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1、干细胞及免疫细胞技术干细胞及免疫细胞技术刘小青刘小青 总经理博士教授总经理博士教授佰通生物科技佰通生物科技一、领军人才介绍一、领军人才介绍1997-20001997-2000:中科院生物物理所博士:中科院生物物理所博士2000-20062000-2006:美国哈佛大学医学院博士后及讲师:美国哈佛大学医学院博士后及讲师2007-20082007-2008:美国西南医学中心助理教授:美国西南医学中心助理教授2008-20092008-2009:葛兰素史克干细胞研发部副总监:葛兰素史克干细胞研发部副总监2009-2009-现在:同济大学教授国家现在:同济大学教授国家973973干细胞研究重大专项课题
2、组长干细胞研究重大专项课题组长2013-2013-现在:苏州佰通生物科技有限公司法人现在:苏州佰通生物科技有限公司法人/ /总经理总经理 2 2013: 013: 入选苏州吴中区领军人才及苏州市姑苏人才入选苏州吴中区领军人才及苏州市姑苏人才 2 2013013:入选上海市杨浦区海外高层次人才:入选上海市杨浦区海外高层次人才33103310计划计划主要成果:(1)在 Nature Genetics、 PNAS 等一系列国际权威期刊上发表了近 40 篇高引用率的文章,文章引用率累计2000多次; (2)申请发明专利12件,其中 8件已授权。刘小青干细胞的特性干细胞的特性二、干细胞研究背景二、干细胞
3、研究背景干细胞的主要应用干细胞的主要应用干细胞潜在的临床应用干细胞潜在的临床应用成体成体( (组织组织) )干细胞的研究概况干细胞的研究概况目前干细胞治疗现状n美国: 允许诊所做自体干细胞治疗或美容。n中国: 干细胞培养条件不规范,事故频繁。项目背景:项目背景: 干细胞在健康产业方面有很大的前景,但干细胞在体内干细胞在健康产业方面有很大的前景,但干细胞在体内含量很小,因此干细胞快速培养放大技术是干细胞研发及产含量很小,因此干细胞快速培养放大技术是干细胞研发及产业化的关键技术。业化的关键技术。u项目产品:项目产品:多种干细胞培养基及其衍生产品。多种干细胞培养基及其衍生产品。u项目市场开发与应用:
4、项目市场开发与应用:早期:干细胞基础研究早期:干细胞基础研究 (科研机构市场)(科研机构市场)中期:抗衰老应用中期:抗衰老应用 (养生和美容市场)(养生和美容市场)长期:干细胞临床的治疗长期:干细胞临床的治疗 (医疗市场)(医疗市场)三、干细胞快速扩增技术三、干细胞快速扩增技术u本项目采用自主知识产权的低血清培养技术或无血清替代物:1.高重现性,规模化生产;2.培养的干细胞扩增时间加快3-5倍;3.传代次数在5-10代以上,高于传统的3代的传代次数;4.细胞存活率提高30%以上。四、项目关键技术及创新点四、项目关键技术及创新点干细胞扩增技术是干细胞产业化的核心技术干细胞扩增技术是干细胞产业化的
5、核心技术技术路线技术路线人间充质干细胞的分子指纹图谱人间充质干细胞的分子指纹图谱mRNA profilingmiRNA profiling人间充质干细胞特异性高表达或低表达基因P 0.05Control0.5ng cocktail/ml添加物与干细胞增殖速度的线性关系 Cocktail (ng/ml) 干细胞潜能的完整性AdvCellAninternationalBrand HBMSC(p2)HUMSC(p2)HADMSC(p2)AdvCell干细胞培养基干细胞培养基AdvCell:细胞增殖速度比进口品牌快:细胞增殖速度比进口品牌快3-53-5倍倍HBMSC(p10,100)AdvCell:
6、:全能性及表面标志物完全保持全能性及表面标志物完全保持AdipocyteformationCellsortingbysurfacemarkerschondrogeniccellformation动员剂50-200 mL外周血CD34-细胞丢弃血浆保留造血干细胞造血干细胞富集(CD34+磁珠/专用仪器)4-7天悬浮培养1-3周1010细胞回输AdvCell 造血干细胞培养基AdvCell造血干细胞技术AdvCell 哺乳细胞快速扩增技术哺乳细胞快速扩增技术低血清培养基低血清培养基无血清培养基无血清培养基1.血清用量由传统的10%降低到5%,或无血清;2.由于单独使用全球最好的Life血清;3.无
7、细胞核型的改变;4.比常规培养基扩增速度快2-5倍以上:例如:Puma小型猪成纤维细胞:1)常规培养基:4周;2)AdvCell哺乳细胞快速扩增培养基:1-2周。AdvCell 免疫细胞培养基免疫细胞培养基1.适用细胞:适用细胞:T、NK、DCCIK2. 无血清培养基系列无血清培养基系列:优于Takara系列不带因子:300元500ml3. 优化培养基系列优化培养基系列: 1)优于Takara系列、AIMV、Xvivo2)等同Cellgenix.不带因子:800元500ml50-200 mL外周血非单核细胞丢弃血浆保留免疫细胞单核细胞富集(专用仪器)悬浮贴壁培养1-3周109-10细胞回输Ad
8、vCell 免疫细胞培养基AdvCell免疫免疫细胞技术免疫细胞扩增速度比较免疫细胞扩增速度比较扩增后的免疫细胞对肿瘤的抑制作用扩增后的免疫细胞对肿瘤的抑制作用CAR-T细胞治疗组NK细胞治疗组DC细胞治疗组CIK细胞治疗组AdvCell含酚红培养基系列DMEM高糖基本培养基间充质干细胞血清培养基脂肪干细胞血清培养基脐带干细胞血清培养基骨髓间充质干细胞血清培养基哺乳细胞快速扩增培养基间充质干细胞无血清培养基脂肪干细胞无血清培养基骨髓间充质干细胞无血清培养基脐带干细胞无血清培养基哺乳细胞快速扩增无血清培养基免疫细胞无血清培养基免疫细胞优化培养基造血干细胞无血清培养基造血干细胞无血清完全培养基CI
9、K细胞无血清培养基CIK细胞优化培养基DC细胞无血清培养基DC细胞优化培养基NK细胞无血清培养基NK细胞优化培养基T细胞无血清培养基T细胞优化培养基无酚红培养基系列DMEM 高糖无酚红基本培养基 间充质干细胞无酚红培养基 哺乳细胞快速扩增无酚红培养基 骨髓间充质干细胞无酚红培养基 脐带血干细胞无酚红培养基 脂肪干细胞无酚红培养基 间充质干细胞无酚红无血清培养基 造血干细胞无酚红无血清培养基 骨髓间充质干细胞无酚红无血清培养基 脐带干细胞无酚红无血清培养基 脂肪干细胞无酚红无血清培养基 造血干细胞无酚红无血清完全培养基哺乳细胞快速扩增无酚红无血清培养基免疫细胞无酚红无血清培养基免疫细胞无酚红优化
10、培养基CIK细胞无酚红无血清培养基CIK细胞无酚红优化培养基DC细胞无酚红无血清培养基DC细胞无酚红优化培养基NK细胞无酚红无血清培养基NK细胞无酚红优化培养基T细胞无酚红无血清培养基T细胞无酚红优化培养基分化培养基成骨分化培养基成脂分化培养基成软骨分化培养基成脂分化培养基组织细胞分离培养相关产品 细胞培养优化添加物 细胞无血清冻存液 组织细胞分离消化液 组织淋洗液 胰蛋白酶-EDTA溶液 青霉素/链霉素溶液 相关SCI研究论文nBrunnerD,FrankJ,ApplH,SchofflH,Pfaller,GstraunthalerG,Theserum-freemediainteractive
11、onlinedatabase.Altex27,1-10.nvanderValk,BrunnerD,SmetK,SvenningsenF,HoneggerP,KnudsenL,LindlT,NorabergJ,PriceA,ScarinoML,GstraunthalerG.OptimizationofchemicallydefinedcellculturemediaReplacingfetalbovineseruminmammalianinvitromethods.Toxicology In vitro.2010(24):1053-1063.nChenG,JinY,ShiX,QiuY,Zhang
12、Y,ZhangY,ChengM,WangX,ChenC,WuY,JiangF,ZhouH,FuQ,LiuX*.Adiposestemcell-basedtreatmentforacuteliverfailure.StemCellResearch&Therapy(InPress).nChenG,ShiX,SunC,LiM,ZhouQ,ZhangC,HuangJ,QiuY,WenX,ZhangY,ZhangY,YangS,LuL,ZhangJ,YuanQ,LuJ,XuG,JinZ,JiangC,YingM,LiuX.VEGF-mediatedproliferationofadiposetissue
13、-derivedstemcell.pLos One2013(8):e73673.nYuanMetal.Transplantationofneuralstemcellsoverexpressingglialcellline-derivedneurotrophicfactorenhancesAktandErk1/2signalingandneurogenesisinratsafterstroke.Chin Med J.2013;126(7):1302-9.nLiuY,LiS,YuanF,XiaJ,YuX,LiuX,YuG.Infrapatellarfatpadmaybebewithtendonre
14、pairingabilityandcloselyrelatedwiththedeveloppingprocessofpatellaBaja.Medical Hypotheses2011(77):620-3.nYangC,ZhouL,GaoX,ChenB,TuJ,SunH,LiuX,HeJ,LiuJ,YuanQ.Neuroprotectiveeffectsofbonemarrowmesenchymalstemcellsover-expressingGDNFonratswithintracerebralhemorrhageandneuronsexposedtohypoxia/reoxygenati
15、on.Neurosurgery2011(68):691-704.企业标准相关自我知识产权序序号号专利名称专利名称专利号专利号专利权属专利权属申请申请国家国家1一种干细胞培养基及其应用一种干细胞培养基及其应用201310146165.5专利权人专利权人/发明人发明人中国中国2一种干细胞培养基及其应用和干细胞培养方法一种干细胞培养基及其应用和干细胞培养方法201210557941.6刘小青:第一发明人刘小青:第一发明人中国中国3一种干细胞培养基及其应用和干细胞培养方法一种干细胞培养基及其应用和干细胞培养方法PCT/CN2013/071173刘小青:第一发明人刘小青:第一发明人PCT4A stem
16、cell culture medium and its applications as well as a stem cell culture methodUS Patent Application No.#13885000刘小青:第一发明人刘小青:第一发明人美国美国5一种免疫细胞培养基、培养方法及应用一种免疫细胞培养基、培养方法及应用201510132444.5刘小青:第一发明人刘小青:第一发明人中国中国“佰通生物”微信推广平台()BeforeAfter 2 weeks 干细胞美容干细胞美容After 5 weeks BeforeAfterBeforeAfter对男性性功能的改善目前干细胞及免疫细胞技术产业化方向1. 细胞培养基的规模化2. 个性化细胞美容与养生4. 联合医院及科研单位进行细胞治疗5. 个性化细胞文库政府资助政府资助1.国家973干细胞重大研究专项 2010-2014 (课题组长):500万 2011-2015 (研究骨干): 150万2. 国家985平台专项:200万3. 上海市转化医学平台:240万4. 上海浦江人才:20万5. 上海杨浦高层次人才3310计划:60万5. 国家自然科学基金(2个):140万6. 上海市海外高层次人才创业3310计划:60万7. 苏州吴中区领军人才:100万8. 苏州姑苏领军人才:200万谢谢关注!