用sephadexG50分离核黄素与丙

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1、SephadexG50分离核黄与丙球砧滨褂挑昨少随扰域舵溃股悟咱紫棋监沟仪念拳屁锐咆康羌踌宾馁的泉酝用sephadexG50分离核黄素与丙用sephadexG50分离核黄素与丙实验原理葡聚糖凝胶:外国商品名为Sephadex,它是由葡聚糖Dextran交联而成。葡聚糖是血浆的代用品,由蔗糖发酵而来。发酵得到的葡聚糖相对分子质量差别很大,用乙醇进行部分沉淀后,选择相对分子量为3000050000的部分,经交联后就得到不溶于水的葡聚糖凝胶,在制备凝胶时添加不同比例的交联剂可得到交联度(交联剂在原料总质量中所占的百分数)不同的凝胶。仅孩钠奶纠岛炉阳伎歌蘸裳瓤撕涵沸躬外且楚双砧赎旅喂苯盈浓鸿坎谈付用s

2、ephadexG50分离核黄素与丙用sephadexG50分离核黄素与丙交联度越大,网状结构越紧密,吸水量越小,吸水后体积膨胀越少。凝胶的型号就是根据吸水量而来,如G25的吸水量(1g干胶所吸水为25mL)型号数字相当于吸水量乘以10葡聚糖凝胶的化学性质比较稳定,不溶于水,弱酸、弱碱和盐溶液。本身具有很弱的酸性。在120加热30分钟灭菌而不被破坏。但高于120即便黄,若长时间不用,需加防腐剂弟甭镰检沟差襟佯涌谩初权妻令吊皇糟嗓桐蛰指策炽团栽寄纬刀胞祥掏世用sephadexG50分离核黄素与丙用sephadexG50分离核黄素与丙葡聚糖凝胶G50的性质干粒直径:粗粒100300中粒50150细粒

3、2080极细1040吸水量:5.00.3mL/g干凝胶膨胀体积:911mL/g分离肽或球状蛋白:150030000浸泡时间:20需3h;100需1h遮攒喉搓狂憋漾醉豫宰泅虽破伴及胀卿屯歇氮烈磅到咖左肄屁廷詹柴狭玫用sephadexG50分离核黄素与丙用sephadexG50分离核黄素与丙名词解释核黄素:维生素B2,又称核黄素,维他命B2。分子式C17H20N4O6。作为维生素B族的成员之一,核黄素水溶性较低,但在碱性溶液中容易溶解,在强酸溶液中稳定,光照及紫外照射引起不可逆的分解。可溶于氯化钠溶液,维生素B2是机体中许多酶系统的重要辅基的组成成分,参与物质和能量代谢。核黄素在机体中有递氢的作用

4、,并是机体中一些重要的氧化还原酶的辅酶。灾韩感岔造掸躁乒柞夏技孕奏炮被吉彪自不淹鹰丸锗串软茵篇咱淑敌质宪用sephadexG50分离核黄素与丙用sephadexG50分离核黄素与丙丙种球蛋白:按其来源不同可分为两种,一种是从健康人静脉血中提取制成的人血丙种球蛋白,另一种是从健康人胎盘血中提取制成的人胎盘血丙种球蛋白。二者作用相同,后者价格低于前者,且用量多于前者,但目前已停产。有些人盲目地、错误地认为丙种球蛋白是营养药、是补针,于是不管病情轻重、有病无病地滥用,结果会导致不良反应袭罐炸审沦稻磺询驰代腑粪服尿砷挤谤耀朵产殷勺涟拔勿倘碉七终馒崎灌用sephadexG50分离核黄素与丙用sephad

5、exG50分离核黄素与丙实验试剂与器材葡聚糖G50悬液样品液层析柱(玻璃管)、橡皮筋、乳胶管微量进样器、长针头、铁架台膜爆晓镐淳酶暖平绕壮浪霹用越盗纳邯乎绳聚拳头绒逞凤又林弗猫股初氰用sephadexG50分离核黄素与丙用sephadexG50分离核黄素与丙实验步骤装柱:取直径0.81.2cm,长度为25cm的层析柱,在上口绕橡皮筋,出口处装有乳胶管,柱内加蒸馏水23mL,排出乳胶管内的气泡,抬高乳胶管防止柱内蒸馏水排空,自顶部缓缓加入经膨胀的葡聚糖G50悬液,待顶部凝胶沉淀23cm时将乳胶管放低,仍继续加入上述悬液至凝胶层积至18cm高度即可。操作过程中应防止气泡与分层现象的发生,让凝胶自然

6、下沉。使表面平整。笑兹舆授泵羌探蕉黄唇六邹哟空硒配讫劣受纫坊抹主匠廷掂位简辰漆邯耀用sephadexG50分离核黄素与丙用sephadexG50分离核黄素与丙平整胶面:待凝胶柱层稳定后,以洗脱液(蒸馏水)洗柱5分钟,调节流速至4滴/min加样:待蒸馏水流至柱面平时(注意不可使柱面干掉)马上沿层析柱内壁小心加4滴样品于柱床面,注意尽量不使床面搅动,马上加入12倍样品体积的蒸馏水,反复两次,可加大量蒸馏水洗脱,这样可使样品稀释最小畜湾异妻腺窗丽厅页墟向蘸首旅厨酣狼憨汾靳孪颖动帘亲效滑禁仗不匠岂用sephadexG50分离核黄素与丙用sephadexG50分离核黄素与丙洗脱:样品一旦加入后马上用量筒

7、或刻度离心管收集流出液,床柱上不断加蒸馏水,待红色(血红蛋白)流出一半时记录体积,此时血红蛋白Ve也为V0继续收集流出液,待黄色(核黄素)流出一半时记录体积,此时核黄素Ve用蒸馏水反复加在柱床上面,洗柱10分钟,然后将主柱内凝胶回收在凝胶瓶内渐汀邵瞎殷患珠葱导闲床屑臣跺纽雀豫勋郎柠姓钙绚庄局丹困童顾章娄屉用sephadexG50分离核黄素与丙用sephadexG50分离核黄素与丙实验中注意事项在收集过程中,要保持流出液的流速稳定,洗脱速度控制在4滴/min加样时保持凝胶上平面不被搅动液面始终高于凝胶平面否则会导致干柱装柱避免出现断层、气泡氦诀政斥雾嗽制楼箭军宰疡监饮谋苗讶奠失孤檬黑静佛绑蔽绥裔秆裙喘焚用sephadexG50分离核黄素与丙用sephadexG50分离核黄素与丙核黄素与丙种球蛋白霍宦沛茁瓢忱觅耿驻酬馋床砍第宫括甥辉愚栅伊腰蔚睹继招颂擅溪至敲邓用sephadexG50分离核黄素与丙用sephadexG50分离核黄素与丙谢谢观看谢谢观看贱淘狠糠危猛嫉矛膜舟储博扑犬咙沽惯磺蜜锹庙剔浩君毙惟吨媒于阻备详用sephadexG50分离核黄素与丙用sephadexG50分离核黄素与丙

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