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1、 实验十二实验十二APTT、PT、TT测定测定目的:掌握实验原理目的:掌握实验原理 操作方法操作方法 临床意义临床意义 质量控制质量控制临床血液学教研室临床血液学教研室 王王 侠侠.一、实验原理一、实验原理APTT Ca2+脑磷脂脑磷脂白陶土白陶土 Ca2+脑磷脂脑磷脂部分凝部分凝血活酶血活酶PT组织因子组织因子Ca2+ 磷脂磷脂凝血酶凝血酶TT. 二、资料二、资料 1、半自动血凝仪、水浴箱、塑料试、半自动血凝仪、水浴箱、塑料试管、管、 秒表秒表 2、 APTT: 4%白陶土白陶土-脑磷脂悬脑磷脂悬液液 0.025mol/L氯化钙氯化钙溶液溶液 PT :0.025mol/L氯化钙凝氯化钙凝血活
2、酶溶液血活酶溶液 TT:凝血酶:凝血酶 3、正常对照血浆、受检血浆、正常对照血浆、受检血浆 . 三、操作三、操作 (一(一1APTT手工法手工法(试管法)试管法) 血血浆浆100L APTT试试剂剂100L +CaCl2 100L (混匀计时)(混匀计时) 结结果果观观察察:缓缓慢慢倾倾斜斜试试管管,观观察察液液体体流流动动状状态,流动态,流动 停止终止计时。停止终止计时。.平皿法平皿法(试剂和血浆用量同试剂和血浆用量同)结结果果观观察察:不不断断来来回回挑挑动动混混合合物物,观观察察血血浆浆纤纤维的生成,观维的生成,观 察察到到开开始始有有纤纤维维丝丝产产生生时时终终止止计计时。时。 参考值
3、参考值 23 36s 3737水浴水浴5min37温浴. PT :磁珠磁珠+血浆血浆50L + PT试剂试剂100L37) 参考值参考值 10. 1s TT:磁珠磁珠+血浆血浆100L + TT试剂试剂100L室温)室温) 参考值参考值 1s 37预温预温3min(二(二PT、TT(半自动血凝仪法)半自动血凝仪法)3737预温预温2min.(三报告方式(三报告方式: : APTT: S( APTT: S(参考范围参考范围: ): ) 参比血浆参比血浆: S(: S(手工法手工法) ) PT: S( PT: S(参考范围参考范围: ): ) 参比血浆参比血浆: S : S TT: S( TT:
4、S(参考范围参考范围: ): ) 参比血浆参比血浆 : S : S.四、临床意义四、临床意义 APTT PT TT延长延长因子因子VIII、IX、XI活性减低活性减低因子因子II、V、VII、X、Fg活性减低活性减低Fg异常、循环中异常、循环中抗凝物质增多抗凝物质增多缩短缩短高凝状态高凝状态高凝状态高凝状态少见少见监测监测指标指标口服肝素抗凝药物监口服肝素抗凝药物监测测口服双香豆素类抗凝药口服双香豆素类抗凝药物监测物监测链激酶、尿激酶链激酶、尿激酶作溶栓治疗时的作溶栓治疗时的监测监测.五、本卷须知五、本卷须知 1 1、标本的采集和处理,标本放置不应超、标本的采集和处理,标本放置不应超过过2h2
5、h 2 2、收到后注意观察标本,分离血浆注意、收到后注意观察标本,分离血浆注意离心离心 速度和时间速度和时间 3 3、操作要准确、操作要准确 4 4、使用试剂前应仔细阅读说明书、使用试剂前应仔细阅读说明书.37试剂位试剂位室温试剂孔室温试剂孔37加样器孔加样器孔 37带搅拌试剂孔带搅拌试剂孔室温加样器孔室温加样器孔联动加样枪联动加样枪.(一)(一) APTT:手工法手工法(试管法)试管法) 血血浆浆100L APTT试试剂剂100L + CaCl2 100L (混匀计时)(混匀计时) 结结果果观观察察:不不断断来来回回挑挑动动混混合合物物,观观察察血血浆浆纤纤维维的的生生成成,观观察到开始有纤维丝产生时终止计时察到开始有纤维丝产生时终止计时 (二(二) PT:半自动血凝仪法半自动血凝仪法 磁磁珠珠+血血浆浆50L PT试试剂剂各各100L (37) (三(三TT:半自动血凝仪半自动血凝仪 磁珠磁珠 +血浆血浆100L + TT试剂试剂100L(室温室温)3737水浴水浴5min37温浴37预温预温3min3737预温预温2min2min.思考题:思考题:本次实验课的关键环节是什么?本次实验课的关键环节是什么?.