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1、第四章第四章 细胞工程技术概论细胞工程技术概论 主要主要内内容容u细胞培养技术u细胞融合u细胞重组u遗传物质转移u单克隆抗体技术贴壁细胞的生长特征贴壁细胞的生长特征成纤维细胞人胃腺癌细胞悬浮细胞的生长特征悬浮细胞的生长特征白细胞细胞:K562腹水瘤细胞:Ehrlich腹水瘤细胞EAC兼性贴壁细胞的生长特征兼性贴壁细胞的生长特征CHOK1显微镜下的高密度微载体显微镜下的高密度微载体 微囊示意图微囊示意图微囊膜微囊膜生物大分子生物大分子代谢产物代谢产物细胞细胞营养物质营养物质聚赖氨酸/海藻酸微囊化步骤 1.1.悬浮细胞胶状液;悬浮细胞胶状液;2.2.成滴器;成滴器;3.3.胶化小珠;胶化小珠;4.
2、4.包被溶液;包被溶液;5.5.显微镜下微囊;显微镜下微囊;6.6.多孔微囊膜;多孔微囊膜;7.7.完成操作后的微囊。完成操作后的微囊。中空纤维培养法中空纤维培养法A Glimpse of Plant Tissue Culture愈伤组织愈伤组织显微镜下细胞融合过程显微镜下细胞融合过程用灭活的病毒诱导的动物细胞融合过程示意图用灭活的病毒诱导的动物细胞融合过程示意图 聚乙二醇(聚乙二醇(PEG)法细胞融合过程)法细胞融合过程电融合诱导法原理示意图电融合诱导法原理示意图 原生质体分离过程(以叶片为例)原生质体分离过程(以叶片为例)过滤、离过滤、离心心加果胶酶加果胶酶和纤维素和纤维素酶酶固体培养法固
3、体培养法液体浅层培养液体浅层培养原生质体原生质体悬浮液悬浮液1mm厚液体培养基厚液体培养基2x105/ml悬滴培养悬滴培养促融因素促融因素电融合电融合 融合融合过过程程杂杂种种细细胞的胞的鉴鉴定定形态鉴定形态鉴定 核移植技核移植技术术目前在各治疗领域的单抗产品数量占比目前在各治疗领域的单抗产品数量占比 例题例题一、选择一、选择1、植物体细胞杂交要先去除细胞壁的原因是(、植物体细胞杂交要先去除细胞壁的原因是()A.植物体细胞的结构组成中不包括细胞壁植物体细胞的结构组成中不包括细胞壁B.细胞壁使原生质体失去活力细胞壁使原生质体失去活力C.细胞壁阻碍了原生质体的融合细胞壁阻碍了原生质体的融合D.细胞
4、壁不是原生质的组成部分细胞壁不是原生质的组成部分2、动物细胞融合的说法不正确的是(、动物细胞融合的说法不正确的是()A.细胞融合首先用酶解法(胰蛋白酶)分散成单个细胞细胞融合首先用酶解法(胰蛋白酶)分散成单个细胞B.细胞融合是个细胞识别过程细胞融合是个细胞识别过程C.融合细胞能表现出两个亲本的特点融合细胞能表现出两个亲本的特点D.原生质体自然条件下常自发融合原生质体自然条件下常自发融合3、单克隆抗体的生产方法中错误的是(、单克隆抗体的生产方法中错误的是()A.发酵罐中培养发酵罐中培养B.小鼠的腹腔繁殖小鼠的腹腔繁殖C.培养成组织移植到动物体内培养成组织移植到动物体内 D.牛的体腔培养牛的体腔培
5、养4、不能人工诱导原生质体融合的方法是(、不能人工诱导原生质体融合的方法是()A.高高pHB.电刺激电刺激C.PEG(聚乙二醇)试剂(聚乙二醇)试剂D.重压重压5、植物细胞融合常用的诱导剂是(、植物细胞融合常用的诱导剂是()A.PEPB.PEGC.ATPD.大肠杆菌质粒大肠杆菌质粒例题例题6、植物细胞融合常用的诱导剂是(、植物细胞融合常用的诱导剂是()A.PEPB.PEGC.ATPD.大肠杆菌质粒大肠杆菌质粒B.7、目前有一种蔬菜新品种、目前有一种蔬菜新品种“白菜白菜甘蓝甘蓝”,只是将两个来自不同植物的只是将两个来自不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞,并将其培养成新的植物体。这是利用了现体细胞
6、融合成一个杂种细胞,并将其培养成新的植物体。这是利用了现代生物技术中的什么?代生物技术中的什么?C.A.细胞工程细胞工程B.基因工程基因工程C.蛋白质工程蛋白质工程D.酶工程酶工程二二.填空:填空:1、下图为植物体细胞杂交过程示意图。据图回答:下图为植物体细胞杂交过程示意图。据图回答:( 1)步)步骤是是,最常用的方法,最常用的方法是是。(2)步骤)步骤一般常用的化学试剂是一般常用的化学试剂是,目的是,目的是。第三章第三章动物细胞工程动物细胞工程作业作业简答简答P1122、4、5、6第四章第四章植物细胞工程植物细胞工程作业作业1.名词解释名词解释原生质体、外植体、愈伤组织、原生质体融合原生质体、外植体、愈伤组织、原生质体融合2.简答简答P1279