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1、医院感染微生物学监测 感染暴发或感染流行时，环境因素在感染中有流行病学意义感染暴发或感染流行时，环境因素在感染中有流行病学意义感染暴发或感染流行时，环境因素在感染中有流行病学意义感染暴发或感染流行时，环境因素在感染中有流行病学意义 监测潜在的危险环境，证明有危险的病原体存在或证明危险监测潜在的危险环境，证明有危险的病原体存在或证明危险监测潜在的危险环境，证明有危险的病原体存在或证明危险监测潜在的危险环境，证明有危险的病原体存在或证明危险 病原体已被成功清除病原体已被成功清除病原体已被成功清除病原体已被成功清除 当某项感染控制措施改变时，评价其效果；或根据要求，仪当某项感染控制措施改变时，评价其
2、效果；或根据要求，仪当某项感染控制措施改变时，评价其效果；或根据要求，仪当某项感染控制措施改变时，评价其效果；或根据要求，仪器设备或系统启用时进行监测器设备或系统启用时进行监测器设备或系统启用时进行监测器设备或系统启用时进行监测 询证医学证据支持询证医学证据支持询证医学证据支持询证医学证据支持采样时间采样时间2 2 2 2、未采用洁净技术净化空气的房间（、未采用洁净技术净化空气的房间（、未采用洁净技术净化空气的房间（、未采用洁净技术净化空气的房间（、） 消毒、通风换气后消毒、通风换气后消毒、通风换气后消毒、通风换气后 操作前操作前操作前操作前1 1 1 1、采用洁净技术净化空气的房间（、采用洁
3、净技术净化空气的房间（、采用洁净技术净化空气的房间（、采用洁净技术净化空气的房间（） 洁净系统自净后洁净系统自净后洁净系统自净后洁净系统自净后 操作前操作前操作前操作前3 3 3 3、怀疑空气与医院感染暴发有关时怀疑空气与医院感染暴发有关时怀疑空气与医院感染暴发有关时怀疑空气与医院感染暴发有关时消毒后消毒后消毒后消毒后 操作前操作前操作前操作前监测方法监测方法沉降法沉降法沉降法沉降法重力沉降（平板沉降法）重力沉降（平板沉降法）重力沉降（平板沉降法）重力沉降（平板沉降法）静电沉降静电沉降静电沉降静电沉降热沉降热沉降热沉降热沉降浮游菌测定法浮游菌测定法浮游菌测定法浮游菌测定法撞击式空气微生物采样法
4、撞击式空气微生物采样法撞击式空气微生物采样法撞击式空气微生物采样法离心式空气微生物采样法离心式空气微生物采样法离心式空气微生物采样法离心式空气微生物采样法洗刷式空气微生物采样法洗刷式空气微生物采样法洗刷式空气微生物采样法洗刷式空气微生物采样法过滤空气微生物采样法过滤空气微生物采样法过滤空气微生物采样法过滤空气微生物采样法温差空气微生物采样法温差空气微生物采样法温差空气微生物采样法温差空气微生物采样法静电或冲击空气微生物采样法静电或冲击空气微生物采样法静电或冲击空气微生物采样法静电或冲击空气微生物采样法未采用洁净技术净化空气的房间：未采用洁净技术净化空气的房间：平板暴露法平板暴露法室内面积室内面
5、积室内面积室内面积30m30m30m30m2 2 2 2 设内、外、中设内、外、中设内、外、中设内、外、中 对角线对角线对角线对角线3 3 3 3点点点点 内、外点距离墙壁内、外点距离墙壁内、外点距离墙壁内、外点距离墙壁1m1m1m1m处处处处室内面积室内面积室内面积室内面积30m30m30m30m2 2 2 2 设四角及中央共设四角及中央共设四角及中央共设四角及中央共5 5 5 5点点点点 四角距离墙壁四角距离墙壁四角距离墙壁四角距离墙壁1m1m1m1m处处处处 1 1 1 1、平板暴露法、平板暴露法、平板暴露法、平板暴露法 2 2 2 2、空气采样器法、空气采样器法、空气采样器法、空气采样
6、器法参照参照参照参照GB50333-2002GB50333-2002GB50333-2002GB50333-2002（医院洁净手术部建筑技术规范）（医院洁净手术部建筑技术规范）（医院洁净手术部建筑技术规范）（医院洁净手术部建筑技术规范）采用洁净技术净化空气的房间：采用洁净技术净化空气的房间：手术区：手术台及其周围的区域手术区：手术台及其周围的区域手术区：手术台及其周围的区域手术区：手术台及其周围的区域级手术室级手术室级手术室级手术室 ( (手术区百级，周围千级）：手术区百级，周围千级）：手术区百级，周围千级）：手术区百级，周围千级）：手术台两侧边至少各外推手术台两侧边至少各外推手术台两侧边至少
7、各外推手术台两侧边至少各外推0.9m0.9m两端至少各外推两端至少各外推两端至少各外推两端至少各外推0.4m0.4m后（包括手术台）的区域后（包括手术台）的区域后（包括手术台）的区域后（包括手术台）的区域级手术室级手术室级手术室级手术室 ( (手术区千级，周围万级）：手术区千级，周围万级）：手术区千级，周围万级）：手术区千级，周围万级）：手术台两侧边至少各外推手术台两侧边至少各外推手术台两侧边至少各外推手术台两侧边至少各外推0.6m0.6m两端至少各外推两端至少各外推两端至少各外推两端至少各外推0.4m0.4m后（包括手术台）的区域后（包括手术台）的区域后（包括手术台）的区域后（包括手术台）的
8、区域级手术室（手术区域万级，周围十万级）：级手术室（手术区域万级，周围十万级）：级手术室（手术区域万级，周围十万级）：级手术室（手术区域万级，周围十万级）：手术台四边至少各外推手术台四边至少各外推手术台四边至少各外推手术台四边至少各外推0.4m0.4m后（包括手术台）的区域后（包括手术台）的区域后（包括手术台）的区域后（包括手术台）的区域级手术室（三十万级）：不分手术区和周边区级手术室（三十万级）：不分手术区和周边区级手术室（三十万级）：不分手术区和周边区级手术室（三十万级）：不分手术区和周边区周围区：除去手术区以外的其他区域周围区：除去手术区以外的其他区域周围区：除去手术区以外的其他区域周围
9、区：除去手术区以外的其他区域平板暴露法平板暴露法局部百级局部百级局部百级局部百级周围千级设置周围千级设置周围千级设置周围千级设置13131313点点点点局部千级局部千级局部千级局部千级周围万级设置周围万级设置周围万级设置周围万级设置9 9 9 9点点点点局部万级局部万级局部万级局部万级周围十万级设置周围十万级设置周围十万级设置周围十万级设置7 7 7 7点点点点局部十万级局部十万级局部十万级局部十万级周围三十万级设置周围三十万级设置周围三十万级设置周围三十万级设置5 5 5 5点点点点?医院洁净手术部建筑技术规范医院洁净手术部建筑技术规范GB50333-2002当用沉降法测定沉降菌浓度时当用沉
10、降法测定沉降菌浓度时当用沉降法测定沉降菌浓度时当用沉降法测定沉降菌浓度时细菌浓度测点数既要不少于被测区域含尘浓度测点数细菌浓度测点数既要不少于被测区域含尘浓度测点数细菌浓度测点数既要不少于被测区域含尘浓度测点数细菌浓度测点数既要不少于被测区域含尘浓度测点数又应满足沉降菌最少培养皿数又应满足沉降菌最少培养皿数又应满足沉降菌最少培养皿数又应满足沉降菌最少培养皿数被测区域洁净度的级别被测区域洁净度的级别被测区域洁净度的级别被测区域洁净度的级别 最少培养皿数（最少培养皿数（最少培养皿数（最少培养皿数（90909090，30min30min30min30min计）计）计）计） 100100100100级
11、级级级 13131313 1000 1000 1000 1000级级级级 5 5 5 5 10000 10000 10000 10000级级级级 3 3 3 3 100000 100000 100000 100000级级级级 2 2 2 2 300000 300000 300000 300000级级级级 2 2 2 2 局部千级设置局部千级设置局部千级设置局部千级设置5 5 5 5点点点点周围万级设置周围万级设置周围万级设置周围万级设置4 4 4 4点点点点 局部百级设置局部百级设置局部百级设置局部百级设置13131313点点点点周围千级设置周围千级设置周围千级设置周围千级设置6 6 6 6点
12、点点点 局部万级设置局部万级设置局部万级设置局部万级设置3 3 3 3点点点点周围十万级设置周围十万级设置周围十万级设置周围十万级设置2 2 2 2点点点点 局部十万级设置局部十万级设置局部十万级设置局部十万级设置2 2 2 2点点点点周围三十万级设置周围三十万级设置周围三十万级设置周围三十万级设置2 2 2 2点点点点操操 作作 方方 法法将平皿（直径将平皿（直径将平皿（直径将平皿（直径9cm9cm9cm9cm）放置在采样点处）放置在采样点处）放置在采样点处）放置在采样点处采样高度距离地面采样高度距离地面采样高度距离地面采样高度距离地面80-100cm80-100cm80-100cm80-1
13、00cm采样时将平皿盖打开、采样时将平皿盖打开、采样时将平皿盖打开、采样时将平皿盖打开、扣放扣放扣放扣放于平板旁于平板旁于平板旁于平板旁采样时，必须有采样时，必须有采样时，必须有采样时，必须有2 2 2 2次次次次空白对照空白对照空白对照空白对照第第第第1 1 1 1次次次次对用于检测的对用于检测的对用于检测的对用于检测的培养皿或培养基条培养皿或培养基条培养皿或培养基条培养皿或培养基条做对比试验做对比试验做对比试验做对比试验每一批做一个对照皿每一批做一个对照皿每一批做一个对照皿每一批做一个对照皿第第第第2 2 2 2次次次次是在检测时，每区或每室是在检测时，每区或每室是在检测时，每区或每室是在
14、检测时，每区或每室1 1 1 1个对照皿个对照皿个对照皿个对照皿对对对对操作试验操作试验操作试验操作试验做对照试验做对照试验做对照试验做对照试验模拟操作过程模拟操作过程模拟操作过程模拟操作过程但培养皿或培养基条打开后又迅速封盖但培养皿或培养基条打开后又迅速封盖但培养皿或培养基条打开后又迅速封盖但培养皿或培养基条打开后又迅速封盖两次对照试验都必须为阴性两次对照试验都必须为阴性两次对照试验都必须为阴性两次对照试验都必须为阴性整个操作过程都必须无菌操作整个操作过程都必须无菌操作整个操作过程都必须无菌操作整个操作过程都必须无菌操作未采用未采用未采用未采用洁净技术净化空气的房间暴露洁净技术净化空气的房间
15、暴露洁净技术净化空气的房间暴露洁净技术净化空气的房间暴露5 5minminminmin采用采用采用采用洁净技术净化空气的房间暴露洁净技术净化空气的房间暴露洁净技术净化空气的房间暴露洁净技术净化空气的房间暴露3030minminminmin未采用未采用未采用未采用洁净技术净化空气的房间洁净技术净化空气的房间洁净技术净化空气的房间洁净技术净化空气的房间类环境类环境类环境类环境暴露暴露暴露暴露15min15min15min15min 、类类类类环境暴露环境暴露环境暴露环境暴露5min5min5min5min采用采用采用采用洁净技术净化空气的房间暴露洁净技术净化空气的房间暴露洁净技术净化空气的房间暴露
16、洁净技术净化空气的房间暴露3030minminminmin采样后盖好平皿盖子采样后盖好平皿盖子采样后盖好平皿盖子采样后盖好平皿盖子 记录采样时间记录采样时间记录采样时间记录采样时间采样平皿采样平皿采样平皿采样平皿6h6h6h6h内送实验室培养内送实验室培养内送实验室培养内送实验室培养置置置置361361361361恒温培养箱培养恒温培养箱培养恒温培养箱培养恒温培养箱培养48h48h48h48h计数每个平板的菌落总数计数每个平板的菌落总数计数每个平板的菌落总数计数每个平板的菌落总数若怀疑与医院感染有关时若怀疑与医院感染有关时若怀疑与医院感染有关时若怀疑与医院感染有关时进行目标微生物检测进行目标微
17、生物检测进行目标微生物检测进行目标微生物检测平板暴露法采样平板暴露法采样注意事项注意事项：布点应尽量布点应尽量布点应尽量布点应尽量避开高效送风口正下方避开高效送风口正下方避开高效送风口正下方避开高效送风口正下方放置培养皿时放置培养皿时放置培养皿时放置培养皿时应从应从应从应从最里面的房间最里面的房间最里面的房间最里面的房间或或或或房间的房间的房间的房间的最里面开始布点最里面开始布点最里面开始布点最里面开始布点依次向外依次向外依次向外依次向外最后人员撤出最后人员撤出最后人员撤出最后人员撤出收集培养皿时收集培养皿时收集培养皿时收集培养皿时从从从从最外面的房间最外面的房间最外面的房间最外面的房间或或或
18、或房间的最外面房间的最外面房间的最外面房间的最外面开始开始开始开始最先布的点最后收最先布的点最后收最先布的点最后收最先布的点最后收采样前采样前采样前采样前关闭门窗关闭门窗关闭门窗关闭门窗无人走动无人走动无人走动无人走动的情况下的情况下的情况下的情况下静止静止静止静止1010分钟分钟分钟分钟后采样后采样后采样后采样对检测人员的要求：对检测人员的要求：着无菌的工作服、戴口罩、帽子着无菌的工作服、戴口罩、帽子着无菌的工作服、戴口罩、帽子着无菌的工作服、戴口罩、帽子操作前洗手或手卫生操作前洗手或手卫生操作前洗手或手卫生操作前洗手或手卫生手臂及头部不可越过打开的培养皿上方手臂及头部不可越过打开的培养皿上
19、方手臂及头部不可越过打开的培养皿上方手臂及头部不可越过打开的培养皿上方行动及放置动作要轻行动及放置动作要轻行动及放置动作要轻行动及放置动作要轻尽量减少对空气流动状态的影响尽量减少对空气流动状态的影响尽量减少对空气流动状态的影响尽量减少对空气流动状态的影响每次采样人员不得超过每次采样人员不得超过每次采样人员不得超过每次采样人员不得超过2 2人人人人所带物品徐清洁后方可带入所带物品徐清洁后方可带入所带物品徐清洁后方可带入所带物品徐清洁后方可带入结结 果果 计计 算算奥梅良斯基公式（奥氏公式）：奥梅良斯基公式（奥氏公式）：奥梅良斯基公式（奥氏公式）：奥梅良斯基公式（奥氏公式）： 5 5 5 5分钟在
20、分钟在分钟在分钟在100cm100cm100cm100cm2 2 2 2的面积上降落的细菌数的面积上降落的细菌数的面积上降落的细菌数的面积上降落的细菌数 相当于相当于相当于相当于10L10L10L10L空气中所含的细菌数空气中所含的细菌数空气中所含的细菌数空气中所含的细菌数细菌数（细菌数（细菌数（细菌数（cfu/mcfu/m3 3)=)=50000N50000NAtAtt-t-t-t-平皿暴露于空气中的时间（分钟）平皿暴露于空气中的时间（分钟）平皿暴露于空气中的时间（分钟）平皿暴露于空气中的时间（分钟）N-N-N-N-培养后，平皿上的细菌总数培养后，平皿上的细菌总数培养后，平皿上的细菌总数培养
21、后，平皿上的细菌总数A-A-A-A-所用平皿的面积所用平皿的面积所用平皿的面积所用平皿的面积（20022002版版消消毒毒技技术术规规范范）版版消消毒毒技技术术规规范范）20112011年年年年消毒技术规范消毒技术规范消毒技术规范消毒技术规范 平板暴露法平板暴露法平板暴露法平板暴露法 按平均每皿的菌落数报告：按平均每皿的菌落数报告：按平均每皿的菌落数报告：按平均每皿的菌落数报告：cfu/cfu/cfu/cfu/皿皿皿皿暴露时间暴露时间暴露时间暴露时间 例如：例如：例如：例如： 产房产房产房产房30m30m30m30m2 2 2 2 放置平皿放置平皿放置平皿放置平皿5 5 5 5个个个个 放置放
22、置放置放置15min15min15min15min 培养后培养后培养后培养后5 5 5 5个平皿共长菌落个平皿共长菌落个平皿共长菌落个平皿共长菌落15151515个个个个 该产房空气培养的结果为该产房空气培养的结果为该产房空气培养的结果为该产房空气培养的结果为 平均每皿的菌落数平均每皿的菌落数平均每皿的菌落数平均每皿的菌落数 3cfu/3cfu/3cfu/3cfu/皿皿皿皿 15min15min15min15min空气采样器法（浮游菌测定法）空气采样器法（浮游菌测定法）二级二级二级二级撞击式空气采样仪撞击式空气采样仪撞击式空气采样仪撞击式空气采样仪六级六级六级六级撞击式空气采样仪撞击式空气采样
23、仪撞击式空气采样仪撞击式空气采样仪八级八级八级八级撞击式空气采样仪撞击式空气采样仪撞击式空气采样仪撞击式空气采样仪推荐使用推荐使用推荐使用推荐使用六级撞击式空气采样器六级撞击式空气采样器六级撞击式空气采样器六级撞击式空气采样器或其他经验证的空气采样器或其他经验证的空气采样器或其他经验证的空气采样器或其他经验证的空气采样器6 6 6 6层有微小孔眼的铝合金圆盘层有微小孔眼的铝合金圆盘层有微小孔眼的铝合金圆盘层有微小孔眼的铝合金圆盘圆盘下放琼脂平皿圆盘下放琼脂平皿圆盘下放琼脂平皿圆盘下放琼脂平皿圆盘间有密封胶圈圆盘间有密封胶圈圆盘间有密封胶圈圆盘间有密封胶圈通过三个弹簧卡子把圆盘固定联在一起通过三
24、个弹簧卡子把圆盘固定联在一起通过三个弹簧卡子把圆盘固定联在一起通过三个弹簧卡子把圆盘固定联在一起标准采样流量为标准采样流量为标准采样流量为标准采样流量为1 1 1 1立方尺立方尺立方尺立方尺28.3L/min28.3L/min28.3L/min28.3L/min 提前联系需采样的科室提前联系需采样的科室提前联系需采样的科室提前联系需采样的科室 安排好采样的时间以及房间的准备安排好采样的时间以及房间的准备安排好采样的时间以及房间的准备安排好采样的时间以及房间的准备 百级洁净房间至少已运行百级洁净房间至少已运行百级洁净房间至少已运行百级洁净房间至少已运行15151515分钟分钟分钟分钟 其余洁净度
25、房间至少已运行其余洁净度房间至少已运行其余洁净度房间至少已运行其余洁净度房间至少已运行40404040分钟分钟分钟分钟空气采样仪（浮游法）采样步骤和方法空气采样仪（浮游法）采样步骤和方法 采样仪需提前充电采样仪需提前充电采样仪需提前充电采样仪需提前充电10101010小时小时小时小时 采样点采样点采样点采样点: : : : 洁净房间每间需要采样至少洁净房间每间需要采样至少洁净房间每间需要采样至少洁净房间每间需要采样至少2 2 2 2个点个点个点个点 一次采样需要一次采样需要一次采样需要一次采样需要2 2 2 2个空白对照个空白对照个空白对照个空白对照 采样的布点：采样的布点：采样的布点：采样的
26、布点： 中央区和周边区中央区和周边区中央区和周边区中央区和周边区房间大于房间大于房间大于房间大于10m10m10m10m2 2 2 2 每增加每增加每增加每增加10m10m10m10m2 2 2 2 增设一个采样点增设一个采样点增设一个采样点增设一个采样点 在平皿上要标注房间号和采样区域及采样时间在平皿上要标注房间号和采样区域及采样时间在平皿上要标注房间号和采样区域及采样时间在平皿上要标注房间号和采样区域及采样时间 采样的高度：采样的高度：采样的高度：采样的高度： 将采样器置于室内中央将采样器置于室内中央将采样器置于室内中央将采样器置于室内中央0.8m0.8m0.8m0.8m1.5m1.5m1
27、.5m1.5m高度高度高度高度 采样的角度：采样的角度：采样的角度：采样的角度： 在在在在100100100100级区域检测时，采样口应对着气流方向级区域检测时，采样口应对着气流方向级区域检测时，采样口应对着气流方向级区域检测时，采样口应对着气流方向 在其他级别区域检测时，采样口均向上在其他级别区域检测时，采样口均向上在其他级别区域检测时，采样口均向上在其他级别区域检测时，采样口均向上 采样的时长：采样的时长：采样的时长：采样的时长： 百级中央区百级中央区百级中央区百级中央区30303030分钟分钟分钟分钟 其余洁净房间均为其余洁净房间均为其余洁净房间均为其余洁净房间均为10101010分钟分
28、钟分钟分钟（至少（至少（至少（至少2 2 2 2分钟）分钟）分钟）分钟） 采样时间采样时间采样时间采样时间不应超过不应超过不应超过不应超过30min30min30min30min 采样时要注意无菌操作：采样时要注意无菌操作：采样时要注意无菌操作：采样时要注意无菌操作： 操作者：带口罩、帽子，穿隔离衣操作者：带口罩、帽子，穿隔离衣操作者：带口罩、帽子，穿隔离衣操作者：带口罩、帽子，穿隔离衣 换鞋或穿鞋套；手卫生换鞋或穿鞋套；手卫生换鞋或穿鞋套；手卫生换鞋或穿鞋套；手卫生 安装进气盖前需用酒精灯灭菌进气端盖正反两面安装进气盖前需用酒精灯灭菌进气端盖正反两面安装进气盖前需用酒精灯灭菌进气端盖正反两面
29、安装进气盖前需用酒精灯灭菌进气端盖正反两面 空白对照的设置：空白对照的设置：空白对照的设置：空白对照的设置： 空白对照空白对照空白对照空白对照1 1 1 1：培养皿不打开：培养皿不打开：培养皿不打开：培养皿不打开 空白对照空白对照空白对照空白对照2 2 2 2：模拟操作过程：模拟操作过程：模拟操作过程：模拟操作过程 但培养皿打开后又立封盖但培养皿打开后又立封盖但培养皿打开后又立封盖但培养皿打开后又立封盖 两次对照必须均为阴性。两次对照必须均为阴性。两次对照必须均为阴性。两次对照必须均为阴性。被测区域洁净度级别被测区域洁净度级别被测区域洁净度级别被测区域洁净度级别 最小采样量最小采样量最小采样量
30、最小采样量m m m m3 3 3 3(L) 100(L) 100(L) 100(L) 100级级级级 0.6(600)0.6(600)0.6(600)0.6(600)1000100010001000级级级级 0.06(60) 0.06(60) 0.06(60) 0.06(60) 10000100001000010000级级级级 0.03(30)0.03(30)0.03(30)0.03(30)100000100000100000100000级级级级 0.006(6) 0.006(6) 0.006(6) 0.006(6) 300000 300000 300000 300000级级级级 0.006
31、(6) 0.006(6) 0.006(6) 0.006(6) 浮游菌法最小采样量浮游菌法最小采样量培养皿的准备要求培养皿的准备要求培养皿的准备要求培养皿的准备要求配置平皿的试验台需要使用水平仪提前校正配置平皿的试验台需要使用水平仪提前校正配置平皿的试验台需要使用水平仪提前校正配置平皿的试验台需要使用水平仪提前校正保证加注培养基后平民内琼脂厚度均匀保证加注培养基后平民内琼脂厚度均匀保证加注培养基后平民内琼脂厚度均匀保证加注培养基后平民内琼脂厚度均匀需提前培养需提前培养需提前培养需提前培养24h24h（为证实无菌）（为证实无菌）（为证实无菌）（为证实无菌）空气采样器法计算公式空气采样器法计算公式空
32、气中菌落总数（空气中菌落总数（空气中菌落总数（空气中菌落总数（cfu/mcfu/mcfu/mcfu/m3 3 3 3）采样器各平皿菌落数之和（采样器各平皿菌落数之和（采样器各平皿菌落数之和（采样器各平皿菌落数之和（cfucfucfucfu）采样速率（采样速率（采样速率（采样速率（L/minL/minL/minL/min) ) ) ) 采样时间采样时间采样时间采样时间( ( ( (minminminmin) ) ) )1000100010001000=合合 格格 标标 准准环境类别环境类别环境类别环境类别 范围范围范围范围空气标准空气标准空气标准空气标准（cfu/mcfu/mcfu/mcfu/m
33、3 3 3 3) ) ) )I I I I类类类类层流手术室、层流洁净病房层流手术室、层流洁净病房层流手术室、层流洁净病房层流手术室、层流洁净病房10101010类类类类普通手术室、产房、婴儿室、早普通手术室、产房、婴儿室、早普通手术室、产房、婴儿室、早普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、普通保护性隔离室、供产儿室、普通保护性隔离室、供产儿室、普通保护性隔离室、供产儿室、普通保护性隔离室、供应室无菌区、烧伤病房、应室无菌区、烧伤病房、应室无菌区、烧伤病房、应室无菌区、烧伤病房、ICUICUICUICU 200 200 200 200类类类类儿科病房、妇科检查室、注射室、儿科病房、妇科检查室、注
34、射室、儿科病房、妇科检查室、注射室、儿科病房、妇科检查室、注射室、换药室、治疗室、供应室清洁区、换药室、治疗室、供应室清洁区、换药室、治疗室、供应室清洁区、换药室、治疗室、供应室清洁区、急诊室、化验室、各类普通病房急诊室、化验室、各类普通病房急诊室、化验室、各类普通病房急诊室、化验室、各类普通病房和房间和房间和房间和房间500500500500类类类类传染病科病房传染病科病房传染病科病房传染病科病房- - - -类环境：采用空气洁净技术的诊所，类环境：采用空气洁净技术的诊所，类环境：采用空气洁净技术的诊所，类环境：采用空气洁净技术的诊所， 分分分分洁净手术部洁净手术部洁净手术部洁净手术部和和和
35、和其他洁净场所其他洁净场所其他洁净场所其他洁净场所类环境：非洁净手术部（室）；产房；类环境：非洁净手术部（室）；产房；类环境：非洁净手术部（室）；产房；类环境：非洁净手术部（室）；产房；导管室导管室导管室导管室； 血液病区血液病区血液病区血液病区、烧伤病区等保护性隔离区；、烧伤病区等保护性隔离区；、烧伤病区等保护性隔离区；、烧伤病区等保护性隔离区； 重症监护病房；新生儿室等重症监护病房；新生儿室等重症监护病房；新生儿室等重症监护病房；新生儿室等类环境：类环境：类环境：类环境：消毒供应中心的检查包装灭菌区消毒供应中心的检查包装灭菌区消毒供应中心的检查包装灭菌区消毒供应中心的检查包装灭菌区 和无菌
36、物品存放区和无菌物品存放区和无菌物品存放区和无菌物品存放区；母婴同室母婴同室母婴同室母婴同室； 血液透析中心（室）血液透析中心（室）血液透析中心（室）血液透析中心（室）；其他普通住院病区；其他普通住院病区；其他普通住院病区；其他普通住院病区类环境：感染性疾病科门诊和病区；类环境：感染性疾病科门诊和病区；类环境：感染性疾病科门诊和病区；类环境：感染性疾病科门诊和病区； 普通门急诊及其检查普通门急诊及其检查普通门急诊及其检查普通门急诊及其检查、 治疗（注射、换药等）室治疗（注射、换药等）室治疗（注射、换药等）室治疗（注射、换药等）室 类环境类环境等等等等级级级级手术室手术室手术室手术室名称名称名称
37、名称空气洁净度空气洁净度空气洁净度空气洁净度级别级别级别级别沉降法沉降法沉降法沉降法/ / / /浮游菌细菌浮游菌细菌浮游菌细菌浮游菌细菌最大平均浓度最大平均浓度最大平均浓度最大平均浓度手术区手术区手术区手术区周边区周边区周边区周边区手术区手术区手术区手术区周边区周边区周边区周边区I I I I特别洁净特别洁净特别洁净特别洁净手术室手术室手术室手术室百级百级百级百级千级千级千级千级0.20.20.20.2个个个个/ / / /（30min30min30min30min 90909090皿）皿）皿）皿）0.40.40.40.4个个个个/ / / /（30min30min30min30min 90
38、909090皿）皿）皿）皿）5 5 5 5个个个个/m/m/m/m3 3 3 310101010个个个个/m/m/m/m3 3 3 3标准洁净标准洁净标准洁净标准洁净手术室手术室手术室手术室千级千级千级千级万级万级万级万级0.750.750.750.75个个个个/ / / /（30min30min30min30min 90909090皿）皿）皿）皿）1.51.51.51.5个个个个/ / / /（30min30min30min30min 90909090皿）皿）皿）皿）25252525个个个个/m/m/m/m3 3 3 350505050个个个个/m/m/m/m3 3 3 3一般洁净一般洁净一
39、般洁净一般洁净手术室手术室手术室手术室万级万级万级万级十万十万十万十万级级级级2 2 2 2个个个个/ / / /（30min30min30min30min 90909090皿）皿）皿）皿）4 4 4 4个个个个/ / / /（30min30min30min30min 90909090皿）皿）皿）皿）75757575个个个个/m/m/m/m3 3 3 3150150150150个个个个/m/m/m/m3 3 3 3准洁净手准洁净手准洁净手准洁净手术室术室术室术室三十万级三十万级三十万级三十万级5 5 5 5个个个个/ / / /（30min30min30min30min 90909090皿）皿
40、）皿）皿）175175175175个个个个/m/m/m/m3 3 3 3 洁净手术部：洁净手术部：洁净手术部：洁净手术部：要求符合要求符合要求符合要求符合GB50333GB50333GB50333GB50333要求要求要求要求类区域：细菌总数类区域：细菌总数类区域：细菌总数类区域：细菌总数4cfu/15min4cfu/15min4cfu/15min4cfu/15min 平皿平皿平皿平皿、类区域：细菌总数类区域：细菌总数类区域：细菌总数类区域：细菌总数5cfu/5min5cfu/5min5cfu/5min5cfu/5min 平皿平皿平皿平皿浮游菌测定法的优点浮游菌测定法的优点能够采集浮游在空气中
41、的微生物粒子能够采集浮游在空气中的微生物粒子能够采集浮游在空气中的微生物粒子能够采集浮游在空气中的微生物粒子这种粒子可随人们呼吸道运动进入呼吸道这种粒子可随人们呼吸道运动进入呼吸道这种粒子可随人们呼吸道运动进入呼吸道这种粒子可随人们呼吸道运动进入呼吸道因而更具有卫生学意义因而更具有卫生学意义因而更具有卫生学意义因而更具有卫生学意义采样效率高采样效率高采样效率高采样效率高 采样量准确采样量准确采样量准确采样量准确采样时不受粒径大小、沉降速度和气流的影响采样时不受粒径大小、沉降速度和气流的影响采样时不受粒径大小、沉降速度和气流的影响采样时不受粒径大小、沉降速度和气流的影响能准确的表示出空气中细菌的
42、实际含量能准确的表示出空气中细菌的实际含量能准确的表示出空气中细菌的实际含量能准确的表示出空气中细菌的实际含量医院物体表面消毒效果的医院物体表面消毒效果的监测采样时间采样时间消消 毒毒 后后消消 毒毒 后后1 1 1 1、消毒处理后、消毒处理后、消毒处理后、消毒处理后2 2 2 2、怀疑与医院感染暴发有关时、怀疑与医院感染暴发有关时、怀疑与医院感染暴发有关时、怀疑与医院感染暴发有关时采样方法采样方法5cm 5cm5cm 5cm5cm 5cm5cm 5cm灭菌规格板灭菌规格板灭菌规格板灭菌规格板放在被检物体表面放在被检物体表面放在被检物体表面放在被检物体表面用蘸有生理盐水的棉拭子用蘸有生理盐水的
43、棉拭子用蘸有生理盐水的棉拭子用蘸有生理盐水的棉拭子1 1 1 1支支支支在规格板内横竖在规格板内横竖在规格板内横竖在规格板内横竖往返各涂擦往返各涂擦往返各涂擦往返各涂擦5 5 5 5次次次次并随之转动棉拭子并随之转动棉拭子并随之转动棉拭子并随之转动棉拭子被采表面被采表面被采表面被采表面100cm100cm100cm100cm2 2 2 2，取，取，取，取全部面积全部面积全部面积全部面积被采样表面被采样表面被采样表面被采样表面100cm100cm100cm100cm2 2 2 2，取，取，取，取100cm100cm100cm100cm2 2 2 2剪去手接触部分剪去手接触部分剪去手接触部分剪去手
44、接触部分将棉拭子投入装有将棉拭子投入装有将棉拭子投入装有将棉拭子投入装有10ml10ml10ml10ml无菌检测用洗脱液的试管中送检无菌检测用洗脱液的试管中送检无菌检测用洗脱液的试管中送检无菌检测用洗脱液的试管中送检门把手等小型物体用棉拭子直接涂抹物体表面采样门把手等小型物体用棉拭子直接涂抹物体表面采样门把手等小型物体用棉拭子直接涂抹物体表面采样门把手等小型物体用棉拭子直接涂抹物体表面采样采样物体表面有消毒剂残留时采样物体表面有消毒剂残留时采样物体表面有消毒剂残留时采样物体表面有消毒剂残留时采样液应含有相应中和剂采样液应含有相应中和剂采样液应含有相应中和剂采样液应含有相应中和剂检测方法检测方法
45、倾注法倾注法充分振荡采样管充分振荡采样管充分振荡采样管充分振荡采样管取不同稀释倍数的的洗脱液取不同稀释倍数的的洗脱液取不同稀释倍数的的洗脱液取不同稀释倍数的的洗脱液1.0ml1.0ml1.0ml1.0ml接种平皿接种平皿接种平皿接种平皿（每一标本接种（每一标本接种（每一标本接种（每一标本接种2 2 2 2个平皿）个平皿）个平皿）个平皿）将冷却至将冷却至将冷却至将冷却至4040404045454545的融化营养琼脂培养基的融化营养琼脂培养基的融化营养琼脂培养基的融化营养琼脂培养基（ 45454848）每皿倾注每皿倾注每皿倾注每皿倾注15-20ml15-20ml15-20ml15-20ml（15-
46、18ml15-18ml15-18ml15-18ml）361361361361恒温箱培养恒温箱培养恒温箱培养恒温箱培养48h48h48h48h计数菌落数计数菌落数计数菌落数计数菌落数怀疑与医院感染暴发有关时，进行目标微生物的检测怀疑与医院感染暴发有关时，进行目标微生物的检测怀疑与医院感染暴发有关时，进行目标微生物的检测怀疑与医院感染暴发有关时，进行目标微生物的检测涂抹法涂抹法将采样试管充分振荡或在混匀器上混匀将采样试管充分振荡或在混匀器上混匀将采样试管充分振荡或在混匀器上混匀将采样试管充分振荡或在混匀器上混匀30s30s30s30s取取取取100ul100ul100ul100ul接种于平皿接种于
47、平皿接种于平皿接种于平皿均匀涂布均匀涂布均匀涂布均匀涂布361361361361恒温箱培养恒温箱培养恒温箱培养恒温箱培养48h48h48h48h计数菌落数计数菌落数计数菌落数计数菌落数怀疑与医院感染暴发有关时，进行目标微生物的检测怀疑与医院感染暴发有关时，进行目标微生物的检测怀疑与医院感染暴发有关时，进行目标微生物的检测怀疑与医院感染暴发有关时，进行目标微生物的检测结果计算结果计算规则物体表面规则物体表面物体表面菌落总数（物体表面菌落总数（物体表面菌落总数（物体表面菌落总数（cfu/cmcfu/cmcfu/cmcfu/cm2 2 2 2) ) ) )平皿菌落数平皿菌落数平皿菌落数平皿菌落数洗脱
48、液洗脱液洗脱液洗脱液稀释倍数稀释倍数稀释倍数稀释倍数采样面积（采样面积（采样面积（采样面积（cmcmcmcm2 2 2 2）= =小型物体表面小型物体表面物体表面菌落总数（物体表面菌落总数（物体表面菌落总数（物体表面菌落总数（cfu/cfu/cfu/cfu/件件件件) ) ) )= =平皿菌落数平皿菌落数平皿菌落数平皿菌落数洗脱液洗脱液洗脱液洗脱液稀释倍数稀释倍数稀释倍数稀释倍数例如：例如：例如：例如： 手术室手术床，面积手术室手术床，面积手术室手术床，面积手术室手术床，面积100cm100cm100cm100cm2 2 2 2 采样面积采样面积采样面积采样面积100cm100cm100cm1
49、00cm2 2 2 2涂抹法接种涂抹法接种涂抹法接种涂抹法接种培养培养培养培养48h48h48h48h后后后后 平皿上的菌落数为平皿上的菌落数为平皿上的菌落数为平皿上的菌落数为10cfu10cfu10cfu10cfu手术床的菌落总数手术床的菌落总数手术床的菌落总数手术床的菌落总数= = = =（10100101001010010100）/100/100/100/100=10cfu/cm=10cfu/cm=10cfu/cm=10cfu/cm2 2 2 2倾注法接种倾注法接种倾注法接种倾注法接种培养培养培养培养48h48h48h48h后后后后 平皿上的菌落数为平皿上的菌落数为平皿上的菌落数为平皿上
50、的菌落数为100cfu100cfu100cfu100cfu手术床的菌落总数手术床的菌落总数手术床的菌落总数手术床的菌落总数= = = =（10010100101001010010）/100/100/100/100=10cfu/cm=10cfu/cm=10cfu/cm=10cfu/cm2 2 2 2合格标准合格标准 、类区域：类区域：类区域：类区域：细菌菌落总数细菌菌落总数细菌菌落总数细菌菌落总数 5cfu/cm5cfu/cm2 2 、 类区域：类区域：类区域：类区域： 细菌菌落总数细菌菌落总数细菌菌落总数细菌菌落总数 10cfu/cm10cfu/cm2 2 、类区域：类区域：类区域：类区域：
51、细菌菌落总数细菌菌落总数细菌菌落总数细菌菌落总数5cfu/cm5cfu/cm5cfu/cm5cfu/cm2 2 2 2 类区域：类区域：类区域：类区域： 细菌菌落总数细菌菌落总数细菌菌落总数细菌菌落总数10cfu/cm10cfu/cm10cfu/cm10cfu/cm2 2 2 2 类区域：类区域：类区域：类区域： 细菌菌落总数细菌菌落总数细菌菌落总数细菌菌落总数15cfu/cm15cfu/cm15cfu/cm15cfu/cm2 2 2 2不得检出致病微生物不得检出致病微生物不得检出致病微生物不得检出致病微生物使用中消毒液染菌量监测使用中消毒液染菌量监测证明被污染的消毒剂可以成为医疗机构感染和流
52、行证明被污染的消毒剂可以成为医疗机构感染和流行证明被污染的消毒剂可以成为医疗机构感染和流行证明被污染的消毒剂可以成为医疗机构感染和流行传播的媒介已有传播的媒介已有传播的媒介已有传播的媒介已有50505050年的历史年的历史年的历史年的历史已经有报告证明污染的消毒剂导致医院感染的例子已经有报告证明污染的消毒剂导致医院感染的例子已经有报告证明污染的消毒剂导致医院感染的例子已经有报告证明污染的消毒剂导致医院感染的例子消毒剂溶液中长菌常见有下列几种原因：消毒剂溶液中长菌常见有下列几种原因：消毒剂溶液中长菌常见有下列几种原因：消毒剂溶液中长菌常见有下列几种原因：消毒剂的配制问题消毒剂的配制问题消毒剂的配
53、制问题消毒剂的配制问题消毒剂的外源性污染消毒剂的外源性污染消毒剂的外源性污染消毒剂的外源性污染消毒剂的储存问题消毒剂的储存问题消毒剂的储存问题消毒剂的储存问题消毒剂本身成分的问题消毒剂本身成分的问题消毒剂本身成分的问题消毒剂本身成分的问题美国美国CDCCDC医疗机构消毒灭菌指南医疗机构消毒灭菌指南20082008采采样样及及操操作作方方法法1、涂涂布布法法用无菌吸管吸取消毒液用无菌吸管吸取消毒液用无菌吸管吸取消毒液用无菌吸管吸取消毒液1ml1ml1ml1ml加入加入加入加入9ml9ml9ml9ml相应中和剂中相应中和剂中相应中和剂中相应中和剂中充分振荡或在混匀器上混匀充分振荡或在混匀器上混匀充
54、分振荡或在混匀器上混匀充分振荡或在混匀器上混匀30s30s30s30s取取取取200ul200ul200ul200ul接种于培养基平皿表面接种于培养基平皿表面接种于培养基平皿表面接种于培养基平皿表面均匀涂布均匀涂布均匀涂布均匀涂布每份样品同时做每份样品同时做每份样品同时做每份样品同时做2 2 2 2个平行样个平行样个平行样个平行样一个平皿置于一个平皿置于一个平皿置于一个平皿置于20202020培养培养培养培养7d7d7d7d观察真菌的生长观察真菌的生长观察真菌的生长观察真菌的生长另一平皿置于另一平皿置于另一平皿置于另一平皿置于35353535恒温培养箱培养恒温培养箱培养恒温培养箱培养恒温培养箱
55、培养72h72h72h72h计数菌落数计数菌落数计数菌落数计数菌落数怀疑与医院感染暴发相关时怀疑与医院感染暴发相关时怀疑与医院感染暴发相关时怀疑与医院感染暴发相关时进行目标微生物检测进行目标微生物检测进行目标微生物检测进行目标微生物检测消毒剂染菌量（消毒剂染菌量（cfu/mlcfu/ml）= = 每个平皿上的菌落数每个平皿上的菌落数5050结结 果果 计计 算算2、倾倾注注法法用无菌吸管吸取消毒液用无菌吸管吸取消毒液用无菌吸管吸取消毒液用无菌吸管吸取消毒液1ml1ml1ml1ml加入加入加入加入9ml9ml9ml9ml相应中和剂中相应中和剂中相应中和剂中相应中和剂中充分振荡或在混匀器上混匀充分
56、振荡或在混匀器上混匀充分振荡或在混匀器上混匀充分振荡或在混匀器上混匀30s30s30s30s分别取分别取分别取分别取500ul500ul500ul500ul接种于接种于接种于接种于2 2 2 2个个个个灭菌平皿内灭菌平皿内灭菌平皿内灭菌平皿内加入已溶化的加入已溶化的加入已溶化的加入已溶化的4545454548484848普通营养琼脂普通营养琼脂普通营养琼脂普通营养琼脂1515151518ml18ml18ml18ml边倾注边摇匀边倾注边摇匀边倾注边摇匀边倾注边摇匀待琼脂凝固待琼脂凝固待琼脂凝固待琼脂凝固一个平皿置于一个平皿置于一个平皿置于一个平皿置于20202020培养培养培养培养7d7d7d7
57、d观察真菌的生长观察真菌的生长观察真菌的生长观察真菌的生长另一平皿置于另一平皿置于另一平皿置于另一平皿置于361361361361恒温培养箱培养恒温培养箱培养恒温培养箱培养恒温培养箱培养72h72h72h72h计数菌落数计数菌落数计数菌落数计数菌落数怀疑与医院感染暴发相关时怀疑与医院感染暴发相关时怀疑与医院感染暴发相关时怀疑与医院感染暴发相关时进行目标微生物检测进行目标微生物检测进行目标微生物检测进行目标微生物检测消毒剂染菌量（消毒剂染菌量（cfu/mlcfu/ml）= = 每个平皿上的菌落数每个平皿上的菌落数2020结结 果果 计计 算算中和剂中和剂在微生物杀灭实验中在微生物杀灭实验中在微生
58、物杀灭实验中在微生物杀灭实验中用以消除试验微生物与消毒剂的混悬液中用以消除试验微生物与消毒剂的混悬液中用以消除试验微生物与消毒剂的混悬液中用以消除试验微生物与消毒剂的混悬液中和微生物表面上残留的消毒剂和微生物表面上残留的消毒剂和微生物表面上残留的消毒剂和微生物表面上残留的消毒剂使其失去对微生物的抑制和杀灭作用的试剂使其失去对微生物的抑制和杀灭作用的试剂使其失去对微生物的抑制和杀灭作用的试剂使其失去对微生物的抑制和杀灭作用的试剂中和剂选择原则中和剂选择原则本身对菌无影响本身对菌无影响本身对菌无影响本身对菌无影响生成物对菌无影响生成物对菌无影响生成物对菌无影响生成物对菌无影响确能去除杀菌因子确能去
59、除杀菌因子确能去除杀菌因子确能去除杀菌因子消毒剂消毒剂消毒剂消毒剂中和剂中和剂中和剂中和剂含氯消毒剂含氯消毒剂含氯消毒剂含氯消毒剂硫代硫酸钠（硫代硫酸钠（硫代硫酸钠（硫代硫酸钠（0.1%-1.0%0.1%-1.0%0.1%-1.0%0.1%-1.0%）碘类消毒剂碘类消毒剂碘类消毒剂碘类消毒剂硫代硫酸钠（硫代硫酸钠（硫代硫酸钠（硫代硫酸钠（0.1%-1.1%0.1%-1.1%0.1%-1.1%0.1%-1.1%）戊二醛（戊二醛（戊二醛（戊二醛（2%2%2%2%）甘氨酸（甘氨酸（甘氨酸（甘氨酸（1%1%1%1%）或甲醛（）或甲醛（）或甲醛（）或甲醛（1%1%1%1%）醇类消毒剂醇类消毒剂醇类消毒剂
60、醇类消毒剂吐温吐温吐温吐温80808080（0.5%-3.0%0.5%-3.0%0.5%-3.0%0.5%-3.0%）过氧乙酸（过氧乙酸（过氧乙酸（过氧乙酸（0.1%-0.5%0.1%-0.5%0.1%-0.5%0.1%-0.5%）硫代硫酸钠（硫代硫酸钠（硫代硫酸钠（硫代硫酸钠（0.1%-0.5%0.1%-0.5%0.1%-0.5%0.1%-0.5%）过氧乙酸（过氧乙酸（过氧乙酸（过氧乙酸（0.5%-1.0%0.5%-1.0%0.5%-1.0%0.5%-1.0%） 硫代硫酸钠（硫代硫酸钠（硫代硫酸钠（硫代硫酸钠（0.5%-1.0%0.5%-1.0%0.5%-1.0%0.5%-1.0%）常用消毒
61、剂的中和剂常用消毒剂的中和剂合合 格格 标标 准准皮肤黏膜消毒剂染菌皮肤黏膜消毒剂染菌 10cfu/ml10cfu/ml灭菌剂染菌量灭菌剂染菌量 0cfu/ml0cfu/ml消毒剂染菌量消毒剂染菌量 100cfu/ml100cfu/ml对对对对未使用的未使用的未使用的未使用的低效消毒剂和皮肤黏膜用消毒剂低效消毒剂和皮肤黏膜用消毒剂低效消毒剂和皮肤黏膜用消毒剂低效消毒剂和皮肤黏膜用消毒剂使用前使用前使用前使用前应按照使用中消毒液染菌量的方法进行细菌检测应按照使用中消毒液染菌量的方法进行细菌检测应按照使用中消毒液染菌量的方法进行细菌检测应按照使用中消毒液染菌量的方法进行细菌检测未检出细菌为合格未检
62、出细菌为合格未检出细菌为合格未检出细菌为合格消毒剂有效浓度的监测消毒剂有效浓度的监测使用中消毒液的有效浓度应该符合使用要求使用中消毒液的有效浓度应该符合使用要求使用中消毒液的有效浓度应该符合使用要求使用中消毒液的有效浓度应该符合使用要求连续使用消毒液应定期进行有效浓度测定连续使用消毒液应定期进行有效浓度测定连续使用消毒液应定期进行有效浓度测定连续使用消毒液应定期进行有效浓度测定 每日使用，每日监测；每日使用，每日监测；每日使用，每日监测；每日使用，每日监测；每周使用，每次使用前监测；每周使用，每次使用前监测；每周使用，每次使用前监测；每周使用，每次使用前监测；医务人员手卫生效果的监测医务人员手
63、卫生效果的监测遵循遵循WS/T 313WS/T 313中华人民共和国卫生部行业标准中华人民共和国卫生部行业标准医务人员手卫生规范医务人员手卫生规范手术室手术室手术室手术室 产房产房产房产房 母婴室母婴室母婴室母婴室 新生儿室新生儿室新生儿室新生儿室口腔科口腔科口腔科口腔科 器官移植病房器官移植病房器官移植病房器官移植病房 层流洁净病房层流洁净病房层流洁净病房层流洁净病房 烧伤病房烧伤病房烧伤病房烧伤病房 血液透析室血液透析室血液透析室血液透析室 导管室导管室导管室导管室 ICU ICU ICU ICU 感染性疾病科感染性疾病科感染性疾病科感染性疾病科 等部门等部门等部门等部门医疗机构应医疗机构
64、应每季度每季度对对医务人员手进行消毒效果监测医务人员手进行消毒效果监测当怀疑医院感染暴发当怀疑医院感染暴发当怀疑医院感染暴发当怀疑医院感染暴发与医务人员手卫生相关时与医务人员手卫生相关时与医务人员手卫生相关时与医务人员手卫生相关时应及时进行监测应及时进行监测应及时进行监测应及时进行监测并进行相关致病微生物的检测并进行相关致病微生物的检测并进行相关致病微生物的检测并进行相关致病微生物的检测1、采采样样时时间间手卫生后手卫生后手卫生后手卫生后接触病人或诊疗操作之前接触病人或诊疗操作之前接触病人或诊疗操作之前接触病人或诊疗操作之前2、采采样样方方法法棉拭子法棉拭子法被检人员五指并拢被检人员五指并拢被
65、检人员五指并拢被检人员五指并拢用蘸有含相应中和剂的棉拭子用蘸有含相应中和剂的棉拭子用蘸有含相应中和剂的棉拭子用蘸有含相应中和剂的棉拭子在双手手指屈面从指根到指尖往返涂擦在双手手指屈面从指根到指尖往返涂擦在双手手指屈面从指根到指尖往返涂擦在双手手指屈面从指根到指尖往返涂擦2 2 2 2次次次次一只手的涂擦面积约一只手的涂擦面积约一只手的涂擦面积约一只手的涂擦面积约30cm30cm30cm30cm2 2 2 2并随之转动采样棉拭子并随之转动采样棉拭子并随之转动采样棉拭子并随之转动采样棉拭子剪去操作者手接触的部分剪去操作者手接触的部分剪去操作者手接触的部分剪去操作者手接触的部分将棉拭子投入将棉拭子投
66、入将棉拭子投入将棉拭子投入10ml10ml10ml10ml含相应中和液的试管中含相应中和液的试管中含相应中和液的试管中含相应中和液的试管中立即送检立即送检立即送检立即送检3、检检测测方方法法同物体表面消毒效果检验方法同物体表面消毒效果检验方法4、结结果果计计算算菌落数（菌落数（菌落数（菌落数（cfu/cmcfu/cmcfu/cmcfu/cm2 2 2 2) ) ) )平皿菌落数平皿菌落数平皿菌落数平皿菌落数稀释倍数稀释倍数稀释倍数稀释倍数采样面积（采样面积（采样面积（采样面积（cmcmcmcm2 2 2 2）= =5、合合格格标标准准 、类区域：细菌菌落总数类区域：细菌菌落总数类区域：细菌菌落
67、总数类区域：细菌菌落总数5cfu/cm5cfu/cm5cfu/cm5cfu/cm2 2 2 2类区域：类区域：类区域：类区域： 细菌菌落总数细菌菌落总数细菌菌落总数细菌菌落总数10cfu/cm10cfu/cm10cfu/cm10cfu/cm2 2 2 2类区域：类区域：类区域：类区域： 细菌菌落总数细菌菌落总数细菌菌落总数细菌菌落总数15cfu/cm15cfu/cm15cfu/cm15cfu/cm2 2 2 2卫生手消毒卫生手消毒卫生手消毒卫生手消毒：细菌菌落总数细菌菌落总数细菌菌落总数细菌菌落总数10cfu/cm10cfu/cm10cfu/cm10cfu/cm2 2 2 2外科手消毒外科手消
68、毒外科手消毒外科手消毒：细菌菌落总数细菌菌落总数细菌菌落总数细菌菌落总数5cfu/cm5cfu/cm5cfu/cm5cfu/cm2 2 2 2不得检出治病微生物不得检出治病微生物不得检出治病微生物不得检出治病微生物压力蒸汽灭菌效果的生物监测压力蒸汽灭菌效果的生物监测监测时间：监测时间：监测时间：监测时间：每周一次每周一次每周一次每周一次指示菌株：指示菌株：指示菌株：指示菌株：嗜热脂肪芽胞杆菌嗜热脂肪芽胞杆菌嗜热脂肪芽胞杆菌嗜热脂肪芽胞杆菌 （ATCC7953ATCC7953ATCC7953ATCC7953或或或或SSIK31SSIK31SSIK31SSIK31株）株）株）株）培养基：培养基：培
69、养基：培养基： 溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基该菌为需氧芽孢杆菌，革兰氏染色呈紫色该菌为需氧芽孢杆菌，革兰氏染色呈紫色该菌为需氧芽孢杆菌，革兰氏染色呈紫色该菌为需氧芽孢杆菌，革兰氏染色呈紫色细菌芽胞孔雀绿着色细菌芽胞孔雀绿着色细菌芽胞孔雀绿着色细菌芽胞孔雀绿着色在溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨琼脂上表面呈粗糙呈米黄色在溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨琼脂上表面呈粗糙呈米黄色在溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨琼脂上表面呈粗糙呈米黄色在溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨琼脂上表面呈粗糙呈米黄色 嗜热脂肪芽胞杆菌（嗜热脂肪芽胞杆菌（ATCC7953ATCC7953或
70、或SSIK31SSIK31株）株）最适生长繁殖温度为最适生长繁殖温度为最适生长繁殖温度为最适生长繁殖温度为56565656 65656565，培养，培养，培养，培养24h24h24h24h形成菌落形成菌落形成菌落形成菌落热死亡时间为热死亡时间为热死亡时间为热死亡时间为121121121121嗜热脂肪芽孢杆菌菌片嗜热脂肪芽孢杆菌菌片嗜热脂肪芽孢杆菌菌片嗜热脂肪芽孢杆菌菌片染菌量为染菌量为染菌量为染菌量为5105105105105 5 5 5 101010106 6 6 6cfu/cfu/cfu/cfu/片片片片 检测方法检测方法将嗜热脂肪芽胞杆菌菌片放入将嗜热脂肪芽胞杆菌菌片放入将嗜热脂肪芽胞杆
71、菌菌片放入将嗜热脂肪芽胞杆菌菌片放入灭菌的小纸袋内灭菌的小纸袋内灭菌的小纸袋内灭菌的小纸袋内置于标准实验包中心部位置于标准实验包中心部位置于标准实验包中心部位置于标准实验包中心部位标准生物监测包应置于灭菌器排气口的上方标准生物监测包应置于灭菌器排气口的上方标准生物监测包应置于灭菌器排气口的上方标准生物监测包应置于灭菌器排气口的上方或厂家建议的灭菌器内最难灭菌的部位或厂家建议的灭菌器内最难灭菌的部位或厂家建议的灭菌器内最难灭菌的部位或厂家建议的灭菌器内最难灭菌的部位试验包制作试验包制作3 3件平纹长袖手术衣件平纹长袖手术衣件平纹长袖手术衣件平纹长袖手术衣4 4块小手术巾块小手术巾块小手术巾块小手
72、术巾2 2块中手术巾块中手术巾块中手术巾块中手术巾1 1块大手术巾块大手术巾块大手术巾块大手术巾3030块块块块10cm10cm10cm10cm纱布敷料纱布敷料纱布敷料纱布敷料裹成裹成裹成裹成25cm30cm30cm25cm30cm30cm大小大小大小大小经过一个灭菌周期后经过一个灭菌周期后经过一个灭菌周期后经过一个灭菌周期后在无菌条件下取出试验包在无菌条件下取出试验包在无菌条件下取出试验包在无菌条件下取出试验包或通气储物盒中的指示菌片或通气储物盒中的指示菌片或通气储物盒中的指示菌片或通气储物盒中的指示菌片投入投入投入投入溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基溴甲酚紫葡萄糖蛋
73、白胨水培养基溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基中中中中5656培养培养培养培养48h48h同时将未经灭菌的菌片投入另一管培养基中作对照同时将未经灭菌的菌片投入另一管培养基中作对照同时将未经灭菌的菌片投入另一管培养基中作对照同时将未经灭菌的菌片投入另一管培养基中作对照观察培养基颜色的变化观察培养基颜色的变化观察培养基颜色的变化观察培养基颜色的变化若指示菌片中的细菌未被杀灭若指示菌片中的细菌未被杀灭若指示菌片中的细菌未被杀灭若指示菌片中的细菌未被杀灭可分解培养基中的葡萄糖产酸可分解培养基中的葡萄糖产酸可分解培养基中的葡萄糖产酸可分解培养基中的葡萄糖产酸使指示剂溴甲酚紫使指示剂溴甲酚紫使指示剂溴甲酚紫使指
74、示剂溴甲酚紫由原来的由原来的由原来的由原来的紫色紫色紫色紫色变成变成变成变成黄色黄色黄色黄色对照管为黄色对照管为黄色对照管为黄色对照管为黄色灭菌合格仍为淡蓝色灭菌合格仍为淡蓝色灭菌合格仍为淡蓝色灭菌合格仍为淡蓝色灭菌不合格为黄色灭菌不合格为黄色灭菌不合格为黄色灭菌不合格为黄色自含式生物指示剂自含式生物指示剂使用方法使用方法使用方法使用方法经过一个灭菌过程后经过一个灭菌过程后经过一个灭菌过程后经过一个灭菌过程后取出指示剂管取出指示剂管取出指示剂管取出指示剂管挤破内含的安瓿挤破内含的安瓿挤破内含的安瓿挤破内含的安瓿与对照管一起放入与对照管一起放入与对照管一起放入与对照管一起放入5656培养培养培养
75、培养48h48h结果判断结果判断灭菌合格灭菌合格灭菌合格灭菌合格检测管培养阴性检测管培养阴性检测管培养阴性检测管培养阴性阳性对照管培养阳性阳性对照管培养阳性阳性对照管培养阳性阳性对照管培养阳性阴性对照管培养阴性阴性对照管培养阴性阴性对照管培养阴性阴性对照管培养阴性灭菌不合格灭菌不合格灭菌不合格灭菌不合格检测管培养阳性检测管培养阳性检测管培养阳性检测管培养阳性阳性对照管培养阳性阳性对照管培养阳性阳性对照管培养阳性阳性对照管培养阳性阴性对照管培养阴性阴性对照管培养阴性阴性对照管培养阴性阴性对照管培养阴性环氧乙烷灭菌效果的生物监测环氧乙烷灭菌效果的生物监测监测时间：监测时间：监测时间：监测时间：每灭
76、菌批次每灭菌批次每灭菌批次每灭菌批次指示菌株：指示菌株：指示菌株：指示菌株：枯草杆菌黑色变种芽胞枯草杆菌黑色变种芽胞枯草杆菌黑色变种芽胞枯草杆菌黑色变种芽胞 （ATCC9372ATCC9372ATCC9372ATCC9372）培养基：培养基：培养基：培养基： 普通营养肉汤培养基普通营养肉汤培养基普通营养肉汤培养基普通营养肉汤培养基检测方法检测方法取取取取20ml20ml一次性塑料或玻璃注射器一次性塑料或玻璃注射器一次性塑料或玻璃注射器一次性塑料或玻璃注射器去掉针头和针头套去掉针头和针头套去掉针头和针头套去掉针头和针头套拔出针栓拔出针栓拔出针栓拔出针栓将指示剂带孔的塑料盖应朝向注射器针头处将指示
77、剂带孔的塑料盖应朝向注射器针头处将指示剂带孔的塑料盖应朝向注射器针头处将指示剂带孔的塑料盖应朝向注射器针头处将注射器针栓插入原位将注射器针栓插入原位将注射器针栓插入原位将注射器针栓插入原位（不要接触到生物指示剂）（不要接触到生物指示剂）（不要接触到生物指示剂）（不要接触到生物指示剂）用一条全棉小毛巾折成两层包裹用一条全棉小毛巾折成两层包裹用一条全棉小毛巾折成两层包裹用一条全棉小毛巾折成两层包裹置于纸塑包装袋中置于纸塑包装袋中置于纸塑包装袋中置于纸塑包装袋中封袋封袋封袋封袋将常规生物监测包放在将常规生物监测包放在将常规生物监测包放在将常规生物监测包放在灭菌器最难灭菌的部位灭菌器最难灭菌的部位灭菌
78、器最难灭菌的部位灭菌器最难灭菌的部位同时设阴、阳性对照同时设阴、阳性对照同时设阴、阳性对照同时设阴、阳性对照灭菌周期完成后灭菌周期完成后灭菌周期完成后灭菌周期完成后立即将生物指示剂取出立即将生物指示剂取出立即将生物指示剂取出立即将生物指示剂取出363611培养培养培养培养7 7天天天天若用自含式生物指示剂若用自含式生物指示剂若用自含式生物指示剂若用自含式生物指示剂可直接挤碎置于可直接挤碎置于可直接挤碎置于可直接挤碎置于3737温箱中温箱中温箱中温箱中培养培养培养培养48h48h观察结果观察结果观察结果观察结果医医疗疗器器械械消消毒毒效效果果监监测测高度危险性医疗器械：高度危险性医疗器械：高度危
79、险性医疗器械：高度危险性医疗器械：进入进入进入进入正常无菌组织、脉管系统或有无菌体液（如血正常无菌组织、脉管系统或有无菌体液（如血正常无菌组织、脉管系统或有无菌体液（如血正常无菌组织、脉管系统或有无菌体液（如血液）流过，若液）流过，若液）流过，若液）流过，若被微生物污染将导致极高感染危险的器材被微生物污染将导致极高感染危险的器材被微生物污染将导致极高感染危险的器材被微生物污染将导致极高感染危险的器材如如如如手术器械；穿刺针；腹腔镜；活检钳；牙科手机手术器械；穿刺针；腹腔镜；活检钳；牙科手机手术器械；穿刺针；腹腔镜；活检钳；牙科手机手术器械；穿刺针；腹腔镜；活检钳；牙科手机及其配套器械；心导管；
80、植入物及其配套器械；心导管；植入物及其配套器械；心导管；植入物及其配套器械；心导管；植入物等等等等消毒效果：应消毒效果：应消毒效果：应消毒效果：应无菌生长无菌生长无菌生长无菌生长消毒水平：达到消毒水平：达到消毒水平：达到消毒水平：达到灭菌灭菌灭菌灭菌中度危险性医疗器械：中度危险性医疗器械：中度危险性医疗器械：中度危险性医疗器械：直接、间接接触粘膜直接、间接接触粘膜直接、间接接触粘膜直接、间接接触粘膜的器材的器材的器材的器材如如如如胃肠道内镜；气管镜；喉镜；体温表（口腔测温胃肠道内镜；气管镜；喉镜；体温表（口腔测温胃肠道内镜；气管镜；喉镜；体温表（口腔测温胃肠道内镜；气管镜；喉镜；体温表（口腔测
81、温表肛门测温表）；呼吸机管道；麻醉剂管道；压舌板；表肛门测温表）；呼吸机管道；麻醉剂管道；压舌板；表肛门测温表）；呼吸机管道；麻醉剂管道；压舌板；表肛门测温表）；呼吸机管道；麻醉剂管道；压舌板；肛门直肠压力测量导管肛门直肠压力测量导管肛门直肠压力测量导管肛门直肠压力测量导管等等等等消毒效果：消毒效果：消毒效果：消毒效果：菌落数应菌落数应菌落数应菌落数应20cfu/20cfu/20cfu/20cfu/件、件、件、件、g g g g或或或或100cm100cm100cm100cm2 2 2 2消毒水平：消毒水平：消毒水平：消毒水平：高水平消毒或中水平消毒高水平消毒或中水平消毒高水平消毒或中水平消毒
82、高水平消毒或中水平消毒氧气湿化瓶、吸引器、婴儿暖箱、加温加湿罐等氧气湿化瓶、吸引器、婴儿暖箱、加温加湿罐等氧气湿化瓶、吸引器、婴儿暖箱、加温加湿罐等氧气湿化瓶、吸引器、婴儿暖箱、加温加湿罐等宜采用宜采用宜采用宜采用高水平消毒高水平消毒高水平消毒高水平消毒低度危险性医疗器械：低度危险性医疗器械：低度危险性医疗器械：低度危险性医疗器械：仅与完整皮肤接触仅与完整皮肤接触仅与完整皮肤接触仅与完整皮肤接触而而而而不与粘膜接触不与粘膜接触不与粘膜接触不与粘膜接触的器材的器材的器材的器材如如如如听诊器；血压计袖带；病床围栏、床面以及床头听诊器；血压计袖带；病床围栏、床面以及床头听诊器；血压计袖带；病床围栏、
83、床面以及床头听诊器；血压计袖带；病床围栏、床面以及床头柜、被褥；墙面；痰盂、尿壶、便器柜、被褥；墙面；痰盂、尿壶、便器柜、被褥；墙面；痰盂、尿壶、便器柜、被褥；墙面；痰盂、尿壶、便器等等等等消毒效果：消毒效果：消毒效果：消毒效果：菌落数应菌落数应菌落数应菌落数应200cfu/200cfu/200cfu/200cfu/件、件、件、件、g g g g或或或或100cm100cm100cm100cm2 2 2 2消毒水平：消毒水平：消毒水平：消毒水平：中水平消毒或低水平消毒中水平消毒或低水平消毒中水平消毒或低水平消毒中水平消毒或低水平消毒或保持日常清洁或保持日常清洁或保持日常清洁或保持日常清洁在消毒
84、或灭菌处理后在消毒或灭菌处理后在消毒或灭菌处理后在消毒或灭菌处理后存放有效期内采样存放有效期内采样存放有效期内采样存放有效期内采样采采 样样 时时 间间可用可用可用可用破坏性破坏性破坏性破坏性方法取样的，如一次性输液（血）器、注射方法取样的，如一次性输液（血）器、注射方法取样的，如一次性输液（血）器、注射方法取样的，如一次性输液（血）器、注射器和注射针等参照器和注射针等参照器和注射针等参照器和注射针等参照中华人民共和国药典中华人民共和国药典中华人民共和国药典中华人民共和国药典无菌检查无菌检查无菌检查无菌检查法法法法进行。进行。进行。进行。灭菌医疗器材的检查方法灭菌医疗器材的检查方法灭菌医疗器材
85、的检查方法灭菌医疗器材的检查方法牙科手机牙科手机牙科手机牙科手机采样：应在采样：应在采样：应在采样：应在100100100100级洁净实验室将每支手机分别置级洁净实验室将每支手机分别置级洁净实验室将每支手机分别置级洁净实验室将每支手机分别置20-25mL20-25mL20-25mL20-25mL采样液的无菌大试管（内径采样液的无菌大试管（内径采样液的无菌大试管（内径采样液的无菌大试管（内径25mm25mm25mm25mm）中，液面高度）中，液面高度）中，液面高度）中，液面高度为为为为4.5cm4.5cm4.5cm4.5cm，于旋涡混合器上洗涤震荡，于旋涡混合器上洗涤震荡，于旋涡混合器上洗涤震荡
86、，于旋涡混合器上洗涤震荡30s30s30s30s，取洗脱液进行，取洗脱液进行，取洗脱液进行，取洗脱液进行无菌检查。无菌检查。无菌检查。无菌检查。对对对对不能用破坏性不能用破坏性不能用破坏性不能用破坏性方法取样的医疗器材，应在方法取样的医疗器材，应在方法取样的医疗器材，应在方法取样的医疗器材，应在100100100100级洁净级洁净级洁净级洁净实验室，用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子在被检物实验室，用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子在被检物实验室，用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子在被检物实验室，用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子在被检物体表面涂抹采样，被采表面体表面涂抹采样，被采表面体表面涂抹采样，
87、被采表面体表面涂抹采样，被采表面100cm2100cm2100cm2100cm2，取全部表面；被，取全部表面；被，取全部表面；被，取全部表面；被采表面采表面采表面采表面100cm2100cm2100cm2100cm2，取，取，取，取100cm2100cm2100cm2100cm2；然后将采样棉拭子进行无；然后将采样棉拭子进行无；然后将采样棉拭子进行无；然后将采样棉拭子进行无菌检查。菌检查。菌检查。菌检查。手机采样方法决定检测结果！手机采样方法决定检测结果！手机采样方法决定检测结果！手机采样方法决定检测结果！棉签涂擦法不能体现手机的无菌性！棉签涂擦法不能体现手机的无菌性！棉签涂擦法不能体现手机的
88、无菌性！棉签涂擦法不能体现手机的无菌性！（1 1 1 1）在）在）在）在洁净度洁净度洁净度洁净度100100100100级级级级区域中进行，区域中进行，区域中进行，区域中进行，严格无菌操作严格无菌操作严格无菌操作严格无菌操作 （2 2 2 2）采样后送检时间不得超过）采样后送检时间不得超过）采样后送检时间不得超过）采样后送检时间不得超过6h6h6h6h 样品保存于样品保存于样品保存于样品保存于4444，则不超过，则不超过，则不超过，则不超过24h 24h 24h 24h （3 3 3 3）如消毒因子为消毒剂，采样液中应加入中和剂）如消毒因子为消毒剂，采样液中应加入中和剂）如消毒因子为消毒剂，采
89、样液中应加入中和剂）如消毒因子为消毒剂，采样液中应加入中和剂 （4 4 4 4）采样面积，）采样面积，）采样面积，）采样面积，100cm100cm100cm100cm2 2 2 2 （5 5 5 5）设好阳性、阴性对照）设好阳性、阴性对照）设好阳性、阴性对照）设好阳性、阴性对照 注意事项：注意事项：不推荐医院常规开展灭菌物品的无菌检查不推荐医院常规开展灭菌物品的无菌检查可用可用可用可用破坏性方法取样破坏性方法取样破坏性方法取样破坏性方法取样的，应在的，应在的，应在的，应在100100100100级超净工作台称取级超净工作台称取级超净工作台称取级超净工作台称取1 1 1 110g10g10g10
90、g样样样样品，放入装有品，放入装有品，放入装有品，放入装有10mL10mL10mL10mL采样液的试管内进行洗脱，取洗脱液接种采样液的试管内进行洗脱，取洗脱液接种采样液的试管内进行洗脱，取洗脱液接种采样液的试管内进行洗脱，取洗脱液接种平皿进行菌落计数（平皿进行菌落计数（平皿进行菌落计数（平皿进行菌落计数（cfu/gcfu/gcfu/gcfu/g），必要时分离致病性微生物。），必要时分离致病性微生物。），必要时分离致病性微生物。），必要时分离致病性微生物。消毒医疗器材的检查方法消毒医疗器材的检查方法消毒医疗器材的检查方法消毒医疗器材的检查方法可可可可整件整件整件整件放入试管进行洗脱的，用洗脱液浸
91、没后震荡放入试管进行洗脱的，用洗脱液浸没后震荡放入试管进行洗脱的，用洗脱液浸没后震荡放入试管进行洗脱的，用洗脱液浸没后震荡30s30s30s30s以上，以上，以上，以上，取洗脱液接种平皿，进行菌落计数（取洗脱液接种平皿，进行菌落计数（取洗脱液接种平皿，进行菌落计数（取洗脱液接种平皿，进行菌落计数（cfu/cfu/cfu/cfu/件），必要时分离件），必要时分离件），必要时分离件），必要时分离致病性微生物。致病性微生物。致病性微生物。致病性微生物。对对对对不能用破坏性方法取样不能用破坏性方法取样不能用破坏性方法取样不能用破坏性方法取样的医疗器材，应在的医疗器材，应在的医疗器材，应在的医疗器材，应
92、在100100100100级超净工作台，用级超净工作台，用级超净工作台，用级超净工作台，用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子在被检物体表面涂抹采样，被浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子在被检物体表面涂抹采样，被浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子在被检物体表面涂抹采样，被浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子在被检物体表面涂抹采样，被采表面采表面采表面采表面100cm2100cm2100cm2100cm2，取全部表面，被采表面，取全部表面，被采表面，取全部表面，被采表面，取全部表面，被采表面100cm2100cm2100cm2100cm2，取，取，取，取100cm2100cm2100cm2100cm2，然后将采样棉
93、拭子进行洗脱，取洗脱液接种平皿进行菌落计数然后将采样棉拭子进行洗脱，取洗脱液接种平皿进行菌落计数然后将采样棉拭子进行洗脱，取洗脱液接种平皿进行菌落计数然后将采样棉拭子进行洗脱，取洗脱液接种平皿进行菌落计数（cfu/ cm2cfu/ cm2cfu/ cm2cfu/ cm2），必要时分离致病性微生物。），必要时分离致病性微生物。），必要时分离致病性微生物。），必要时分离致病性微生物。采样时间采样时间采样时间采样时间消毒灭菌后消毒灭菌后消毒灭菌后消毒灭菌后使用前使用前使用前使用前内窥镜消毒灭菌效果的生物监测内窥镜消毒灭菌效果的生物监测采样方法采样方法监测部位为内镜的监测部位为内镜的监测部位为内镜的监
94、测部位为内镜的内腔面内腔面内腔面内腔面用无菌注射器抽取用无菌注射器抽取用无菌注射器抽取用无菌注射器抽取50ml50ml含有相应中和剂的洗脱液含有相应中和剂的洗脱液含有相应中和剂的洗脱液含有相应中和剂的洗脱液从待检内镜的从待检内镜的从待检内镜的从待检内镜的活检口活检口活检口活检口注入内镜（注入内镜（注入内镜（注入内镜（使用蠕动泵使用蠕动泵使用蠕动泵使用蠕动泵）用无菌试管从活检出口收集注入的液体用无菌试管从活检出口收集注入的液体用无菌试管从活检出口收集注入的液体用无菌试管从活检出口收集注入的液体2h2h内送检内送检内送检内送检检测方法检测方法将洗脱液充分混匀将洗脱液充分混匀将洗脱液充分混匀将洗脱液
95、充分混匀 取洗脱液取洗脱液取洗脱液取洗脱液1.0ml1.0ml接种平皿接种平皿接种平皿接种平皿将冷却至将冷却至将冷却至将冷却至4040-45-45溶化的营养琼脂培养基溶化的营养琼脂培养基溶化的营养琼脂培养基溶化的营养琼脂培养基每皿倾注每皿倾注每皿倾注每皿倾注15-20ml15-20ml363611恒温箱培养恒温箱培养恒温箱培养恒温箱培养48h48h计数菌落数（计数菌落数（计数菌落数（计数菌落数（cfu/cfu/件）件）件）件）将剩余洗脱液在将剩余洗脱液在将剩余洗脱液在将剩余洗脱液在无菌条件下用滤过膜（无菌条件下用滤过膜（无菌条件下用滤过膜（无菌条件下用滤过膜（0.45um0.45um）过滤浓缩
96、）过滤浓缩）过滤浓缩）过滤浓缩将滤过膜接种于凝固的营养琼脂平板上将滤过膜接种于凝固的营养琼脂平板上将滤过膜接种于凝固的营养琼脂平板上将滤过膜接种于凝固的营养琼脂平板上置置置置363611恒温箱培养恒温箱培养恒温箱培养恒温箱培养48h48h计数菌落数（计数菌落数（计数菌落数（计数菌落数（cfu/cfu/件）件）件）件）合格标准合格标准消毒内镜消毒内镜消毒内镜消毒内镜细菌总数细菌总数细菌总数细菌总数 20cfu/20cfu/件件件件灭菌内镜灭菌内镜灭菌内镜灭菌内镜无任何细菌检出无任何细菌检出无任何细菌检出无任何细菌检出采样时间采样时间采样时间采样时间消毒灭菌后消毒灭菌后消毒灭菌后消毒灭菌后使用前使
97、用前使用前使用前呼吸机麻醉机等螺纹管消毒效果生物监测呼吸机麻醉机等螺纹管消毒效果生物监测采样方法采样方法用蘸有相应中和剂的长柄棉签用蘸有相应中和剂的长柄棉签用蘸有相应中和剂的长柄棉签用蘸有相应中和剂的长柄棉签在被检螺纹管内面反复涂擦在被检螺纹管内面反复涂擦在被检螺纹管内面反复涂擦在被检螺纹管内面反复涂擦并同时转动棉签并同时转动棉签并同时转动棉签并同时转动棉签剪去手接触的部位剪去手接触的部位剪去手接触的部位剪去手接触的部位将棉签投入将棉签投入将棉签投入将棉签投入10ml10ml含相应中和剂的含相应中和剂的含相应中和剂的含相应中和剂的无菌生理盐水试管无菌生理盐水试管无菌生理盐水试管无菌生理盐水试管
98、立即送检立即送检立即送检立即送检检测方法检测方法同物体表面微生物学的检测方法同物体表面微生物学的检测方法结果计算结果计算细菌总数（细菌总数（细菌总数（细菌总数（cfu/cmcfu/cm2 2）= =平板上的菌落数平板上的菌落数平板上的菌落数平板上的菌落数 稀释倍数稀释倍数稀释倍数稀释倍数采样面积采样面积采样面积采样面积采样面积采样面积采样面积采样面积=棉签涂抹采样的长度棉签涂抹采样的长度棉签涂抹采样的长度棉签涂抹采样的长度 螺纹管内周长螺纹管内周长螺纹管内周长螺纹管内周长医院治疗用水的细菌学检测医院治疗用水的细菌学检测血液透析相关治疗用水的细菌学监测血液透析相关治疗用水的细菌学监测依据依据依据
99、依据YY 0572YY 0572YY 0572YY 0572血液透析和相关治疗用水血液透析和相关治疗用水血液透析和相关治疗用水血液透析和相关治疗用水进行检测进行检测进行检测进行检测监测时间监测时间监测时间监测时间最初最初最初最初监测应监测应监测应监测应每周每周每周每周监测监测监测监测1 1次次次次连续连续连续连续2 2次监测结果符合要求后次监测结果符合要求后次监测结果符合要求后次监测结果符合要求后改为改为改为改为每月每月每月每月1 1次次次次采样点采样点血液透析器与复用系统连接处血液透析器与复用系统连接处血液透析器与复用系统连接处血液透析器与复用系统连接处或尽可能接近此处或尽可能接近此处或尽可
100、能接近此处或尽可能接近此处采样方法采样方法用用用用75%75%酒精擦拭采样口酒精擦拭采样口酒精擦拭采样口酒精擦拭采样口酒精自然风干后打开采样口酒精自然风干后打开采样口酒精自然风干后打开采样口酒精自然风干后打开采样口在透析液连续流动在透析液连续流动在透析液连续流动在透析液连续流动1min1min后后后后用无菌试管接取样本用无菌试管接取样本用无菌试管接取样本用无菌试管接取样本3-4ml3-4ml检验方法检验方法倾注法倾注法将洗脱液充分混匀将洗脱液充分混匀将洗脱液充分混匀将洗脱液充分混匀 取洗脱液取洗脱液取洗脱液取洗脱液1.0ml1.0ml接种平皿接种平皿接种平皿接种平皿将冷却至将冷却至将冷却至将冷
101、却至4040-45-45的的的的胰蛋白酶大豆琼脂胰蛋白酶大豆琼脂胰蛋白酶大豆琼脂胰蛋白酶大豆琼脂每皿倾注每皿倾注每皿倾注每皿倾注15-20ml15-20ml3535-37-37孵育孵育孵育孵育48h48h48h48h后若呈阴性后若呈阴性后若呈阴性后若呈阴性 延时培养至延时培养至延时培养至延时培养至72h72h计数平板上的菌落数计数平板上的菌落数计数平板上的菌落数计数平板上的菌落数菌落总数菌落总数菌落总数菌落总数(cfu/ml(cfu/ml）= =平板上的菌落数平板上的菌落数平板上的菌落数平板上的菌落数结果计算结果计算无菌操作取无菌操作取无菌操作取无菌操作取100ul100ul样本样本样本样本滴
102、于培养皿表面滴于培养皿表面滴于培养皿表面滴于培养皿表面 均匀涂抹均匀涂抹均匀涂抹均匀涂抹3535-37-37孵育孵育孵育孵育48h48h48h48h后若呈阴性后若呈阴性后若呈阴性后若呈阴性 延时培养至延时培养至延时培养至延时培养至72h72h计数平板上的菌落数计数平板上的菌落数计数平板上的菌落数计数平板上的菌落数涂抹法涂抹法菌落总数菌落总数菌落总数菌落总数(cfu/ml(cfu/ml）= =平板上的菌落数平板上的菌落数平板上的菌落数平板上的菌落数1010结果计算结果计算透析用水细菌总数透析用水细菌总数透析用水细菌总数透析用水细菌总数合格标准合格标准ISO 13959:2002 ISO 1395
103、9:2002 ISO 13959:2002 ISO 13959:2002 血液透析和相关治疗用水血液透析和相关治疗用水血液透析和相关治疗用水血液透析和相关治疗用水200cfu/ml200cfu/ml100cfu/ml100cfu/ml口腔科治疗用水的细菌菌落总数应口腔科治疗用水的细菌菌落总数应口腔科治疗用水的细菌菌落总数应口腔科治疗用水的细菌菌落总数应100cfu/mL100cfu/mL100cfu/mL100cfu/mL口腔科治疗用水的细菌学监测口腔科治疗用水的细菌学监测直接取治疗用水直接取治疗用水直接取治疗用水直接取治疗用水1mL1mL1mL1mL接种平皿接种平皿接种平皿接种平皿37373
104、737恒温箱培养恒温箱培养恒温箱培养恒温箱培养48h48h48h48h计数细菌菌落数。计数细菌菌落数。计数细菌菌落数。计数细菌菌落数。检测方法检测方法检测方法检测方法合格标准合格标准合格标准合格标准血血液液透透析析液液内内毒毒素素检检测测血液透析用水内毒素监测血液透析用水内毒素监测血液透析用水内毒素监测血液透析用水内毒素监测最初每周最初每周最初每周最初每周监测监测监测监测1 1次次次次连续连续连续连续2 2次检测结果符合要求后次检测结果符合要求后次检测结果符合要求后次检测结果符合要求后应至少应至少应至少应至少每每每每3 3月月月月送检送检送检送检1 1次次次次国际标准国际标准ISO 13959
105、:ISO 13959:血液透析和相关治疗用水血液透析和相关治疗用水水处理输出端水处理输出端水处理输出端水处理输出端内毒素含量应内毒素含量应内毒素含量应内毒素含量应1EU/ml1EU/ml血液透析器入口的输出点血液透析器入口的输出点血液透析器入口的输出点血液透析器入口的输出点内毒素含量内毒素含量内毒素含量内毒素含量 5EU/ml5EU/ml样本样本反渗水反渗水反渗水反渗水 透析液透析液透析液透析液采集方法采集方法容器容器容器容器专用无热源真空管专用无热源真空管专用无热源真空管专用无热源真空管方法方法方法方法用用用用75%75%酒精擦拭采样口酒精擦拭采样口酒精擦拭采样口酒精擦拭采样口酒精自然风干后
106、打开采样口酒精自然风干后打开采样口酒精自然风干后打开采样口酒精自然风干后打开采样口1 1分钟后用无菌无热源注射器针头分钟后用无菌无热源注射器针头分钟后用无菌无热源注射器针头分钟后用无菌无热源注射器针头深入采样口内深入采样口内深入采样口内深入采样口内吸取样本吸取样本吸取样本吸取样本3-4ml3-4ml用用用用75%75%酒精消毒无热源真空管顶端酒精消毒无热源真空管顶端酒精消毒无热源真空管顶端酒精消毒无热源真空管顶端待酒精自然挥发后待酒精自然挥发后待酒精自然挥发后待酒精自然挥发后将样品注入真空管内将样品注入真空管内将样品注入真空管内将样品注入真空管内（不可打开真空管上方的红色盖子）（不可打开真空管
107、上方的红色盖子）（不可打开真空管上方的红色盖子）（不可打开真空管上方的红色盖子）实验方法实验方法动态比浊法（仪器法）动态比浊法（仪器法）动态比浊法（仪器法）动态比浊法（仪器法）注意事项注意事项样本采集、保存、运送整个过程中样本采集、保存、运送整个过程中样本采集、保存、运送整个过程中样本采集、保存、运送整个过程中避免外来热源的污染避免外来热源的污染避免外来热源的污染避免外来热源的污染采样管抽真空采样管抽真空采样管抽真空采样管抽真空以防管内压力过高试管盖崩掉以防管内压力过高试管盖崩掉以防管内压力过高试管盖崩掉以防管内压力过高试管盖崩掉运输过程中做好保护措施运输过程中做好保护措施运输过程中做好保护措
108、施运输过程中做好保护措施以免运输途中碰撞、破碎以免运输途中碰撞、破碎以免运输途中碰撞、破碎以免运输途中碰撞、破碎每次送样时需同时送每次送样时需同时送每次送样时需同时送每次送样时需同时送3 3支与采样时所用的支与采样时所用的支与采样时所用的支与采样时所用的同一厂家、型号、批号的注射器同一厂家、型号、批号的注射器同一厂家、型号、批号的注射器同一厂家、型号、批号的注射器存在的问题存在的问题采样管的选择采样管的选择采样管的选择采样管的选择送样点送样点送样点送样点运输运输运输运输普通注射用水普通注射用水普通注射用水普通注射用水0.25EU/ml0.25EU/ml内毒素监测用水内毒素监测用水内毒素监测用水
109、内毒素监测用水0.003EU/ml0.003EU/ml产品资料：注：图片及文字介绍仅供参考，请以实物为准简介：我厂生产的六级筛孔撞击式空气微生物采样器，是一种双功能阶式多级撞击采样器，可广泛地用于卫生防疫、生物洁净、制药、发酵工业等环境中的监测以及有关研究教学部门作空气微生物的采样研究，为评价空气环境微生物污染危害及其防治措施提供依据。特点：六级筛孔撞击式空气微生物采样器能够测定空气微生物的数量之外，它独有的特性是还能测出这些粒子的大小，而后者是判定空气微生物危害的重要指标之一。它是由六个撞击器组合成一体，每一级实际是一个单级采样器，利用6次反复撞击原理，绝大部分粒子特别是在气管及肺沉降的粒子
110、基本都撞击下来，因而它采集到的粒子大小范围自然比单级的广，这是一些单级撞击采样器所无法比拟的而且采样器的圆形喷口比裂隙等喷口有更高的采样效率。采样时相对湿度逐级地增高（由第一级的39增至第六级的88），这十分有利于脆弱的病原微生物，特别是病毒粒子的存活。由于它这些与众不同的特点，使它广泛而有效地应用于空气微生物的监测，自问世以来常用不衰。被专家推荐为国际标准采样器。模拟人呼吸道的解剖结构和空气动力学生理特征，采样惯性撞击原理而将悬浮在空气中的微生物粒子分别等级地收集到采样介质表面上，然后供培养及微生物学分析。整个仪器是由撞击器、主机（流量计）、定时器、三脚架组成。撞击器是6层有微小孔眼的铝合金
111、圆盘。圆盘下放琼脂平皿，每圆盘间有密封胶圈，在通过三个弹簧挂钩把圆盘牢固地联在一起。每个圆盘上有400个成环行排列、逐层减小、尺寸精确的小孔，标准采样流量为1立方呎（28.3L/min）。当含有微生物粒子的气流进入最上层的采样口后，由于气流的逐层增高，不同大小的微生物粒子按空气动力学特征分别撞击在相应的琼脂表面上。捕获在各级上的粒子大小范围是由该级孔眼的气流速度和上一级的粒子截阻率而决定的。第1、2级类似人的上呼吸道捕获的粒子，第36级类似人的下呼吸道捕获的粒子，这就相当程度上复制了这些粒子在呼吸道的穿透作用和沉着部位。可提供加装好普通营养琼脂的平皿。技术参数：测量范围捕获率：98%捕获粒子范围第一级：7.0m孔径1.18mm第二级：4.7m7.0m孔径0.91mm第三级：3.3m4.7m孔径0.71mm第四级：2.1m3.3m孔径0.53mm第五级：1.1m-2.1m孔径0.34mm第六级：0.65m1.1m孔径0.25mm采样流量28.3L/min可调节精度5%噪声60db电子定时器范围1-24小时，精度1%工作电源220V/AC功率45W保修期1年基本配置：1.主机：一套（含真空泵，流量剂，定时器各1个）2.撞击器：6级撞击器一台3.三脚架：一台4.操作手册：一份5.连接管等专用附件：一套6.铝合金手提箱：一个结束语结束语谢谢大家聆听！谢谢大家聆听！125
