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1、医院感染监测方法医院感染监测的定义v医院感染监测的定义医院感染监测的定义:v医院感染监测是指长期地、系统地、有方案医院感染监测是指长期地、系统地、有方案地、自动地察看一定人群中医院感染发生和地、自动地察看一定人群中医院感染发生和分布以及影响医院感染的各种要素，对监测分布以及影响医院感染的各种要素，对监测资料进展定期的整理分析，确定其分布动态资料进展定期的整理分析，确定其分布动态和变化趋势，向有关人员和单位发送、反响，和变化趋势，向有关人员和单位发送、反响，并及时采取防治对策和措施，同时对其防治并及时采取防治对策和措施，同时对其防治效果和经济效益作出评价，不断改良，以期效果和经济效益作出评价，不
2、断改良，以期到达控制和降低医院感染的目的。到达控制和降低医院感染的目的。医院感染监测的内涵v医院感染监测的内涵医院感染监测的内涵v要有一个长期的监测方案，延续系统地搜集要有一个长期的监测方案，延续系统地搜集资料资料v定期汇总并经分析和解释所搜集的资料，使定期汇总并经分析和解释所搜集的资料，使之成为有意义的资料，向有关人员或单位反之成为有意义的资料，向有关人员或单位反响或报送响或报送v准确地确定医院感染的各种问题，以便有针准确地确定医院感染的各种问题，以便有针对性地采取控制措施对性地采取控制措施v对各种监测方法和手段要进展评价对各种监测方法和手段要进展评价v要确定诊断规范要确定诊断规范医院感染监
3、测的目的v医院感染监测是医院感染控制的先行，医院医院感染监测是医院感染控制的先行，医院感染控制程度是反映医疗技术程度的重要评感染控制程度是反映医疗技术程度的重要评价目的之一。价目的之一。v目的是为了控制医院感染的各种危险要素，目的是为了控制医院感染的各种危险要素，降低医院感染的各种危险要素、降低医院感降低医院感染的各种危险要素、降低医院感染的发生率，保证和提高医疗质量和医疗平染的发生率，保证和提高医疗质量和医疗平安安医院感染监测简史v医院感染监测源于医院感染监测源于19世纪中叶，产褥热发生世纪中叶，产褥热发生缘由的调查研讨缘由的调查研讨v医院感染监测的系统开展始于医院感染监测的系统开展始于20
4、世纪世纪50年代年代欧美欧美MRSA感染的流行感染的流行v美国在美国在60年代开场成立医院感染控制委员会，年代开场成立医院感染控制委员会，在医院中开展空气和环境的细菌学监测在医院中开展空气和环境的细菌学监测医院感染监测的组织系统v由以下机构和部门构成由以下机构和部门构成v院长指点下的医院感染管理委员会院长指点下的医院感染管理委员会v医院感染科医院感染科v科室医院感染管理小组科室医院感染管理小组v组成三级医院感染监测管理网络组成三级医院感染监测管理网络医院感染监测的人员分工和职责v医院感染委员会担任医院感染监测与控制的医院感染委员会担任医院感染监测与控制的全面指点与管理任务。全面指点与管理任务。
5、v医院感染科由专职人员组成，是医院感染管医院感染科由专职人员组成，是医院感染管理委员会的办事机构，担任全面医院感染管理委员会的办事机构，担任全面医院感染管理任务理任务医院感染监测的人员分工和职责v病房医院感染管理小组普通由主治医师、护士长、病房医院感染管理小组普通由主治医师、护士长、感控医生和监控护士组成。感控医生和监控护士组成。v监控护士担任对空气、物体外表、医护人员的手进监控护士担任对空气、物体外表、医护人员的手进展定期监测和对本科进展全面监视检查展定期监测和对本科进展全面监视检查v住院医师担任对住院病人医院感染的临床检查、诊住院医师担任对住院病人医院感染的临床检查、诊断、合理运用抗菌药物
6、并填写医院感染病例登记表，断、合理运用抗菌药物并填写医院感染病例登记表，由科主任、主治医师审核签字后上报医院感染管文由科主任、主治医师审核签字后上报医院感染管文科。科。v由医院感染科汇总制表，送医院感染管理委员会主由医院感染科汇总制表，送医院感染管理委员会主任审核后上报上级部门任审核后上报上级部门医院感染监测的信息反响系统v和医院感染三级管理机构一同组成完好的管和医院感染三级管理机构一同组成完好的管理体系理体系v在医院感染管理任务中具有互通情报、承上在医院感染管理任务中具有互通情报、承上启下、发现问题、改良任务的重要作用。启下、发现问题、改良任务的重要作用。医院感染监测内容v医院感染率及其病种
7、与部位分布医院感染率及其病种与部位分布v常用的统计目的有常用的统计目的有v医院感染发生率医院感染发生率v例次发病率例次发病率v患病率及构成比、均数等患病率及构成比、均数等医院感染监测内容漏漏报率率采用回想性采用回想性调查，普通以月，普通以月为单位位 漏漏报率率= 漏漏报病例数病例数 100% 原上原上报病例数病例数+漏漏报例数例数医院感染监测内容估估计实践践发病率病率估估计实践践发病率病率= 报揭露病率揭露病率 100% 1漏漏报率率“实践病例数践病例数= 估估计发病率病率 报告病例数告病例数 报揭露病率揭露病率医院感染监测内容v病原体与药物敏感性的监测病原体与药物敏感性的监测v病原体变化趋势
8、的监测病原体变化趋势的监测v病原体耐药性的变化趋势的监测病原体耐药性的变化趋势的监测v平常及医院感染迸发时微生物实验室监测资平常及医院感染迸发时微生物实验室监测资料需及时报告，并在一定时期做出微生物报料需及时报告，并在一定时期做出微生物报告小结告小结v应做好菌种保管及耐药谱变化记录，将菌株应做好菌种保管及耐药谱变化记录，将菌株生化、血清、分子生物学分型结果存于计算生化、血清、分子生物学分型结果存于计算机数据库以便于分析生物型、血清型、分子机数据库以便于分析生物型、血清型、分子生物型变化生物型变化医院感染监测内容v环境境卫生生监测v病房保病房保洁制度制度执行情况行情况监测v 是是预防医院感染的根
9、本要求，尤其是重防医院感染的根本要求，尤其是重点点 病房及科室病房及科室v对医院医院环境境细菌学菌学监测v医院空气微生物学医院空气微生物学检验v微生物气溶胶感染的微生物气溶胶感染的预防：防：污染源的染源的监测、对“排菌者和排菌者和“带菌者的菌者的调查附：医院感染监测公用表格医院感染监测方法v监测方法的类型监测方法的类型v全面综合性监测全面综合性监测v指对全院一切病人、任务人员及感染有关要指对全院一切病人、任务人员及感染有关要素和环境的综合监测，了解全院感染率、各素和环境的综合监测，了解全院感染率、各科感染率、病原体及其耐药性和因院感呵斥科感染率、病原体及其耐药性和因院感呵斥的经济损失等，对全院
10、人员进展宣传教育，的经济损失等，对全院人员进展宣传教育，发现问题，采取措施，预防发生、中止流行。发现问题，采取措施，预防发生、中止流行。v目前我国大多数医院都需求进展全面综合性目前我国大多数医院都需求进展全面综合性监测监测医院感染监测方法目的性监测目的性监测在全面综合性监测根底上才干进展目的性监测，在全面综合性监测根底上才干进展目的性监测，包括部门监测、轮转监测、从优监测等方法包括部门监测、轮转监测、从优监测等方法是医院感染监测的一种新观念和方法是医院感染监测的一种新观念和方法医院感染监测方法v资料搜集方法资料搜集方法v医生自报医生自报v漏报率高，需提高医生对医感的认识，加强漏报率高，需提高医
11、生对医感的认识，加强迫度与责任管理。迫度与责任管理。v横断面现况调查横断面现况调查v由医院感染专职人员完成，可初步了解医院由医院感染专职人员完成，可初步了解医院感染率的本底及其变动情况，同时分析医院感染率的本底及其变动情况，同时分析医院感染的危险要素，找出薄弱环节，采取控制感染的危险要素，找出薄弱环节，采取控制措施，任务量大，容易做到，结果快速，漏措施，任务量大，容易做到，结果快速，漏报率高，可延续定期进展以使结果尽量符合报率高，可延续定期进展以使结果尽量符合医院感染的真实情况医院感染的真实情况医院感染监测方法回想性调查回想性调查普通回想性调查无对照组普通回想性调查无对照组病例病例-对照感染危
12、险要素调查对照感染危险要素调查为分析感染缘由提供初步根据，常因原始病历记为分析感染缘由提供初步根据，常因原始病历记载不完好，漏诊难以防止，不能真实反映医院感载不完好，漏诊难以防止，不能真实反映医院感染程度染程度感染监控护士登记感染监控护士登记每个病房应设一名兼职医院感染监控护士，加以每个病房应设一名兼职医院感染监控护士，加以培训，对其病房发生的感染病例进展登记，随时培训，对其病房发生的感染病例进展登记，随时与感染控制科联络与感染控制科联络医院感染监测方法医院感染专职人员做前瞻性调查医院感染专职人员做前瞻性调查要监测医院感染的发病率，必需由专职医院感染要监测医院感染的发病率，必需由专职医院感染人
13、员组织进展前瞻性调查人员组织进展前瞻性调查有方案地对某些重点科室或全院进展某时期的医有方案地对某些重点科室或全院进展某时期的医院感染前瞻调查，以发现该时期某病房或全院发院感染前瞻调查，以发现该时期某病房或全院发生的感染病例生的感染病例计算医院感染发病率，以及有关危险要素的分析计算医院感染发病率，以及有关危险要素的分析也可对暴露与未暴露于某危险要素的病例进展队也可对暴露与未暴露于某危险要素的病例进展队列研讨，以进一步证明感染的缘由。列研讨，以进一步证明感染的缘由。结果较为真实可靠，但需一定人力、物力及较长结果较为真实可靠，但需一定人力、物力及较长时间，有时难于坚持时间，有时难于坚持医院感染监测方
14、法v资料整理资料整理v原始资料整理核实原始资料整理核实v能否按要求仔细完好填写院感病例登记表及能否按要求仔细完好填写院感病例登记表及其它相关表格，缺项要立刻补上其它相关表格，缺项要立刻补上v对诊断不确定的感染病例再核实对诊断不确定的感染病例再核实v去除反复的病例去除反复的病例医院感染监测方法统计目的统计目的对核实好的资料计算以下目的对核实好的资料计算以下目的前瞻性调查资料，要计算全院及各科的医院感染前瞻性调查资料，要计算全院及各科的医院感染病例发病率及例次发病率病例发病率及例次发病率横断面调查资料可计算医院感染现患率及各部位横断面调查资料可计算医院感染现患率及各部位感染率及构成比感染率及构成比
15、对平常医生自报资料，要定期整理计算以上各目对平常医生自报资料，要定期整理计算以上各目的的医院感染监测方法除以上目的外，可根据调查登记表工程进展统计，如除以上目的外，可根据调查登记表工程进展统计，如抗生素运用率抗生素运用率病原菌及其耐药率病原菌及其耐药率各种危险要素情况等各种危险要素情况等应对各项目的进展编号以便输入计算机管理应对各项目的进展编号以便输入计算机管理医院感染监测方法v结果分析一结果分析一v比较医院感染率的变动性况，与本底感染率比较能比较医院感染率的变动性况，与本底感染率比较能否有上升或下降，分析其缘由是什么否有上升或下降，分析其缘由是什么v分析各种危险要素与医院感染病例发生的关系分
16、析各种危险要素与医院感染病例发生的关系v抗生素运用率与细菌耐药性的情况抗生素运用率与细菌耐药性的情况v各种感染病原菌变动及流行株情况各种感染病原菌变动及流行株情况医院感染监测方法v结果分析二结果分析二v医院感染对本院医护人员安康的损害及影响出勤率医院感染对本院医护人员安康的损害及影响出勤率等情况等情况v因医院感染添加病人苦楚、延伸住院天数以及呵斥因医院感染添加病人苦楚、延伸住院天数以及呵斥的经济损失等的经济损失等v如医院感染迸发，那么需立刻查清缘由，采取针对如医院感染迸发，那么需立刻查清缘由，采取针对性措施并察看其效果如何性措施并察看其效果如何院感监测资料的利用v对医院感染开展趋向预测和预告对
17、医院感染开展趋向预测和预告v发现某时期分发感染病例添加，已明显超越发现某时期分发感染病例添加，已明显超越了本底感染率了本底感染率v流行菌株及耐药性有变化流行菌株及耐药性有变化v可预测将有能够发生医院感染的流行或迸发可预测将有能够发生医院感染的流行或迸发院感监测资料的利用v探求危探求危险要素要素v除除传统的院感危的院感危险要素外，我要素外，我们面面临着：着：v各种新型侵入性医各种新型侵入性医疗检查治治疗手段的大量手段的大量运用运用v患者添加、床位添加、老年与患者添加、床位添加、老年与婴幼儿、免幼儿、免疫低下、慢性病患者不断添加疫低下、慢性病患者不断添加v新型广新型广谱抗生素的大量运用、多重甚至泛
18、抗生素的大量运用、多重甚至泛耐耐药细菌、菌、“超超级细菌的出菌的出现v高致性微生物不断出高致性微生物不断出现SARS、H5N1、禽流感禽流感 v使医院感染不断出使医院感染不断出现新的危新的危险要素，亟需要素，亟需经过监测去探求与去探求与专题研研讨院感监测资料的利用v防治效果的评价防治效果的评价v经过监测任务可跟踪察看某项防治措施对医经过监测任务可跟踪察看某项防治措施对医院感染发病率的动态变化，凡是运用后发病院感染发病率的动态变化，凡是运用后发病率能明显降低者，可以为该项措施是有效的，率能明显降低者，可以为该项措施是有效的，反之那么以为无效。反之那么以为无效。医院微生物监测方法环境空气的监测v采
19、采样时间v清毒清毒处置后与置后与进展医展医疗活活动之前之前v采采样方法方法v仪器采器采样法法:准确准确,结果接近果接近实践践,有有JWL、LWC-、Anderson等型号空气采等型号空气采样器。器。v自然沉降法自然沉降法:简便易行、国内运用广泛。便易行、国内运用广泛。环境空气的监测v自然沉降法自然沉降法v培育基：直径培育基：直径9cm普通普通营养养琼脂平板脂平板v布点方法：室内面布点方法：室内面积30m2,设内、中、外内、中、外对角角线3点，内、外点布点部位距点，内、外点布点部位距墙壁壁1m处；室内面室内面积30m2，设4角及中央角及中央5点，点，4角的角的布点部位距布点部位距墙壁壁1m处。v
20、采采样方法：将直径方法：将直径9cm的普通的普通琼脂平板放在脂平板放在室内各采室内各采样点点处，高度距地面，高度距地面1.5m，将平板，将平板盖翻开，盖子扣在平板的盖翻开，盖子扣在平板的边缘上暴露上暴露5分分钟后后送送检。环境空气的监测v培育方法：送培育方法：送检平板置平板置361温箱培育温箱培育48小小时，计数各平板菌落数并数各平板菌落数并计算平均菌落数小数点后一位、算平均菌落数小数点后一位、四舍五入，并分四舍五入，并分别致病菌。致病菌。v结果果报告告v计算公式：算公式：v细菌菌总数数cfu/m3)=50000N/(AT)vA：平板面：平板面积cm2)；T：暴露：暴露时间min)vN：平均菌
21、落数：平均菌落数cfu)环境空气监测的结果计算自然沉降法6cm7.5cm9cm5min35422615810min1771137915min118765230min593826物体外表的监测v采样时间采样时间v消毒处置后消毒处置后4h内进展采样内进展采样v采样方法：采样方法：v棉拭子采样法棉拭子采样法v压印法压印法物体外表的监测v拭子采拭子采样法：法：v采采样面面积：被采外表：被采外表100cm2 时,取全部外取全部外表；被采外表表；被采外表100cm2时,取取100cm2。v采采样方法：用方法：用55cm2的的规范范灭菌菌规格板，放格板，放在被在被检物体外表。用浸有含相物体外表。用浸有含相应
22、中和中和剂的无的无菌采菌采样液的棉拭子液的棉拭子1支，在支，在规格板内横格板内横竖往返往返各涂抹各涂抹5次，并随之次，并随之转动棉拭子，延棉拭子，延续采采样14个个规格板面格板面积，剪去或折去手接触部份，剪去或折去手接触部份，棉拭子放入装有棉拭子放入装有10ml采采样液的液的试管中送管中送检，门把手等小型物体那么采用棉拭子直接涂抹把手等小型物体那么采用棉拭子直接涂抹物体的方法采物体的方法采样物体外表的监测v检测方法：方法：v将采将采样管在混匀器上振管在混匀器上振荡20s或用力振或用力振摇80次，次，用无菌吸管汲取用无菌吸管汲取1.0ml接种于接种于灭菌平皿，每一菌平皿，每一样本接种本接种2个平
23、皿，内参与已溶化的个平皿，内参与已溶化的45480C的的营养养琼脂脂1518ml，边倾注注边摇匀，匀，待待琼脂凝固后置脂凝固后置361温箱培育温箱培育48小小时，计数菌落数。数菌落数。物体外表的监测v结果报告菌落总数结果报告菌落总数v计算公式：计算公式：v物体外表细菌菌落总数物体外表细菌菌落总数(cfu/cm2)=平皿上菌平皿上菌落的平均数落的平均数v其中小件物品以其中小件物品以cfu/件报告结果件报告结果采样面积(cm2 )医务人员手生物学监测v采样时间采样时间v清毒后立刻采样清毒后立刻采样v采样方法：被检人五指并拢采样方法：被检人五指并拢,用浸有含相应中用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭
24、子在双手指屈面从和剂的无菌洗脱液的棉拭子在双手指屈面从指根到指端往返涂擦指根到指端往返涂擦2次次(一只手涂擦面积约一只手涂擦面积约30 cm2),并随之转动采样棉拭子并随之转动采样棉拭子,剪去操作者剪去操作者手接触部位手接触部位,将棉拭子投入将棉拭子投入10ml含相应中和含相应中和剂的无菌洗脱液试管内剂的无菌洗脱液试管内,立刻送检立刻送检.医务人员手生物学监测v检测方法：同前。方法：同前。v计算公式：算公式：v手手细菌菌落菌菌落总数数(cfu/cm2)=平皿上菌落的平均平皿上菌落的平均数数采采样液稀液稀释倍数倍数/30 2皮肤黏膜的监测v采采样时间：消毒后立刻采：消毒后立刻采样v采采样方法：用
25、方法：用55cm2的的规范范灭菌菌规格板，放在被格板，放在被检皮肤皮肤处，用浸有含相，用浸有含相应中和中和剂的无菌洗脱液的棉拭的无菌洗脱液的棉拭子子1支，在支，在规格板内横格板内横竖往返均匀涂擦各往返均匀涂擦各5次，并随次，并随之之转动棉拭子，剪去手接触部位后。将棉拭子投入棉拭子，剪去手接触部位后。将棉拭子投入10ml含相含相应中和中和剂的无菌洗脱液的的无菌洗脱液的试管内，立刻送管内，立刻送检。不。不规那么的粘膜皮肤那么的粘膜皮肤处可用棉拭子直接涂擦采可用棉拭子直接涂擦采样。皮肤黏膜的监测v检测方法：将采方法：将采样管在混匀器上振管在混匀器上振荡20s或用力振或用力振摇80次，用无菌吸管汲取次
26、，用无菌吸管汲取1.0ml接种于接种于灭菌平皿，每一菌平皿，每一样本接种本接种2个平皿，内参与已溶化的个平皿，内参与已溶化的45480C的的营养养琼脂脂1518ml，边倾注注边摇匀，待匀，待琼脂凝固后置脂凝固后置361温箱培育温箱培育48小小时，计数菌落数。数菌落数。v结果果报告菌落告菌落总数数v计算公式：算公式：v皮肤粘膜外表皮肤粘膜外表细菌菌落菌菌落总数数(cfu/cm2)=平平皿上菌落的平均数皿上菌落的平均数采采样液稀液稀释倍数倍数/55皮肤黏膜的监测运用中消毒液染菌量测定v涂抹法涂抹法:v 用无菌吸管汲取消毒液用无菌吸管汲取消毒液1.0ml,参与参与9.0ml含有相含有相应中和中和剂的
27、采的采样管内混匀管内混匀,用无菌吸管汲取上述溶液用无菌吸管汲取上述溶液0.2ml,滴于枯燥普通滴于枯燥普通琼脂平板脂平板,每份每份样品同品同时做做2个个平行平行样,一平板置一平板置200C培育培育7天天,察看霉菌生察看霉菌生长情况情况,另一个平板置另一个平板置350C温箱培育温箱培育72h,记数菌落数数菌落数,同同时检测致病菌致病菌v v 消毒液染菌量消毒液染菌量(cfu/ml)=每个平板上菌落数每个平板上菌落数50运用中消毒液染菌量测定v倾注法注法:v用无菌吸管汲取消毒液用无菌吸管汲取消毒液1.0ml,参与到参与到9.0ml含有相含有相应中和中和剂的无菌生理的无菌生理盐水采水采样管内混匀管内
28、混匀,分分别取取0.5ml放入放入2只只灭菌平皿内菌平皿内,参与已溶化的参与已溶化的45480C的的营养养琼脂脂1518ml，边倾注注边摇匀，待匀，待琼脂凝固脂凝固,一平一平板置板置200C培育培育7天天,察看霉菌生察看霉菌生长情况情况,另一个平板置另一个平板置36 10C温箱培育温箱培育72h,记数菌落数数菌落数,同同时检测致病菌致病菌v 消毒液染菌量消毒液染菌量(cfu/ml)=每个平板上菌落数每个平板上菌落数20运用中消毒液染菌量测定v结果判果判别:v 消毒液染菌量消毒液染菌量100 cfu/ml,并未并未检出致病菌出致病菌为合格合格v本卷本卷须知知:采采样后后1h内内监测消毒灭菌的卫生
29、学规范环境环境类别类别范围范围 标准标准空气空气物体表面物体表面手手类类洁净手术室、洁净病洁净手术室、洁净病房房 10cfu/m3 5cfu/cm25 cfu/cm2类类普通手术室、产房、普通手术室、产房、婴儿室、烧伤病房、婴儿室、烧伤病房、重症监护病房等重症监护病房等200 cfu/m35 cfu/cm2 5cfu/cm2类类各类普通病房、急诊各类普通病房、急诊室、化验室、治疗室室、化验室、治疗室等等 500cfu/m3 10cfu/cm2 10cfu/cm2类类传染科及病房传染科及病房 15cfu/cm2 15cfu/cm2沙门菌检验程序 样品 胆盐乳糖采样管 SS或伊红美蓝平板 三糖铁琼
30、脂血清凝集实验 葡萄糖 乳糖 甘露醇 靛基质 尿素 赖氨酸脱羧酶大肠菌群检验程序 样品 胆盐乳糖采样管 麦康凯平板或伊红美蓝平板 染色镜检 乳糖复发酵金黄色葡萄球菌检验程序 样品 7.5%氯化钠肉汤 血平板或甘露醇高盐平板 染色镜检 甘露醇发酵实验 血浆凝固酶实验绿脓杆菌检验程序 样品 胆盐乳糖采样液 普通琼脂平板或血琼脂平板 染色镜检 氧化酶实验 阴性 绿脓菌素实验 阴性 阳性 明胶液化实验 硝酸盐复原实验 42C0生长实验乙型溶血性链球菌检测程序 样品 1%葡萄糖肉汤 血平板 染色镜检、生化反响医疗器械采样及检查方法v无菌检验的定义：指检查经灭菌的敷料、缝线、一无菌检验的定义：指检查经灭菌
31、的敷料、缝线、一次性运用的医疗用品、无菌器械以及适用于无菌室次性运用的医疗用品、无菌器械以及适用于无菌室的其他种类能否无菌的一种方法。的其他种类能否无菌的一种方法。v无菌检验应在干净度为无菌检验应在干净度为100级单向流空气区域内进级单向流空气区域内进展展v应严厉遵守无菌操作，防止微生物污染应严厉遵守无菌操作，防止微生物污染v对单向流空气区域及任务台面，必需进展干净度验对单向流空气区域及任务台面，必需进展干净度验证证医疗器械采样及检查方法v采样时间采样时间v在灭菌处置后，存放有效期内采样在灭菌处置后，存放有效期内采样医疗器械采样及检查方法v采样方法采样方法v缝合针、针头、刀片等小件医疗器械：缝
32、合针、针头、刀片等小件医疗器械：v 取取5件直接浸入件直接浸入6管需管需-厌氧培育管其中一管作厌氧培育管其中一管作阳性对照与阳性对照与4管霉菌培育管。培育基用量为管霉菌培育管。培育基用量为15ml/管管医疗器械采样及检查方法v注射器：注射器：v 取取5付注射器，在付注射器，在5ml洗脱液中反复抽吸洗脱液中反复抽吸5次，洗次，洗下管内细菌，混和后接种需厌氧菌培育管共下管内细菌，混和后接种需厌氧菌培育管共6管，管，其中其中1管作阳性对照与霉菌培育管共管作阳性对照与霉菌培育管共4管接种管接种量为量为1ml注射器注射器0.5ml, 2ml注射器注射器1ml, 510ml注注射器射器2ml ,2050m
33、l注射器注射器5ml。培育基用量为接种。培育基用量为接种量量2ml以下以下15ml/管管,接种量接种量5ml为为40ml/管。管。医疗器械采样及检查方法v手样钳、镊子等大件医疗器械：手样钳、镊子等大件医疗器械：v 取取2件用蘸有无菌洗脱液的棉拭子反复涂抹件用蘸有无菌洗脱液的棉拭子反复涂抹采样，将棉拭子投入采样，将棉拭子投入5ml无菌洗脱液中，将采无菌洗脱液中，将采样液混匀，接种于需氧样液混匀，接种于需氧-厌氧培育管共厌氧培育管共6管，管，其中其中1管作阳性对照与霉菌培育基共管作阳性对照与霉菌培育基共4管管。接种量为。接种量为1ml/管，培育基用量为管，培育基用量为15ml/管。管。医疗器械采样
34、及检查方法v检测方法：方法：v需需设阳性及阴性阳性及阴性对看管看管v待待检样品的需氧品的需氧-厌氧培育管及阳性与阴性氧培育管及阳性与阴性对看管看管30 35 培育培育5天，霉菌培育管与阴性天，霉菌培育管与阴性对看管看管20 25 培育培育7天，培育期天，培育期间逐日逐日检查能否有菌生能否有菌生长。如不能从外。如不能从外观判判别的的样品品需作涂片染色需作涂片染色镜检。医疗器械采样及检查方法v无菌检验的结果判别无菌检验的结果判别v阳性对照在阳性对照在24h内应有菌生长，阴性对照在内应有菌生长，阴性对照在培育期间应无菌生长培育期间应无菌生长v如需如需-厌氧管及霉菌培育管内均为廓清或虽显厌氧管及霉菌培
35、育管内均为廓清或虽显混浊但经证明并非有菌生长，判为灭菌合格。混浊但经证明并非有菌生长，判为灭菌合格。v如任何一管明显混浊并证明有菌生长，应重如任何一管明显混浊并证明有菌生长，应重新取样，分别按同样方法复试新取样，分别按同样方法复试2次，除阳性对次，除阳性对照外，其他各管均不得有菌生长，否那么判照外，其他各管均不得有菌生长，否那么判为灭菌不合格。为灭菌不合格。无菌检验本卷须知v送送检时间不得超越不得超越6h，假，假设样品保管于品保管于0 4 那那么不得超越么不得超越24hv被采外表被采外表100cm2 时,取全部外表；被采外表取全部外表；被采外表100cm2时,取取100cm2。v假假设消毒因子
36、消毒因子为化学消毒化学消毒剂，采，采样液中液中应参与相参与相应中和中和剂。医疗用品细菌菌落卫生规范类别类别 标准标准进入人体无菌组织、器官进入人体无菌组织、器官或接触破损皮肤、黏膜的或接触破损皮肤、黏膜的医疗用品医疗用品无菌无菌接触黏膜的医疗用品接触黏膜的医疗用品 20cfu/g或或100cm，致病性微生物，致病性微生物不得检出不得检出接触皮肤的医疗用品接触皮肤的医疗用品 200cfu/g或或100cm，致病性微生，致病性微生物不得检出物不得检出洗脱液的配制方法蛋白胨蛋白胨10g氯化钠氯化钠8.5g吐温吐温801.0ml加加0.03mol/L PBS至至1000ml注：注：0.03mol/L
37、PBS（PH7.2-7.4）配方：）配方：磷酸氢二钠磷酸氢二钠2.84g磷酸二氢钾磷酸二氢钾1.36g加加H2O至至1000ml常用消毒液的相应中和剂消毒剂（浓度消毒剂（浓度 ）中和剂（浓度中和剂（浓度 ）含氯（碘）消毒剂（含氯（碘）消毒剂（0.1-0.5）硫代硫酸钠（硫代硫酸钠（0.1-1.0）过氧乙酸（过氧乙酸（0.1-0.5）硫代硫酸钠（硫代硫酸钠（0.1-0.5）过氧化氢（过氧化氢（1.0-3.0）硫代硫酸钠（硫代硫酸钠（0.5-1.0）福尔马林（福尔马林（1.0）（1）双甲酮（）双甲酮（1.0）与吗啉（）与吗啉（0.6）混合）混合液；（液；（2）亚硫酸钠（）亚硫酸钠（0.1-0.5）
38、；（）；（3）氢）氢氧化铵（氧化铵（25.0）戊二醛（戊二醛（2.0）甘氨酸（甘氨酸（1.0）季胺盐类消毒剂（季胺盐类消毒剂（0.1-0.5）吐温吐温80（0.5-3.0）+卵磷脂（卵磷脂（1.0-2.0）洗必泰（洗必泰（0.1-0.5）同季胺盐类同季胺盐类酚类消毒剂（酚类消毒剂（30.0-50.0）吐温吐温80（0.5-3.0）汞类消毒剂（汞类消毒剂（0.002-0.5）巯基醋酸钠（巯基醋酸钠（0.2-2.0）碱类消毒剂碱类消毒剂等当量酸等当量酸酸类消毒剂酸类消毒剂等当量碱等当量碱手术室环境的监测v层流手术室的空气监测方法层流手术室的空气监测方法v浮游菌浓度监测法浮游菌浓度监测法CFU/m3
39、v沉降菌浓度监测法沉降菌浓度监测法CFU/皿皿手术室环境的监测v沉降菌沉降菌浓度度监测法法v采采样时间:v 级干干净手手术室和干室和干净辅助用房助用房检测前前,系系统已运已运转15min,其他干其他干净房房间应已运已运转40minv采采样方法方法:v 用直径用直径90mm培育皿在空气中暴露培育皿在空气中暴露30min,采采样点可布置在地面上或不高于地面点可布置在地面上或不高于地面0.8m的的恣意高度上恣意高度上,盖好培育皿后盖好培育皿后经过培育得出的菌培育得出的菌落数落数,代表空气中可以沉降下来的代表空气中可以沉降下来的细菌数菌数,单位位CFU/皿皿手术室环境的监测层流手术室沉降法空气监测采样
40、布点数层流手术室沉降法空气监测采样布点数被测区域洁净度级别被测区域洁净度级别最少培养皿数最少培养皿数(90MM,30MIN)100131000510000310000023000002手术室环境的监测v培育方法培育方法:v 采采样后的培育基后的培育基,应立刻置于立刻置于37 条件下培育条件下培育24h。v结果果报告告:v 计数生数生长的菌落数，求出菌落数的平均的菌落数，求出菌落数的平均值四舍四舍五入到小数点后五入到小数点后1位，位，单位位CFU/皿皿)手术室环境的监测v层流手术室沉降法空气监测菌落数卫生规范层流手术室沉降法空气监测菌落数卫生规范v (单位单位:CFU/30min)手术区手术区周
41、边区周边区级特别洁净手级特别洁净手术室术室0.2 0.4级标准洁净手级标准洁净手术室术室 0.75 1.5一般洁净手术一般洁净手术室室 2 4准洁净手术室准洁净手术室 5 5血液净化系统的监测v采样时间：采样时间：v 血液净化系统监测应在透析用水和透析液血液净化系统监测应在透析用水和透析液制做好后即将进展透析前制做好后即将进展透析前v采样方法：采样方法：v 用灭菌注射器汲取透析用水或透析液用灭菌注射器汲取透析用水或透析液25ml,放入无菌管中送检放入无菌管中送检血液净化系统的监测v检测方法方法v 用无菌吸管汲取用无菌吸管汲取1.0ml待待检样品接种于品接种于灭菌菌平皿平皿,每一每一样本接种本接
42、种2个平皿个平皿,内参与已溶化的内参与已溶化的4548 的的营养养琼脂脂1518ml,边倾注注边摇匀匀,待待琼 脂凝固脂凝固,置置361 温箱培育温箱培育48h,计数数菌落数菌落数血液净化系统的监测v结果果计算算v 用析用水用析用水/透析液透析液细菌菌总数数(CFU/ml)=2个平个平板上的菌落板上的菌落总数数稀稀释倍数倍数v卫生生规范范v透析用水透析用水细菌数菌数200 CFU/ml,每个月每个月监测1次次,结果超出范果超出范围时,应再复再复查,当疑心或确定当疑心或确定患者在透析患者在透析过程中有程中有热原反响、菌血病症原反响、菌血病症时应随随时进展展监测血液净化系统的监测v透析液透析液细菌数菌数2000 CFU/ml，每个月，每个月监测1次，当次，当疑心有透析液疑心有透析液污染或染或发生生严重的感染病例重的感染病例时，应添添加采加采样点。如原水口、反渗水出口、点。如原水口、反渗水出口、储水箱出口、水箱出口、透析液配比机和透析液配比机和浓缩透析液等透析液等
