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1、神经干动作电位电生理神经干动作电位电生理综合合实验实验 实验目的实验目的 测定测定蛙蛙坐骨神经的动作电位传导速度坐骨神经的动作电位传导速度 学习蛙类离体坐骨神经干的单相、双学习蛙类离体坐骨神经干的单相、双相动作电位的记录方法及与强度的关系。相动作电位的记录方法及与强度的关系。 判别、分析神经干动作电位的基本波判别、分析神经干动作电位的基本波形、测量其幅值以及时程。形、测量其幅值以及时程。学会制作坐骨神经标本的学会制作坐骨神经标本的方法方法实验原理（一）实验原理（一） 将蛙的神经标本放在任氏液中，其将蛙的神经标本放在任氏液中，其兴奋性在几个小时内可保持不变。兴奋性在几个小时内可保持不变。 若给神
2、经一次适宜刺激，可在神经若给神经一次适宜刺激，可在神经上产生一个动作电位。生理学实验中常上产生一个动作电位。生理学实验中常利用蛙的坐骨神经标本来观察神经兴奋利用蛙的坐骨神经标本来观察神经兴奋性的规律。性的规律。 蛙蛙坐骨神经标本制作坐骨神经标本制作实验原理（二）实验原理（二） 本实验将两个引导电极置于正常完整的神经干本实验将两个引导电极置于正常完整的神经干表面，当神经干的一端兴奋之后，兴奋波会先后通表面，当神经干的一端兴奋之后，兴奋波会先后通过两个引导电极，可记录到两个相反方向的电位偏过两个引导电极，可记录到两个相反方向的电位偏转波形，称为转波形，称为双相动作电位双相动作电位。如果两个引导电极
3、之。如果两个引导电极之间的神经组织有损伤，兴奋波只能通过一个引导电间的神经组织有损伤，兴奋波只能通过一个引导电极，不能传导至第二个引导电极，则只能记录到一极，不能传导至第二个引导电极，则只能记录到一个方向的电位偏转波形，称为个方向的电位偏转波形，称为单向动作电位。单向动作电位。蛙坐骨神经双相、单相动作电位与蛙坐骨神经双相、单相动作电位与强度法则强度法则实验原理（三）实验原理（三） 动作电位在神经干上传导具有一定的动作电位在神经干上传导具有一定的速度蟾蜍的坐骨神经是混合神经，由许多速度蟾蜍的坐骨神经是混合神经，由许多粗细不等的有髓和无髓神经纤维构成，其粗细不等的有髓和无髓神经纤维构成，其中以中以
4、A A类纤维为主，传导速度约为类纤维为主，传导速度约为353540m/s40m/s。 神经冲动的传导速度神经冲动的传导速度 （v v）是指动）是指动作电位在单位时间（作电位在单位时间（t t）内传导的距离）内传导的距离（s s） 神经神经动作电位动作电位传导速度的测定传导速度的测定仪器与器械仪器与器械（一）（一）普通剪刀、手术剪、组织剪、眼科镊普通剪刀、手术剪、组织剪、眼科镊金属探针、蛙板、蛙钉金属探针、蛙板、蛙钉玻璃分针玻璃分针瓷碗、细线、培养皿、滴管瓷碗、细线、培养皿、滴管实验方法与步骤实验方法与步骤1.1.破坏脑、脊髓破坏脑、脊髓（双毁髓）（双毁髓） 枕骨大孔枕骨大孔2.2.剪除躯干上部
5、、皮肤及内脏剪除躯干上部、皮肤及内脏坐骨神经坐骨神经坐骨神经的走行坐骨神经的走行3.3.剥皮剥皮剥完皮肤后，将标本放在盛有任氏液的培养皿中。剥完皮肤后，将标本放在盛有任氏液的培养皿中。 4.4.洗干净双手及使用过的全部手术器械。洗干净双手及使用过的全部手术器械。5.5.分离两腿分离两腿6.6.游离坐骨神经标本游离坐骨神经标本注意事项注意事项1.1.破坏脑脊髓要彻底，防止蟾酥射入操作者破坏脑脊髓要彻底，防止蟾酥射入操作者眼中或污染实验标本。眼中或污染实验标本。2.2.操作时避免压挤、损伤和用力牵拉标本，操作时避免压挤、损伤和用力牵拉标本，不可用金属器械触碰神经干。不可用金属器械触碰神经干。3.3
6、.操作过程中，应给神经和肌肉滴加任氏液，操作过程中，应给神经和肌肉滴加任氏液，防止表面干燥，以免影响标本的兴奋性。防止表面干燥，以免影响标本的兴奋性。4.4.标本制成后须放在任氏液中浸泡数分钟标本制成后须放在任氏液中浸泡数分钟, ,使使标本兴奋性稳定标本兴奋性稳定, ,再开始实验效果会较好。再开始实验效果会较好。仪器与器械仪器与器械（二）（二） 计算机生物信号采集计算机生物信号采集处理系统处理系统 RM6240 RM6240 神经标本屏蔽盒神经标本屏蔽盒 实验方法与步骤实验方法与步骤1.1.坐骨神经标本的制备坐骨神经标本的制备2.2.仪器及标本的连结仪器及标本的连结 坐骨神经干放置于神经标本屏
7、蔽盒内坐骨神经干放置于神经标本屏蔽盒内神经标本屏蔽盒神经标本屏蔽盒 与与RM6240RM6240系统连接系统连接刺激电极刺激电极引导电极引导电极s+ s_s+ s_r1 r1r1 r1r2 r2r2 r2接地电极接地电极（1）引导双相神经动作电位引导双相神经动作电位 3. 3.启动启动BL410BL410系统，进入系统软件，点击系统，进入系统软件，点击“实验实验项目项目”菜单，选择菜单，选择“神经肌肉生理实验神经肌肉生理实验”。点击点击“神经干神经干动作电位的引动作电位的引导导”，引导出，引导出一个双相动作一个双相动作电位。电位。 仔细观察双相动作电位的仔细观察双相动作电位的波形。读出最大刺激
8、时双相波形。读出最大刺激时双相动作电位上下相的振幅和整动作电位上下相的振幅和整个动作电位持续时间数值。个动作电位持续时间数值。 自动调节刺激强度，观自动调节刺激强度，观察动作电位波形的变化。读察动作电位波形的变化。读出波宽为某一数值时的阈刺出波宽为某一数值时的阈刺激和最大刺激。激和最大刺激。（2 2）观察和测定双相动作电位）观察和测定双相动作电位 测定神经冲动传导速度测定神经冲动传导速度分别测量两个动作电位分别测量两个动作电位起始点之间的时间差（起始点之间的时间差（t t），），为神经冲动从第一对引导电为神经冲动从第一对引导电极传导到第二对引导电极所极传导到第二对引导电极所需要的时间。需要的时
9、间。测量神经屏蔽盒内两对测量神经屏蔽盒内两对电极之间的距离（电极之间的距离（s s）即为）即为神经干的长度。（神经干的长度。（2 2）按公式按公式v=s/t(m/sv=s/t(m/s）计）计算神经冲动传导的速度。算神经冲动传导的速度。用镊子将两个用镊子将两个引导电极引导电极r1,r1r1,r1之间的之间的神经夹伤，记神经夹伤，记录单相动作电录单相动作电位。位。 观察和测定单相动作电位观察和测定单相动作电位注意事项注意事项1.1.制备标本时，神经干应尽可能分离长一些，上自制备标本时，神经干应尽可能分离长一些，上自脊柱附近的主干，下至踝关节附近。分离过程中脊柱附近的主干，下至踝关节附近。分离过程中
10、勿损伤神经组织，以免影响其兴奋性。勿损伤神经组织，以免影响其兴奋性。2.2.将神经干搭在引导电极上时，神经干不能与标本将神经干搭在引导电极上时，神经干不能与标本盒壁相接触，尽量将其拉成水平线，不要下垂或盒壁相接触，尽量将其拉成水平线，不要下垂或斜向放置。斜向放置。3.3.刺激强度在开始时不要过强，先由弱强度开始，刺激强度在开始时不要过强，先由弱强度开始，逐步加大强度，以免剌激伤害神经标本。逐步加大强度，以免剌激伤害神经标本。4.4.经常滴加任氏液，保持神经标本湿润。经常滴加任氏液，保持神经标本湿润。5.5.实验完毕神经糟应仔细清洗，擦干，以免残留的实验完毕神经糟应仔细清洗，擦干，以免残留的盐液导致电极腐蚀生锈盐液导致电极腐蚀生锈。 实验结果分析及思考实验结果分析及思考1. 1. 神经干动作电位与刺激强度有何关系？神经干动作电位与刺激强度有何关系？神经干动作电位符合神经干动作电位符合“全或无全或无”定律吗定律吗 ？为什么为什么? ?
