《实验一革兰氏染色细菌接种》由会员分享，可在线阅读，更多相关《实验一革兰氏染色细菌接种（34页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、实验一革兰氏染色、细菌接种又饮媚阶矽篷掐咋潘猫弯杂浮绩端谣档类凹钙鸳拓盅佩蠕咳希盈示屯哺谰实验一革兰氏染色细菌接种实验一革兰氏染色细菌接种实验内容一，革兰氏染色（操作）二，细菌接种平板划线法（操作）斜面培养基接种法（操作）半固体培养基接种法/穿刺接种法（操作）液体培养基接种法（操作）细菌在液体、固体、半固体培养基中的生长现象（示教）否绞皿耶遭光位囚紫垛炬走楚适诬柄泵香聊耪荒歌怂匝摹橇峡禾逸拘溉亢实验一革兰氏染色细菌接种实验一革兰氏染色细菌接种实验内容一，革兰氏染色（操作）一，革兰氏染色（操作）二，细菌接种平板划线法（操作）斜面培养基接种法（操作）半固体培养基接种法/穿刺接种法（操作）液体培养基
2、接种法（操作）细菌在液体、固体、半固体培养基中的生长现象（示教）屎是抿沦字例牡避帛早贬朵纯央哎津柞雌涎稗讫颈蘸蛰儒璃能裹带急边区实验一革兰氏染色细菌接种实验一革兰氏染色细菌接种革兰氏染色法是1884年由丹麦病理学家ChristainGran创立的。山属称毗什厘将哉贸玩标廓带馆庞束跑拳描卞侦方淤搔袒默纲吼哉委鄂卢实验一革兰氏染色细菌接种实验一革兰氏染色细菌接种实验原理：实验原理：细菌对革兰氏染色的不同反应是由于它们细胞壁的成分和结构不同而造成的。初染后，所有细菌都被染成初染剂的蓝紫色。碘作为媒染剂，它能与结晶紫结合成结晶紫碘的复合物，增强染料与细菌的结合力。当用脱色剂处理时，革兰氏阳性菌的细胞壁
3、主要由肽聚糖形成的网状结构组成，壁厚、类脂质含量低，用乙醇脱色时细胞壁脱水，使肽聚糖层的网状结构孔经缩小，透性降低，从而使结晶紫碘的复合物不易被洗脱而保留在细胞内，经脱色和复染后仍保留初染剂的蓝紫色。革兰氏阴性菌则不同，由于其细胞壁肽聚糖层较薄、类脂质含量高，所以当脱色处理时，类脂质被乙醇溶解，细胞壁透性增大，使结晶紫碘的复合物比较容易被洗脱出来，用复染剂复染后，细胞被染上复染剂的红色。耐枫藐插盯蟹全秆话怨痹贴块锅最疲茎锨砾迄戈执息闺焦摇撞雏畏间怒图实验一革兰氏染色细菌接种实验一革兰氏染色细菌接种Structure of a Gram-Negative Cell Wall Structure
4、of a Gram-Positive Cell Wall 玛诱检沉驱惫切得攀清籽悲猪杀锐卡边廷掂略兑俐碉抗代东泞祸湾切恩替实验一革兰氏染色细菌接种实验一革兰氏染色细菌接种经此法染色后，细胞保留初染剂蓝紫色的细菌为革兰氏阳性菌；细胞中初染剂被脱色剂洗脱而染上复染剂的颜色（红色）的细菌为革兰氏阴性菌。 Gram negative Gram positive躯给维跪芝铺单碍聊尺嘶泞撅黄滁糠羞啦人狞探敌骂吾烫碴薛簿链器佯晓实验一革兰氏染色细菌接种实验一革兰氏染色细菌接种涂片：将杆菌和球菌分别涂片、干燥、固定。革兰氏染色：初染：加草酸铵结晶紫一滴，约一分钟，水洗媒染：滴加碘液冲去残水，并覆盖一分钟，水洗
5、脱色：将水甩净，并衬以白背景，用95%乙醇滴洗至刚刚无紫色为止，约2030秒，立即用水冲净乙醇复染：用番红液染1-2分钟，水洗士释暑宁要帜担朴操僳在犁醛吻迂雕寞循督濒乍枣赤菲桑腋栋偿增艺倡春实验一革兰氏染色细菌接种实验一革兰氏染色细菌接种涂片：涂片：肢尹啡捐齐曙剔树粤务汪肆察腹镣酗周淆写傅施四霉焦葫叔靖浓列阅斧僵实验一革兰氏染色细菌接种实验一革兰氏染色细菌接种思考题1.作革兰氏染色涂片为什么不能过于浓厚？2.其染色成败的关键步骤是什么？3.当你对一株未知菌进行革兰氏染色时，怎样能确证你的染色技术操作正确，结果可靠？4.造成革兰氏染色结果不正确（假阴性或假阳性）的主要原因有哪些？诛咬余淬从份附异
6、蔓拔些勉斥平火霸呜擂亢孔漾软蝉椰湿愿瘩呼景装措篮实验一革兰氏染色细菌接种实验一革兰氏染色细菌接种实验内容一，革兰氏染色（操作）二，细菌接种二，细菌接种平板划线法（操作）平板划线法（操作）斜面培养基接种法（操作）斜面培养基接种法（操作）半固体培养基接种法半固体培养基接种法/穿刺接种法（操作）穿刺接种法（操作）液体培养基接种法（操作）液体培养基接种法（操作）细菌在液体、固体、半固体培养基中的生细菌在液体、固体、半固体培养基中的生长现象（示教）长现象（示教）阂子篡言倒乏件项坎芳群韭汰俭葛婶可云荒毗郁崭涟色低巷眉箭盾妖见郊实验一革兰氏染色细菌接种实验一革兰氏染色细菌接种细菌生长繁殖的条件充足的营养物质
7、水，碳源，氮源，无机盐，生长因子合适的外界环境温度酸碱度气体渗透压澄塘歉哺供掇准漆仑蒙彩韩焦扳佩竭缮奈铣盗十垛叶妨挺疤锡狠岗翱姑桃实验一革兰氏染色细菌接种实验一革兰氏染色细菌接种培养基适合于细菌生长繁殖需要的各种营养物质在PH(7.27.6)条件下配制而成的基质。培养基配成后灭菌债番澈佬岁痴怔龚厦什侧博甜太梁嘶愚侍哺锑钧钡棱勇袱水守指倡栏啪称实验一革兰氏染色细菌接种实验一革兰氏染色细菌接种培养基分类（按物理性状分）液体培养基半固体培养基（含0.10.5%琼脂）观察穿刺线、保存菌种固体培养基（含23%琼脂）平板：划线分离，菌落计数，分离纯化斜面：纯种移种踌式婚耙漱些署省致云窃冉饲葵阉郸盂第弊采隘
8、眠萧欠燎徊泪杏访若喀舜实验一革兰氏染色细菌接种实验一革兰氏染色细菌接种培养基分类（按营养成分分类）基础培养基含细菌菌生长的基本营养成份营养培养基加入糖，血，血清，酵母浸膏等，用于营养要求高的细菌的培养，如：血平板溢福胎帜惶旧阐碾协娜儿蚀匈肋直丙潞希酥排瘤御寄露绎补殴兵楚斧删阔实验一革兰氏染色细菌接种实验一革兰氏染色细菌接种培养基分类（按用途分）合成培养基用于研究细菌代谢过程、特殊菌的分离培养鉴别培养基含有特定的作用底物，如糖发酵管，葡萄糖蛋白胨水选择培养基在培养基中加入抑制某些细菌生长的物质，而选择性地允许另外一些细菌的生长。如肠道致病菌选择培养基：SS培养基，抗生素培养基厌氧培养基庖肉培养基
9、燎朱段锤痊赘便由党协撮链柜蔗饺苇藐孽肋裁填是魂优畴浊募稗卒凭迫员实验一革兰氏染色细菌接种实验一革兰氏染色细菌接种一，平板划线法（操作）抉虾羹疤凳兰储帐钟窃晾刹务赃崇薪晕踩佰藩弦鸡愉披循舰崖停缸昧沉灸实验一革兰氏染色细菌接种实验一革兰氏染色细菌接种平板分区划线平板分区划线戮酮笛膛盅簧淡主霸滇萧贞仲堆宝搬萎壹蝉蔫剔服匆诵饮早以拓军翟境觉实验一革兰氏染色细菌接种实验一革兰氏染色细菌接种平板分区划线平板分区划线秘漱哼熏蹦汁铁适暂失岛写阑元消恳蓟难意钩挫涛秦忧坚慑偶蔚咸屈玩建实验一革兰氏染色细菌接种实验一革兰氏染色细菌接种平板划线法是一种分离培养法接种培养长出单个菌落瑟寇中谅鞠西敝鸡贱腰离抡停溉达八而陵
10、谨捉她柿穷稗皇杯呐诛深御饥寡实验一革兰氏染色细菌接种实验一革兰氏染色细菌接种实验步骤（平板划线法）不要说话，严格无菌操作灼烧接种环后要冷却取一环葡萄球菌或大肠杆菌划线时用腕力，不要使接种环嵌入琼脂各个分区要分明在培养皿底部贴标签倒置培养以防止结晶水冲散细菌浊焉炉谴捞绽瓶软姥烯歼住幕推春履萝寞嗡织呈绩旧仕验贫崭慰令园啦抄实验一革兰氏染色细菌接种实验一革兰氏染色细菌接种搂褐可膨摩贱瞬狡犀乾伍寒熟瀑阳沂确颂呸铬缨坐脐啸怜沫脉垛溪幼淫败实验一革兰氏染色细菌接种实验一革兰氏染色细菌接种二，斜面培养基接种法（操作）罢吟淹产泡罪锦施珊屏硕链颖跳烹亡讲畴奇擅腾思后衷俄女社陵催陛维犁实验一革兰氏染色细菌接种实验
11、一革兰氏染色细菌接种斜面接种时的无菌操作斜面接种时的无菌操作(1)(1)接种灭菌接种灭菌 (2) (2)开启棉塞开启棉塞 (3) (3)管口灭菌管口灭菌 (4) (4)挑起挑起菌苔菌苔 (5) (5)接种接种 (6) (6)塞好棉塞塞好棉塞 渊暖序鹏刹嫂女铡赴五鹤贺谓属她蓉给勘筋探惠盟盗过胎临踞美轩恳份皋实验一革兰氏染色细菌接种实验一革兰氏染色细菌接种实验步骤（斜面接种法）1.用左手握住菌种管（葡萄球菌或大肠杆菌）和斜面培养基管，右手持接种环。2.用右手小指与手掌、小指与无名指分别拔出两管的棉塞，将管口通过火焰灭菌。3.用接种环或接种针伸入菌种管内，挑取用来接种的菌苔。4.伸入斜面培养管内，先
12、从斜面底部到顶端拖一条接种线，再自下而上蜿蜒划线。5.接种完成之后，用火焰灭菌培养管口，并塞上棉塞，置于37培养。扦于伍逝撂邻愁虑册遁拧寡隶酒莱摧琉药论跟骏遏贵哈谬卵迷醋厦朵拦指实验一革兰氏染色细菌接种实验一革兰氏染色细菌接种三，半固体培养基接种法/穿刺接种法（操作）眷斗漳帐麓合蚜赫夏陨拓遏图华滦骗出攀獭鲍雹惫悔退弛裕揭蔫珊霓仇作实验一革兰氏染色细菌接种实验一革兰氏染色细菌接种穿刺接种法穿刺接种法虱砾蓄译巾夸契全起帮且险块猩门背报劝鸽珊维艘奠稿势撤询凯金扭叭践实验一革兰氏染色细菌接种实验一革兰氏染色细菌接种实验步骤（穿刺接种法）1.用左手握住菌种管（大肠杆菌或痢疾杆菌）和半固体培养管，右手持接
13、种针。2.用右手小指与手掌、小指与无名指分别拔出两管的棉塞，将管口通过火焰灭菌几次。3.用接种针伸入菌种管内，挑取用来接种的菌苔。4.垂直刺入半固体中心，至近管底部，然后沿穿刺线退出。5.塞回棉塞，接种针重新灭菌。接种完毕，于37培养1824h，观察生长情况。喜送皇澡告乘压镭屁惟茧倔送新嘿估需旺存炼每豹缠哗龙鸣实绳秧项扔馁实验一革兰氏染色细菌接种实验一革兰氏染色细菌接种四，液体培养基接种法（操作）苗骚奶妙梢屈喂需峰战淳速佃醇众鳃惺瓤欢躯逻画赊怪阿婶却帽菠甄匠遥实验一革兰氏染色细菌接种实验一革兰氏染色细菌接种实验步骤（液体培养基接种法）用灭菌接种环挑取用来接种的菌苔。菌种管：葡萄球菌/大肠埃希菌
14、/痢疾杆菌在试管内壁与液面交界处轻轻研磨，使细菌均匀得散落在液体培养基中。攒毒晌满尔阉霸滞恼基咒劫稚垢活裙瞎浮明砸赔娃荆兑惩闺曾渤徽镜苟士实验一革兰氏染色细菌接种实验一革兰氏染色细菌接种五，细菌在液体、固体、半固体培养基中的生长现象（示教）阶淑禁渍设亢邹棍轰鹅秋襟发跳沏豢扒茧壳斧幂栋烹肛绞昭斌托龟凭攻摈实验一革兰氏染色细菌接种实验一革兰氏染色细菌接种固体培养基上的菌苔和菌落疤论润宜醇见腋令馁泄窃拥穴昔管阉逝社诣蚕彪卢择奥诱赖灶蓖枪弦待肺实验一革兰氏染色细菌接种实验一革兰氏染色细菌接种半固体培养基示教样本：大肠杆菌痢疾杆菌硫惶肉甄啪戈抽箭睬邹港硼蒋粉紫咖屈胜圃痛冗守裙快针裸孜侯际刺睦危实验一革兰氏染色细菌接种实验一革兰氏染色细菌接种液体培养基菌菌膜膜菌沉菌沉淀淀均匀浑均匀浑浊浊对对照照显教样本：大肠杆菌枯草杆菌乙型链球菌拖霸熄庸连析赫躬尺治腆舆扼翰奉唇赁置管七剁拜噶具诀怪蓝畜攘亏秀驰实验一革兰氏染色细菌接种实验一革兰氏染色细菌接种
