《医学课件第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定》由会员分享，可在线阅读，更多相关《医学课件第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定（42页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、第一节第一节 概概 述述第二节第二节 血脂、脂蛋白血脂、脂蛋白 及载脂及载脂蛋白测定蛋白测定时阅澜氮破癣缺招闰满艳似腥雁尸瑚砸算杆耙坑奇祁耽滥痒氧猖醚讫律辽第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定跌穿玫槐养凭躇腰活缓涣并箩糕窑阐钞芹胎某尺谗界哉素誊当峨药褥柏柬第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定一、血脂和血浆脂蛋白一、血脂和血浆脂蛋白自学自学二、脂蛋白代谢紊乱二、脂蛋白代谢紊乱（一一）高高脂脂蛋蛋白白血血症症血血脂脂含含量量超超过过正正常常称称为为高高脂脂血血症症，由由于于血血脂脂均均以以血血浆浆脂脂蛋蛋白白的
2、的形形式式存存在在，故故也也称称为为高高脂脂蛋蛋白白血血症症。按按发发病病原原因因分分为为两大类。两大类。1.按按表表型型分分类类以以Fredrickson（1967）分分类类法法为为基基础础，经经WHO（1970）修修订订的的分分类类系系统统，根根据据血血清清TC、TG、外外观观和和脂脂蛋蛋白白电电泳泳图图谱谱，将将其分为其分为6型。型。第一节第一节 概概 述述屹郭降悍缉汾函隋限盎饺婿阻诬龄沸竟辨狞杆酵溅仔匿栗奥疲盟峡钟论胸第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定（1）型型高高脂脂蛋蛋白白血血症症又又称称高高乳乳糜糜微微粒粒血血症症。是是一一种种常常染
3、染色色体体隐隐性性遗遗传传病病。由由于于LPL缺缺损损或或LPL活活化化因因子子（ApoC）缺缺损损所所致致。婴儿期即可发生，但罕见。其生化检查特征：婴儿期即可发生，但罕见。其生化检查特征：4冷冷置置试试验验，血血清清上上层层为为奶奶油油状状，下层清亮。下层清亮。血血清清TG，达达11mmol/L以以上上，血血清清TC正常或轻度正常或轻度。血清血清LPL活性活性。血清脂蛋白电泳，血清脂蛋白电泳，CM。余骸殆胳琳振宠运互褂祟樟腺殖搬奏舒犊谎忍说浴驰舰佬谷亢缨亡秆住乡第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定 （2）a高高脂脂蛋蛋白白血血症症又又称称高高-脂脂
4、蛋蛋白白血血症症或或高高胆胆固固醇醇血血症症。属属常常染染色色体体显显性性遗遗传传，有有明明显显的的家家族族史史。病病因因LPL受受体体缺缺损损，杂杂合合子子型型发发 生生 频频 率率 为为 1/500， 纯纯 合合 子子 型型 发发 生生 频频 率率 为为1/100000。其生化检查特征：。其生化检查特征：4冷置试验，血清外观清亮透明。冷置试验，血清外观清亮透明。血血清清TC，15.6mmol/L尤尤其其是是LDL-C，TG正常。正常。血清脂蛋白电泳，血清脂蛋白电泳，-LP。临床表现，中青年常伴有冠状动脉硬化，临床表现，中青年常伴有冠状动脉硬化，结局为心肌梗塞。结局为心肌梗塞。品仿秦堕灵淹曾
5、函郭涎林寂药悄哗冕涟琉窿李轿棕寥俄搔亥负件造男瓣铝第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定（3）b型高脂蛋白血症型高脂蛋白血症在在 a型型 基基 础础 上上 伴伴 有有 VLDL（ 高高LDL+VLDL血血症症），病病因因不不明明。其其生生化化检检查特征：查特征：4冷置试验，血清外观清亮或微混。冷置试验，血清外观清亮或微混。血清血清TC，TG。血清脂蛋白电泳，血清脂蛋白电泳，-LP，pre-LP。化辨萌透柠耳氢质臻头焉掳咽咱明姓败交咳嫉舰鸥趁蓝咬品捕鸟蓑应莫钨第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定（4）型型高高脂
6、脂蛋蛋白白血血症症又又称称宽宽-脂脂蛋蛋白白血血症症。属属常常染染色色体体显显性性遗遗传传病病，发发病病率率1/10000，病病因因，ApoE异异常常，与与相相应应受受体体结结合率合率。其生化检查特征：。其生化检查特征：4冷冷置置试试验验，血血清清外外观观混混浊浊，后后形形成蜡样黄色薄膜。成蜡样黄色薄膜。血清血清TC，TG。血血清清脂脂蛋蛋白白电电泳泳，-LP，pre-LP，IDL。融合形成宽。融合形成宽区带。区带。钝怔距惭裂皂缘参扁稳街年赐切殴潭锅澄浪冶唉嫌笺痔锨办搅棺疮阳吃妆第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定（5）型型高高脂脂蛋蛋白白血血症症又
7、又称称高高前前-脂脂蛋蛋白白血血症症或或家家族族性性高高甘甘油油三三脂脂血血症症。属属常常染染色色体体显显性性遗遗传传病病，较较常常见见，我我国国原原发发性性高高脂脂蛋蛋白白血血症症中中一一半半属属于于此此型型。病病因因，ApoA2异异常常。其其生生化检查特征：化检查特征：4冷置试验，血清外观混浊。冷置试验，血清外观混浊。血清血清TG，TC正常或稍正常或稍。血清脂蛋白电泳，血清脂蛋白电泳，pre-LP。临床表现，多见于中年人易发生冠心病。临床表现，多见于中年人易发生冠心病。相泣地藏奄兰消虑默态滚增搜竟赛程操娃迭酱缴揍怔席松钧洋阵无悔轨嘴第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血
8、脂脂蛋白及载脂蛋白测定（6）型型高高脂脂蛋蛋白白血血症症属属常常染染色色体体显显性性遗遗传传病病，病病因因不不详详，可可能能由由几几种种遗遗传传缺缺陷所致，较罕见。生化检查特征：陷所致，较罕见。生化检查特征：4冷冷置置试试验验，血血清清上上层层为为奶奶油油状状，下层混浊。下层混浊。血清血清TG，TC。血清脂蛋白电泳，血清脂蛋白电泳，CM，pre-LP。您贡胳涸闲雾毡租檀票拳沙黍酉隋籽颅更腾蒸额犊抄肇手英鬼鼓饯睦蚤姚第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定2.按按是是否否继继发发于于全全身身性性疾疾病病分分类类分分为为原原发发性性和和继继发发性性高高脂脂血
9、血症症。常常继继发发于于糖糖尿尿病病、肝肝病病、肾肾病病、肥肥胖胖以以及及过过量量饮饮酒酒，成人发病率为成人发病率为3%5%。3.高高脂脂血血症症的的基基因因分分型型法法一一部部分分高高脂脂血血症症患患者者存存在在单单一一或或多多个个遗遗传传基基因因的的缺缺陷陷，具具有有明明显显的的家家族族聚聚集集性性，有有明明显显的的遗遗传倾向。传倾向。哦眷帧矮亨诅纸骋战蝎漾驾羽舍迟制斋向袭蛇脐沃兴溃政累骤棺珍垣究斑第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定（二）低脂蛋白血症（二）低脂蛋白血症主要有四种类型主要有四种类型1.低低LDL血血症症是是一一种种常常染染色色体体
10、显显性性遗遗传传病病，病因病因ApoB100低下，血浆低下，血浆LDL减少，减少，TC。2.无无LDL血血症症罕罕见见的的常常染染色色体体隐隐性性遗遗传传病病，病因病因ApoB100、B48缺损，血浆中无缺损，血浆中无LDL，TC。3.低低HDL血血症症病病因因不不详详，血血清清TG，动动脉脉粥粥样硬化、冠心病的发病率高。样硬化、冠心病的发病率高。4.无无HDL血血症症（Tangier病病）罕罕见见的的常常染染色色体体隐隐性性遗遗传传病病，ApoA、A缺缺损损，血血浆浆TC，HDL-C。藤疡亩完石匹告咽鳞桐妨敛拥咋寡挤惟掖日匿很侦副境油随趋侣遁缀会漂第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一
11、节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定血血脂脂测测定定方方法法很很多多，目目前前临临床床实实验验室室基基本本检检验验项项目目有有：血血清清外外观观分分析析，TC，TG，HDL-C，LDL-C测测定定。进进一一步步可可做做HDL亚亚组组分分，IDL，Apo（如如ApoA、ApoB100），Lp（a）及及脂脂蛋蛋白白电电泳泳，LPL，LCAT测测定定，为为保保证证分分析析结结果果的的可靠性，标本的采集应在餐后可靠性，标本的采集应在餐后12h以上。以上。第二节第二节血脂、脂蛋白及载脂蛋白测定血脂、脂蛋白及载脂蛋白测定铱华役羊矗颜垒走焰惰阎署妊丙欠林搽蒸雍胶身烧出盅屎猎撵郊噬寐乞或第一节概述第二节血脂脂
12、蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定一、血清外观分析（血清冷置试验）一、血清外观分析（血清冷置试验）混浊混浊（TG增高）增高）下层浊（下层浊（VLDL增高）增高）型型下层清（下层清（VLDL正常）正常）型型均匀混浊均匀混浊（VLDL）TC正常正常型型上层奶油样上层奶油样（CM）TC增高增高a型型TC正常正常正常人正常人清亮清亮（TG正常）正常）TCb，型型空空腹腹血血清清测测TC4过夜过夜测测TC腔泌酞凶丽储摘武朴冀萧埠罗柑宵碎蔫朱懒姓埋第私局疏悉讫层傅单恿鲜第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定二、血清总胆固醇测定二、血清总胆固
13、醇测定胆胆固固醇醇是是人人体体重重要要的的脂脂类类成成分分，具具有有重重要要的的生生理理功功能能，如如合合成成类类固固醇醇激激素素，维维生生素素D3胆胆汁汁酸酸，并并构构成成细细胞胞膜膜成成分分，TC包包括括FC（1/3）和和CE（2/3），胆胆固固醇醇与与动动脉脉粥粥样样硬硬化化有有密密切切关关系系，故故胆胆固固醇醇测测定定是是最最常常用用的的实验室检测项目之一。实验室检测项目之一。TC测测定定方方法法很很多多，约约200多多种种，分分为为化化学学测测定定法法、酶酶法法、气气相相色色谱谱法法、高高效效液液相相色色谱法、核素稀释质谱法（决定性方法）。谱法、核素稀释质谱法（决定性方法）。噶冒迭坏
14、替样问钳惠希愤赣斯浅疯尸册苛谐菱轮碱淡贞升畏畦涸蝶麦开胞第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定（一）化学测定法（一）化学测定法主要有两类主要有两类1.Liberman-Burchard反反应应简简称称L-B反反应应，胆胆固固醇醇经经冰冰醋醋酸酸，浓浓硫硫酸酸脱脱水水生生成成3.5-胆胆烷烷二二烯烯阳阳离离子子，然然后后被被醋醋酐酐，浓浓硫硫酸酸氧氧化化生生成绿色的胆烷六烯磺酸。呈色稳定性差。成绿色的胆烷六烯磺酸。呈色稳定性差。2.Zak反反应应胆胆固固醇醇经经冰冰醋醋酸酸，浓浓硫硫酸酸脱脱水水生生成成3.5-胆胆烷烷二二烯烯阳阳离离子子，然然后后在在F
15、e3+存存在在下下氧氧化化生生成成紫紫红红色色胆胆烷烷四四烯烯阳阳离离子子，灵灵敏敏度度较较L-B反反应应高高7倍倍，且且呈呈色色稳稳定定性性好好，但但试试剂剂腐蚀性极大，不能用于自动化分析。腐蚀性极大，不能用于自动化分析。蹭舀备姜釜瀑脚恐茧拼吧平鲤葛驼幻坡蜕候湍赊彼皋告契瀑捻州嫡食毙巨第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定（二）酶法（二）酶法胆固醇酯胆固醇酯胆固醇胆固醇脂肪酸脂肪酸胆固醇胆固醇O2胆烷胆烷-4-烯烯-3酮酮H2O2H2O24AAP酚酚红色亚胺醌红色亚胺醌H2OCEHChODPOD试试剂剂中中除除上上述述三三种种酶酶外外，还还有有胆胆酸
16、酸钠钠和和表表面面活活性性剂剂及及稳稳定定剂剂，胆胆酸酸钠钠用用于于激激活活CEH，表表面面活活性性剂剂促进胆固醇从脂蛋白中释放。促进胆固醇从脂蛋白中释放。酶酶法法操操作作简简便便，快快速速，试试剂剂无无腐腐蚀蚀性性，适适合合于于自自动动化化分分析析，但但也也存存在在有有一一些些不不足足，CEH对对胆胆固固醇醇水水解解不不完完全全，表表面面活活性性剂剂影影响响CEH活活性性，黄黄疸疸血血清中过高的胆红素可还原清中过高的胆红素可还原H2O2使结果偏低。使结果偏低。胁猖甥妓膊屏垃磋商活走彦阔烩赣疆幻散却促痊爬官梗迈浦冈湿娇怯速挂第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载
17、脂蛋白测定【参考范围】【参考范围】3.105.70mmol/L【临临床床意意义义】血血清清TC含含量量受受年年龄龄、性性别别、饮饮食食和和运运动动等等因因素素的的影影响响。20岁岁以以上上随随年年龄龄而而，70岁岁以以后后则则有有下下降降趋趋势势。2040岁岁阶阶段段男男性性高高于于女女性性，但但女女性性绝绝经经后后则则高高于于男男性性。城城市市人人群群高高于于农农村村人人群群，与与饮饮食食和和运动有关。运动有关。脑力劳动者高于体力劳动者。脑力劳动者高于体力劳动者。病病理理性性高高胆胆固固醇醇血血症症原原发发性性高高胆胆固固醇醇血血症症，糖糖尿尿病病、胆胆道道阻阻塞塞、肾肾病病综综合合症症、甲
18、甲状腺功能减退。状腺功能减退。病理性低胆固醇血症病理性低胆固醇血症严重贫血、甲亢、严重贫血、甲亢、营养不良。营养不良。焉菠篓渡距蛤堆渺夜菇祖枣逃嘶戎铡印妙懦颇同赣诫疹央嗜均僻目进荔须第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定三、血清甘油三脂测定三、血清甘油三脂测定TG是是有有一一分分子子甘甘油油与与三三分分子子脂脂肪肪酸酸组组成成的的化化合合物物，主主要要存存在在于于VLDL和和CM中中，临临床床化化学学中中往往往往以以测测定定甘甘油油代代表表TG的的含含量量。TG的的测测定定方方法法很很多多，如如气气相相色色谱谱法法、高高效效液液相相色色谱谱法法、红红外
19、外分分光光光光度度法法。但但上上述述方方法法需需特特殊殊的的仪仪器器设设备备和和技技术术，故故一一般般只只用用于于研研究究工工作作中中。临临床床实实验验室室主主要要用用化化学学法法和酶法。和酶法。蔚庄边亨舔岂婆丽锐令匝渗寥嫉役烛记汐虚媳琵滔库矛陨皆窿臃痞藤渐楔第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定（一）化学法（一）化学法基本步骤可归纳为四步基本步骤可归纳为四步1.提提取取：甘甘油油三三脂脂的的提提取取采采用用合合适适的的溶溶剂剂，使使脂脂蛋蛋白白变变性性提提取取TG，同同时时去去除除干干扰扰物物质质(磷脂、游离甘油、葡萄糖等磷脂、游离甘油、葡萄糖等),
20、常用方法有：常用方法有：（1）异异丙丙醇醇抽抽提提，沸沸石石合合剂剂（沸沸石石、高高岭岭土）吸附。土）吸附。（2）异丙醇抽提，氧化铝吸附磷脂。）异丙醇抽提，氧化铝吸附磷脂。（3）正正壬壬烷烷、异异丙丙醇醇、稀稀硫硫酸酸分分溶溶抽抽提提，免免去去吸吸附附磷磷脂脂的的操操作作，后后用用价价廉廉的的正正庚庚烷烷代代替替正壬烷。应用较广。正壬烷。应用较广。逾瓢墙达埠圾挟畦粘既簧辆脑喷膊盐盾柔悼内较冒塌寥柠石推咸焊丧温悟第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定2.皂皂化化：甘甘油油三三脂脂的的水水解解一一般般都都采采用用KOH乙乙醇醇或或KOH异异丙丙醇醇溶溶液液
21、，60，515min可使可使TG完全水解。完全水解。3.氧氧化化：甘甘油油的的氧氧化化最最常常用用的的氧氧化化剂剂是是HIO4，甘甘油油在在酸酸性性条条件件下下被被氧氧化化成成甲甲醛醛、甲甲酸酸。反反应应受受-磷磷酸酸甘甘油油、葡葡萄萄糖糖、丝丝氨氨酸酸的的干干扰扰，故故抽抽提提时时应应尽尽量量除除去去此此类类物质的干扰。物质的干扰。另伟膨荣梳踌展戎传躬泥丸旬吏送尹疼汪泛榆涧忙键泞骚蛰脆捐病计骆猿第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定4.显显色色：显显色色测测定定甲甲醛醛。常常用用方方法法有：有：（1）甲甲醛醛与与变变色色酸酸（4.5-二二羟羟-2.7
22、-萘萘二二磺磺酸酸）在在硫硫酸酸溶溶液液中中加加热热生生成成紫紫红红色色化合物。（化合物。（570nm）（2）甲甲醛醛与与乙乙酰酰丙丙酮酮在在氨氨的的存存在在下下缩缩合合成成黄黄色色的的3.5-二二乙乙酰酰-1.4-二二氢氢-2.6-二二甲基吡啶。（甲基吡啶。（420nm）熏尘佩匡冠嗡丰买绕黑糯窑狐胁瘴顿祷覆哟悯霜佬增婆潘夕媒受亥闭猿渔第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定（二）酶法（二）酶法常用的有常用的有：1.磷酸甘油氧化酶法（磷酸甘油氧化酶法（GK-GPOD-POD法）法）TGH2O甘油甘油FA甘油甘油ATP3-磷酸甘油磷酸甘油ADP3-磷酸甘油
23、磷酸甘油O2磷酸二羟丙酮磷酸二羟丙酮H2O2H2O24-AAP酚酚红色亚胺醌红色亚胺醌H2O试试剂剂较较稳稳定定，灵灵敏敏度度高高，线线性性范范围围宽宽，胆红素、维生素胆红素、维生素C可消耗可消耗H2O2使结果偏低。使结果偏低。LPLGKGPODPOD怜祸潞着月匀下疵廊上态答茸震而滋膏查绒蘸旅惮扛阳葬断婆本彼惑江哈第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定2.乳酸脱氢酶法（乳酸脱氢酶法（GK-PK-LDH法）法）TGH2O甘油甘油FA甘油甘油ATP3-磷酸甘油磷酸甘油ADPADP磷酸烯醇式丙酮酸磷酸烯醇式丙酮酸ATP丙酮酸丙酮酸丙酮酸丙酮酸NADHH+乳酸
24、乳酸NAD+3.甘油氧化酶法甘油氧化酶法第一步消除血清中原有的甘油：第一步消除血清中原有的甘油：LPLGPODPKLDH可斧宦午妹绷住旅亭酝挝疹社童茎岳串旺辨侵掌安踞剑左到搁铬门迷融渴第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定游离甘油游离甘油O2甘油醛甘油醛H2O2GlyODH2O2EMAE无色物质无色物质EMAE称称N-乙乙基基-N-（3-甲甲基基）-N-乙乙酰酰乙乙二二胺胺。是是一一种种还还原原剂剂，灵灵敏敏度度比比酚酚高高。第第二二步步测测定定甘油三脂水解释放的甘油：甘油三脂水解释放的甘油：TGH2O甘油甘油FA甘油甘油O2甘油醛甘油醛H2O2H2O
25、24-AAPEMAE有色化合物有色化合物PODGlyODLPLPOD玲桂盒浸谅拍骆满楞度在道择罗亥挚爸袜挛挝犬荫桂犁昭钓咙棚启掌编推第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定【参考范围】【参考范围】0.561.70mmol/L【临临床床意意义义】血血清清TG一一般般随随年年龄龄增增长长而而升高，体重超标者往往偏高。升高，体重超标者往往偏高。1.病病理理性性增增高高原原发发性性高高脂脂蛋蛋白白血血症症、肥肥胖胖症症、糖糖尿尿病病、肾肾病病综综合合症症、脂脂肪肪肝肝、妊妊娠后期。娠后期。2.病理性降低病理性降低甲亢、肾上腺皮质功能甲亢、肾上腺皮质功能减退、严重
26、肝功能损伤。减退、严重肝功能损伤。康决瓣镍者需位揣零替豫遥宾凑泼柳捞隆卵童按株蛾郴像掷帧昧搅萤戍局第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定四、血清（浆）脂蛋白测定四、血清（浆）脂蛋白测定（一）血清脂蛋白电泳（一）血清脂蛋白电泳临临床床实实验验室室常常用用的的支支持持介介质质有有醋醋酸酸纤纤维薄膜和琼脂糖凝胶。维薄膜和琼脂糖凝胶。1.血血清清脂脂蛋蛋白白醋醋酸酸纤纤维维薄薄膜膜电电泳泳以以醋醋酸酸纤纤维维薄薄膜膜为为支支持持介介质质，血血清清脂脂蛋蛋白白经经电电泳泳分分离离，然然后后用用臭臭氧氧氧氧化化，使使脂脂蛋蛋白白中中的的不不饱饱和和脂脂肪肪酸酸的的
27、双双键键断断裂裂生生成成醛醛，再再用用亚亚硫酸品红染色，即生成紫红色区带。硫酸品红染色，即生成紫红色区带。刽净血撒种题畅腋扬香揩啄转虱赊猫哑坪岭箩骇灸魂焊密侯掇冬扎间镣航第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定2.血血清清脂脂蛋蛋白白预预染染琼琼脂脂糖糖电电泳泳血血清清脂脂蛋蛋白白经经饱饱和和苏苏丹丹黑黑B预预染染后后，以以琼琼脂脂糖糖凝凝胶胶为为支支持持介介质质，进进行行电电泳泳分分离离，即即可可得得到到清清晰晰的的兰兰色色区带。区带。凝凝胶胶浓浓度度一一般般为为0.5%，超超过过1%，-Lp与与pre-Lp不不易易分分开开，0.5%，凝凝胶胶机机械械
28、强强度度太太低。低。血血清清：染染料料为为9：1，染染料料过过多多稀稀释释标标本本，而而且且染染料料中中乙乙醇醇会会引引起起蛋蛋白白质质变变性性，影影响响分分离离效果。效果。耻裔咆肖咯吕唾闯亚省肋圆股疚缅龟惜晦宰腆械璃革拷血樱泻匀锑芦估妻第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定结结果果判判断断，直直观观区区带带的的着着色色深深浅浅，宽宽窄窄，用用浅浅染染，稍稍浅浅染染，深深染染及及消消失失加加以描述；或用光密度扫描仪测定。以描述；或用光密度扫描仪测定。【参考范围】【参考范围】-Lp30%40%pre-Lp13%25%-Lp50%60%CM（）（）燕胚继焊
29、碎凡柜酌抱膳训盅扼崭蒂饰赎敢讳琢衍渐充否甩帛税雄蹋纳牛穿第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定（二）血清高密度脂蛋白测定（二）血清高密度脂蛋白测定常常以以测测定定HDL-C含含量量代代表表HDL水水平平。测测定定步步骤骤包包括括HDL的的分分离离；测测定定HDL中胆固醇中胆固醇。HDL的的分分离离方方法法有有：超超速速离离心心法法、凝凝胶胶过过滤滤法法、免免疫疫化化学学法法、电电泳泳法法、沉沉淀淀法法。临临床床实实验验室室常常用用沉沉淀淀法法。沉沉淀淀剂剂一一般般为为二二价价阴阴离离子子和和多多价价阴阴离离子子。如如：肝肝素素-Mg2+、硫硫酸酸葡葡聚
30、聚糖糖-Mg2+、磷磷钨钨酸酸-Mg2+、聚聚乙乙二二醇（醇（PEG）等。）等。粹潘伤晨不频遇了栓脓畔舷渍泻刚鸯母张锋阜宙城茸晚铅褪氓期裕楼暑葱第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定如如：磷磷钨钨酸酸-Mg2+选选择择性性地地沉沉淀淀血血清清中中的的LDL和和VLDL，经经离离心心上上清清液液中中保保留留HDL，然然后后用用酶酶法法测测定定上上清清液液中中的的胆胆固固醇醇含量，即代表含量，即代表HDL中的胆固醇。中的胆固醇。【参考范围】【参考范围】男男1.280.33mmol/L女女1.370.33mmol/L【临临床床意意义义】HDL-C与与冠冠心心
31、病病发发病病呈呈负负相相关关，HDL-C低低于于0.9mmol/L是是冠冠心心病病危危险因素。险因素。羚誊证葫医措琅优瑶石信继丝茂罕钳勺竹荧阎响潜珠秆胆忿碟甩粮辙弄酸第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定（三）血清高密度脂蛋白亚组分测定（三）血清高密度脂蛋白亚组分测定HDL有有 三三 个个 亚亚 类类 （ HDL1、 HDL2、HDL3）最最近近的的研研究究工工作作表表明明，HDL2亚亚类类与与冠冠心心病病危危险险度度的的相相关关程程度度比比总总HDL-C更更密切密切。HDL2d=1.0631.125g/mlHDL3d=1.1251.210g/mlHD
32、L2脂脂类类60%蛋蛋白白质质40%；HDL3脂类脂类45%蛋白质蛋白质55%铁讹粒逆东尽挟镊袋安柱班遇鳞恫扳呆隆饶倡铺盲轻够停胖诚剃瘴忠囚泣第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定高密度脂蛋白亚组分的分析方法有超速高密度脂蛋白亚组分的分析方法有超速离心法、柱层析法、聚丙烯酰胺凝胶电泳法、离心法、柱层析法、聚丙烯酰胺凝胶电泳法、多价阴离子分级沉淀法。多价阴离子分级沉淀法。其其中中多多价价阴阴离离子子分分级级沉沉淀淀法法具具有有快快速速、经经济济、简简便便更更为为实实用用，是是目目前前临临床床实实验验室室最最常常用用的的方方法法。常常用用的的沉沉淀淀剂剂有
33、有硫硫酸酸葡葡聚聚糖糖-Mg2+、聚乙二醇（、聚乙二醇（PEG）。）。尺喻诵煎吁刃聋巢十迎伤熔丰铂琳泥友著锌欠添什哟烬黎宜笆杰补汀虏祭第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定【原原理理】用用PEG做做沉沉淀淀剂剂，以以不不同同浓浓度度的的PEG在在不不同同pH条条件件下下分分别别将将VLDL和和LDL（沉沉淀淀剂剂 95g/L PEG，pH6.5）HDL2（沉沉淀淀剂剂170g/LPEG，pH7.5）沉沉淀淀，上上清清液液中中只只含含有有HDL（沉沉淀淀剂剂）和和HDL3（沉沉淀淀剂剂），然然后后用用酶酶法法测测定定HDL-C和和HDL3-C，并并以以H
34、DL-C减减去去HDL3-C的差即为的差即为HDL2-C的含量。的含量。【参考范围】【参考范围】HDL2-C男男0.530.17mmol/L女女0.620.22mmol/LHDL3-C男男0.750.17mmol/L女女0.750.16mmol/L岿洒爱坷戚李先忘涧踢帅仕肪釉秦嫌睦续乔止恳阅毙衍拈誓螺删话外猴望第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定（四）低密度脂蛋白测定（四）低密度脂蛋白测定低密度脂蛋白水平通常以低密度脂蛋白水平通常以LDL-C含量表含量表示。示。LDL-C测定方法很多，常用的有：测定方法很多，常用的有：1.Friedewald公式法公
35、式法LDL-CTCHDL-C式中的浓度单位是式中的浓度单位是mmol/L，在一般情，在一般情况下能得到可被临床接受的近似结果，但况下能得到可被临床接受的近似结果，但TG4.25mmol/L时不能应用此公式计算，时不能应用此公式计算，否则结果偏差太大。否则结果偏差太大。TG2.2因剿软岿此话痘拎路鳖掌绸讼缮屎籽嚣寞菲般夸弧就怠通福绪彼贤维耳猴第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定2.聚乙烯硫酸盐沉淀法聚乙烯硫酸盐沉淀法聚乙烯硫酸聚乙烯硫酸（PVS）能选择性沉淀血清中）能选择性沉淀血清中LDL，再以血，再以血清清TC减去上清液（含减去上清液（含HDL和和V
36、LDL）胆固）胆固醇，即得醇，即得LDL-C值。试剂中加入值。试剂中加入EDTA去除去除两价阳离子，避免两价阳离子，避免VLDL共沉，辅以聚乙二共沉，辅以聚乙二醇独甲醚（醇独甲醚（PEGME）可加速沉淀。）可加速沉淀。3.直接测定法直接测定法匀相的匀相的LDL-C直接测定直接测定法是以不同的表面活性剂的双试剂使非法是以不同的表面活性剂的双试剂使非LDL-C与与LDL-C分两步水解，因先消除非分两步水解，因先消除非LDL-C，故也称为消除法。，故也称为消除法。骆慷魏猫缚链揣枚捷素秉万驭句甚派潦欺橱固钱形庙戒忠我横衔把笺蚤辆第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋
37、白测定【参考范围】【参考范围】LDL-C3.12mmol/L【临床意义】【临床意义】LDL-C增高是动脉粥样硬化增高是动脉粥样硬化发生发展的主要危险因素。发生发展的主要危险因素。（五）脂蛋白（五）脂蛋白（a）测定）测定脂脂蛋蛋白白(a)是是由由载载脂脂蛋蛋白白(a)与与载载脂脂蛋蛋白白B100通通过过二二硫硫键键连连接接所所形形成成的的特特殊殊蛋蛋白白。脂脂蛋蛋白白(a)测定的方法目前常用的是测定的方法目前常用的是ELISA法。法。血血清清中中的的脂脂蛋蛋白白(a)与与单单克克隆隆抗抗Lp(a)抗抗体体结结合合，再再与与过过氧氧化化物物酶酶结结合合，形形成成Lp(a)-单单克克隆抗体隆抗体-酶
38、复合物，然后与底物孵育显色。酶复合物，然后与底物孵育显色。稀吾尿瞪蓝磅陡咯洼同耽惰骚茸扔祈滔涛草藩苛触缩肩档追本烽选彼拐序第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定【参考范围】【参考范围】120180mg/L【临临床床意意义义】Lp（a）动动脉脉粥粥样样硬硬化化、冠冠心心病病的的独独立立危危险险因因素素，与与动动脉脉粥粥样样硬硬化化成成正正相相关关，血血清清Lp（a）浓浓度度300mg/L时时，其其冠冠心心病病的的发发病病率率高高于于健健康康人人的的25倍倍。血血清清Lp（a）水水平平主主要要决决定定于于遗遗传传，个个体体间间Lp（a）水水平平差差异异很很
39、大大，但但同同一一个个体体血血浆浆Lp（a）水水平平的的变变化化较较小小，环环境境、饮饮食食、药物对它的影响不明显。药物对它的影响不明显。什粪鹏报凛碗蝇崇万僚平锨鉴圣孺翌母肯梯父肤信婆忆占棠词悸篱沮哈免第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定五、血清载脂蛋白五、血清载脂蛋白A及及B测定测定脂脂蛋蛋白白中中的的蛋蛋白白质质部部分分称称为为载载脂脂蛋蛋白白（apolipoprotein，Apo），可可分分为为A、B、C、D、E、F、G、H八八类类，其其中中ApoA，B，C还有亚类。还有亚类。ApoA是是HDL的的主主要要蛋蛋白白质质，占占HDL蛋蛋白白质质的
40、的85%左左右右，它它的的血血清清浓浓度度可可代代表表HDL水水平平，ApoB是是LDL的的主主要要蛋蛋白白质质，占占LDL蛋蛋白白质质的的97%左左右右，ApoB浓浓度度主主要要反反映映LDL水平。水平。霄狠妥豹什高门痒缠淳蓖台眨躇贺氨阔沁炊卓嘿跳馆遥账平影士凡蹄猫穴第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定Apo的测定方法主要有三类：的测定方法主要有三类：层析层析分离分离，然后再按一般蛋白质定量；，然后再按一般蛋白质定量；电泳电泳分离分离后经染色光密度扫描定量；后经染色光密度扫描定量；各种免各种免疫分析法疫分析法。层层析析法法操操作作麻麻烦烦，一一般般
41、只只用用于于研研究究；电电泳泳法法简简便便灵灵敏敏，但但各各类类Apo染染色色性性能能不不一一致致，重重复复性性不不好好；免免疫疫法法特特异异性性好好，灵灵敏敏度度高高，不不需需预预先先分分离离脂脂蛋蛋白白，适适合合临临床床实验室的应用，但需特异抗血清。实验室的应用，但需特异抗血清。罚号习蓄珠采侮壹鼎邦便桓粱馒藕驯诬纬刻归慑将捶迫角攀病碧威招梭会第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定目前常用的免疫学方法有：目前常用的免疫学方法有：1.单单向向免免疫疫扩扩散散法法（RID）方方法法简简单单，但需时间长，灵敏度较低。但需时间长，灵敏度较低。2.火火箭箭免免
42、疫疫电电泳泳法法（IE）比比RID快快速速、灵敏，抗血清用量少。灵敏，抗血清用量少。3.免免疫疫比比浊浊法法测测定定抗抗原原抗抗体体复复合合物物形形成成而而产产生生的的混混浊浊，方方法法简简便便、快快速速，适适合合于于自自动动分分析析仪仪，灵灵敏敏度度高高于于火火箭箭电电泳泳法法，免免疫疫比比浊浊法法又又分分为为：散散射射比比浊浊法法和和透透射射比比浊法。浊法。泽尸稗鱼蟹肪静荡胎乾颓撮腔缕腻查赁范鞘苦娘蕊彦丛益限话盅萧沛废珐第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定4.酶酶联联免免疫疫吸吸附附法法（ELISA）需需制制备备指指示示酶酶与与Apo或或其其抗抗
43、体体的的交交联联物物（现现有有商商品化试剂盒）和酶标仪。品化试剂盒）和酶标仪。5.放放射射免免疫疫法法（RIA）用用核核素素标标记记抗抗原作为示踪物，灵敏度可达原作为示踪物，灵敏度可达35g。6.荧光免疫分析法（荧光免疫分析法（FIA）7.化学发光免疫法（化学发光免疫法（CLIA）肚鱼镑然树弱虾镇扶抨杖霉诉菱赞芒梢嗜移砒囱桌痞脱诌苹涨剁在袄馒峻第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定【参考范围】【参考范围】ApoA1.001.50g/LApoB0.801.00g/L【临临床床意意义义】ApoA是是HDL的的主主要要结结构构蛋蛋白白，ApoB是是LDL的的主主要要结结构构蛋蛋白白，因因此此，ApoA和和ApoB可可直直接接反反映映HDL和和LDL的的含含量量。但但在在某某些些病病理理情情况况下下，ApoA与与HDL和和ApoB与与LDL并并非非成成正正相相关关，临临床床上上常常将将ApoA和和ApoB比比值值作作为为冠冠心心病的危险指标。病的危险指标。临汉妊瓣沮嗜拉誊争透闯捕决姆看虏丁扎兴允砷岳五疥阅恳帆痈牛遭瓣刊第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定
