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1、二、动物细胞工程二、动物细胞工程 动物细胞培养技术是其他动物细胞动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的工程技术的基础基础动物细胞培养；动物细胞融合动物细胞培养；动物细胞融合单克隆抗体；胚胎移植；核移植单克隆抗体；胚胎移植；核移植（一）动物细胞培养（一）动物细胞培养9/1/2024该课件由【语文公社】友情提供动物胚胎或幼龄动动物胚胎或幼龄动物的组织、器官物的组织、器官细胞悬浮液细胞悬浮液胰蛋白酶胰蛋白酶10代细胞代细胞原代培养原代培养50代细胞代细胞传代培养传代培养细胞株细胞株无限传代无限传代细胞系细胞系单个细胞单个细胞加加培养液培养液9/1/2024该课件由【语文公社】友情提供（2）为什么选
2、用动物胚胎或幼龄个体的）为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？器官或组织做动物细胞培养材料？（1）动物细胞培养液的主要成分是什么？）动物细胞培养液的主要成分是什么？较植物组培培养基有何独特之处？较植物组培培养基有何独特之处？主要成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、主要成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。维生素和动物血清等。独特之处：独特之处：1、液体培养基、液体培养基 2、成分中有、成分中有动物血清等动物血清等 因为这些组织或器官上的细胞生命力因为这些组织或器官上的细胞生命力旺盛，分裂能力强旺盛，分裂能力强（动物体细胞大都生活在（动物体细胞大都生活在液体液体的环境
3、）的环境）9/1/2024该课件由【语文公社】友情提供 血清是一种很好的营养物质，含血清是一种很好的营养物质，含有动物体细胞生长所需要的营养物质，有动物体细胞生长所需要的营养物质，并给动物创造了生活环境。并给动物创造了生活环境。 任何血清使用前必须经过任何血清使用前必须经过鉴定鉴定，只有，只有无菌、无内毒素、无溶血或低溶血、蛋白无菌、无内毒素、无溶血或低溶血、蛋白质以及营养素达一定标准以上才能使用。质以及营养素达一定标准以上才能使用。 血清与血浆的主要区别是血清里不含血清与血浆的主要区别是血清里不含纤维蛋白原纤维蛋白原9/1/2024该课件由【语文公社】友情提供（3）为什么培养前要将组织细胞分
4、散成）为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？单个细胞？ 成块组织不利培养，分散了做成成块组织不利培养，分散了做成细胞悬浮液利于培养细胞悬浮液利于培养（4）动物细胞培养能否像绿色植物组织）动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？培养那样最终培养成新个体？ 不能，动物细胞培养只能使细胞数目增不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的动物个体多，不能发育成新的动物个体9/1/2024该课件由【语文公社】友情提供胰蛋白酶胰蛋白酶 动物组织细胞间隙中含有一定量的动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质弹性纤维等蛋白质，它们与细胞一起，它们与细胞一起，形成具有一定弹性和韧
5、性的组织和器官。形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。 弹性纤维易被胰蛋白酶分解弹性纤维易被胰蛋白酶分解胃蛋白酶？胃蛋白酶？No9/1/2024该课件由【语文公社】友情提供贴壁生长贴壁生长 大多数组织细胞不适应悬浮生长，大多数组织细胞不适应悬浮生长，必须在固定的表面生长和分裂。必须在固定的表面生长和分裂。脱离下来脱离下来 当表面相互接触时就停止分裂增殖当表面相互接触时就停止分裂增殖接触抑制接触抑制 9/1/2024该课件由【语文公社】友情提供动物动物胚胎胚胎或或幼龄幼龄动动物的组织、器官物的组织、器官胰蛋白酶胰蛋白酶剪碎剪碎单个细胞单个细胞加培养液加培养液制成制成细胞细胞悬浮悬浮液液细胞株细胞株
6、细胞系细胞系细胞增殖细胞增殖无限传代无限传代去掉组织去掉组织间蛋白间蛋白动物细胞培养不能动物细胞培养不能最终培养成生物体最终培养成生物体9/1/2024该课件由【语文公社】友情提供动物细胞动物细胞动物细胞动物细胞原代培养 分裂10次细胞株细胞株传代培养 分裂50次( (细胞系细胞系) )( (细胞株细胞株) )细胞系细胞系无限分裂无限分裂遗传物质未遗传物质未发生改变发生改变遗传物质发生遗传物质发生改变无限增殖改变无限增殖9/1/2024该课件由【语文公社】友情提供细胞细胞悬浮悬浮液液1010代代细胞细胞5050代代细胞细胞无限传无限传代代原代培养原代培养传代培养传代培养细胞株细胞株细胞系细胞系
7、注意界定原代培养和传代培养；细胞株和细胞系注意界定原代培养和传代培养；细胞株和细胞系多数组织细胞固定在表面多数组织细胞固定在表面生长和分裂。生长和分裂。随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖遗传物质改变遗传物质改变9/1/2024该课件由【语文公社】友情提供动物细胞培养技术的应用动物细胞培养技术的应用（1 1）生产蛋白质生物制品：病毒疫苗、）生产蛋白质生物制品：病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。干扰素、单克隆抗体等。（2 2）获得大量自身的皮肤细胞，用于）获得大量自身的皮肤细胞，用于植皮。植皮。（3 3）用于检测有毒物质）用于检测有毒物质（4 4）用于生理、病理、药理等
8、方面的）用于生理、病理、药理等方面的研究，为治疗和预防疾病提供理论依据研究，为治疗和预防疾病提供理论依据9/1/2024该课件由【语文公社】友情提供植物体植物体培养结果培养结果获得细胞或细胞获得细胞或细胞分泌蛋白分泌蛋白培养目的培养目的葡萄糖葡萄糖动物血动物血清清蔗糖蔗糖植物激素植物激素液体培养基液体培养基固体培养基固体培养基培养基性质培养基性质细胞增殖细胞增殖细胞的全能性细胞的全能性原理原理动物细胞培养动物细胞培养植物组织培养植物组织培养比较项目比较项目细胞株、细胞系细胞株、细胞系植物体植物体培养结果培养结果分泌蛋白分泌蛋白快速繁殖、培育快速繁殖、培育无病毒植株无病毒植株培养目的培养目的葡萄
9、糖葡萄糖动物血动物血蔗糖蔗糖植物激素植物激素培养基特有成分培养基特有成分液体培养基液体培养基固体培养基固体培养基培养基性质培养基性质细胞的增殖细胞的增殖细胞的全能性细胞的全能性原理原理动物细胞培养动物细胞培养植物组织培养植物组织培养比较项目比较项目植物组织培养和动物细胞培养的比较植物组织培养和动物细胞培养的比较9/1/2024该课件由【语文公社】友情提供（二）动物细胞融合（二）动物细胞融合9/1/2024该课件由【语文公社】友情提供细胞细胞A细胞细胞B杂种细胞杂种细胞灭活的病毒灭活的病毒物理法物理法化学法化学法仙台病毒仙台病毒疱疹病毒疱疹病毒新城鸡瘟病毒新城鸡瘟病毒9/1/2024该课件由【语
10、文公社】友情提供用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程细胞核细胞核病毒颗粒病毒颗粒细胞核细胞核9/1/2024该课件由【语文公社】友情提供诱导动物细胞融合的方法诱导动物细胞融合的方法物理法：离心、振动、电刺激物理法：离心、振动、电刺激化学法：聚乙二醇（化学法：聚乙二醇（PEGPEG）生物法：灭活的动物病毒生物法：灭活的动物病毒（丧失感染活性）（丧失感染活性）9/1/2024该课件由【语文公社】友情提供主要用于制备主要用于制备单克隆抗体单克隆抗体获得杂种植株获得杂种植株用途用途物理、化学方法物理、化学方法（同左）（同左）灭活的病毒灭活的病毒物理（离心、振物理（离心、振荡
11、、电刺激）荡、电刺激）化学（聚乙二醇）化学（聚乙二醇）诱导方法诱导方法使细胞分散后诱使细胞分散后诱导细胞融合导细胞融合去除细胞壁后诱去除细胞壁后诱导原生质体融合导原生质体融合细胞融合的方法细胞融合的方法细胞膜的流动性细胞膜的流动性细胞膜的流动性、细胞膜的流动性、植物细胞全能性植物细胞全能性细胞融合的原理细胞融合的原理动物细胞融合动物细胞融合植物体细胞杂交植物体细胞杂交比较项目比较项目比较项目比较项目植物、动物细胞融合的比较植物、动物细胞融合的比较9/1/2024该课件由【语文公社】友情提供动物细胞融合最重要的用途动物细胞融合最重要的用途制备单克隆抗体制备单克隆抗体9/1/2024该课件由【语文
12、公社】友情提供抗原抗原吞噬细胞吞噬细胞T细胞细胞B细胞细胞增殖、分化增殖、分化效应效应B细胞细胞T记忆细胞记忆细胞B记忆细胞记忆细胞抗体抗体抗原抗原杀灭杀灭结合结合增殖增殖增殖、分化增殖、分化效应效应T细胞细胞靶细胞靶细胞接触、激活接触、激活溶酶体酶溶酶体酶靶细胞靶细胞解体死亡解体死亡增殖增殖淋巴因子淋巴因子增强增强免疫细胞作用免疫细胞作用再次进入9/1/2024该课件由【语文公社】友情提供读读下面一段文字资料，思考以下问题：下面一段文字资料，思考以下问题：长期以来，为了获得抗体，采用的是把某种抗原反复长期以来，为了获得抗体，采用的是把某种抗原反复注射到动物体内，然后从动物血清中分离出所需抗体
13、注射到动物体内，然后从动物血清中分离出所需抗体的方法。用这种方法获得的抗体，不仅产量低，而且的方法。用这种方法获得的抗体，不仅产量低，而且抗体的特异性差，纯度低，反应不够灵敏。人们发现，抗体的特异性差，纯度低，反应不够灵敏。人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的在动物发生免疫反应的过程中，体内的B细胞可以产细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个每个B细胞只细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得。要想获得大量的单一抗体，必须用单个大量的单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，细胞进行无性繁殖，即克
14、隆。即克隆。 （1）请）请从从以上文字资料中找出单克隆抗体的概念以上文字资料中找出单克隆抗体的概念用用单个单个B细胞进行克隆，得到的细胞群能够分泌一种细胞进行克隆，得到的细胞群能够分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体，这种抗体就叫做单化学性质单一、特异性强的抗体，这种抗体就叫做单克隆抗体。克隆抗体。9/1/2024该课件由【语文公社】友情提供提示提示1：仅用细胞培养技术可行吗？：仅用细胞培养技术可行吗？（2）怎样才能获得单克隆抗体？）怎样才能获得单克隆抗体？提示提示2：我们所学的哪种细胞是可以无限：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？增殖的？提示提示3：有什么方法能使：有什么方法能使B细胞产生
15、抗体细胞产生抗体的能力和肿瘤细胞无限增殖能力同时具的能力和肿瘤细胞无限增殖能力同时具备呢？备呢？9/1/2024该课件由【语文公社】友情提供（1 1）提出问题：从）提出问题：从动物血清中分离抗体动物血清中分离抗体的方的方法产量低、特异性差、纯度低、反应不够灵法产量低、特异性差、纯度低、反应不够灵敏敏（三）单克隆抗体（三）单克隆抗体（2 2）设计方案：由于）设计方案：由于每一个每一个B B淋巴细胞只分泌淋巴细胞只分泌一种特异性抗体一种特异性抗体，利用，利用单个单个B B淋巴细胞淋巴细胞进行无性进行无性繁殖，就可以产生单克隆抗体。繁殖，就可以产生单克隆抗体。 由于由于B B淋巴细胞不能无限增殖，因
16、此利用淋巴细胞不能无限增殖，因此利用小鼠骨髓瘤细胞与之融合，就可达到目的。小鼠骨髓瘤细胞与之融合，就可达到目的。9/1/2024该课件由【语文公社】友情提供 单克隆抗体制备过程：单克隆抗体制备过程： 注射抗原注射抗原B淋巴细胞淋巴细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞细胞融合、筛选细胞融合、筛选杂交瘤细胞杂交瘤细胞细胞培养细胞培养筛选，继续培养筛选，继续培养足够数量的、能产生足够数量的、能产生特定抗体的细胞群特定抗体的细胞群体外培养体外培养注射到小鼠腹腔注射到小鼠腹腔单克隆抗体单克隆抗体（选择性培养基）（选择性培养基）选择性培养基：选择性培养基：使亲本细胞不能使亲本细胞不能存活而杂种细胞可存活存活而杂种细胞
17、可存活9/1/2024该课件由【语文公社】友情提供1、本过程利用了哪些原理？、本过程利用了哪些原理？免疫原理，免疫原理，细胞融合原理和动物细胞培养原理细胞融合原理和动物细胞培养原理2、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞细胞融合？融合？ 这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传物质，不仅具有亲细胞的遗传物质，不仅具有B细胞分泌细胞分泌抗体的能力，而且还有无限增殖的本领，抗体的能力，而且还有无限增殖的本领，因而可以获得大量单克隆抗体因而可以获得大量单克隆抗体9/1/2024该课件由【语文公社】友情提供 细胞的同源性细胞的同源性越近越近，
18、融合形成的，融合形成的杂种细胞越易成活杂种细胞越易成活 有无限增殖能力（失去凋亡机制，有无限增殖能力（失去凋亡机制，失去接触抑制等）的细胞是肿瘤细胞，失去接触抑制等）的细胞是肿瘤细胞，而具有转移能力的肿瘤细胞，称为癌细而具有转移能力的肿瘤细胞，称为癌细胞。胞。9/1/2024该课件由【语文公社】友情提供单克隆抗体的应用单克隆抗体的应用在基础理论研究中具有重要意义在基础理论研究中具有重要意义在疾病诊断、治疗和预防方面，具在疾病诊断、治疗和预防方面，具有特异性高、灵敏度高等优越性。有特异性高、灵敏度高等优越性。生物导弹生物导弹（作为载体，运载抗癌药物，形成（作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹生
19、物导弹”治治疗肿瘤）疗肿瘤）9/1/2024该课件由【语文公社】友情提供资料资料：目前世界各国已经研制出数以百目前世界各国已经研制出数以百计的单克隆抗体。许多缺乏良好诊断手计的单克隆抗体。许多缺乏良好诊断手段的传染病、免疫性疾病、血液病、内段的传染病、免疫性疾病、血液病、内分泌疾病和遗传病，用单克隆抗体作为分泌疾病和遗传病，用单克隆抗体作为诊断手段，是一个必然趋势。另外，用诊断手段，是一个必然趋势。另外，用单克隆抗体做体内诊断，借以鉴别和定单克隆抗体做体内诊断，借以鉴别和定位体内位体内“病灶病灶”也引起人们的注意，目也引起人们的注意，目前，主要用于肿瘤追踪及心肌梗塞的诊前，主要用于肿瘤追踪及心
20、肌梗塞的诊断。断。9/1/2024该课件由【语文公社】友情提供小结小结两个过程两个过程动物细胞培养过程动物细胞培养过程单克隆抗体制备过程单克隆抗体制备过程三三个个“一一”一个诱导细胞融合的新方法一个诱导细胞融合的新方法 灭活病毒灭活病毒一个新细胞杂交瘤细胞一个新细胞杂交瘤细胞一个优势单克隆抗体特异性一个优势单克隆抗体特异性 强、灵敏度高的优势强、灵敏度高的优势9/1/2024该课件由【语文公社】友情提供卵细胞卵细胞C母绵羊子宫母绵羊子宫母绵羊母绵羊母绵羊母绵羊乳腺细胞乳腺细胞细胞质细胞质细胞核细胞核细胞核移植细胞核移植胚胎移植胚胎移植早期胚胎早期胚胎多莉羊多莉羊分娩分娩卵裂卵裂融合后的卵细胞融
21、合后的卵细胞细胞拆合技术细胞拆合技术妊娠妊娠多多莉莉羊羊的的培培育育过过程程细胞核细胞核移植移植9/1/2024该课件由【语文公社】友情提供黑面绵羊去黑面绵羊去核卵细胞核卵细胞白面绵羊乳白面绵羊乳腺细胞核腺细胞核细胞核移植细胞核移植重组细胞重组细胞电脉冲刺激电脉冲刺激早期胚胎早期胚胎胚胎移植胚胎移植另另一头绵羊的子宫一头绵羊的子宫妊娠、出生妊娠、出生克隆羊多莉克隆羊多莉9/1/2024该课件由【语文公社】友情提供 采用此方法可以将两个不同种、属采用此方法可以将两个不同种、属的动物优点集中在一起，产生的动物优点集中在一起，产生具有双亲具有双亲优点优点的可繁殖的杂种动物。的可繁殖的杂种动物。 细胞
22、核移植对动物优良杂交种的无性细胞核移植对动物优良杂交种的无性繁殖具有重大意义。这一技术的成功与完繁殖具有重大意义。这一技术的成功与完善对于优良家禽的无性繁殖和濒临绝迹的善对于优良家禽的无性繁殖和濒临绝迹的珍贵动物的传种意义重大。珍贵动物的传种意义重大。 9/1/2024该课件由【语文公社】友情提供克隆动物的研究意义克隆动物的研究意义1. 1.用于生物学和医学研究的实验动物用于生物学和医学研究的实验动物2. 2.改良动物品种改良动物品种 3. 3.治疗人类疾病治疗人类疾病4.4.保护濒危动物保护濒危动物9/1/2024该课件由【语文公社】友情提供动物的胚胎移植动物的胚胎移植 解决某些妊解决某些妊
23、娠时间长、每胎产娠时间长、每胎产子数量少的优良种子数量少的优良种畜的繁殖速度问题。畜的繁殖速度问题。9/1/2024该课件由【语文公社】友情提供（1）激素促多排卵）激素促多排卵 （2）体外受精）体外受精 （3）培育胚胎）培育胚胎 （4）胚胎激素处理）胚胎激素处理 （5）胚胎植入母体）胚胎植入母体 操作过程：操作过程：9/1/2024该课件由【语文公社】友情提供胚胎移植技术胚胎移植技术试管动物（婴儿）培养过程：试管动物（婴儿）培养过程：卵细胞卵细胞精子精子体外受精体外受精受精卵受精卵胚胎胚胎新个体新个体母体子宫内母体子宫内孕育、产出孕育、产出9/1/2024该课件由【语文公社】友情提供不同细胞工程技术间的关系不同细胞工程技术间的关系 植物组织培养是植物细胞工程技植物组织培养是植物细胞工程技术的基础。术的基础。 动物细胞培养是各种动物细胞工动物细胞培养是各种动物细胞工程技术的基础。程技术的基础。 为达到特定的目的，许多细胞工程为达到特定的目的，许多细胞工程技术往往需要同时运用。技术往往需要同时运用。 9/1/2024该课件由【语文公社】友情提供
