RFLP技术文档资料

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1、1RFLP技术检索报告技术检索报告贾欢欢贾欢欢2010级生物技术级生物技术2班班201025134882常见的搜索引擎常见的搜索引擎3文库资源非常丰富文库资源非常丰富生物医药商务平台生物医药商务平台词条资源词条资源生物医药门户网站生物医药门户网站广告推广百度特点广告推广百度特点器材销售广告器材销售广告百度百度4百度文库百度文库其他资源也很丰富其他资源也很丰富文本下载文本下载5易生物(生物医药商务平台)易生物(生物医药商务平台)6生物秀(生物医药门户网站)生物秀(生物医药门户网站)7Goo维基百科排名靠前维基百科排名靠前8Goo搜索网页搜索网页9Goo搜索网页搜索网页10Goo搜索网页搜索网页R

2、FLP解析解析11Google数量时间优势明显数量时间优势明显维基百科排名靠前维基百科排名靠前无法无法打开打开功能强大功能强大翻译网页翻译网页12维基百科(英文界面)维基百科(英文界面)多语言多语言13维基百科(中文界面)维基百科(中文界面)多语言多语言14YAHOO数量优势极为明显数量优势极为明显15雅虎中国雅虎中国中文界面中文界面竞价排名广告竞价排名广告数量较少数量较少美女再好美女再好依然广告依然广告16RFLP技术检索结果技术检索结果RFLP标记是发展最早的标记是发展最早的DNA标记技术。标记技术。RFLP是指基因型之间限制性是指基因型之间限制性片段长度的差异,这种差异是由限制性酶切位点

3、上碱基的插入、缺失、片段长度的差异,这种差异是由限制性酶切位点上碱基的插入、缺失、重排或点突变所引起的。重排或点突变所引起的。RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism)即)即限制性内限制性内切酶片段长度多态性切酶片段长度多态性,作为第一代分子生物学标记自问世以来已广泛运作为第一代分子生物学标记自问世以来已广泛运用于多门生物学科研究中,但它运用于植物抗性研究还只是近几年的事。用于多门生物学科研究中,但它运用于植物抗性研究还只是近几年的事。RFLP能对植物的抗性基因进行定位和分离,利用能对植物的抗性基因进行定位和分离,利用RFLP技术,对于核技术,

4、对于核基因组或叶绿体基因组、尤其是后者,若能提取纯净基因组或叶绿体基因组、尤其是后者,若能提取纯净DNA,则可直接从,则可直接从酶切后的电泳图谱看出其多态性,利用这一方法可以测定种群内、种群酶切后的电泳图谱看出其多态性,利用这一方法可以测定种群内、种群间不同水平的物种在污染环境下抗性分化进化水平上的差异。间不同水平的物种在污染环境下抗性分化进化水平上的差异。RFLP技术在用于基因型分型研究的同时,同样的可用于在不同环境中技术在用于基因型分型研究的同时,同样的可用于在不同环境中微生物多样性的研究。微生物多样性的研究。17RFLP技术主要包括以下基本步骤:技术主要包括以下基本步骤: DNA提取提取

5、用限制性内切酶酶切用限制性内切酶酶切DNA用凝胶电泳分开用凝胶电泳分开DNA片段片段把把DNA片段转移到滤膜上片段转移到滤膜上利用放射性标记的探针杂交显示特定的利用放射性标记的探针杂交显示特定的DNA片段(片段(Southern杂交)杂交)结果分析结果分析RFLP技术主要步骤技术主要步骤18优缺点优缺点:RFLP遍布低拷贝编码序列,并且非常稳定,但遍布低拷贝编码序列,并且非常稳定,但RFLP实验操作繁实验操作繁琐,检测周期长,成本高昂,不适于大规模的分子育种,在植物分子琐,检测周期长,成本高昂,不适于大规模的分子育种,在植物分子标记辅助育种中需要将标记辅助育种中需要将RFLP转换成以转换成以P

6、CR为基础的标记。为基础的标记。 与核酸序列分析相比,与核酸序列分析相比,RFLP可省去序列分析中许多非常繁琐工序,可省去序列分析中许多非常繁琐工序,但相对但相对RAPD 而言,而言,RFLP方法更费时、费力,需要进行方法更费时、费力,需要进行DNA多种酶切、多种酶切、转膜以及探针的制备等多个步骤,仅对基因组单拷贝序列进行鉴定。转膜以及探针的制备等多个步骤,仅对基因组单拷贝序列进行鉴定。但但RFLP又有比又有比RAPD优越之处,优越之处, 它可以用来测定多态性是由父本还是它可以用来测定多态性是由父本还是母本产生的,也可用来测定由多态性产生的突变类型究竟是由碱基突母本产生的,也可用来测定由多态性

7、产生的突变类型究竟是由碱基突变或倒位、变或倒位、 还是由缺失、插入造成的。还是由缺失、插入造成的。基本类型基本类型:1.点的多态性点的多态性表现为表现为DNA链中发生单个碱基的突变,且突变导致一个原有酶切链中发生单个碱基的突变,且突变导致一个原有酶切位点的丢失或形成一个新的酶切位点。位点的丢失或形成一个新的酶切位点。Southern杂交即可诊断。杂交即可诊断。2.序列多态性序列多态性因因DNA链内发生较大部分的缺失链内发生较大部分的缺失 重复重复 插入等变异,其结果是即使插入等变异,其结果是即使其内切酶位点碱基序列没有变化,但原有的内切酶位点相对位置发生其内切酶位点碱基序列没有变化,但原有的内切酶位点相对位置发生变化从而导致变化从而导致RFLP。优缺点及基本类型优缺点及基本类型19谢谢观看谢谢观看over!20

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