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1、2024/9/182024/9/18;. ;.1 1第二十二章第二十二章第二十二章第二十二章白假丝酵母菌白假丝酵母菌白假丝酵母菌白假丝酵母菌 2024/9/182024/9/18;. ;.2 2n n重点重点1.1.白色假丝酵母菌的生物学特性白色假丝酵母菌的生物学特性2.2.白色假丝酵母菌的微生物学检查白色假丝酵母菌的微生物学检查2024/9/182024/9/18;. ;.3 3 真菌学概述真菌学概述真菌学概述真菌学概述 概念：概念：概念：概念： 是一类有典型的细胞核和完善的细胞器，不含叶绿素，无根、茎、叶分化的真核细胞是一类有典型的细胞核和完善的细胞器，不含叶绿素，无根、茎、叶分化的真核细
2、胞是一类有典型的细胞核和完善的细胞器，不含叶绿素，无根、茎、叶分化的真核细胞是一类有典型的细胞核和完善的细胞器，不含叶绿素，无根、茎、叶分化的真核细胞型微生物。型微生物。型微生物。型微生物。 2024/9/182024/9/18;. ;.4 4真菌的真菌的真菌的真菌的形态特性形态特性形态特性形态特性（一）单细胞真菌呈圆形，如酵母菌。（一）单细胞真菌呈圆形，如酵母菌。（一）单细胞真菌呈圆形，如酵母菌。（一）单细胞真菌呈圆形，如酵母菌。（二）多细胞真菌由菌丝和孢子组成，（二）多细胞真菌由菌丝和孢子组成，（二）多细胞真菌由菌丝和孢子组成，（二）多细胞真菌由菌丝和孢子组成， 称丝状菌或霉菌。称丝状菌或
3、霉菌。称丝状菌或霉菌。称丝状菌或霉菌。菌丝和孢子的形态因菌而异，是鉴定真菌丝和孢子的形态因菌而异，是鉴定真菌丝和孢子的形态因菌而异，是鉴定真菌丝和孢子的形态因菌而异，是鉴定真菌的重要依据。孢子又分为多种，如叶菌的重要依据。孢子又分为多种，如叶菌的重要依据。孢子又分为多种，如叶菌的重要依据。孢子又分为多种，如叶状孢子、分生孢子和孢子囊孢子等。状孢子、分生孢子和孢子囊孢子等。状孢子、分生孢子和孢子囊孢子等。状孢子、分生孢子和孢子囊孢子等。 2024/9/182024/9/18;. ;.5 5单细胞真菌单细胞真菌单细胞真菌单细胞真菌酵母菌：孢子，无菌丝酵母菌：孢子，无菌丝酵母菌：孢子，无菌丝酵母菌：
4、孢子，无菌丝类酵母菌：芽生孢子，假菌丝类酵母菌：芽生孢子，假菌丝类酵母菌：芽生孢子，假菌丝类酵母菌：芽生孢子，假菌丝多细胞真菌多细胞真菌多细胞真菌多细胞真菌 丝状菌（霉菌）：孢子和菌丝丝状菌（霉菌）：孢子和菌丝丝状菌（霉菌）：孢子和菌丝丝状菌（霉菌）：孢子和菌丝菌丝和孢子的形态因菌而异，是鉴定真菌的重要依菌丝和孢子的形态因菌而异，是鉴定真菌的重要依菌丝和孢子的形态因菌而异，是鉴定真菌的重要依菌丝和孢子的形态因菌而异，是鉴定真菌的重要依据。孢子又分为多种，如叶状孢子、分生孢子和孢据。孢子又分为多种，如叶状孢子、分生孢子和孢据。孢子又分为多种，如叶状孢子、分生孢子和孢据。孢子又分为多种，如叶状孢子
5、、分生孢子和孢子囊孢子等。子囊孢子等。子囊孢子等。子囊孢子等。真菌的真菌的真菌的真菌的形态特性形态特性形态特性形态特性2024/9/182024/9/18;. ;.9 9 真菌菌落特性真菌菌落特性真菌菌落特性真菌菌落特性1 1 1 1酵母型菌落酵母型菌落酵母型菌落酵母型菌落： 是单细胞真菌的菌落，形态与细菌是单细胞真菌的菌落，形态与细菌菌落相似，较大，表面光滑湿润柔软、边缘整齐，如菌落相似，较大，表面光滑湿润柔软、边缘整齐，如新生隐球菌。新生隐球菌。2. 2. 2. 2. 类酵母型菌落类酵母型菌落类酵母型菌落类酵母型菌落：如白假丝酵母菌，形成假菌丝，如白假丝酵母菌，形成假菌丝，伸入培养基中。伸
6、入培养基中。3 3 3 3霉菌型菌落霉菌型菌落霉菌型菌落霉菌型菌落： 是多细胞真菌的菌落。菌落呈棉絮是多细胞真菌的菌落。菌落呈棉絮状、绒毛状，并产生不同的色素，如皮肤癣菌。状、绒毛状，并产生不同的色素，如皮肤癣菌。2024/9/182024/9/18;. ;.1313培养特性培养特性培养特性培养特性n n真菌培养要求不高，常用沙氏真菌培养要求不高，常用沙氏(Sabouraud)(Sabouraud)培养基培养基( (含含1 1蛋白胨、蛋白胨、4 4葡萄糖或麦芽糖、葡萄糖或麦芽糖、2 2琼脂琼脂) )培培养，适宜温度养，适宜温度2222 2828，但深部真菌为，但深部真菌为3737。适宜。适宜P
7、HPH值为值为4.0-6.04.0-6.0。n n菌落是鉴别真菌的方法。注意以下几点：菌落是鉴别真菌的方法。注意以下几点：菌落性质：酵母菌还是霉菌；菌落性质：酵母菌还是霉菌；菌落大小，病原性真菌菌落小，而条件致病性真菌菌落大；菌落大小，病原性真菌菌落小，而条件致病性真菌菌落大；菌落颜色菌落颜色 病原性真菌颜色淡，污染真菌颜色深；病原性真菌颜色淡，污染真菌颜色深；致病性真菌菌落下沉，有时使培养基开裂；污染性真菌菌落不下沉致病性真菌菌落下沉，有时使培养基开裂；污染性真菌菌落不下沉, ,很少引起开裂。很少引起开裂。n n真菌依靠孢子及菌丝进行无性或有性繁殖真菌依靠孢子及菌丝进行无性或有性繁殖2024
8、/9/182024/9/18;. ;.1414变异性抵抗力变异性抵抗力变异性抵抗力变异性抵抗力n n易发生变异易发生变异易发生变异易发生变异形态、培养性状和毒力等形态、培养性状和毒力等形态、培养性状和毒力等形态、培养性状和毒力等n n抵抗力较强抵抗力较强抵抗力较强抵抗力较强对干燥、紫外线及一般消毒剂抵抗力强对热敏感，对干燥、紫外线及一般消毒剂抵抗力强对热敏感，对干燥、紫外线及一般消毒剂抵抗力强对热敏感，对干燥、紫外线及一般消毒剂抵抗力强对热敏感，60601 1小时菌丝、孢子均被杀死对小时菌丝、孢子均被杀死对小时菌丝、孢子均被杀死对小时菌丝、孢子均被杀死对2%2%石炭酸、石炭酸、石炭酸、石炭酸、
9、0.1%0.1%升汞、升汞、升汞、升汞、2.5%2.5%碘酊或碘酊或碘酊或碘酊或10%10%甲醛敏感对作用于甲醛敏感对作用于甲醛敏感对作用于甲醛敏感对作用于细菌抗生素不敏感，对二性霉素细菌抗生素不敏感，对二性霉素细菌抗生素不敏感，对二性霉素细菌抗生素不敏感，对二性霉素B B制霉菌素、咪康制霉菌素、咪康制霉菌素、咪康制霉菌素、咪康唑唑唑唑、酮康唑酮康唑酮康唑酮康唑、氟康唑和伊曲康唑敏感。氟康唑和伊曲康唑敏感。氟康唑和伊曲康唑敏感。氟康唑和伊曲康唑敏感。2024/9/182024/9/18;. ;.1515致病性与免疫性致病性与免疫性致病性与免疫性致病性与免疫性n n致病性致病性致病性致病性1.1
10、.1.1.致病性真菌感染：致病性真菌感染：致病性真菌感染：致病性真菌感染： 浅部真菌：角蛋白酶、机械刺激、代谢产物浅部真菌：角蛋白酶、机械刺激、代谢产物浅部真菌：角蛋白酶、机械刺激、代谢产物浅部真菌：角蛋白酶、机械刺激、代谢产物 深部真菌：慢性肉芽肿、组织溃疡深部真菌：慢性肉芽肿、组织溃疡深部真菌：慢性肉芽肿、组织溃疡深部真菌：慢性肉芽肿、组织溃疡2.2.2.2.条件致病性真菌：假丝酵母菌条件致病性真菌：假丝酵母菌条件致病性真菌：假丝酵母菌条件致病性真菌：假丝酵母菌3.3.3.3.真菌超敏反应性疾病真菌超敏反应性疾病真菌超敏反应性疾病真菌超敏反应性疾病4.4.4.4.真菌性中毒症真菌性中毒症真
11、菌性中毒症真菌性中毒症5.5.5.5.真菌毒素与肿瘤真菌毒素与肿瘤真菌毒素与肿瘤真菌毒素与肿瘤n n免疫性免疫性免疫性免疫性天然免疫天然免疫天然免疫天然免疫获得性免疫：获得性免疫：获得性免疫：获得性免疫： 体液免疫、体液免疫、体液免疫、体液免疫、 细胞免疫细胞免疫细胞免疫细胞免疫2024/9/182024/9/18;. ;.1616真菌感染的病原学诊断真菌感染的病原学诊断n n标本的采集标本的采集标本的采集标本的采集临床标本类别：临床标本类别：临床标本类别：临床标本类别：1 1 1 1皮肤的角质性物质：毛发、指皮肤的角质性物质：毛发、指皮肤的角质性物质：毛发、指皮肤的角质性物质：毛发、指( (
12、 ( (趾趾趾趾) ) ) )甲、皮屑等。甲、皮屑等。甲、皮屑等。甲、皮屑等。2 2 2 2各种分泌物和排泄物：生殖道、分泌物、耳垢、痰、各种分泌物和排泄物：生殖道、分泌物、耳垢、痰、各种分泌物和排泄物：生殖道、分泌物、耳垢、痰、各种分泌物和排泄物：生殖道、分泌物、耳垢、痰、粪便、尿粪便、尿粪便、尿粪便、尿 液等。液等。液等。液等。 3 3 3 3血液和体液：体液包括胸水、腹水、脑脊液、淋巴穿血液和体液：体液包括胸水、腹水、脑脊液、淋巴穿血液和体液：体液包括胸水、腹水、脑脊液、淋巴穿血液和体液：体液包括胸水、腹水、脑脊液、淋巴穿刺液等。刺液等。刺液等。刺液等。 4 4 4 4脓汁及渗出物。脓汁
13、及渗出物。脓汁及渗出物。脓汁及渗出物。 2024/9/182024/9/18;. ;.1717采集标本注意事项：采集标本注意事项：采集标本注意事项：采集标本注意事项：1.1.1.1.采集的标本要适宜采集的标本要适宜采集的标本要适宜采集的标本要适宜 不同真菌感染应采取不同的临床标本。不同真菌感染应采取不同的临床标本。不同真菌感染应采取不同的临床标本。不同真菌感染应采取不同的临床标本。怀疑为浅部真菌感染如体癣，应刮取病变边缘的痂、皮屑，发怀疑为浅部真菌感染如体癣，应刮取病变边缘的痂、皮屑，发怀疑为浅部真菌感染如体癣，应刮取病变边缘的痂、皮屑，发怀疑为浅部真菌感染如体癣，应刮取病变边缘的痂、皮屑，发
14、癣应取病发。深部真菌感染应取血液、脑脊液、脓汁等。癣应取病发。深部真菌感染应取血液、脑脊液、脓汁等。癣应取病发。深部真菌感染应取血液、脑脊液、脓汁等。癣应取病发。深部真菌感染应取血液、脑脊液、脓汁等。2 2 2 2在用药前采集标本在用药前采集标本在用药前采集标本在用药前采集标本 一般真菌标本须在用药前采集，对已一般真菌标本须在用药前采集，对已一般真菌标本须在用药前采集，对已一般真菌标本须在用药前采集，对已用药者则需停药一段时间后再采集标本。用药者则需停药一段时间后再采集标本。用药者则需停药一段时间后再采集标本。用药者则需停药一段时间后再采集标本。3 3 3 3采集的标本量要足采集的标本量要足采
15、集的标本量要足采集的标本量要足 血液和脑脊液血液和脑脊液血液和脑脊液血液和脑脊液5ml5ml5ml5ml，胸腔液，胸腔液，胸腔液，胸腔液20ml20ml20ml20ml，皮屑，皮屑，皮屑，皮屑标本两块，活体组织两份标本两块，活体组织两份标本两块，活体组织两份标本两块，活体组织两份( ( ( (一份病理检查，一份镜检和培养一份病理检查，一份镜检和培养一份病理检查，一份镜检和培养一份病理检查，一份镜检和培养) ) ) )。4 4 4 4严格无菌操作严格无菌操作严格无菌操作严格无菌操作 并进行消毒处理，尤其是采集血液和脑脊并进行消毒处理，尤其是采集血液和脑脊并进行消毒处理，尤其是采集血液和脑脊并进行
16、消毒处理，尤其是采集血液和脑脊液标本，要避免污染杂菌。液标本，要避免污染杂菌。液标本，要避免污染杂菌。液标本，要避免污染杂菌。5 5 5 5采集标本立即送检采集标本立即送检采集标本立即送检采集标本立即送检 深部真菌标本最长不得超过深部真菌标本最长不得超过深部真菌标本最长不得超过深部真菌标本最长不得超过2h2h2h2h。2024/9/182024/9/18;. ;.1818 检验程序检验程序P354P354检验方法检验方法n n直接检查不染色和染色镜检直接检查不染色和染色镜检直接检查不染色和染色镜检直接检查不染色和染色镜检 2024/9/182024/9/18;. ;.1919n n培养检查法培
17、养检查法培养检查法培养检查法培养基的选择培养基的选择培养基的选择培养基的选择培养方法：直接法、试管法、大培养、小培养培养方法：直接法、试管法、大培养、小培养培养方法：直接法、试管法、大培养、小培养培养方法：直接法、试管法、大培养、小培养n n真菌的鉴定真菌的鉴定真菌的鉴定真菌的鉴定生化反应生化反应用于主要深部感染真菌如假丝酵母菌、隐球菌等。用于主要深部感染真菌如假丝酵母菌、隐球菌等。用于主要深部感染真菌如假丝酵母菌、隐球菌等。用于主要深部感染真菌如假丝酵母菌、隐球菌等。1.1.糖糖( (醇醇) )类发酵试验类发酵试验 3737孵育，观察糖发酵情况。孵育，观察糖发酵情况。2.2.同化碳源试验同化
18、碳源试验 含菌生理盐水与已融化的固体同化碳源培养含菌生理盐水与已融化的固体同化碳源培养 基基(45)(45)混合，然后在培养基上分别加糖，置混合，然后在培养基上分别加糖，置2525孵育观察孵育观察 结果。若结果。若24h24h后无变化可重复加糖。如能同化周围有生长圈，后无变化可重复加糖。如能同化周围有生长圈， 否则无生长。否则无生长。 3.3.同化氮源试验同化氮源试验 同化碳源试验相同，但需用无氮源的培养基，不要加糖类，而加入硝酸钾。同化碳源试验相同，但需用无氮源的培养基，不要加糖类，而加入硝酸钾。4.4.明胶液化试验、尿素分解试验、测定淀粉样化合物明胶液化试验、尿素分解试验、测定淀粉样化合物
19、5.5.分解牛乳试验分解牛乳试验2024/9/182024/9/18;. ;.2020n n抗原检测抗原检测抗原检测抗原检测常用的方法有胶乳凝集试验、常用的方法有胶乳凝集试验、常用的方法有胶乳凝集试验、常用的方法有胶乳凝集试验、ELISAELISAELISAELISA、半定量放射免疫法。均、半定量放射免疫法。均、半定量放射免疫法。均、半定量放射免疫法。均应设对照，防止发生假阳性和假阴性。应设对照，防止发生假阳性和假阴性。应设对照，防止发生假阳性和假阴性。应设对照，防止发生假阳性和假阴性。n n动物实验动物实验动物实验动物实验实验的目的是分离病原性真菌、确定真菌菌种的致病性、研究实验的目的是分离
20、病原性真菌、确定真菌菌种的致病性、研究实验的目的是分离病原性真菌、确定真菌菌种的致病性、研究实验的目的是分离病原性真菌、确定真菌菌种的致病性、研究药物对真菌的作用等。如假丝酵母菌接种家兔或小白鼠，肾脏药物对真菌的作用等。如假丝酵母菌接种家兔或小白鼠，肾脏药物对真菌的作用等。如假丝酵母菌接种家兔或小白鼠，肾脏药物对真菌的作用等。如假丝酵母菌接种家兔或小白鼠，肾脏明显肿胀，肾皮质部位有白色脓疡。明显肿胀，肾皮质部位有白色脓疡。明显肿胀，肾皮质部位有白色脓疡。明显肿胀，肾皮质部位有白色脓疡。n n核酸检测核酸检测核酸检测核酸检测从核酸碱基从核酸碱基从核酸碱基从核酸碱基G+C molG+C molG+
21、C molG+C mol分析、限制性片段长度多态性分析、限制性片段长度多态性分析、限制性片段长度多态性分析、限制性片段长度多态性(RFLP)(RFLP)(RFLP)(RFLP)、SouthernSouthernSouthernSouthern印迹分析到脉冲场凝胶电泳印迹分析到脉冲场凝胶电泳印迹分析到脉冲场凝胶电泳印迹分析到脉冲场凝胶电泳(PFGE)(PFGE)(PFGE)(PFGE)、PCRPCRPCRPCR指纹、随机指纹、随机指纹、随机指纹、随机扩增多态性扩增多态性扩增多态性扩增多态性DNA(RAPD)DNA(RAPD)DNA(RAPD)DNA(RAPD)以及以及以及以及DNADNADNAD
22、NA特殊片段测序等。特殊片段测序等。特殊片段测序等。特殊片段测序等。 2024/9/182024/9/18;. ;.2121 主要致病性真菌主要致病性真菌主要致病性真菌主要致病性真菌真菌按其侵犯部位和临床表现分为：真菌按其侵犯部位和临床表现分为：真菌按其侵犯部位和临床表现分为：真菌按其侵犯部位和临床表现分为： 表面感染真菌表面感染真菌表面感染真菌表面感染真菌 浅部感染真菌浅部感染真菌浅部感染真菌浅部感染真菌 皮肤癣真菌皮肤癣真菌皮肤癣真菌皮肤癣真菌 皮下组织真菌感染皮下组织真菌感染皮下组织真菌感染皮下组织真菌感染 深部感染真菌：深部感染真菌：深部感染真菌：深部感染真菌： 新生隐球菌新生隐球菌新
23、生隐球菌新生隐球菌 条件致病性真菌：假丝酵母菌条件致病性真菌：假丝酵母菌条件致病性真菌：假丝酵母菌条件致病性真菌：假丝酵母菌2024/9/182024/9/18;. ;.2222深部感染真菌深部感染真菌n n深部真菌是侵犯皮下组织和内脏，引起全身性感染的真菌。深部真菌是侵犯皮下组织和内脏，引起全身性感染的真菌。深部真菌是侵犯皮下组织和内脏，引起全身性感染的真菌。深部真菌是侵犯皮下组织和内脏，引起全身性感染的真菌。n n多数能引起慢性肉芽肿样炎症、溃疡及坏死等病变多数能引起慢性肉芽肿样炎症、溃疡及坏死等病变多数能引起慢性肉芽肿样炎症、溃疡及坏死等病变多数能引起慢性肉芽肿样炎症、溃疡及坏死等病变n
24、 n深部感染真菌分两大类：深部感染真菌分两大类：深部感染真菌分两大类：深部感染真菌分两大类： 1. 1. 1. 1. 致病性真菌：致病性真菌：致病性真菌：致病性真菌： 此类真菌在正常人体内部不存在，一旦侵入机体，即可致病，如组织胞浆菌、球孢子此类真菌在正常人体内部不存在，一旦侵入机体，即可致病，如组织胞浆菌、球孢子此类真菌在正常人体内部不存在，一旦侵入机体，即可致病，如组织胞浆菌、球孢子此类真菌在正常人体内部不存在，一旦侵入机体，即可致病，如组织胞浆菌、球孢子菌、芽生菌等，属外源性，我国少见；菌、芽生菌等，属外源性，我国少见；菌、芽生菌等，属外源性，我国少见；菌、芽生菌等，属外源性，我国少见；
25、2. 2. 2. 2. 条件致病性真菌：条件致病性真菌：条件致病性真菌：条件致病性真菌： 是人体正常菌群的成员，当机体抵抗力下降时才致病，如新型隐球菌、白色念珠菌、曲是人体正常菌群的成员，当机体抵抗力下降时才致病，如新型隐球菌、白色念珠菌、曲是人体正常菌群的成员，当机体抵抗力下降时才致病，如新型隐球菌、白色念珠菌、曲是人体正常菌群的成员，当机体抵抗力下降时才致病，如新型隐球菌、白色念珠菌、曲霉菌和毛霉菌等。霉菌和毛霉菌等。霉菌和毛霉菌等。霉菌和毛霉菌等。2024/9/182024/9/18;. ;.2323假丝酵母菌俗称念珠菌，有假丝酵母菌俗称念珠菌，有8181个种，其中有个种，其中有1111
26、种对人有致病种对人有致病性：白假丝酵母菌、为最常见的致病菌。此外，热带假丝酵母性：白假丝酵母菌、为最常见的致病菌。此外，热带假丝酵母菌、克柔假丝酵母菌和光滑假丝酵母菌也较多引起疾病。菌、克柔假丝酵母菌和光滑假丝酵母菌也较多引起疾病。白假丝酵母菌白假丝酵母菌白假丝酵母菌白假丝酵母菌（canidia Albicanscanidia Albicans）又称）又称白色念白色念白色念白色念珠菌珠菌珠菌珠菌，广泛存在于自然界，也存在于正常人，广泛存在于自然界，也存在于正常人口腔，上呼吸道，肠道及阴道，一般在正常机口腔，上呼吸道，肠道及阴道，一般在正常机体中数量少，不引起疾病体中数量少，不引起疾病 。为条件
27、致病性真为条件致病性真为条件致病性真为条件致病性真菌。菌。菌。菌。2024/9/182024/9/18;. ;.24241 1微生物特性微生物特性微生物特性微生物特性 白假丝酵母菌呈圆形或卵圆形，直径白假丝酵母菌呈圆形或卵圆形，直径白假丝酵母菌呈圆形或卵圆形，直径白假丝酵母菌呈圆形或卵圆形，直径2-42-42-42-4 m m m m。革。革。革。革兰阳性。出芽方式繁殖，在组织内可见芽生孢子、兰阳性。出芽方式繁殖，在组织内可见芽生孢子、兰阳性。出芽方式繁殖，在组织内可见芽生孢子、兰阳性。出芽方式繁殖，在组织内可见芽生孢子、假菌丝，孢子可伸长成芽管，如不与母细胞脱离假菌丝，孢子可伸长成芽管，如不
28、与母细胞脱离假菌丝，孢子可伸长成芽管，如不与母细胞脱离假菌丝，孢子可伸长成芽管，如不与母细胞脱离而形成假菌丝。而形成假菌丝。而形成假菌丝。而形成假菌丝。2024/9/182024/9/18;. ;.2525营养要求不高，在普通琼脂、血琼脂、和沙保培养基营养要求不高，在普通琼脂、血琼脂、和沙保培养基营养要求不高，在普通琼脂、血琼脂、和沙保培养基营养要求不高，在普通琼脂、血琼脂、和沙保培养基均生长。需氧，室温或均生长。需氧，室温或均生长。需氧，室温或均生长。需氧，室温或37373737，甚至，甚至，甚至，甚至42424242生长良好。菌生长良好。菌生长良好。菌生长良好。菌落呈酵母样，落呈酵母样，落
29、呈酵母样，落呈酵母样，有大量向下生长的营养假菌丝，有大量向下生长的营养假菌丝，有大量向下生长的营养假菌丝，有大量向下生长的营养假菌丝，表面光表面光表面光表面光滑，呈灰白色或奶油色，有酵母味，如时间长，菌落滑，呈灰白色或奶油色，有酵母味，如时间长，菌落滑，呈灰白色或奶油色，有酵母味，如时间长，菌落滑，呈灰白色或奶油色，有酵母味，如时间长，菌落增大成蜂窝状。在玉米粉吐温增大成蜂窝状。在玉米粉吐温增大成蜂窝状。在玉米粉吐温增大成蜂窝状。在玉米粉吐温-80-80-80-80培养基中可长出厚膜培养基中可长出厚膜培养基中可长出厚膜培养基中可长出厚膜孢子。孢子。孢子。孢子。沙沙氏氏斜斜面面普通平板普通平板血
30、平板血平板2024/9/182024/9/18;. ;.2626条件致病条件致病：皮肤粘膜感染皮肤粘膜感染 鹅口疮鹅口疮，阴道炎，阴道炎内脏感染：肺炎、关节炎、膀胱炎，肾盂肾炎内脏感染：肺炎、关节炎、膀胱炎，肾盂肾炎中枢神经感染：脑膜（脑）炎、脑脓肿中枢神经感染：脑膜（脑）炎、脑脓肿2致病性和免疫性致病性和免疫性本菌可侵犯人体许多部位，本菌可侵犯人体许多部位，机体也可它产生的免疫力机体也可它产生的免疫力过敏过敏2024/9/182024/9/18;. ;.27273 3 3 3微生物检验微生物检验微生物检验微生物检验 1.1.1.1.标本采集：所致疾病不同，取不同标本。标本采集：所致疾病不同，
31、取不同标本。标本采集：所致疾病不同，取不同标本。标本采集：所致疾病不同，取不同标本。2.2.2.2.检验程序检验程序检验程序检验程序P354P354P354P3543.3.3.3.检验方法及鉴定检验方法及鉴定检验方法及鉴定检验方法及鉴定1 1）直直直直接接接接显显显显微微微微镜镜镜镜检检检检查查查查：取取取取脓脓脓脓汁汁汁汁、痰痰痰痰和和和和局局局局部部部部炎炎炎炎症症症症性性性性分分分分泌泌泌泌物物物物直直直直接接接接涂涂涂涂片片片片，有有有有些些些些标标标标本本本本需需需需用用用用KOHKOH先先先先消消消消化化化化，革革革革兰兰兰兰染染染染色色色色后后后后镜镜镜镜检检检检，显显显显微微微
32、微镜镜镜镜见见见见到到到到革革革革兰兰兰兰阳阳阳阳性性性性( (着着着着色色色色不不不不均均均均匀匀匀匀) )、圆圆圆圆形形形形或或或或卵卵卵卵圆圆圆圆形形形形菌菌菌菌体体体体或或或或孢孢孢孢子子子子及及及及假假假假菌菌菌菌丝丝丝丝，厚膜孢子较少见。厚膜孢子较少见。厚膜孢子较少见。厚膜孢子较少见。2024/9/182024/9/18;. ;.28282 2 2 2）培养检查：将标本接种在沙氏培养基上，）培养检查：将标本接种在沙氏培养基上，）培养检查：将标本接种在沙氏培养基上，）培养检查：将标本接种在沙氏培养基上，25252525或或或或37373737培培培培养养养养1 1 1 12d2d2d
33、2d后，可出现奶油色类酵母型菌落。镜检可见假后，可出现奶油色类酵母型菌落。镜检可见假后，可出现奶油色类酵母型菌落。镜检可见假后，可出现奶油色类酵母型菌落。镜检可见假菌丝和芽生孢子。菌丝和芽生孢子。菌丝和芽生孢子。菌丝和芽生孢子。2024/9/182024/9/18;. ;.29293)3)鉴定试验鉴定试验鉴定试验鉴定试验n n芽芽芽芽管管管管形形形形成成成成试试试试验验验验：将将将将假假假假丝丝丝丝酵酵酵酵母母母母菌菌菌菌接接接接种种种种于于于于0.20.20.5ml0.5ml血血血血清清清清中中中中，3737孵孵孵孵育育育育1.51.5h h观观观观察察察察有有有有无无无无芽芽芽芽管形成。白
34、假丝酵母菌可形成芽管，其他假丝酵母菌不形成芽管。管形成。白假丝酵母菌可形成芽管，其他假丝酵母菌不形成芽管。管形成。白假丝酵母菌可形成芽管，其他假丝酵母菌不形成芽管。管形成。白假丝酵母菌可形成芽管，其他假丝酵母菌不形成芽管。芽管芽管芽管芽管芽管芽管2024/9/182024/9/18;. ;.3030n n厚膜孢子形成试验：厚膜孢子形成试验：厚膜孢子形成试验：厚膜孢子形成试验：将假丝酵母菌接种于玉米粉培养基将假丝酵母菌接种于玉米粉培养基将假丝酵母菌接种于玉米粉培养基将假丝酵母菌接种于玉米粉培养基25252525孵育孵育孵育孵育1-2d1-2d1-2d1-2d后，白假丝酵母菌在菌丝顶端、侧缘或中间
35、形成厚后，白假丝酵母菌在菌丝顶端、侧缘或中间形成厚后，白假丝酵母菌在菌丝顶端、侧缘或中间形成厚后，白假丝酵母菌在菌丝顶端、侧缘或中间形成厚膜孢子。膜孢子。膜孢子。膜孢子。 厚膜孢子厚膜孢子2024/9/182024/9/18;. ;.3131n n糖同化和糖同化和糖同化和糖同化和糖发酵糖发酵糖发酵糖发酵试验：试验：试验：试验： 凡发酵某种糖一定能同化该糖，故只需做那些不发凡发酵某种糖一定能同化该糖，故只需做那些不发酵糖的同化试验。将假丝酵母菌接种糖发酵管，酵糖的同化试验。将假丝酵母菌接种糖发酵管，2525孵孵育，一般观察育，一般观察2 23d3d，对不发酵或弱发酵管可延长至，对不发酵或弱发酵管
36、可延长至10d10d或或2 24 4周。观察有无酵母生长或液体培养基是否变混周。观察有无酵母生长或液体培养基是否变混浊。现在商品化的产色培养基可快速鉴定白假丝酵母菌浊。现在商品化的产色培养基可快速鉴定白假丝酵母菌和其他假丝酵母菌。和其他假丝酵母菌。2024/9/182024/9/18;. ;.3232n nTZCTZCTZCTZC试验试验试验试验：将白色念珠菌接种于含将白色念珠菌接种于含将白色念珠菌接种于含将白色念珠菌接种于含0.0050.0050.0050.005氯化三本四氮唑的沙保氯化三本四氮唑的沙保氯化三本四氮唑的沙保氯化三本四氮唑的沙保培养基中，经培养基中，经培养基中，经培养基中，经2
37、222222225252525，2424242448h48h48h48h培养，白色念珠菌不培养，白色念珠菌不培养，白色念珠菌不培养，白色念珠菌不变色或仅淡红色，其他念珠菌或酵母菌呈红色或深红变色或仅淡红色，其他念珠菌或酵母菌呈红色或深红变色或仅淡红色，其他念珠菌或酵母菌呈红色或深红变色或仅淡红色，其他念珠菌或酵母菌呈红色或深红色色色色( ( ( (被还原为红色的三苯甲被还原为红色的三苯甲) ) 。n n血清学试验：取病人血清作血清学试验：取病人血清作血清学试验：取病人血清作血清学试验：取病人血清作ELISAELISA、免疫印迹法等检测白假丝酵母菌抗原。、免疫印迹法等检测白假丝酵母菌抗原。、免疫
38、印迹法等检测白假丝酵母菌抗原。、免疫印迹法等检测白假丝酵母菌抗原。n n核酸检测：用核酸检测：用核酸检测：用核酸检测：用PCRPCR法将白假丝酵母菌法将白假丝酵母菌法将白假丝酵母菌法将白假丝酵母菌DNADNA分子扩增后以分子探针检测，具有较好的敏性和分子扩增后以分子探针检测，具有较好的敏性和分子扩增后以分子探针检测，具有较好的敏性和分子扩增后以分子探针检测，具有较好的敏性和特异性。特异性。特异性。特异性。n n动物试验动物试验动物试验动物试验 ：2024/9/182024/9/18;. ;.3333新型隐球菌新型隐球菌新型隐球菌新型隐球菌n n新型隐球菌又名溶组织酵母菌，是土壤，鸽类，牛乳、水
39、果等的腐生菌，也可新型隐球菌又名溶组织酵母菌，是土壤，鸽类，牛乳、水果等的腐生菌，也可存在人口腔中。存在人口腔中。n n可侵犯人和动物，一般为外源性感染，但也可能为内源性感染，对人类而言，可侵犯人和动物，一般为外源性感染，但也可能为内源性感染，对人类而言，它通常是条件致病菌。它通常是条件致病菌。 2024/9/182024/9/18;. ;.3434n n较大球形，直径可达较大球形，直径可达5 520um20um，n n有肥厚的荚膜，折光性强，一般染料不易着色，难以发现，称隐球菌，有肥厚的荚膜，折光性强，一般染料不易着色，难以发现，称隐球菌，n n用墨汁阴性显影法镜检用墨汁阴性显影法镜检 ，可
40、见到透明荚膜包裹着菌细胞，可见到透明荚膜包裹着菌细胞，n n菌细胞常有出芽，但不生菌细胞常有出芽，但不生 成假菌丝。成假菌丝。 生物学特性生物学特性生物学特性生物学特性2024/9/182024/9/18;. ;.3535n n在沙保氏琼脂及血琼脂培养基上，于在沙保氏琼脂及血琼脂培养基上，于2525及及3737皆可生长，而非病原性隐球菌在皆可生长，而非病原性隐球菌在3737不能繁殖。不能繁殖。n n酵母型菌落，呈白色。酵母型菌落，呈白色。n n本菌能分解尿素，以本菌能分解尿素，以 此与酵母菌和念珠菌鉴别。此与酵母菌和念珠菌鉴别。 2024/9/182024/9/18;. ;.3636致病性致病
41、性致病性致病性n n本菌大多由呼吸道转入，在肺部引起轻度炎症，或隐性传染。本菌大多由呼吸道转入，在肺部引起轻度炎症，或隐性传染。n n侵犯中枢神经系统，发生脑膜炎、脑炎、脑肉芽肿等。侵犯中枢神经系统，发生脑膜炎、脑炎、脑肉芽肿等。n n此外可侵入骨骼、肌肉、淋巴结、皮肤粘膜引起慢性炎症和脓肿。此外可侵入骨骼、肌肉、淋巴结、皮肤粘膜引起慢性炎症和脓肿。 2024/9/182024/9/18;. ;.3737微生物学检验微生物学检验1 1直接镜检：常用墨汁涂片法。直接镜检：常用墨汁涂片法。2 2分离培养：分离培养： 在沙保培养基上，室温、在沙保培养基上，室温、3723723 3天即可长出典型天即可
42、长出典型酵母型菌落。有荚膜者菌落粘稠。酵母型菌落。有荚膜者菌落粘稠。 2024/9/182024/9/18;. ;.38383 3糖糖同同化化及及发发酵酵试试验验：本本本本菌菌菌菌不不不不发发发发酵酵酵酵各各各各种种种种糖糖糖糖类类类类，但但能能同同化化葡葡萄萄糖糖、麦麦芽芽糖糖、蔗蔗糖糖、半乳糖、肌醇，不同化乳糖。半乳糖、肌醇，不同化乳糖。4 4酚酚氧氧化化酶酶试试验验：在在含含多多巴巴橘橘橼橼酸酸铁铁和和咖咖啡啡酸酸培培养养基基中中，经经天天培培养养，新型隐球菌出现新型隐球菌出现棕黑色菌落棕黑色菌落棕黑色菌落棕黑色菌落。尿素酶试验：新型隐球菌产生尿素酶，在尿素培养基（含尿素及酚红指示剂）尿
43、素酶试验：新型隐球菌产生尿素酶，在尿素培养基（含尿素及酚红指示剂）中分解尿素形成氨和中分解尿素形成氨和COCO2 2，以致培养基的，以致培养基的pHpH值升高，使酚红由黄变为粉红色为阳值升高，使酚红由黄变为粉红色为阳性，而白色念珠菌为阴性。性，而白色念珠菌为阴性。 2024/9/182024/9/18;. ;.3939谢谢谢谢谢谢谢谢2024/9/182024/9/18;. ;.4040临床标本临床标本临床标本临床标本 直接检查直接检查直接检查直接检查 分离培养分离培养分离培养分离培养 其它方法其它方法其它方法其它方法核酸核酸核酸核酸 直接直接直接直接 2525 35 35 检测检测检测检测 检测检测检测检测 动物动物动物动物检测检测检测检测 镜检镜检镜检镜检 抗原抗原抗原抗原 抗体抗体抗体抗体 试验试验试验试验 菌落观察菌落观察菌落观察菌落观察 固定标固定标固定标固定标 墨汁墨汁墨汁墨汁 KOHKOH法法法法 本染色本染色本染色本染色 染色染色染色染色 镜检镜检镜检镜检 小培养小培养小培养小培养 生化生化生化生化 荧荧荧荧 革革革革 P P 亚亚亚亚 反应反应反应反应 光光光光 兰兰兰兰 A A 甲甲甲甲 S S 基基基基 蓝蓝蓝蓝
