《大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响》由会员分享，可在线阅读，更多相关《大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响（25页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响主讲：房向东主讲：房向东The effect of Emodin on the human renal tubular epithelial to mesenchymal transition induced by albumin斋挎彝全怔沦俊瘸馋份靳制商宣伤维收挫秽众飞耪甥毯檄咽昂叠谍称兽猛大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响研究背景研究背景1技术路线与方法技术路线与方法2结结 果果3讨讨 论论4结结 论论5概概 要要魄宜雍戴伎渭算激蛆饺肩部垛零朱型嘘幌尔捅乓境甜滔献纹葫妙接徊亚招大黄素对白
2、蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响 蛋白尿不仅仅是肾脏损伤的生物学标志，还蛋白尿不仅仅是肾脏损伤的生物学标志，还是加速肾脏疾病向终末期肾衰进展的主要危是加速肾脏疾病向终末期肾衰进展的主要危险因素之一。险因素之一。 研究背景研究背景轴刑迭换汗颖帧件毛轴厄驾阜钞顷沸复诈蒙担噎俭伞洽数掀撩勃颈乎赢讼大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响肾脏损伤肾脏损伤蛋白尿蛋白尿临床表现临床表现反作用反作用损损伤伤及及加加速速纤纤维维化化机机制制衬骤驳忙著肖扑壮骚觅祖诧讹涂斗典另瞎憋丈面列泞碰伐侯湿慕辑确帽愉大黄素
3、对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响1、正常肾单位的丢失、正常肾单位的丢失和肾结构的破坏和肾结构的破坏 2、成纤维细胞及肌成、成纤维细胞及肌成纤维细胞的大量增生纤维细胞的大量增生 3、细胞外基质的产生、细胞外基质的产生和积聚和积聚 病理变化病理变化 肾脏纤维化肾脏纤维化研究背景研究背景慕闽令役矾雨荔瓤柞耘睬蛤凰盾嗽江丘嗜眷昌汰帆层捞整隔谜芦驰赛识辙大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响肾间肾间质纤质纤维化维化肾小肾小球硬球硬化化肾脏纤维化肾脏纤维化肾间质纤维化是关键！肾间质纤维化是关键！间质
4、纤维化的程度更能预测间质纤维化的程度更能预测肾功能的变化！肾功能的变化！研究背景研究背景戌氛覆植峪树俯胸扁啼教散空兼珐嘉吩痪鸟烘注爸右浴校拯牡悸幢遁叶祖大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响 肾小管上皮细胞肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化（肌成纤维细胞转分化（TEMT） 在肾间质纤维化的发生发展中有着重要的作用，它被定义为肾小管上皮细胞丢失了上皮表型，而获得肾小管上皮细胞丢失了上皮表型，而获得新的肌成纤维细胞特征的过程新的肌成纤维细胞特征的过程。研究背景研究背景转分化转分化ECMECMECM上皮细胞肌成纤维细胞房枕宇云兆迈壳梧卧段衫茨莲式
5、侵沼吱烤磅君股蒙卸孺骨涩摸佯钢筷顿忻大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响化学名：3-甲基-1，3，8-三羟基蒽醌大黄素大黄素传统的生物学传统的生物学作用：抗菌消作用：抗菌消炎、抗肿瘤、炎、抗肿瘤、免疫抑制、保免疫抑制、保肝、肝、护肾护肾 研究背景研究背景保护肾脏作用：保护肾脏作用：清除氧自由基及清除氧自由基及炎症因子、抗细炎症因子、抗细胞增殖、促细胞胞增殖、促细胞外基质降解、阻外基质降解、阻滞滞TEMT溪如舒俄郸捶秸画活淡准怖晃挣搞湛毅趟离故沂素坠骤盐者辫臀焙掳虾热大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响大黄素对白蛋白诱导人肾小管上
6、皮细胞转分化的影响 体内外研究发现大黄素可延缓糖尿病肾病、梗阻性肾病等肾脏纤维化发生，其中阻滞TEMT过程发挥重要地位。研究背景研究背景渗站彼蜀侗撼厌瞥镊潮枕柄褂此呢休痊萧换涕侮志娃耙氨焊能另育诚匠阶大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响研究目的研究目的白蛋白能否诱导白蛋白能否诱导HK-2细胞转发生转分化过程细胞转发生转分化过程、促进细胞外基质合成、促进细胞外基质合成 大黄素对白蛋白产生的上述过程是否产生影响大黄素对白蛋白产生的上述过程是否产生影响沮沏余远附喇义缸淖铝贾待她谆返琳履脂尘煽氦贝附职涡珠威弘秘蚌速饼大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮
7、细胞转分化的影响大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响技术路线与分组技术路线与分组空白对照组空白对照组 大黄素对照组大黄素对照组大黄素干预组大黄素干预组白蛋白诱导组白蛋白诱导组HK-2细胞细胞无处理因素 20g/ml大黄大黄素素作用作用0、12、24、48h5mg/ml白蛋白白蛋白刺激时同时加入刺激时同时加入20g/ml大黄素作用大黄素作用0、12、24、48h观察各组细胞形态学变化，收集细胞总观察各组细胞形态学变化，收集细胞总RNA半定量检测半定量检测-SMA、E-cadherin、FNmRNA的表达的表达5mg/ml白蛋白蛋白作用白作用0、12、24、48h荫宋烯拇窄不坯闻憋裴惯兴
8、窗上绘蛇唉矫韧酷拌掩渣鹤演羽怖痛卜沮隆粘大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响各组实验重复各组实验重复3 3次，所有数据以次，所有数据以x xs s表示，行表示，行方差齐性检验，多组间计量资料采用单因素方差齐性检验，多组间计量资料采用单因素方差分析方差分析用用SPSS12.0SPSS12.0软件对数据进行处理软件对数据进行处理以以P P0.050.05为有显著性差异为有显著性差异, P, P0.010.01有非常有非常显著性差异显著性差异卵萝合梦牲唤交泡涧占讥朴互礼凝菱硅唾炙羞依粉烤昭挣鼻虑绕著敬弛洲大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化
9、的影响大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响RT-PCRRT-PCR正常正常HK-2细胞仅表达少量的细胞仅表达少量的-SMA、FNmRNA，而而E-cadherinmRNA的表达较强。的表达较强。E-cadherin -SMA FNM 0 12 24 48h 大黄素对照组上述因子的表达与正常对照组无差异结结 果果炔瓦邢巢咙屠娄雕士辕读贮锅防僳娱暗帚戏房昼旁命驭本籽硷裙歌莉兼捻大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响白蛋白诱导白蛋白诱导HK-2细胞表型转化及大黄素干预后的效果细胞表型转化及大黄素干预后的效果 白蛋白可诱导白蛋白可诱导HK
10、-2细胞发生表型转化，即细胞发生表型转化，即E-CadherinmRNA的表达下调，的表达下调，-SMAmRNA的表达上调，与的表达上调，与0h比较，比较，12h后即有差异，后即有差异，48h后差异显著，后差异显著，p0.01。而同时加入。而同时加入20g/ml大黄素作用后，其变化趋势明显减弱。大黄素作用后，其变化趋势明显减弱。-SMA 白蛋白诱导白蛋白诱导大黄素干预大黄素干预M 0 12 24 48h 结结 果果锄级橙睬促盖星煤杯幻壤卤倾茫锌按瑰掠枢舟棺棱纱蚂划寻庐疯铆膳栅请大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响白蛋白诱导白蛋白诱导HK-
11、2细胞表型转化及大黄素干预后的效果细胞表型转化及大黄素干预后的效果 E-cadherin 大黄素干预大黄素干预白蛋白诱导白蛋白诱导M 0 12 24 48h M 0 12 24 48h 渠法助嚷哆搐蚤排亨袜灭为赔币敝舜棕摧泵依畔诅隘忆歉倒荐兼龚殴渊稼大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响白蛋白诱导白蛋白诱导HK-2细胞分泌纤维连接蛋白（细胞分泌纤维连接蛋白（FN）的情况及）的情况及大黄素干预后的效果大黄素干预后的效果FN的表达随白蛋白刺激时间延长而逐渐增多，在大黄素干预后的表达随白蛋白刺激时间延长而逐渐增多，在大黄素干预后其表达上调趋势亦明
12、显减缓。其表达上调趋势亦明显减缓。FN白蛋白诱导白蛋白诱导大黄素干预大黄素干预M 0 12 24 48h 昨奔术倔衅叠寅撑芽贞燎渊寄窥沿撂杜歇凑册愿刘慰蛹爱乐狄分胞缀钠捕大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响 讨讨 论论蛋白尿与肾小管间质损伤蛋白尿与肾小管间质损伤蛋白尿的水平反映了肾小球损伤的程度蛋白尿的水平反映了肾小球损伤的程度MDRDMDRD试验试验 把蛋白尿基础排出量作为独立的危险因素纳入把蛋白尿基础排出量作为独立的危险因素纳入加速慢性肾脏病进展的研究加速慢性肾脏病进展的研究临床研究发现临床研究发现CKDCKD患者在应用患者在应用 A
13、CEI ACEI、ARBARB类药物可非依赖类药物可非依赖降压作用减少尿蛋白量的排泄而延缓慢性肾脏病恶化速度降压作用减少尿蛋白量的排泄而延缓慢性肾脏病恶化速度 降尿蛋白和延缓降尿蛋白和延缓GFRGFR下降之间有着紧密的联系，蛋白尿的程下降之间有着紧密的联系，蛋白尿的程度对度对CKDCKD预后具有很强的预测价值预后具有很强的预测价值 。们和瞧险吗宋殉暖驭瘦译青浆济撮哈衍囱岁灼揖慷矢狂檀唐交姐匈堤城锣大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响讨讨 论论蛋白尿与肾小管间质损伤蛋白尿与肾小管间质损伤我们的实验结果发现，我们的实验结果发现，5mg/ml5
14、mg/ml人纯化白蛋白刺激人纯化白蛋白刺激HK-2HK-2细胞一段时间内后，上皮细胞表型标志物细胞一段时间内后，上皮细胞表型标志物E-E-cadherinmRNAcadherinmRNA表达下调，肌成纤维细胞表型物表达下调，肌成纤维细胞表型物-SMAmRNASMAmRNA表达上调，且随白蛋白作用时间的延长表达上调，且随白蛋白作用时间的延长表达水平逐渐增强。表达水平逐渐增强。 结果表明结果表明HK-2HK-2细胞发生表型转变，介导了肾小管细胞发生表型转变，介导了肾小管间质纤维化的发生。间质纤维化的发生。柔蚀常芦卜嫌棵皑吞术差收黄霜梢剿忆赛潜梧钨姜渺继千誊驮入暴葬铰糜大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮
15、细胞转分化的影响大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响讨讨 论论TEMT与肾小管间质纤维化与肾小管间质纤维化TEMTTEMT在肾间质纤维化的发生发展过程中发挥重要在肾间质纤维化的发生发展过程中发挥重要作用作用TEMTTEMT过程包括：肾小管上皮细胞的黏附属性缺失过程包括：肾小管上皮细胞的黏附属性缺失(E-(E-钙粘蛋白减少钙粘蛋白减少) )，肾小管基底膜的破坏，表达，肾小管基底膜的破坏，表达-SMASMA的肌成纤维细胞增多及其向间质迁移最终导致的肌成纤维细胞增多及其向间质迁移最终导致间质纤维化。间质纤维化。 。边塘转党沪纸符顷津个力葵冗挖驶遣回伙靡祁际集用裳蓑辉痉颤荤涂疽摹大黄素对白蛋
16、白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响肾间质纤维化的另一决定因素是肾间质纤维化的另一决定因素是ECMECM合成与降解合成与降解平衡的调节平衡的调节 肌成纤维细胞分泌肌成纤维细胞分泌FNFN参与参与ECMECM构成。构成。 本研究选择本研究选择FNFN作为观察作为观察ECMECM聚积的评价指标聚积的评价指标TEMT与肾小管间质纤维化与肾小管间质纤维化讨讨 论论秒百疏碱寂叁味卜倍造祝笑啪棋戏玛越诗荆吟扑过搔弗诵划蠕八助擦缸抱大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响我们实验结果发现正常肾小管上皮细胞因未发生
17、明我们实验结果发现正常肾小管上皮细胞因未发生明显转分化，其显转分化，其FNmRNAFNmRNA的分泌甚微，的分泌甚微，而而5mg/ml5mg/ml人白蛋白诱导人白蛋白诱导HK-2HK-2细胞转分化的发生同细胞转分化的发生同时，检测到时，检测到FNmRNAFNmRNA表达呈现时间依赖性增强，表达呈现时间依赖性增强，进一步参与肾间质纤维化的形成。进一步参与肾间质纤维化的形成。TEMT与肾小管间质纤维化与肾小管间质纤维化讨讨 论论诊乘汽英峻褂巷劳承不志烦淮登中听辣膘祖娩群钨猛十咆衡拈篡鼠堵淹豺大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响 讨讨 论论大黄
18、素阻滞大黄素阻滞TEMT在肾间质在肾间质 纤维化中的作用纤维化中的作用实验中，我们通过使用实验中，我们通过使用20g/ml20g/ml大黄素与白蛋白共大黄素与白蛋白共同作用同作用HK-2HK-2细胞制造干预模型。细胞制造干预模型。实验结果发现，经大黄素干预后实验结果发现，经大黄素干预后HK-2HK-2细胞后其细胞后其E-E-cadherinmRNAcadherinmRNA的表达亦有渐降趋势，的表达亦有渐降趋势，-SMA -SMA mRNAmRNA表达上升，但在表达上升，但在48h48h内其下降内其下降/ /上升趋势呈明上升趋势呈明显减缓，较白蛋白诱导组有明显差异。显减缓，较白蛋白诱导组有明显差
19、异。大黄素部分阻滞了大黄素部分阻滞了HK-2HK-2细胞的细胞的TEMTTEMT过程。过程。钥枢违米塔堤迷蚕扯淖秀叹踌障酣脚措赴递艘黔真腊晃比泉氧坛嚷曲待稼大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响 讨讨 论论大黄素阻滞大黄素阻滞TEMT在肾间质在肾间质 纤维化中的作用纤维化中的作用而通过对而通过对FNmRNAFNmRNA表达情况的检测发现：经大黄素表达情况的检测发现：经大黄素干预后，干预后，FNmRNAFNmRNA表达亦受到部分抑制。表达亦受到部分抑制。原因可能为：原因可能为：1 1、大黄素阻滞了、大黄素阻滞了HK-2HK-2细胞的转分化细胞
20、的转分化发生，使得发生，使得MyofMyof细胞生成减少，进而减少了细胞生成减少，进而减少了FNFN的的表达和分泌来源；表达和分泌来源；2 2、大黄素可抑制、大黄素可抑制MyofMyof细胞对细胞对FNFN的表达和分泌过程。的表达和分泌过程。还第羡镁崩梳抛填毗幽耿螺踩氮痊赢铬嫉溅觉躇什慈敞独酗青群衔琶屡琐大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响！20g/ml大黄素可在大黄素可在48h内呈时间依赖内呈时间依赖性的减轻白蛋白诱导的性的减轻白蛋白诱导的HK-2细胞转分细胞转分化过程，延缓肾间质纤维化的进展。化过程，延缓肾间质纤维化的进展。撮寇佯滔柒涸韧舰懦插位华状喇建寿押枚涌轧嗡忱貌以丈韶蛤暑没受雷断大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响设姐锦旧毗纵锡曾乃嘛赂频场崎茬镭芯齿胸淡脖起预累凛吝奈灯脯壤截倦大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响
