对流免疫电泳课件

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1、对流免疫电泳对流免疫电泳对流免疫电泳对流免疫电泳免疫学免疫学对流免疫电泳PPT课件基本概念基本概念可溶性抗原与相应的抗体在溶液或凝胶中接触可溶性抗原与相应的抗体在溶液或凝胶中接触可形成肉眼可见的抗原与抗体复合物沉淀可形成肉眼可见的抗原与抗体复合物沉淀, ,即即免疫沉淀反应免疫沉淀反应. .可溶性抗原亦称沉淀原可溶性抗原亦称沉淀原, ,抗体亦抗体亦称为沉淀素称为沉淀素. .沉淀物形成的主要原是因为抗原与抗体分子表沉淀物形成的主要原是因为抗原与抗体分子表面的疏水基团相互接近而有效的排出它们之间面的疏水基团相互接近而有效的排出它们之间的水分的水分. .免疫复合物的形成通常经过两步免疫复合物的形成通常

2、经过两步 1:1:抗原与抗体抗原与抗体的特异性结合的特异性结合 2:2:形成肉眼可见的免疫复合物晶格形成肉眼可见的免疫复合物晶格. .对流免疫电泳PPT课件分类沉沉淀淀反反应应环状沉淀反应环状沉淀反应絮状反应絮状反应琼脂扩散试验琼脂扩散试验双向扩散双向扩散单向扩散单向扩散电泳技术火箭免疫电泳火箭免疫电泳对流免疫电泳对流免疫电泳对流免疫电泳PPT课件 即将一定量的抗体混合于琼脂中，待琼脂凝固后打孔即将一定量的抗体混合于琼脂中，待琼脂凝固后打孔并加入抗原，孔中的抗原向四周扩散，在抗原与抗体并加入抗原，孔中的抗原向四周扩散，在抗原与抗体的比例合适处呈现白色的沉淀环。沉淀环的大小与抗的比例合适处呈现白

3、色的沉淀环。沉淀环的大小与抗原的浓度成正比，故该试验是定量试验原的浓度成正比，故该试验是定量试验。对流免疫电泳PPT课件 即将抗原即将抗原和抗体分别加入和抗体分别加入琼脂对应的孔中，琼脂对应的孔中，二者会向四周扩二者会向四周扩散，在二者比例散，在二者比例合适处形成白色合适处形成白色沉淀线沉淀线。对流免疫电泳PPT课件 单向扩散单向扩散+ +电泳：将单向电泳：将单向扩散与电泳技扩散与电泳技术相结合的一术相结合的一种方法。种方法。 沉淀峰的高沉淀峰的高度与抗原的浓度与抗原的浓度成正比度成正比。对流免疫电泳PPT课件实验目的实验目的 熟悉对流免疫电泳的原理熟悉对流免疫电泳的原理掌握对流免疫电泳的操作

4、方法掌握对流免疫电泳的操作方法了解对流免疫电泳的应用了解对流免疫电泳的应用对流免疫电泳PPT课件实验原理实验原理 利用琼脂双向扩散与电泳技术结合的利用琼脂双向扩散与电泳技术结合的方法方法, ,根据抗原与抗体所受电场力与电根据抗原与抗体所受电场力与电渗力合力的大小渗力合力的大小, ,使它们发生对向移动使它们发生对向移动, ,在它们浓度与比例合适处形成肉眼可见在它们浓度与比例合适处形成肉眼可见的沉淀物的沉淀物. .对流免疫电泳PPT课件 电渗：指在电场中液体对于一个固定固体的相电渗：指在电场中液体对于一个固定固体的相对移动称为电渗。液体移动的方向取决于固体带对移动称为电渗。液体移动的方向取决于固体

5、带的是正电荷或负电荷，如果电渗的方向于样品的的是正电荷或负电荷，如果电渗的方向于样品的移动方向相同，那么样品的迁移率加快，反之，移动方向相同，那么样品的迁移率加快，反之，减慢，甚至倒退。实际上在电泳的过程中受到电减慢，甚至倒退。实际上在电泳的过程中受到电泳力和电渗力的双重作用。泳力和电渗力的双重作用。电场力电场力电场力电场力抗原抗体电场力电场力 电渗力电渗力电场力电场力 电渗力电渗力对流免疫电泳PPT课件 11琼脂琼脂 打孔器打孔器 微量加样器微量加样器 玻片玻片 抗原抗原 抗体抗体 槽式电泳仪槽式电泳仪 电炉等电炉等对流免疫电泳PPT课件制板制板打孔打孔加样加样电泳电泳34ml琼脂琼脂孔间距孔间距3mm 抗原抗原 抗体抗体对流免疫电泳PPT课件对流免疫电泳PPT课件一一 抗原抗原、抗体的电极方向不能放反、抗体的电极方向不能放反二二 电泳时电流不宜过大电泳时电流不宜过大, ,以免蛋白质变性以免蛋白质变性三三 抗原、抗体相对浓度要适当抗原、抗体相对浓度要适当四四 电泳的时间与孔距等有关电泳的时间与孔距等有关对流免疫电泳PPT课件一一 简述对流免疫电泳试验的原理简述对流免疫电泳试验的原理? ?二二 如果本试验中没有出现沉淀线考虑有如果本试验中没有出现沉淀线考虑有何因素何因素? ?三三 说明凝集反应与沉淀反应的区别。说明凝集反应与沉淀反应的区别。对流免疫电泳PPT课件