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1、厌氧性细菌厌氧性细菌Anaerobic Bacteria必须在无氧环境下，才能生长繁殖根据能否形成芽胞，可分为厌氧芽胞梭菌属无芽胞厌氧菌 厌氧芽胞梭菌厌氧芽胞梭菌 无芽胞厌氧菌无芽胞厌氧菌致病性致病性 致病性强致病性强 条件致病菌条件致病菌 外毒素毒性强烈外毒素毒性强烈 外源性感染外源性感染 内源性感染、院内感染内源性感染、院内感染 临床诊断临床诊断 症状典型症状典型 症状不典型症状不典型 细菌学检查意义不大细菌学检查意义不大 定性定性/ /定量定量/ /药物敏感试验药物敏感试验防治防治 类毒素类毒素 涉及因素众多涉及因素众多 抗毒素抗毒素 合理使用抗生素合理使用抗生素 抗生素抗生素 全面提高
2、患者免疫力全面提高患者免疫力趋势趋势 逐年减少逐年减少 日趋增多日趋增多 第一节、厌氧芽胞梭菌第一节、厌氧芽胞梭菌 ClostridiumClostridium大多严格厌氧菌，G+芽胞、强大的抵抗力分布于土壤、人和动物肠道多数为腐生菌，少数为致病菌致病菌产生强烈外毒素一、破伤风梭菌一、破伤风梭菌（Clostridium tetaniClostridium tetani）破破伤风大量存在人和大量存在人和动物物肠道，并由道，并由粪便便进入土壤，以芽胞入土壤，以芽胞形式形式长期存在土壤期存在土壤破破伤风创伤性感染性感染新生儿新生儿“脐带风”发病后机体呈病后机体呈强直性直性痉挛、抽搐，可因窒息或呼吸衰
3、、抽搐，可因窒息或呼吸衰竭死亡。死亡率竭死亡。死亡率30-50%30-50%生物学性状生物学性状G+细长杆菌，周鞭毛杆菌，周鞭毛顶端芽胞，形似鼓槌端芽胞，形似鼓槌。专性性厌氧，抵抗力氧，抵抗力强（在被（在被粪便便污染的土壤中可生染的土壤中可生存数十年）存数十年）破伤风梭菌芽胞染色破伤风梭菌芽胞染色破伤风梭菌电镜图破伤风梭菌电镜图抵抗力芽胞抵抗力很强7580 10min仍保持活力100 1小时可完全被破坏在干燥的土壤和尘埃中可存活数年致病性与免疫性伤口需形成厌氧微环境伤口需形成厌氧微环境*伤口窄而深（如刺伤）*有泥土或异物污染*大面积创伤、烧伤，坏死组织多，局部组织缺血*同时有需氧菌或兼性厌氧菌
4、混合感染的伤口致病性致病性1. 1. 致病物致病物质破破伤风溶血素溶血素（tetanolysintetanolysin）在功能与抗原性上与在功能与抗原性上与链球菌溶血素球菌溶血素O O 相似相似溶解溶解红细胞、粒胞、粒细胞、巨噬胞、巨噬细胞、成胞、成纤维细胞胞 及血小板等。及血小板等。但但对破破伤风的致病作用尚未的致病作用尚未阐明。明。破破伤风痉挛毒素毒素（tetanospasmintetanospasmin） 多肽链（多肽链（150 KD150 KD） 细菌蛋白酶切割细菌蛋白酶切割重链（重链（100KD100KD）S S S S 轻链（轻链（50KD50KD） 受体：神经细胞表面受体：神经细
5、胞表面 毒性作用：毒性作用：神经节苷脂结合神经节苷脂结合 封闭抑制性突触的封闭抑制性突触的抑制介质释放抑制介质释放破破伤风痉挛毒素（毒素（tetanospasmintetanospasmin）神神经毒素：毒素：对中枢神中枢神经细胞有高度胞有高度亲和力和力蛋白蛋白质，不耐，不耐热，65306530分分钟即被破坏。可被即被破坏。可被肠道的蛋道的蛋白白酶破坏。破坏。毒性非常毒性非常强烈，烈，仅次于肉毒毒素，次于肉毒毒素，对人致死量人致死量1 1g g重链高亲和力结合运动神经元上的受体，促使毒素进入细胞内形成小泡。轻链为锌内肽酶，裂解抑制性神经递质小泡膜蛋白，阻止抑制性神经介质的释放，使肌肉活动的兴奋
6、与抑制失调，造成强直性痉挛破破伤风痉挛毒素与毒血症毒素与毒血症芽胞芽胞-出芽成繁殖体出芽成繁殖体-局部大量繁殖（不侵入血液）局部大量繁殖（不侵入血液）产生外毒素生外毒素-进入血流入血流-毒血症毒血症外毒素外毒素 由末梢神由末梢神经沿沿轴索索-神神经纤维的的间隙逆行向上隙逆行向上-脑干干 血流、淋巴液血流、淋巴液-中枢神中枢神经系系统阻止抑制性介阻止抑制性介质的的释放、放、丧失抑制性神失抑制性神经元的元的协调作用，作用，致使骨骼肌致使骨骼肌强烈收烈收缩，导致肌肉致肌肉强直直痉挛。临床症状：肌肉痉挛典型症状包括苦笑面容、牙关紧闭、角弓反张，窒息或呼吸衰竭死亡。牙关紧闭,脸部苦笑角弓反张A A se
7、vere severe case case of of tetanus. tetanus. muscles, muscles, back back and and legs legs are are rigidrigid，muscle muscle spasms spasms can can break break bones,bones, can can be fatalbe fatal (e.g respiratory failure)(e.g respiratory failure)主要依靠抗毒素的中和作用抗毒素抗体与游离的痉挛毒素结合，可阻断毒素进入易感细胞，但抗毒素抗体对已与神经细胞
8、受体结合的毒素无中和保护作用病后一般不会获得牢固免疫力毒性强：致死量的毒素还不足以产生抗体毒素迅速与神经组织牢固结合，不能有效地刺激免疫系统。获得抗毒素的方法：主主动免疫免疫-类毒素毒素被被动免疫免疫-抗毒素抗毒素免疫性 典型的症状和病史即可作出诊断，一般不进行涂片镜检和分离培养微生物学检查法微生物学检查法防治原防治原则防止防止创口口厌氧微氧微环境的形成境的形成, ,正确正确处理理创口、清口、清创扩创对可疑外可疑外伤病人，病人，应立即注射破立即注射破伤风抗毒素（抗毒素（tetanus tetanus antitoxinantitoxin，TATTAT）以）以获得被得被动免疫作免疫作紧急急预防防
9、. .注射注射类毒素以毒素以进行特异性行特异性预防三防三联疫苗（白百破三疫苗（白百破三联菌菌苗苗DPTDPT） 免疫程序：免疫程序：3 3、4 4、5 5月月 3 3次次 2 2、7 7岁加加强 2 2次次 特殊情况特殊情况 1 1次次对已已发病者，特异性治病者，特异性治疗包括早期足量使用抗毒素及抗包括早期足量使用抗毒素及抗生素两方面生素两方面. .二、产气荚膜梭菌二、产气荚膜梭菌（C. Perfringens)形形态与染色与染色两端几乎平切的G+粗大杆菌芽胞位于次极端，呈椭圆形，不大于菌体在体内有明显的荚膜 培养特性厌氧生长旺盛：在最适生长温度42，繁殖周期为8分钟.代谢活跃,产酸产气，牛奶
10、培养基中，可出现“汹涌发酵”（stormy fermentation）血平板，多数菌株有血平板，多数菌株有双层溶血环双层溶血环内环内环, ,完全溶血完全溶血,毒素引起毒素引起外环外环, ,不完全溶血不完全溶血,毒素引起毒素引起肉渣汤培养基牛乳培养基高糖琼脂培养基接种破伤风梭菌接种产气荚膜梭菌致病性致病性1 1、致病物、致病物质荚膜：膜：外毒素：外毒素：产气荚膜梭菌能产生10余种外毒素，有些外毒素即为胞外酶、毒素毒素引起坏死损伤和血管通透性增加引起坏死损伤和血管通透性增加毒素毒素: :分解细胞膜上磷脂和蛋白形成的复合物，造成细分解细胞膜上磷脂和蛋白形成的复合物，造成细胞溶解，引起血管通透性增加伴
11、大量溶血、组织胞溶解，引起血管通透性增加伴大量溶血、组织坏死、肝脏、心功能受损坏死、肝脏、心功能受损. .产气荚膜梭菌主要和次要毒素及其分型所致疾病所致疾病（1 1）气性坏疽气性坏疽致病条件与破伤风梭菌相同致病条件与破伤风梭菌相同致病条件与破伤风梭菌相同致病条件与破伤风梭菌相同, , , ,大面积创伤大面积创伤大面积创伤大面积创伤潜伏期短，发展迅速，病情险恶，死亡率高，潜伏期短，发展迅速，病情险恶，死亡率高，潜伏期短，发展迅速，病情险恶，死亡率高，潜伏期短，发展迅速，病情险恶，死亡率高，以组织坏死，气肿和全身中毒为特征以组织坏死，气肿和全身中毒为特征组织坏死、血管内皮损伤，通透性上升组织坏死、
12、血管内皮损伤，通透性上升 出血、水肿、局部坏死出血、水肿、局部坏死分解糖产气，压迫软组织、血管，气肿分解糖产气，压迫软组织、血管，气肿 加重组织坏死加重组织坏死分解组织，病变迅速扩散，引起全身中毒症状分解组织，病变迅速扩散，引起全身中毒症状气性坏疽气性坏疽 创口口 污染（芽胞染（芽胞细菌）菌）迅速繁殖，迅速繁殖，产生多种毒素和生多种毒素和酶 毒素毒素 有利于有利于细菌侵菌侵袭 透明透明质酸酸酶 胶原胶原酶 损伤组织、肌肉、肌肉 发酵肌肉酵肌肉/组织中的糖中的糖类 产气，造成气气，造成气肿，挤压组织和血管和血管 局部局部 组织坏死坏死 水水肿、压迫迫 水气水气夹杂恶臭臭剧烈烈胀疼疼 触摸、捻触摸
13、、捻发感感 不及不及时治治疗全身中毒症状全身中毒症状 毒血症毒血症（毒素和（毒素和组织坏死的毒性坏死的毒性产物吸收入血）物吸收入血）心率减慢，血心率减慢，血压下降、休克，死亡率可达下降、休克，死亡率可达30%（2 2）食物中毒）食物中毒食入被食入被 菌株菌株污染的食物染的食物主要症状：腹痛、腹泻，主要症状：腹痛、腹泻，1 12 2天自愈。天自愈。（3 3）坏死性肠炎）坏死性肠炎毒素引起的肠道运动神经麻痹坏死毒素引起的肠道运动神经麻痹坏死主要症状：腹痛、腹泻，血便可引发肠穿孔。主要症状：腹痛、腹泻，血便可引发肠穿孔。 微生物学微生物学检查法法基本原基本原则： 气性坏疽气性坏疽发展急展急剧、后果、
14、后果严重，重，应尽早作出确尽早作出确诊，及早治，及早治疗，以避免截肢以避免截肢/ /死亡。死亡。1 1、直接涂片、直接涂片镜检极有价极有价值的快速的快速诊断断A ：发现G+大杆菌大杆菌 有有荚膜膜 早早创口深部取材口深部取材B： 白白细胞甚少，且形胞甚少，且形态不典型不典型 期期涂片涂片GS染色染色 （毒素作用，无（毒素作用，无趋化作用）化作用） 诊C： 伴有其他伴有其他杂菌菌 断断2 2、进一步培养：一步培养： A A：分离培养：分离培养菌落形菌落形态 B B：汹涌汹涌发酵酵试验C C：动物物试验： 0.5ml0.5ml细菌培养液菌培养液 尾尾 静静 脉脉 小鼠小鼠 1010分分钟处死死 3
15、737培养培养5 58 8小小时动物躯体膨物躯体膨胀 泡沫肝泡沫肝 肝涂片：有肝涂片：有荚膜的粗大杆菌膜的粗大杆菌3、如如怀疑食物中毒，在疑食物中毒，在发病后一日内，病后一日内，检出大于出大于10105 5病菌病菌/ /克食品或克食品或10106 6病菌病菌/ /克克粪便可确立便可确立诊断断 防治原则防治原则伤口清洗、处理伤口清洗、处理切除局部坏死组织切除局部坏死组织截肢以防止病变扩散，引起全身中毒截肢以防止病变扩散，引起全身中毒抗生素、抗血清治疗，辅以高压氧舱抗生素、抗血清治疗，辅以高压氧舱三、肉毒梭菌（Cbotulinum）细菌在厌氧环境中繁殖，分泌肉毒毒素，细菌在厌氧环境中繁殖，分泌肉毒
16、毒素，它是已知最剧烈的毒素。它是已知最剧烈的毒素。食物中毒（肉毒中毒）、婴儿肉毒中毒。食物中毒（肉毒中毒）、婴儿肉毒中毒。n常见食物：肉毒杆菌污染的封闭食品（罐头、豆瓣酱等），食前未加热处理。n临床症状：乏力、复视、眼睑下垂、吞咽困难，严重者因呼吸肌、心肌麻痹而死亡。生物学性状生物学性状G G+ +粗大杆菌，粗大杆菌，芽胞呈芽胞呈芽胞呈芽胞呈椭圆椭圆形，粗于菌体，位于次极端，使形，粗于菌体，位于次极端，使形，粗于菌体，位于次极端，使形，粗于菌体，位于次极端，使细细菌菌菌菌呈呈呈呈汤汤匙状或网球拍状匙状或网球拍状匙状或网球拍状匙状或网球拍状有鞭毛，无有鞭毛，无荚膜。膜。厌氧，氧，营养要求不高养要
17、求不高产生毒素的抗原性不同，可分生毒素的抗原性不同，可分为8 8个型（个型（A A、B B、C C、C C、D D、E E、F F、G G）。各型毒素只能被同型抗毒素中和。）。各型毒素只能被同型抗毒素中和。引起人引起人类疾病的以疾病的以A A、B B型最常型最常见，我国，我国报道：道：A A型多型多见. . 肉毒杆菌芽胞抵抗力肉毒杆菌芽胞抵抗力强大：高大：高压蒸气蒸气1213012130分分钟 干干热180518051515分分钟， 方能方能杀灭。致病性致病性1 1、致病物质、致病物质-肉毒毒素（肉毒毒素（botulinbotulin）已知最毒的毒素：比已知最毒的毒素：比KCNKCN强一万倍，
18、对人致死量强一万倍，对人致死量0.1g0.1g肉肉毒毒肉毒毒素作用于外周胆碱能神经，抑制神经肌肉接点处肉毒毒素作用于外周胆碱能神经，抑制神经肌肉接点处神经介质乙酰胆碱的释放，导致弛缓性麻痹神经介质乙酰胆碱的释放，导致弛缓性麻痹2 2、所致疾病、所致疾病（1）食物中毒）食物中毒致病条件致病条件 A A：食品被：食品被细菌芽胞菌芽胞污染染 B B：制：制备罐罐头时未未彻底底灭菌菌 C C：芽胞在罐：芽胞在罐头等密封等密封厌氧氧环境下境下发芽繁殖，芽繁殖， 产生大量外毒素生大量外毒素-肉毒毒素（前体毒素）肉毒毒素（前体毒素） D D：食用前，又未：食用前，又未经加加热； 食入后抵抗胃酸作用，达到食入
19、后抵抗胃酸作用，达到肠道。道。 E E：无毒的前体毒素：无毒的前体毒素经胰蛋白胰蛋白酶分解，分解， 解离出有毒性的肉毒毒素。解离出有毒性的肉毒毒素。1 1、食物中毒、食物中毒前体毒素复合物，无毒性前体毒素复合物，无毒性, , 可抵抗胃酸作用可抵抗胃酸作用 小小肠，碱性条件下解离，碱性条件下解离为肉毒毒素肉毒毒素 吸收入淋巴吸收入淋巴/ /血液血液 运运动神神经肌肉接肌肉接头，其重其重链与神与神经末梢的受体末梢的受体结合合 轻链进入入细胞胞, ,阻碍介阻碍介质释放放( (乙乙酰胆碱胆碱) ) 肌肉弛肌肉弛缓性麻痹性麻痹 致病特点致病特点1.1.主要表主要表现为运运动神神经末梢麻痹，死于呼吸困末梢
20、麻痹，死于呼吸困难、衰竭衰竭, ,病死率高。病死率高。2.2.胃胃肠道症状很少道症状很少见3.3.单纯毒素性食物中毒，非毒素性食物中毒，非细菌感染性菌感染性4.4.神志清楚神志清楚（2 2）婴儿肉毒病儿肉毒病感染者以感染者以6 6个月以内的小个月以内的小婴儿居多儿居多 （肠道尚未建立正常菌群微生道尚未建立正常菌群微生态环境）境）为细菌芽胞直接感染菌芽胞直接感染 食用食用污染食品（如蜂蜜染食品（如蜂蜜-含有肉毒杆菌芽胞）含有肉毒杆菌芽胞）, ,出芽出芽 繁殖、繁殖、产生毒素生毒素而致病而致病而致病而致病症状症状: :与肉毒毒素食物中毒与肉毒毒素食物中毒类似，最先引人注意的症状是便似，最先引人注意
21、的症状是便秘，吸乳、啼哭无力。秘，吸乳、啼哭无力。婴儿肉毒病死亡率不高（儿肉毒病死亡率不高（1%1%2%2%）（3）创伤感染中毒）创伤感染中毒 极少数为成人伤口或手术后细菌在局部增殖极少数为成人伤口或手术后细菌在局部增殖，释放肉毒素，释放肉毒素微生物学微生物学检查法法 食物、食物、粪便便 加加热 杀死非芽胞死非芽胞杂菌菌 毒素毒素检测 芽胞芽胞-肉毒杆菌肉毒杆菌 厌氧培养氧培养动物物试验 毒力保毒力保护试验 分离分离细菌菌毒力毒力试验 防治原则n n加加强强食食品品卫卫生生管管理理和和监监督督，提提高高防防范范意意识识 （低温保存食物，高温破坏毒素）（低温保存食物，高温破坏毒素）n n尽尽早早
22、根根据据症症状状作作出出诊诊断断，迅迅速速注注射射A A、B B、E E三三型多价抗毒素，同时加强护理和对症治疗型多价抗毒素，同时加强护理和对症治疗 第二节第二节 无芽胞厌氧菌无芽胞厌氧菌种种类繁多、分布广泛繁多、分布广泛是机体正常菌群的主要是机体正常菌群的主要/ /重要重要组成部分，成部分， 绝对优势菌菌9090引起内源性感染，占引起内源性感染，占临床床细菌感染的大部分菌感染的大部分一、主要种类、性状和在感染中的作用革兰阴性厌氧杆菌革兰阴性厌氧杆菌 类杆菌属类杆菌属脆脆弱弱类类杆杆菌菌( (B Bfragilisfragilis) )：临临床床上上最最常常见见的的无无芽芽胞胞厌氧菌分离株厌氧
23、菌分离株呈多型性形态，有荚膜呈多型性形态，有荚膜类类杆杆菌菌有有典典型型的的革革兰兰阴阴性性菌菌细细胞胞壁壁，但但其其脂脂多多糖糖无无内内毒素活性毒素活性革兰阳性厌氧球菌消化链球菌属，在临床厌氧菌分离株中， 仅次于脆弱类杆菌.主要寄居于阴道.常因女性生殖道感染而引起厌氧菌菌血症， 占1%.革兰阳性厌氧杆菌革兰阳性厌氧杆菌丙酸杆菌丙酸杆菌能发酵糖类产生丙酸能发酵糖类产生丙酸痤疮丙酸杆菌（痤疮丙酸杆菌（P Pacnesacnes）双歧杆菌属双歧杆菌属 正常肠道菌群，在大肠中起重要的调节作用，只正常肠道菌群，在大肠中起重要的调节作用，只有齿双歧杆菌（有齿双歧杆菌（B.dentiumB.dentium
24、）与龋齿和牙周炎有关）与龋齿和牙周炎有关真杆菌属真杆菌属二、致病性二、致病性致病条件致病条件属正常菌群，在成属正常菌群，在成为条件致病菌后，可条件致病菌后，可引起内源性感染引起内源性感染. .感染条件感染条件寄居部位改寄居部位改变宿主免疫力下降宿主免疫力下降菌群失菌群失调厌氧微氧微环境境感染特征 临床上遇到以下情况，应考虑有无厌氧菌感染 内源性感染，可及全身，多呈慢性 无特定病型，大多为化脓性感染 分泌物或脓液粘稠，乳白色、粉红色、血色或棕黑色，有恶臭，有时有气体 使用氨基糖苷类抗生素长期无效 分泌物直接涂片可见细菌，但普通培养法无细菌生长所致疾病腹腔感染：腹膜炎、阑尾炎等。 女性生殖道和盆腔
25、感染：盆腔脓肿、子宫内膜炎等。 口腔感染：牙周脓肿，下颌骨髓炎等。呼吸道感染：坏死性肺炎、肺脓疡等。败血症：多为脆弱类杆菌。中枢神经系统感染：脑脓疡，可继发中耳炎、鼻窦炎等。微生物学检查法微生物学检查法采集无正常菌群部位的采集无正常菌群部位的标本本尽量尽量厌氧采集氧采集标本本（包括（包括标本采集、运送）本采集、运送）作作厌氧氧/ /需氧需氧/ /微需氧培养微需氧培养-鉴别是否是是否是厌氧菌氧菌厌氧培养基：氧培养基：营养丰富养丰富 牛心牛心脑浸液血平板浸液血平板预先先还原原 厌氧氧环境境还原原24h/24h/加加热煮沸，煮沸，驱除液体中除液体中O O2 2判断：判断： 厌氧氧环境境 有氧有氧环境境 生生长 生生长 兼性需氧菌兼性需氧菌 生生长 不生不生长 专性性厌氧菌氧菌 不生不生长 生生长 专性性厌氧菌氧菌防治原则预防防条件致病菌，条件致病菌，避免正常菌群侵入其不避免正常菌群侵入其不应存在的部位存在的部位外科清外科清创引流是引流是预防防厌氧菌感染的一个重要措施。氧菌感染的一个重要措施。防防止局部出止局部出现厌氧微氧微环境境. .治治疗合理合理选择抗生素抗生素大多数无芽胞大多数无芽胞厌氧菌氧菌对甲硝甲硝唑、氯霉霉素、素、氯林可霉素等敏感，用于治林可霉素等敏感，用于治疗。混合感染（需氧或兼性菌），在混合感染（需氧或兼性菌），在选药物物时应有全面考有全面考虑，二者兼，二者兼顾。
