗体或抗原。常用的标记物有荧光素、铁蛋白、辣根过氧化物酶等。 荧光素标记显示皮肤毛细血管内皮细胞免疫组织化学免疫组
8、织化学核酸分子杂交技术核酸分子杂交技术 是用标记的RNA或DNA探针检测RNA或DNA片段的一种重要方法。用核酸杂交技术检测细胞内某一基因在染色体上的定位，称染色体原位杂交。用核酸杂交技术检测某一基因的转录物mRNA的细胞定位和转录状况，称细胞原位杂交。 原位杂交示脐静脉内皮细胞呈心房钠尿肽阳性原位杂交示脐静脉内皮细胞呈心房钠尿肽阳性细胞培养技术细胞培养技术 是将离体细胞或组织放置在适当的环境条件下进行培养的一种技术方法，可用以检测各种理化因子、细胞因子等对细胞增殖、分化、代谢、运动、吞噬、分泌等生命活动和细胞行为的影响，还可用细胞培养技术研究细胞癌变、逆转的机制。 子宫内膜上皮细胞子宫内膜上
9、皮细胞流式细胞术流式细胞术 应用流式细胞仪对单个细胞进行生物化学和生物物应用流式细胞仪对单个细胞进行生物化学和生物物理特性的快速定量测定，可进行细胞周期各时相细理特性的快速定量测定，可进行细胞周期各时相细胞的比例和细胞内胞的比例和细胞内DNADNA、RNARNA、蛋白质的含量分析，、蛋白质的含量分析，淋巴细胞亚群的分离和定量，血细胞增殖情况的分淋巴细胞亚群的分离和定量，血细胞增殖情况的分析，杂交细胞等的分选等。析，杂交细胞等的分选等。 其工作原理是分离被检细胞，制成悬液，并进行荧其工作原理是分离被检细胞，制成悬液，并进行荧光染色或标记，然后使单细胞液流快速通过该仪器光染色或标记，然后使单细胞液
10、流快速通过该仪器的激光照射分析区，被检细胞产生不同的荧光信号的激光照射分析区，被检细胞产生不同的荧光信号并转变为电脉冲，分别输入计算机内贮存，同时显并转变为电脉冲，分别输入计算机内贮存，同时显示于示波器屏幕上，即可获得该细胞群体中不同类示于示波器屏幕上，即可获得该细胞群体中不同类型细胞的有关数据。型细胞的有关数据。组织学的学习方法组织学的学习方法 建立立体与动态的概念 注意结构与功能的联系 重视理论与实践的结合 勤奋加技巧，学习效果好 思考题思考题组织学的主要研究内容是什么？组织和器官分别是如何构成的？人体有哪几种基本组织？何谓嗜碱性、嗜酸性、中性、亲银性和嗜银性？组织学有哪些常用方法和技术？
