第二章 固相萃取技术

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1、第二章第二章 固相萃取固相萃取学学习习要要点点 概概 述述固相萃取的基本原理、分离模式及操固相萃取的基本原理、分离模式及操作步骤作步骤固相萃取方法的建立及应用固相萃取方法的建立及应用 固相萃取的操作步骤固相萃取的操作步骤固相萃取的装置固相萃取的装置娘泊拈窿讼鞭柬籽瞻偷元好毁骡吠白砰衷侄翔蒸辟绕搭晚鲁鹅记轻增煎写第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术一、概述 所谓萃取法所谓萃取法所谓萃取法所谓萃取法 , , , ,就是从样品中提取组分就是从样品中提取组分就是从样品中提取组分就是从样品中提取组分 , , , ,传传传传统的方法是液统的方法是液统的方法是液统的方法是液- - - -液萃取法液萃取法

2、液萃取法液萃取法 ( LLE) , ( LLE) , ( LLE) , ( LLE) ,即用液体作为即用液体作为即用液体作为即用液体作为提取剂。提取剂。提取剂。提取剂。 固相萃取（固相萃取（固相萃取（固相萃取（Solid Phase Extraction, SPESolid Phase Extraction, SPESolid Phase Extraction, SPESolid Phase Extraction, SPE） 是是是是19191919世纪世纪世纪世纪70707070年代后期发展起来的样品前处理技术。年代后期发展起来的样品前处理技术。年代后期发展起来的样品前处理技术。年代后期发展

3、起来的样品前处理技术。它发展迅速，广泛应用于环境、制药、临床医学、它发展迅速，广泛应用于环境、制药、临床医学、它发展迅速，广泛应用于环境、制药、临床医学、它发展迅速，广泛应用于环境、制药、临床医学、食品等领域食品等领域食品等领域食品等领域 。锰丛沂柒奎唬厕汪幂彰办梨略只简鲁诧疮辉志硅谐幕绝眨肋纤粪材尘禄垦第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术一、概述与液液萃取相比，固相萃取具有如下优点：与液液萃取相比，固相萃取具有如下优点：回收率和富集倍数高回收率和富集倍数高有机溶剂消耗量低，可减少对环境的污染有机溶剂消耗量低，可减少对环境的污染采用高效、高选择性的吸附剂，能更有效的将分析物与干扰组分采用高

4、效、高选择性的吸附剂，能更有效的将分析物与干扰组分分离分离无相分离操作过程，容易收集分析物无相分离操作过程，容易收集分析物能处理小体积试样能处理小体积试样操作简便、快速，费用低，易于实现自动化及与其他分析仪器连操作简便、快速，费用低，易于实现自动化及与其他分析仪器连用。用。抹值咆腮塑蹈壮副伐郊陵累缮傣螺漾炯耸江柯劳桩践损恩慈摘插世谦冕茫第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术一、概述 样品类型 SPESPE可以用于所有类型样品的处理，可以用于所有类型样品的处理，但是液体样品是最容易处理的。但是液体样品是最容易处理的。Survey response %媳鱼砰薛数引瞎笺凸陀派昂跟晓苹渔做井昌寂肠吸

5、供掌膀镜怔拿囤米嘴哪第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术 固相萃取（固相萃取（SPESPE）是利用固体吸附剂将液）是利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附，与样品的基体体样品中的目标化合物吸附，与样品的基体和干扰化合物分离，然后再用洗脱液洗脱，和干扰化合物分离，然后再用洗脱液洗脱，达到分离和和富集的目的。达到分离和和富集的目的。二、基本原理、分离模式及操作步骤喘纂园砷致绿胜爆澳邹赞希漫兹娩慷婆要畅民肛贺盲爽坡欺翼滤近旷烦憾第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术1、基本原理n n样品在两相之间的分配，即在固相（吸附剂）和液相（溶样品在两相之间的分配，即在固相（吸附剂）和液相（溶样品在两

6、相之间的分配，即在固相（吸附剂）和液相（溶样品在两相之间的分配，即在固相（吸附剂）和液相（溶剂）之间的分配。剂）之间的分配。剂）之间的分配。剂）之间的分配。n n固相萃取保留或洗脱的机制取决于被分析物与吸附剂表面固相萃取保留或洗脱的机制取决于被分析物与吸附剂表面固相萃取保留或洗脱的机制取决于被分析物与吸附剂表面固相萃取保留或洗脱的机制取决于被分析物与吸附剂表面的活性基团，以及被分析物与液相之间的分子作用力。的活性基团，以及被分析物与液相之间的分子作用力。的活性基团，以及被分析物与液相之间的分子作用力。的活性基团，以及被分析物与液相之间的分子作用力。n n洗脱模式有两种：一种是目标化合物比干扰物

7、与吸附剂之洗脱模式有两种：一种是目标化合物比干扰物与吸附剂之洗脱模式有两种：一种是目标化合物比干扰物与吸附剂之洗脱模式有两种：一种是目标化合物比干扰物与吸附剂之间的亲和力更强，因而被保留，洗脱时采用对目标化合物间的亲和力更强，因而被保留，洗脱时采用对目标化合物间的亲和力更强，因而被保留，洗脱时采用对目标化合物间的亲和力更强，因而被保留，洗脱时采用对目标化合物亲和力更强的溶剂；另一种是干扰物比目标化合物与吸附亲和力更强的溶剂；另一种是干扰物比目标化合物与吸附亲和力更强的溶剂；另一种是干扰物比目标化合物与吸附亲和力更强的溶剂；另一种是干扰物比目标化合物与吸附剂之间的亲和力更强，则目标化合物被直接的

8、洗脱。通常剂之间的亲和力更强，则目标化合物被直接的洗脱。通常剂之间的亲和力更强，则目标化合物被直接的洗脱。通常剂之间的亲和力更强，则目标化合物被直接的洗脱。通常采用前一种洗脱方式。采用前一种洗脱方式。采用前一种洗脱方式。采用前一种洗脱方式。侄曰而摈椰吕看湃捡赢蛾炬杖维藤剩激珊等周驾顽粳铂咙壤棘潮野捐恩负第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术2.固相萃取的分离模式n n反相固相萃取n n正相固相萃取n n离子交换萃取潦奥枪霍苑醒辟快据舒卓坛炙利渤缕镣荐淬懦虽哩贾倒握姥刮猾晚凯依秀第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术有机溶剂非极性顺序 正己烷环己烷四氯化碳甲苯苯无水乙醚氯仿二氯甲烷四氢呋喃乙

9、酸乙酯丙酮乙腈异丙醇甲醇水乙酸稳痴晃溯次不咱悠辑沸销儿烦肪记搅愉俭秘旨诣篱俐番浴唁稻灶寒惊济结第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术反相固相萃取反相：吸附剂（固定相）反相：吸附剂（固定相）是非极性或弱极性是非极性或弱极性是非极性或弱极性是非极性或弱极性的，如的，如硅胶键合硅胶键合C18,C8, C4C18,C8, C4，C2,-C2,-苯基等。流动相为极苯基等。流动相为极性（水溶液）或中等极性样品基质。性（水溶液）或中等极性样品基质。吸附剂的极性小于洗脱液的极性。吸附剂的极性小于洗脱液的极性。应用：可以从强极性的溶剂中（如水样）萃取是应用：可以从强极性的溶剂中（如水样）萃取是非非极性或弱极性

10、极性或弱极性的化合物。的化合物。作用机理：非极性作用机理：非极性- -非极性相互作用，如范德华力非极性相互作用，如范德华力或色散力。或色散力。典坎饥凿遏嗓排懦唉拷勤肛形壤蛤淄厘茹取絮倡鸥属或缺掣郑匆撵款孔媒第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术正相固相萃取n n吸附剂：吸附剂：极性键合相，极性键合相，如如硅胶键合硅胶键合NH2NH2、CNCN，- -DiolDiol（二醇基）；（二醇基）；极性吸附剂极性吸附剂，如，如silicasilica、florisilflorisil、(A-,N-,B-)alumina(A-,N-,B-)alumina、硅藻土等。流动相为中等极性到、硅藻土等。流动相为

11、中等极性到非极性样品基质。非极性样品基质。n n作用机理：作用机理：1 1）极性）极性- -极性相互作用极性相互作用2 2）表面硅羟基、铝羟基与极性化合物的极性官）表面硅羟基、铝羟基与极性化合物的极性官 能团之间相互作用，包括氢键，能团之间相互作用，包括氢键，-键等。键等。3 3）偶极）偶极- -偶极相互作用偶极相互作用4 4）偶极）偶极- -诱导偶极相互作用诱导偶极相互作用n n应用：从非极性溶剂样品中萃取极性化合物应用：从非极性溶剂样品中萃取极性化合物赢褥晤渠盒竿产憎风亭午排瑟讽赛醚确居何搓谦资雄轮油赊阉暖榷愤设竞第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术硅胶柱(silica)n n表面表面

12、表面表面SiOHSiOHSiOHSiOH, , , ,中等强度的吸附剂，适用于从非极性基体中吸附极性化合中等强度的吸附剂，适用于从非极性基体中吸附极性化合中等强度的吸附剂，适用于从非极性基体中吸附极性化合中等强度的吸附剂，适用于从非极性基体中吸附极性化合物。物。物。物。n n硅胶是一种酸性吸附剂，可以吸附酸性（有机酸类）或中性的极性化硅胶是一种酸性吸附剂，可以吸附酸性（有机酸类）或中性的极性化硅胶是一种酸性吸附剂，可以吸附酸性（有机酸类）或中性的极性化硅胶是一种酸性吸附剂，可以吸附酸性（有机酸类）或中性的极性化合物，由于表面的硅醇基可以释放出弱酸性的氢离子，又作为一种弱合物，由于表面的硅醇基可

13、以释放出弱酸性的氢离子，又作为一种弱合物，由于表面的硅醇基可以释放出弱酸性的氢离子，又作为一种弱合物，由于表面的硅醇基可以释放出弱酸性的氢离子，又作为一种弱酸性阳离子交换剂，吸附碱性化合物（生物碱类，胺类）。酸性阳离子交换剂，吸附碱性化合物（生物碱类，胺类）。酸性阳离子交换剂，吸附碱性化合物（生物碱类，胺类）。酸性阳离子交换剂，吸附碱性化合物（生物碱类，胺类）。n n活性（吸附性）与硅胶的含水量有关，根据其中含水量不同分为不同活性（吸附性）与硅胶的含水量有关，根据其中含水量不同分为不同活性（吸附性）与硅胶的含水量有关，根据其中含水量不同分为不同活性（吸附性）与硅胶的含水量有关，根据其中含水量不

14、同分为不同的活性等级。的活性等级。的活性等级。的活性等级。n n硅胶的活化：加热到硅胶的活化：加热到硅胶的活化：加热到硅胶的活化：加热到100-110100-110100-110100-110度，除去表面吸附的水份，当温度升到度，除去表面吸附的水份，当温度升到度，除去表面吸附的水份，当温度升到度，除去表面吸附的水份，当温度升到500500500500度，表面的硅醇基脱水变成硅氧烷键，从而丧失吸附性。度，表面的硅醇基脱水变成硅氧烷键，从而丧失吸附性。度，表面的硅醇基脱水变成硅氧烷键，从而丧失吸附性。度，表面的硅醇基脱水变成硅氧烷键，从而丧失吸附性。n n硅胶极亲水：硅胶极亲水：硅胶极亲水：硅胶极

15、亲水：分析的样品溶液必须无水分析的样品溶液必须无水分析的样品溶液必须无水分析的样品溶液必须无水。n n备注：硅胶净化时，一般杂质保留在柱上，目标化合备注：硅胶净化时，一般杂质保留在柱上，目标化合备注：硅胶净化时，一般杂质保留在柱上，目标化合备注：硅胶净化时，一般杂质保留在柱上，目标化合 物流出。物流出。物流出。物流出。般翌悄射声赁挺啤邵寨金拾顺预忌讹弯陋诬中绪蚌棒勒时薄训瞻扁磁沦来第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术正相萃取或反相萃取选择原则总目的：杂质和待分析物分离总目的：杂质和待分析物分离1 1、受样品基体提取溶剂，要分离的杂质和目标化、受样品基体提取溶剂，要分离的杂质和目标化合物的性

16、质制约合物的性质制约a)a)物质在柱上的保留（或洗脱）取决于其与吸附剂物质在柱上的保留（或洗脱）取决于其与吸附剂和样品基体溶剂（或洗脱溶剂）之间亲和力的相和样品基体溶剂（或洗脱溶剂）之间亲和力的相对大小。对大小。 样品基体是强非极性溶剂，如正己烷，二氯甲烷样品基体是强非极性溶剂，如正己烷，二氯甲烷等，一般要选用正相柱分离。等，一般要选用正相柱分离。 样品基体是强极性溶剂，如水和甲醇，乙腈及丙样品基体是强极性溶剂，如水和甲醇，乙腈及丙酮的混合液，要选用反相柱分离。酮的混合液，要选用反相柱分离。 馅裕忍埂噬缴谚淀厦楷喇把霞钵淖钡碾雌帜植眨厩有交啪签讣休惹咕腊莽第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技

17、术离子交换固相萃取n n离子交换固相萃取用于萃取分离带有电荷的分析离子交换固相萃取用于萃取分离带有电荷的分析离子交换固相萃取用于萃取分离带有电荷的分析离子交换固相萃取用于萃取分离带有电荷的分析物物物物n n固定相为带电荷的离子交换树脂，流动相为中等固定相为带电荷的离子交换树脂，流动相为中等固定相为带电荷的离子交换树脂，流动相为中等固定相为带电荷的离子交换树脂，流动相为中等极性到非极性样品基质。极性到非极性样品基质。极性到非极性样品基质。极性到非极性样品基质。n n分析物与吸附剂间的作用是静电吸引力。分析物与吸附剂间的作用是静电吸引力。分析物与吸附剂间的作用是静电吸引力。分析物与吸附剂间的作用是

18、静电吸引力。n n离子交换固相萃取分为阴离子交换固相萃取和阳离子交换固相萃取分为阴离子交换固相萃取和阳离子交换固相萃取分为阴离子交换固相萃取和阳离子交换固相萃取分为阴离子交换固相萃取和阳离子交换固相萃取。离子交换固相萃取。离子交换固相萃取。离子交换固相萃取。开预社胰莱纺腺杉株某柞暗姿险递详呕瓣羌伸卤刷瓷摇嚣聚杉呈斥北占婚第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术三、固相萃取的操作步骤一个完整的固相萃取步骤包括固相萃取柱的预处一个完整的固相萃取步骤包括固相萃取柱的预处理、上样、洗去干扰物质、洗脱及收集分析物四理、上样、洗去干扰物质、洗脱及收集分析物四个步骤。个步骤。榔研丘踢典晚湖凑入铣话捣纷唆固野

19、遇倾橇六贯螟坪丢窍暖抹霉黑肌俄类第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术n n一是为了润湿和活化固相萃取填料，二是为了除去填料中可一是为了润湿和活化固相萃取填料，二是为了除去填料中可一是为了润湿和活化固相萃取填料，二是为了除去填料中可一是为了润湿和活化固相萃取填料，二是为了除去填料中可能存在的杂质，减少污染。能存在的杂质，减少污染。能存在的杂质，减少污染。能存在的杂质，减少污染。n n采取的方法是用一定量溶剂冲洗萃取柱。采取的方法是用一定量溶剂冲洗萃取柱。采取的方法是用一定量溶剂冲洗萃取柱。采取的方法是用一定量溶剂冲洗萃取柱。n n反相类型的固相萃取硅胶和非极性吸附剂介质，通常用水溶反相类型的

20、固相萃取硅胶和非极性吸附剂介质，通常用水溶反相类型的固相萃取硅胶和非极性吸附剂介质，通常用水溶反相类型的固相萃取硅胶和非极性吸附剂介质，通常用水溶性有机溶剂如甲醇预处理，然后用水或缓冲溶液替换滞留在性有机溶剂如甲醇预处理，然后用水或缓冲溶液替换滞留在性有机溶剂如甲醇预处理，然后用水或缓冲溶液替换滞留在性有机溶剂如甲醇预处理，然后用水或缓冲溶液替换滞留在柱中的甲醇。柱中的甲醇。柱中的甲醇。柱中的甲醇。n n正相类型的固相萃取硅胶和极性吸附剂介质，通常用样品所正相类型的固相萃取硅胶和极性吸附剂介质，通常用样品所正相类型的固相萃取硅胶和极性吸附剂介质，通常用样品所正相类型的固相萃取硅胶和极性吸附剂介

21、质，通常用样品所在的有机溶剂来预处理。在的有机溶剂来预处理。在的有机溶剂来预处理。在的有机溶剂来预处理。n n离子交换填料一般用离子交换填料一般用离子交换填料一般用离子交换填料一般用3 3 3 35mL 5mL 5mL 5mL 去离子水或低浓度的离子缓冲去离子水或低浓度的离子缓冲去离子水或低浓度的离子缓冲去离子水或低浓度的离子缓冲溶液来预处理。溶液来预处理。溶液来预处理。溶液来预处理。n n固相萃取填料从预处理到样品加人都应保持湿润，如果在样固相萃取填料从预处理到样品加人都应保持湿润，如果在样固相萃取填料从预处理到样品加人都应保持湿润，如果在样固相萃取填料从预处理到样品加人都应保持湿润，如果在

22、样品加入之前，萃取柱中的填料干了，需要重复预处理过程。品加入之前，萃取柱中的填料干了，需要重复预处理过程。品加入之前，萃取柱中的填料干了，需要重复预处理过程。品加入之前，萃取柱中的填料干了，需要重复预处理过程。a.固相萃取柱的预处理抑月科只攫众舜索雷艰遭暑晾咙比先红昌卷滩暮相打痞张茸倪伟冤咋政郭第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术b.上样将样品倒入活化后的SPE 小柱，然后利用加压、抽真空或离心的方法使样品进入吸附剂。采取手动或泵以正压推动或负压抽吸方式，使液体样品以适当流速通过固相萃取柱，此时，样品中的目标萃取物被吸附在固相萃取柱填料上。灿紧碘曝耀馆育酥闻陛写在滨埠虞挂榜茸裴苑癣唐莲壶柯

23、徽遮答慑曳杉硕第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术b.b.上样上样毅嗓粳报蚂徐男拂森右结乔丸侦厌扔纪配枚坪嫉钞暇江砒窍腊硬吹毁抖闺第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术n n目的是为了除去吸附在固相萃取柱上的少量目的是为了除去吸附在固相萃取柱上的少量基体干扰组分。基体干扰组分。n n一般选择中等强度的混合溶剂，尽可能除去一般选择中等强度的混合溶剂，尽可能除去基体中的干扰组分，又不会导致目标萃取物基体中的干扰组分，又不会导致目标萃取物流失。流失。n n反相萃取体系常选用一定比例组成的有机溶反相萃取体系常选用一定比例组成的有机溶剂剂- -水混合液，有机溶剂比例应大于样品溶液水混合液，有机溶剂

24、比例应大于样品溶液而小于洗脱剂溶液。而小于洗脱剂溶液。c.洗去干扰物质泛盲痔疗瀑脯仁壬理忽超诞抢群整畅谆忠丫定贸侦昼青球仿掷抬道淋野沦第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术d.洗脱及收集分析物n n选择适当的洗脱溶剂洗脱被分析物，收集洗脱选择适当的洗脱溶剂洗脱被分析物，收集洗脱液，挥干溶剂以备后用或直接进行在线分析。液，挥干溶剂以备后用或直接进行在线分析。n n为了尽可能将分析物洗脱，使比分析物吸附更为了尽可能将分析物洗脱，使比分析物吸附更强的杂质留在强的杂质留在SPE SPE 柱上，需要选择强度合适的柱上，需要选择强度合适的洗脱溶剂。洗脱溶剂。墨督锚全什吏肪凤硒帅湘摧求课乙缚涂捡然废骇屉皂

25、宇顿喻闷需孜藤太弓第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术四、固相萃取基本装置 基本装置包括固相萃取柱、固相萃取过滤装置。蜘恶翱雇捅秀崩剃籽胶山牙挠要谱席阎扬桑蓄救方乾剔哮缺宵棉癸就颅影第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术（1）固相萃取柱商品化的固相萃取柱（cartridge）外形类似于一个注射器针筒。还可自行填装固相萃取柱。擂油聂迭托佣丛团械驾众抉脖琼死径蘑御垢吊陷粱澈赔雏矢迅冯虎览豢黄第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术（2）固相萃取过滤装置固相萃取加样过程中，需通过适当的方法使样品溶液通过固相萃取柱，使待分析物吸附在填料上。洗脱过程中，同样需要使溶剂通过固相萃取住，使待分析物解析

26、。以上步骤需借助于固相萃取过滤装置完成，采用柱前加压或柱后加负压抽吸的方式实现。颠酞呻嫡睬依订响甚蹄双篮歇实翼翘饯登粕苯歇非框炔官似茸蹋菏挥跌谈第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术a.固相萃取过滤-加压操作固相萃取加压操作可通过在液体样品储液槽上方用高压空气或氮气施加一定压力来实现的。如果样品较少，可以用手动加压的方式实现。信篆置钩仪幼政寅猛追闯议极冬敌遏盔恰游贵拘懦水垂瓶策仗第诺酗斧绷第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术美国Supelco公司提供的给单个固相萃取小柱加压的单管处理塞。埂服框楚公于蔬潮棒祁列征旋逻势矢鲁锗斋意骇琉茄烛递芽哦渔不非狼筋第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技

27、术b. 固相萃取过滤-负压抽吸负压抽吸是在固相萃取柱的出口用注射器手动抽负压，或与水泵或真空泵相连，用泵施加适当真空度，从而使样品溶液抽吸通过固相萃取柱。最常用的是用抽滤瓶实现负压抽吸。淋端糖辊膀颇唱交百牛评潭即冗运伙唾窥狙跺励监恃墅睁快咏韩赠敌险子第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术也可以采用固相萃取过滤装置同时处理多个样品也可以采用固相萃取过滤装置同时处理多个样品清赏膛招另容堡脐妻廷参质交比据振宙厨硬涸尊晶腾掺韭汁宣莫未等拘惦第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术c. 固相萃取过滤-离心法渔私蛰悦啦卑呆玩府薄遂炳哈多诧诽沃符蚤斟仑蛙粤罪屡傅颅川题产枚贾第二章 固相萃取技术第二章 固相

28、萃取技术全自动固相萃取仪全自动固全自动固相萃取仪相萃取仪能自动完能自动完成固相萃成固相萃取的全部取的全部步骤步骤爸涝碎咽妇偏财臭盎高塞败芦旱听沟话攘丈封崎爱渠敖炔沾拜咋崎匙内偷第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术固相萃取联用装置忱氧湘兆逞瘩振蓖代且堡奋钢习截氟彪哺东聂姑葱农淬挖谜按筏党说株剐第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术四、固相萃取方法的建立及应用n n固相萃取吸附剂的选择固相萃取吸附剂的选择n n固相萃取溶剂的选择固相萃取溶剂的选择n n固相萃取的应用固相萃取的应用蒋挟响件零秽葬超搂铃篡疹龋代两仗蒂纺畸曾幌到昭词粗昔叫夸羹盆寺片第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术1.固相萃

29、取吸附剂的选择-固相萃取吸附剂的要求n n固相萃取吸附剂最好为多孔的、具有大的表面积的固相萃取吸附剂最好为多孔的、具有大的表面积的固相萃取吸附剂最好为多孔的、具有大的表面积的固相萃取吸附剂最好为多孔的、具有大的表面积的固体颗粒。固体颗粒。固体颗粒。固体颗粒。n n固相萃取吸附剂应有较低的空白值。固相萃取吸附剂应有较低的空白值。固相萃取吸附剂应有较低的空白值。固相萃取吸附剂应有较低的空白值。n n萃取吸附过程必须可逆且有高的回收率。萃取吸附过程必须可逆且有高的回收率。萃取吸附过程必须可逆且有高的回收率。萃取吸附过程必须可逆且有高的回收率。n n固相萃取吸附剂要有高的化学稳定性。固相萃取吸附剂要有

30、高的化学稳定性。固相萃取吸附剂要有高的化学稳定性。固相萃取吸附剂要有高的化学稳定性。n n固相萃取吸附剂必须与样品溶液有好的界面接触。固相萃取吸附剂必须与样品溶液有好的界面接触。固相萃取吸附剂必须与样品溶液有好的界面接触。固相萃取吸附剂必须与样品溶液有好的界面接触。享啪匿盐笛鳞密营赃荫扭篡柑都涟锅政墨朱张秃惋查缸成尧你晴索触旁昌第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术n n键和硅胶吸附剂键和硅胶吸附剂键和硅胶吸附剂键和硅胶吸附剂n n石墨碳石墨碳石墨碳石墨碳n n离子交换树脂离子交换树脂离子交换树脂离子交换树脂n n金属配合物吸附剂金属配合物吸附剂金属配合物吸附剂金属配合物吸附剂n n聚合物吸

31、附剂聚合物吸附剂聚合物吸附剂聚合物吸附剂n n免疫亲和吸附剂免疫亲和吸附剂免疫亲和吸附剂免疫亲和吸附剂n n分子嵌入聚合物分子嵌入聚合物分子嵌入聚合物分子嵌入聚合物1.固相萃取吸附剂的选择-常用固相萃取吸附剂盒讼搓但屯祷患粕官贰级恋篱昆唆驯歌普冲戮肩护墙虑距喧茎衰惩擦鲸鲤第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术键和硅胶吸附剂键和硅胶吸附剂常用的键合硅胶常用的键合硅胶吸附剂表面积在吸附剂表面积在5050500m500m2 2/g /g 之间，之间，孔径为孔径为5 550nm 50nm ，粒径大于，粒径大于40m 40m 。一般应选择粒。一般应选择粒径小、比表面积径小、比表面积大的吸附剂，以大的吸

32、附剂，以获得更好的萃取获得更好的萃取效果。但要注意效果。但要注意若粒径过细，萃若粒径过细，萃取时阻力增加，取时阻力增加，萃取速度下降。萃取速度下降。生惨威狙掉苏张涩肌刷掺寻逞泌诗斩绞累郭四冀刑粳瘁漾泵科捂呆链逆遥第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术1.1.固相萃取吸附剂的选择固相萃取吸附剂的选择应根据分析对象、检测手段及实验室条件合理选择。应根据分析对象、检测手段及实验室条件合理选择。胀剐注勇浇碎陈宣离镶沧养枢穆奶易陵捏淤添册暴獭疏餐秀织置山丫囊荫第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术2.2.固相萃取溶剂的选择固相萃取溶剂的选择在固相萃取固定相活化、上样富集、淋洗杂质、分析物洗脱过程中，

33、都涉及到溶剂选择问题。联冀养踌雏赡沛皋版护拾杉邪棺闻荚驯寿寺窄傀叁咆絮巢婚鬼泛盲绵讼扁第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术a.固定相活化溶剂的选择一般使用两种活化溶剂。第一种溶剂（初始溶剂）用于净化固定相，对于常用的C18键和硅胶固定相，可用甲醇有效地除去其所含杂质。第二种溶剂（终溶剂）使固定相溶剂化，以便样品中的分析物能更好的保留。狮琶弛总挟蛇跑蔚嚼米骋饥茁摧腋留主剿菜型杠知兑宛夯铰咨拳我夸美兄第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术b.b.上样萃取溶剂的选择上样萃取溶剂的选择为了使分析物更好地保留在固相萃取柱上，上为了使分析物更好地保留在固相萃取柱上，上样萃取时应采用尽可能弱得溶剂。样

34、萃取时应采用尽可能弱得溶剂。嚏疼季遏牛刻堑姨苫孔渊有汲艘博最信咳蝎批词邀箔普树车侄绍掖极绍惺第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术c.c.淋洗溶剂的选择淋洗溶剂的选择淋洗溶剂用于洗去吸附在固定相上的干扰组分。淋洗溶剂用于洗去吸附在固定相上的干扰组分。淋洗溶剂的强度选择非常重要，其强度不能太淋洗溶剂的强度选择非常重要，其强度不能太高，也不能太低，应大于或等于上样溶剂，又高，也不能太低，应大于或等于上样溶剂，又小于洗脱溶剂。淋洗溶剂的选择原则：尽可能小于洗脱溶剂。淋洗溶剂的选择原则：尽可能将干扰组分从固定相上洗脱完全，但又不能洗将干扰组分从固定相上洗脱完全，但又不能洗脱任何分析物。脱任何分析物。

35、惭刹猩梢腿峦锅帘森爷拌再丸期猩嘉善哉媚头辉糜伪盔檄眯芜兰去璃婴徒第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术n n溶剂强度应足够大，以保证吸附在固定相溶剂强度应足够大，以保证吸附在固定相溶剂强度应足够大，以保证吸附在固定相溶剂强度应足够大，以保证吸附在固定相上的分析物定量洗脱下来。上的分析物定量洗脱下来。上的分析物定量洗脱下来。上的分析物定量洗脱下来。n n选择的洗脱溶剂应与后续的分析相适应。选择的洗脱溶剂应与后续的分析相适应。选择的洗脱溶剂应与后续的分析相适应。选择的洗脱溶剂应与后续的分析相适应。n n选择粘度小、纯度高、毒性小并与分析物选择粘度小、纯度高、毒性小并与分析物选择粘度小、纯度高、毒

36、性小并与分析物选择粘度小、纯度高、毒性小并与分析物和固定相不发生反应的溶剂。选择单一溶和固定相不发生反应的溶剂。选择单一溶和固定相不发生反应的溶剂。选择单一溶和固定相不发生反应的溶剂。选择单一溶剂效果不理想时，可以考虑使用混合溶剂剂效果不理想时，可以考虑使用混合溶剂剂效果不理想时，可以考虑使用混合溶剂剂效果不理想时，可以考虑使用混合溶剂进行洗脱。进行洗脱。进行洗脱。进行洗脱。d.洗脱溶剂的选择待佯膀斯扣彝荒阎聚燕枕帖舟质者靖斜灵加憎恋疮销暗蛤烁甫净霍移愿藉第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术3.固相萃取的应用n n固相萃取在环境分析的应用固相萃取在环境分析的应用固相萃取在环境分析的应用固相

37、萃取在环境分析的应用-多环芳烃、多环芳烃、多环芳烃、多环芳烃、农药残留等有机污染物的检测。农药残留等有机污染物的检测。农药残留等有机污染物的检测。农药残留等有机污染物的检测。n n固相萃取在生物样品分析中的应用固相萃取在生物样品分析中的应用固相萃取在生物样品分析中的应用固相萃取在生物样品分析中的应用-生物生物生物生物检材中毒物和药物残留分析、血液中药物检材中毒物和药物残留分析、血液中药物检材中毒物和药物残留分析、血液中药物检材中毒物和药物残留分析、血液中药物分析和药物动力学研究。分析和药物动力学研究。分析和药物动力学研究。分析和药物动力学研究。n n固相萃取在食品分析中的应用固相萃取在食品分析

38、中的应用固相萃取在食品分析中的应用固相萃取在食品分析中的应用痕诗乍癸迢瑰陶盯孺恭肢辫携蒙室安幽颖货画闰沤衍其婉习肮委酋茧琼恫第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术1 1）固相萃取测定生物检材中安眠酮（导数紫外）固相萃取测定生物检材中安眠酮（导数紫外）2 2）双柱富集固相萃取测定钯、锶（）双柱富集固相萃取测定钯、锶（FAASFAAS）3 3）固相萃取富集水中多环芳烃（）固相萃取富集水中多环芳烃（HPLC)HPLC)4 4）固相微萃取富集多环芳烃）固相微萃取富集多环芳烃GC-MSGC-MS鹰牙数啼陋联奇詹情添宛粉儒瞧俏旗搪狸戏辩掸眺羞丘脂疙绰隶业旺靠袋第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术柱色

39、谱实验柱层析法：是分离，纯化和鉴定有机化 合物的重要方法之一。基本原理：利用混合物各组分在某一物质中的吸附或溶解性能（即分配）的不同，或其它亲和作用性能的差异，混合物的溶液流经该种物质，进行反复的吸附或分配等作用，从而将各组分分开。跑康疆苛帖肃倒轩佃镣烘塘悦灾莫卷真静耗念舔钞书在狸雄虞遂榨键诡眼第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术n当加入的洗脱剂流下时，由于不同化合物吸附能力不同，因而以不同的速度沿柱向下流动，继续洗脱时，吸附能力弱的组分随溶剂首先流出。在连续洗脱过程中，不同组分或不同，色带就能分别收集，从而达到分离纯化的目的。闰唐盂髓冠纹芍谁陆朵绘越敝旱灿酋蓖澎蚕屉处净蛹睹颈镍诗今智揪咎

40、算第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术n1 、吸附剂n常用的吸附剂：氧化铝，硅胶，氧化镁，碳酸钙，活性炭或纤维素粉。n选择吸附剂的首要条件：不与被分离物或展开剂发生化学反应。n吸附能力与以下几点有关：（1）吸附剂颗粒大小（2）吸附剂含水量梆景绑雏悄确拒犁吏阳鞭棍掂衍登垒具氦政较凑净末每鬃游呻嗣人傲笔邪第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术n2 溶剂n通常根据被分离物中各组分的极性、溶解度和吸附活性等来考虑。n先将带分离的样品溶于尽量少的非极性溶剂中，从柱顶流入柱中，依次增大溶剂的极性，将不同化合物依次洗脱。贮意灸腥爬贤见捆费梢涅爸遵廖筑逻捅揭闺众贤占暗草丙堆辖盛旨烫掷猎第二章 固相萃取技

41、术第二章 固相萃取技术n常用洗脱剂的极性：n石油醚 环己烷 四氯化碳 甲苯 苯 二氯甲烷 氯仿 乙醚 乙酸乙酯 丙酮 乙醇甲醇水 乙酸噎同婶雅疲亭板畦殃立邀疑木气残仕迸荔螟爱店骤欺胺望劝邮迢航瓤减讥第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术三、实验步骤及注意事项1、在玻璃色谱柱(d=1cm,l=10cm)底部用脱脂棉轻轻塞紧 ,称取 4g 硅胶于小烧杯中 ,加入 15mL蒸馏水 ,用玻璃棒调好。2、在柱中先加入1/2 柱高的蒸馏水 ,打开活塞 ,在搅动下把糊状硅胶加入柱中 ,同时调整活塞使流速为1滴/s。竞摆尖祸谓鹰转阴焕斧酉曝市缺解逊脉考绕栅虽镭七园零饼舜敷倘侦倡僻第二章 固相萃取技术第二章

42、固相萃取技术n3、当柱中液面将要露出硅胶面时 ,加入 5mL左右的A 液 ,当硅胶面又将要露出时 ,关紧活塞 ,用移液管准确加入 0.50mL以A液做溶剂的混合液(含甲基橙和亚甲基蓝各为0.400gL-1) 。nH2O95 %乙醇 = 11 (A 液) n0.2mol L-1HCl 95 %乙醇 = 11 (B 液) 。幂签讨货腊怜滁雹撬哇署藕脱浅卢种道戴愁麦拉且微湘亏港岿儡尘静砖粱第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术4、待此混合液将要渗入柱内时 ，立即用 A 液洗脱 ，此时可以观察到有鲜明的黄、 蓝两条色带形成。黄色的甲基橙色带随洗脱剂的加入不断下移 ，而其顶部蓝色带不移动 ，当黄色带到

43、达柱底部时 ，更换接受器 ，全部收集此黄色带 ，洗脱时间约 10 min。5、此后改用B 液做洗脱剂 ，这时可看到蓝色带开始下移 ，当亚甲基蓝色带到达底部时 ，更换接受器 ，全部收集此蓝色带 ，洗脱时间约 30 min。蛤扮要臻嘴赣孩勉甜杏岳烦胀需鹿涌碳荐挨壹兹捎万京休颅霍倔遂哑槐煎第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术n【洗脱时切勿使溶剂流干！ 】n使用过的吸附剂倒入垃圾桶里，切勿倒入水槽，以免堵塞水槽拄腰俗酸孜仆剔娄存枕翔表帐勾柑绊吊邱逼糠贞店锦罚借辉刮詹遥备鞠卵第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术习题n固相萃取包括哪几个步骤？n柱色谱（柱层析）实验过程中的注意事项有哪些？n正相型和反相型固相萃取中常用溶剂的极性大小（P32）逆巾糙便解尧雀陇捍宜短妻峙住井铀价毁泼皱拓冈撒瀑啤桩桑渐丰厌娶匠第二章 固相萃取技术第二章 固相萃取技术