第二章核酸化学2

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1、n nDNA为双链分子为双链分子n n大多是链状结构,少部分呈环状大多是链状结构,少部分呈环状n n分子量一般都很大分子量一般都很大n n真核细胞中集中在细胞核真核细胞中集中在细胞核(98%以上以上)n n种间种间细胞核中细胞核中DNA含量有差异含量有差异n n线粒体、叶绿体线粒体、叶绿体含各自含各自DNA第三节 DNA的结构一、一、 DNA的一级结构的一级结构 DNA分子上核苷酸的排列顺序分子上核苷酸的排列顺序n n浏览书上关于基因(组)的概念浏览书上关于基因(组)的概念1. DNA的碱基组成:的碱基组成: 具有生物具有生物种的特异性种的特异性: 不同物种不同物种DNA有其独特的碱基组成;有

2、其独特的碱基组成; 同一物种不同组织同一物种不同组织/器官器官/DNA碱基组成一样,碱基组成一样, 不受生长发育、营养状况及环境条件的影响。不受生长发育、营养状况及环境条件的影响。 (二)(二)DNA的二级结构(高级结构)的二级结构(高级结构)(一)DNA的二级结构n n19531953年年,J. J. WatsonWatson和和F. F. Crick Crick 在在前前人人研研究究工工作作的的基基础础上上,根根据据DNADNA结结晶晶的的X-X-衍衍射射图图谱谱和和分分子子模模型型,提提出出了了著著名名的的DNADNA双双螺螺旋旋结结构构模模型型,并并对对模模型型的的生生物物学学意意义义

3、作作出出了了科学的解释和预测。科学的解释和预测。n n1.DNA1.DNA碱基互补原则碱基互补原则碱基互补原则碱基互补原则DNA的二级结构(双螺旋)腺嘌呤腺嘌呤胸腺嘧啶胸腺嘧啶鸟嘌呤鸟嘌呤胞嘧啶胞嘧啶其他组合易相互排斥其他组合易相互排斥其他组合易相互排斥其他组合易相互排斥例例例例 如如如如 G:TG:T因因因因 此此此此 , DNA DNA 的的的的 双双双双 股股股股 系系系系 藉藉藉藉 着着着着 A:T A:T 和和和和 G : CG : C的的的的 配配配配 对对对对 关关关关 系系系系 互互互互 相相相相 结结结结 合合合合 。2. Chargaff定则定则/碱基等比定律:碱基等比定律

4、:嘌呤总数等于嘧啶总数嘌呤总数等于嘧啶总数 A+G=C+T;6位上含氨基的碱基位上含氨基的碱基= 6位上含羰基的碱基;位上含羰基的碱基; A+C=G+T 腺腺嘌呤和胸腺嘧啶的摩尔数相同嘌呤和胸腺嘧啶的摩尔数相同 A=T, 胞嘧啶和鸟嘌呤的摩尔数相同胞嘧啶和鸟嘌呤的摩尔数相同 C=GDNA分子的碱基组成具有种属特异性,而不具分子的碱基组成具有种属特异性,而不具有组织器官特异性有组织器官特异性3.二级结构二级结构B型双螺旋结构型双螺旋结构n n大大大大 部部部部 分分分分 DNA DNA 所所所所 具具具具 有有有有 的的的的 双双双双 螺螺螺螺 旋旋旋旋 结结结结 构构构构 , 亦亦亦亦 称称称

5、称 为为为为 B B 型型型型 小沟小沟小沟小沟大沟大沟大沟大沟1.1.反向,平行,右手螺旋, 大沟,小沟55553333555533332.2.链间碱基配对相连3.3.每10个碱基对上升一周4.疏水碱基位于内部5.相邻碱基平面互相平行, 垂直于螺旋轴DNADNA,双螺旋,正反向,双螺旋,正反向,互补链。互补链。A A对对T T,GCGC连,配对时,连,配对时,靠氢键,靠氢键, AT2,GC3,十碱基,转一圈,螺距十碱基,转一圈,螺距3434点中间。点中间。碱基力和氢键,维持螺碱基力和氢键,维持螺旋结构坚。旋结构坚。(AT2AT2,GC3GC3是指之间二个氢键是指之间二个氢键GCGC间三个间三

6、个. .螺距螺距3434点中间即点中间即3.43.4) n n在在 真真 / / 原原 核核 细细 胞胞 皆皆 有有 证证 据据 显显 示示 短短 的的 Z Z 型型 DNA DNA 存存 在在 。其他类型的DNA双螺旋zZ 型 DNA左旋、细长 双螺旋结构的稳定因素n n提问:提问:提问:提问:起稳定作用的有哪些力呢?起稳定作用的有哪些力呢?起稳定作用的有哪些力呢?起稳定作用的有哪些力呢?答案:答案:疏水作用力疏水作用力(碱基堆积力碱基堆积力) 氢键氢键 范德华力范德华力三、 DNA的三级结构n n(一)(一)(一)(一)真核细胞真核细胞真核细胞真核细胞染色体的染色体的染色体的染色体的DNA

7、DNA念珠状三级结构念珠状三级结构念珠状三级结构念珠状三级结构DNA的存在形式的存在形式提问:提问:DNA形成形成三级结构及染色三级结构及染色体的意义何在?体的意义何在?答案:答案:压缩分子空间压缩分子空间人体每个体细胞人体每个体细胞DNA长长2m,细胞直细胞直径径0.1mm,细胞核细胞核0.05mm(二)二)原核生物以及真核生物细胞器原核生物以及真核生物细胞器环状环状DNADNA的的超螺旋超螺旋三级结构三级结构叶绿体中含有环状DNA线粒体中含有环状DNA细菌等原核生物细菌等原核生物质粒质粒质粒质粒染色染色染色染色体体体体固定固定负超螺旋负超螺旋(右手拓扑结构)(右手拓扑结构)反之,则为正超螺

8、旋自然界通常为负超螺旋。环状DNADNA右旋右旋右旋右旋第四节 核酸及核苷酸的性质一、核酸的溶解性一、核酸的溶解性 RNARNA和和和和DNA DNA 均微溶于水,均微溶于水,均微溶于水,均微溶于水, 不溶于一般的有机溶剂不溶于一般的有机溶剂不溶于一般的有机溶剂不溶于一般的有机溶剂二、二、核酸的两性性质及等电点核酸的两性性质及等电点核酸的两性性质及等电点核酸的两性性质及等电点核酸分子中含有酸性基团(磷酸基)和碱性基团核酸分子中含有酸性基团(磷酸基)和碱性基团核酸分子中含有酸性基团(磷酸基)和碱性基团核酸分子中含有酸性基团(磷酸基)和碱性基团(氨基),也具有两性性质。(氨基),也具有两性性质。(

9、氨基),也具有两性性质。(氨基),也具有两性性质。DNADNADNADNA等电点为等电点为等电点为等电点为4 4 4 44.54.54.54.5;RNARNARNARNA等电点为等电点为等电点为等电点为2 2 2 22.52.52.52.5三、核酸的紫外吸收性质n n 碱基含有共轭双键碱基含有共轭双键n n独特的紫外吸收光谱:独特的紫外吸收光谱:最大吸收峰最大吸收峰260nm左右左右 核酸及其组份定性核酸及其组份定性和定量测定的依据和定量测定的依据。四、核酸的变性、复性四、核酸的变性、复性1、变性、变性(denaturation)(1 1)变性的实质)变性的实质 某些理化因素破坏了氢键和碱基堆

10、积力,某些理化因素破坏了氢键和碱基堆积力, 使核酸分子高级结构改变、理化性质及使核酸分子高级结构改变、理化性质及 生物活性发生改变。生物活性发生改变。 不涉及磷酸二酯键断裂,一级结构不变不涉及磷酸二酯键断裂,一级结构不变降解:核苷酸骨架上降解:核苷酸骨架上3,5 -磷酸二酯键的断裂磷酸二酯键的断裂(2)变性因素)变性因素 高温(一般高温(一般7575) 热变性热变性 强酸、碱强酸、碱 酸碱变性酸碱变性 强氧化剂强氧化剂 尿素尿素(PAGE中中DNA )机理:双链间氢键断开,成为两条单链机理:双链间氢键断开,成为两条单链(3 3)增色效应)增色效应完全变性后核酸紫外吸收值增加:完全变性后核酸紫外

11、吸收值增加:n n天然天然DNA 2540%、RNA 约约1.1%这种由于变性或降解引起紫外吸收这种由于变性或降解引起紫外吸收 增加的现象称为增加的现象称为增色效应增色效应.n n实质:碱基暴露实质:碱基暴露RNA变性:从螺旋到线团之间的转变变性:从螺旋到线团之间的转变RNA的变性引起的性质变化没有的变性引起的性质变化没有DNA明显明显DNA变性(4)DNA热变性的特征变性过程是变性过程是“跃变式跃变式”的,而非渐变的,而非渐变, ,是一是一种协同的过程。种协同的过程。Tm 引起引起DNADNA变性的温度称为熔点变性的温度称为熔点T Tm mn n指增色效应达指增色效应达50%50%时的温度时

12、的温度n nDNADNA变性一半所需的温度变性一半所需的温度 一般一般DNA DNA T Tm m 值在值在85 - 90 85 - 90 C C之间。之间。 Tm值大小与下列因素有关:值大小与下列因素有关:(1 1)DNA的均一性:的均一性:越均一越均一Tm的的范围愈小范围愈小(2)GC含量含量:越多越多Tm越高越高 经验公式:经验公式: XG+C(Tm69.3)2.44(3)介质中的离子强度:介质中的离子强度:愈高愈高Tm愈高愈高 不易用稀电解质保存不易用稀电解质保存DNA 核酸的复性(renaturation)n n变性变性DNA在适当的条件下,两条彼此分开的在适当的条件下,两条彼此分开

13、的单链重新缔合成双链单链重新缔合成双链复性复性。复性的程度、速率与复性条件有关:复性的程度、速率与复性条件有关:n n热变性热变性DNA骤然冷却(淬火)不能复性骤然冷却(淬火)不能复性n n将变性将变性DNA缓慢冷却(退火)可以复性缓慢冷却(退火)可以复性DNA复性n n分子量越大复性越难;分子量越大复性越难;n n浓度越大,复性越容易;浓度越大,复性越容易;n nDNA复性也与它本身组成和结构有关复性也与它本身组成和结构有关 (有很多重复序列(有很多重复序列DNA,复性也快)。复性也快)。n n减色效应减色效应(低色效应)(低色效应)复性时紫外吸收减少复性时紫外吸收减少用用Cot1/2表示复

14、性的速度表示复性的速度Co:代表代表DNADNA的原始浓度的原始浓度 t t:复性时间复性时间Cot1/2复性一半所需时间与复性一半所需时间与DNA浓度的乘浓度的乘积积单位:单位:mol s/Ln n提问:提问:提问:提问:为什么核酸有紫外吸光性?为什么核酸有紫外吸光性?为什么核酸有紫外吸光性?为什么核酸有紫外吸光性?答案:答案:答案:答案:碱基含有共轭双键,最大吸收波长碱基含有共轭双键,最大吸收波长碱基含有共轭双键,最大吸收波长碱基含有共轭双键,最大吸收波长260nm260nmn n提问:提问:提问:提问:什么是什么是什么是什么是DNADNA的变性?的变性?的变性?的变性?答案:答案:答案:

15、答案:DNADNA双螺旋二级结构的破坏双螺旋二级结构的破坏双螺旋二级结构的破坏双螺旋二级结构的破坏提问:变性因素有哪些?提问:变性因素有哪些?提问:变性因素有哪些?提问:变性因素有哪些?变性因素:变性因素:变性因素:变性因素:高温(一般高温(一般高温(一般高温(一般7575)、强氧化剂、)、强氧化剂、)、强氧化剂、)、强氧化剂、 强酸、碱、尿素等;强酸、碱、尿素等;强酸、碱、尿素等;强酸、碱、尿素等;变性机理是什么?变性机理是什么?变性机理是什么?变性机理是什么?机理:机理:机理:机理:双链间氢键断开,成为两条单链;双链间氢键断开,成为两条单链;双链间氢键断开,成为两条单链;双链间氢键断开,成

16、为两条单链;n n提问:提问:提问:提问:什么是核酸的复性?什么是核酸的复性?什么是核酸的复性?什么是核酸的复性?答案:答案:答案:答案:一定条件下,去除变性因素后,核酸一定条件下,去除变性因素后,核酸一定条件下,去除变性因素后,核酸一定条件下,去除变性因素后,核酸恢复二级结构及恢复二级结构及恢复二级结构及恢复二级结构及生物活性的现象生物活性的现象生物活性的现象生物活性的现象。高温变性高温变性缓缓慢慢冷冷却却热复性热复性急急速速冷冷却却复性失败复性失败五、核酸的降解n n 化学降解(酸化学降解(酸/ /碱水解)和酶解碱水解)和酶解n n作用于磷酸二酯键和糖苷键作用于磷酸二酯键和糖苷键n nDN

17、A/RNA对酸对酸/ /碱碱耐受程度耐受程度有差别有差别1 1、碱水解、碱水解 0.3 M NaOH溶液中溶液中: RNA磷酸酯键磷酸酯键被水解生成被水解生成2/3 -核苷酸核苷酸DNA则不受影响则不受影响l无无2OH不形成碱水解中间产物不形成碱水解中间产物2 2、酸水解、酸水解糖苷键糖苷键比比磷酸酯键磷酸酯键更易被酸水解;更易被酸水解;嘌呤嘌呤碱比碱比嘧啶嘧啶碱的糖苷键对酸更不稳定;碱的糖苷键对酸更不稳定;对酸最不稳定的对酸最不稳定的:嘌呤嘌呤与脱氧核糖间糖苷键与脱氧核糖间糖苷键DNA在在pH2.8、100加热加热1h,可除去嘌呤碱可除去嘌呤碱形成无嘌呤酸(形成无嘌呤酸(apurinic a

18、cid,APA)3、酶水解酶分类酶分类 根据底物分为:根据底物分为: Dnase、RNase 根据作用方式:根据作用方式:n n核酸外切酶:核酸外切酶:从一端(从一端(3/5)逐个水解)逐个水解n n核酸内切酶:核酸内切酶:从中间开始在某个位点切断从中间开始在某个位点切断按照作用的化学键按照作用的化学键 磷酸二酯酶(磷酸二酯酶(phosphodiesterase) 断断3-OH形成的酯键形成的酯键 5-磷酸核苷磷酸核苷 断断5-OH形成的酯键形成的酯键 3-磷酸核苷磷酸核苷磷酸单酯酶(磷酸单酯酶(phosphomonoesterase)切去核酸分子末端磷酸基切去核酸分子末端磷酸基 及核苷酸的磷

19、酸基及核苷酸的磷酸基其它:对底物二级结构的专一性其它:对底物二级结构的专一性 作用于双链核酸:双链酶作用于双链核酸:双链酶 作用于单链:单链酶作用于单链:单链酶+PyPyPyPyPyPyPuPuPPPPPPPPPP2H2OPPPPPPP2H2OPP+OHOHPPPPPGAGAAAGGCUUC 牛胰核糖核酸酶(牛胰核糖核酸酶(RNase )作用:嘧啶核苷作用:嘧啶核苷3磷酸与其它核苷酸连键磷酸与其它核苷酸连键 专一性极高的内切酶专一性极高的内切酶(1)RNase3嘧啶核苷酸嘧啶核苷酸/其结尾的寡核苷酸其结尾的寡核苷酸+PyPyPyPyPyPyPuPuPPPPPPPPPP2H2OPPPPPPP2H

20、2OPP+OHOHPPPPPGAGAAAGGCUUC 核糖核酸酶核糖核酸酶T1 (RNase T1)作用:作用:3鸟苷酸与相邻核苷酸鸟苷酸与相邻核苷酸5OH连键连键产物:产物:3鸟苷酸或以其为末端的寡核苷酸鸟苷酸或以其为末端的寡核苷酸核糖核酸酶核糖核酸酶T2 (RNase T2 ) 作用位点为作用位点为腺苷酸腺苷酸残基残基 可将可将tRNA完全降解为完全降解为3腺苷酸结尾腺苷酸结尾的寡核苷酸的寡核苷酸(2)DNase(外切酶)(外切酶) DNase:牛胰脱氧核糖核酸酶:牛胰脱氧核糖核酸酶 Mg2+激活激活 切断双链或单链切断双链或单链DNA 以以5磷酸磷酸为末端的寡聚核苷酸为末端的寡聚核苷酸

21、DNase :牛脾脱氧核糖核酸酶:牛脾脱氧核糖核酸酶 Mg2+抑制抑制 DNA降解为降解为3磷酸磷酸为末端的寡聚核苷酸为末端的寡聚核苷酸(3 3)其他核酸外切酶)其他核酸外切酶 牛脾磷酸二酯酶牛脾磷酸二酯酶 蛇毒磷酸二酯酶蛇毒磷酸二酯酶 对对DNA/RNA均有作用均有作用六、DNA一级结构的测定1 1、末端终止法、末端终止法Sanger2,3双脱氧核苷三磷酸(双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)是)是DNA合成链延伸的合成链延伸的抑制剂抑制剂2、化学法、化学法硫酸二甲酯硫酸二甲酯:G断裂断裂甲酸:甲酸:A、G均断裂均断裂肼肼:无:无NaCl时时C、T均断裂均断裂 有有NaCl时仅时仅C断裂断裂使使甲

22、基化甲基化第六节 核酸分析测定及研究方法一、核酸及其组分含量的测定一、核酸及其组分含量的测定一、核酸及其组分含量的测定一、核酸及其组分含量的测定1 1、紫外吸收法紫外吸收法紫外吸收法紫外吸收法核酸及其组分对紫外线的吸光率与其浓度成正比核酸及其组分对紫外线的吸光率与其浓度成正比核酸及其组分对紫外线的吸光率与其浓度成正比核酸及其组分对紫外线的吸光率与其浓度成正比1 1个个个个A A50g/ml50g/ml 双螺旋双螺旋双螺旋双螺旋DNADNA 40g/ml40g/ml RNA RNA或单链或单链或单链或单链DNADNA2 2、定糖法定糖法定糖法定糖法RNARNA:核糖核糖核糖核糖 糠醛糠醛糠醛糠醛

23、 绿色物质(绿色物质(绿色物质(绿色物质(670-680nm670-680nm)DNADNA:脱氧核糖脱氧核糖脱氧核糖脱氧核糖+ +二苯胺二苯胺二苯胺二苯胺兰色物质兰色物质兰色物质兰色物质 (595-620nm595-620nm)苔黑酚/地衣酚浓HCl浓硫酸3 3、定磷法定磷法定磷法定磷法核酸纯的核酸含磷量为核酸纯的核酸含磷量为核酸纯的核酸含磷量为核酸纯的核酸含磷量为9.5%9.5%核酸样品含核酸样品含核酸样品含核酸样品含1g1g磷相当于磷相当于磷相当于磷相当于10.5g10.5g核酸核酸核酸核酸(实验课)(实验课)(实验课)(实验课)4 4、琼脂糖凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳琼脂糖凝

24、胶电泳溴乙锭溴乙锭溴乙锭溴乙锭能插入能插入能插入能插入DNADNA分子的碱基间形成复合物分子的碱基间形成复合物分子的碱基间形成复合物分子的碱基间形成复合物在紫外线照射下溴乙锭发橘红色荧光在紫外线照射下溴乙锭发橘红色荧光在紫外线照射下溴乙锭发橘红色荧光在紫外线照射下溴乙锭发橘红色荧光荧光强度与荧光强度与荧光强度与荧光强度与DNADNA含量成正比,通过与分子标签比含量成正比,通过与分子标签比含量成正比,通过与分子标签比含量成正比,通过与分子标签比较就可得出待测较就可得出待测较就可得出待测较就可得出待测DNADNA分子的大小和含量。分子的大小和含量。分子的大小和含量。分子的大小和含量。二、核酸纯度的

25、测定二、核酸纯度的测定通常通常用用A260/A280 =1.8-2.0作为纯度标准作为纯度标准纯纯DNADNA比值比值1.81.8, 1.8 Pr1.8 Pr污染,污染, 1.8 1.8 RNARNA污染污染纯纯RNARNA比值比值2.0 2.0 , 2.0 Pr2.0 Pr污染,污染, 2.02.0异硫氰酸异硫氰酸污染污染。三、常用分子生物学技术三、常用分子生物学技术1、凝胶电泳、凝胶电泳琼脂糖、琼脂糖、PAGE 不同构象的不同构象的DNADNA分子迁移率不同分子迁移率不同超螺旋线状分子开环状分子超螺旋线状分子开环状分子2、核酸分子杂交、核酸分子杂交3、印迹技术、印迹技术4 4 4 4、PC

26、RPCRPCRPCR技术:变性、退火与延伸技术:变性、退火与延伸技术:变性、退火与延伸技术:变性、退火与延伸核酸的杂交热变性热变性的的DNA单链,在复性时单链,在复性时n n与同源与同源DNA互补链形成双螺旋结构;互补链形成双螺旋结构;n n与在某些区域有互补序列的异源与在某些区域有互补序列的异源DNA单单链形成双螺旋结构。链形成双螺旋结构。n n这样形成的新分子称为这样形成的新分子称为杂交杂交DNA分子分子 DNA单链与互补单链与互补RNA链间也可发生杂交链间也可发生杂交(c)(c)(b)(b)引物引物引物引物2 2553333335555( (d)d)新引新引新引新引物物物物5533靶靶靶

27、靶DNADNA的扩增的扩增的扩增的扩增(a)(a)5533引物引物引物引物1 13 3 553355引物引物引物引物2 2互补链互补链互补链互补链引物引物引物引物1 1互补链互补链互补链互补链单位长度的链单位长度的链单位长度的链单位长度的链不同长度的链不同长度的链不同长度的链不同长度的链5 5 3 3 3 3 5 5 引物引物引物引物1 1互补链互补链互补链互补链引物引物引物引物2 2互补链互补链互补链互补链目的片段(不同长度的链未示出)目的片段(不同长度的链未示出)目的片段(不同长度的链未示出)目的片段(不同长度的链未示出)聚合酶链式反应示意图聚合酶链式反应示意图聚合酶链式反应示意图聚合酶链

28、式反应示意图(e)(e)(f)(f)(g)(g)温度温度温度温度()时间时间时间时间(minmin)9494727260609494变性变性变性变性(1min1min)60 60 退火退火退火退火(1min1min)72 72 延伸延伸延伸延伸(1.5min1.5min)循环循环循环循环1 1 循环循环循环循环2 2 循环循环循环循环3 3PCRPCRPCRPCR反应的温度循环周期反应的温度循环周期反应的温度循环周期反应的温度循环周期如此周而复始,重复进行,直至扩增产物的如此周而复始,重复进行,直至扩增产物的数量满足实验需求为止。数量满足实验需求为止。1. 1.核酸的多核苷酸之间的连接方式是核

29、酸的多核苷酸之间的连接方式是核酸的多核苷酸之间的连接方式是核酸的多核苷酸之间的连接方式是A. 2, 3A. 2, 3磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键 B. 3,5B. 3,5磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键C. 2 ,5C. 2 ,5磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键 D. D. 糖苷键糖苷键糖苷键糖苷键 E. E. 氢键氢键氢键氢键 2. DNA2. DNA合成需要的原料是合成需要的原料是合成需要的原料是合成需要的原料是A. ATP,CTP,GTP,TTP B. ATP,CTP,GTP,UTPA. ATP,CTP,GTP,TTP B. ATP,CTP,GTP,UTPC

30、C dATP,dCTP,dGTP,dTTPdATP,dCTP,dGTP,dTTP D D dATP,dCTP,dGTP,dUTPdATP,dCTP,dGTP,dUTP E E dAMP,dCMP,dGMP,dTMPdAMP,dCMP,dGMP,dTMP 3. 3. 关于关于关于关于Watson and Crick Watson and Crick 的的的的DNADNA双双双双螺旋模型,那种说法是错误的螺旋模型,那种说法是错误的螺旋模型,那种说法是错误的螺旋模型,那种说法是错误的A. A. 组成双螺旋的两条组成双螺旋的两条组成双螺旋的两条组成双螺旋的两条DNA DNA 链反向平行链反向平行链反向

31、平行链反向平行B. B. 碱基对位于双螺旋的内侧碱基对位于双螺旋的内侧碱基对位于双螺旋的内侧碱基对位于双螺旋的内侧C. C. 维系双螺旋结构的作用力主要是碱基堆积力维系双螺旋结构的作用力主要是碱基堆积力维系双螺旋结构的作用力主要是碱基堆积力维系双螺旋结构的作用力主要是碱基堆积力D. DNA D. DNA 双链是双链是双链是双链是左手螺旋左手螺旋左手螺旋左手螺旋B, C,D4. DNA4. DNA和和和和RNARNA共有的成分是共有的成分是共有的成分是共有的成分是A. D A. D 核糖核糖核糖核糖 B. D 2-B. D 2-脱氧核糖脱氧核糖脱氧核糖脱氧核糖 C. C. 鸟嘌呤鸟嘌呤鸟嘌呤鸟嘌

32、呤 D. D. 尿嘧啶尿嘧啶尿嘧啶尿嘧啶 E. E. 胸腺嘧啶胸腺嘧啶胸腺嘧啶胸腺嘧啶5. DNA5. DNA和和和和RNARNA彻底水解后的产物是彻底水解后的产物是彻底水解后的产物是彻底水解后的产物是A. A. 戊糖相同,部分碱基不同戊糖相同,部分碱基不同戊糖相同,部分碱基不同戊糖相同,部分碱基不同 B. B. 碱基相同,戊糖不同碱基相同,戊糖不同碱基相同,戊糖不同碱基相同,戊糖不同C. C. 戊糖相同,碱基不同戊糖相同,碱基不同戊糖相同,碱基不同戊糖相同,碱基不同D. D. 部分碱基不同,戊糖不同部分碱基不同,戊糖不同部分碱基不同,戊糖不同部分碱基不同,戊糖不同E. E. 碱基相同,部分戊

33、糖不同碱基相同,部分戊糖不同碱基相同,部分戊糖不同碱基相同,部分戊糖不同6. 6. 核酸具有紫外吸收能力的原因是核酸具有紫外吸收能力的原因是核酸具有紫外吸收能力的原因是核酸具有紫外吸收能力的原因是A. A. 嘌呤和嘧啶环中有共轭双键嘌呤和嘧啶环中有共轭双键嘌呤和嘧啶环中有共轭双键嘌呤和嘧啶环中有共轭双键B. B. 嘌呤和嘧啶中有酮基嘌呤和嘧啶中有酮基嘌呤和嘧啶中有酮基嘌呤和嘧啶中有酮基C. C. 嘌呤和嘧啶中有氨基嘌呤和嘧啶中有氨基嘌呤和嘧啶中有氨基嘌呤和嘧啶中有氨基D. D. 嘌呤和嘧啶连接了核糖嘌呤和嘧啶连接了核糖嘌呤和嘧啶连接了核糖嘌呤和嘧啶连接了核糖 E. E. 嘌呤和嘧啶连接了磷酸基

34、团嘌呤和嘧啶连接了磷酸基团嘌呤和嘧啶连接了磷酸基团嘌呤和嘧啶连接了磷酸基团C,D,A7. 7. 组成核酸的基本单位是组成核酸的基本单位是组成核酸的基本单位是组成核酸的基本单位是A. A. 嘌呤碱与嘧啶碱嘌呤碱与嘧啶碱嘌呤碱与嘧啶碱嘌呤碱与嘧啶碱 B. B. 核糖与脱氧核糖核糖与脱氧核糖核糖与脱氧核糖核糖与脱氧核糖 C. C. 核苷核苷核苷核苷 D. D. 核苷核苷核苷核苷 酸酸酸酸 E. E. 寡核苷寡核苷寡核苷寡核苷 酸酸酸酸 8. 8. 在核酸结构中含量较稳定的元素是在核酸结构中含量较稳定的元素是在核酸结构中含量较稳定的元素是在核酸结构中含量较稳定的元素是A. C B. H C. O D.

35、 N E. PA. C B. H C. O D. N E. P9. 9. tRNAtRNA的的的的二级结构为二级结构为二级结构为二级结构为A. A. 双螺旋双螺旋双螺旋双螺旋 B. B. 超螺旋超螺旋超螺旋超螺旋 C. C. 线形线形线形线形 D. D. 三叶草形三叶草形三叶草形三叶草形 E. E. 倒倒倒倒“ “L”L”形形形形10. 10. 碱基互补配对形成的键是碱基互补配对形成的键是碱基互补配对形成的键是碱基互补配对形成的键是 维持碱基对之间堆积力的是维持碱基对之间堆积力的是维持碱基对之间堆积力的是维持碱基对之间堆积力的是 核苷酸之间的连接键是核苷酸之间的连接键是核苷酸之间的连接键是核苷

36、酸之间的连接键是 核酸分子中紫外吸收较强的键核酸分子中紫外吸收较强的键核酸分子中紫外吸收较强的键核酸分子中紫外吸收较强的键- 不利于维持双螺旋稳定的力是不利于维持双螺旋稳定的力是不利于维持双螺旋稳定的力是不利于维持双螺旋稳定的力是 A. A. 氢键氢键氢键氢键 B. B. 磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键 C. C. 范德华力范德华力范德华力范德华力 D. D. 碱基中的共轭双键碱基中的共轭双键碱基中的共轭双键碱基中的共轭双键 E. E. 静电斥力静电斥力静电斥力静电斥力D,P,D, A C B D E 11. 11. 假尿嘧啶核苷酸的糖苷键是假尿嘧啶核苷酸的糖苷键是假尿嘧啶核苷酸的糖

37、苷键是假尿嘧啶核苷酸的糖苷键是A. C-C A. C-C 键键键键 B. C-N B. C-N 键键键键 C. N - NC. N - N键键键键 D. C-H D. C-H 键键键键 E. N-H E. N-H 键键键键 12. 12. 下列各下列各下列各下列各DNADNA分子中,碱基组成比例各不相同,其中那种分子中,碱基组成比例各不相同,其中那种分子中,碱基组成比例各不相同,其中那种分子中,碱基组成比例各不相同,其中那种DNADNA的的的的TmTm最低最低最低最低A. A-TA. A-T占占占占15% B. G-C15% B. G-C占占占占25% 25% C. G-CC. G-C占占占占

38、40% D. A-T40% D. A-T占占占占80% 80% E. G-CE. G-C占占占占35% 35% 13. DNA13. DNA变性时,其理化性质发生的改变主要是变性时,其理化性质发生的改变主要是变性时,其理化性质发生的改变主要是变性时,其理化性质发生的改变主要是A. A. 溶液黏度升高溶液黏度升高溶液黏度升高溶液黏度升高 B. B. 浮力密度下降浮力密度下降浮力密度下降浮力密度下降C. 260nmC. 260nm处光吸收增强处光吸收增强处光吸收增强处光吸收增强 D. D. 易被蛋白酶降解易被蛋白酶降解易被蛋白酶降解易被蛋白酶降解E. E. 分子量降低分子量降低分子量降低分子量降低14. 14. 名词解释名词解释名词解释名词解释 增色增色增色增色/ /减色效应减色效应减色效应减色效应 核苷酸核苷酸核苷酸核苷酸 DNADNA变性变性变性变性/ / / /复性复性复性复性 TmTm 核酸分子杂交核酸分子杂交核酸分子杂交核酸分子杂交 A,D,C

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