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1、临床实验室临床实验室生物安全培训生物安全培训 郭郭 洁职业暴露与感染职业暴露与感染w实验室工作室工作可能可能发生生职业暴露暴露w职业暴露可暴露可能能发生感染生感染实验室职业暴露感染的途径实验室职业暴露感染的途径w实验室室职业暴露可暴露可发生在生在实验室工作或逗室工作或逗留的任何留的任何时间w呼吸道吸入呼吸道吸入w经口口摄入入w针刺或刺或锐器刺器刺伤w皮肤、粘膜皮肤、粘膜污染染w叮咬叮咬呼吸道传播呼吸道传播w呼吸道呼吸道传播的微生物主要存在于播的微生物主要存在于气溶胶气溶胶中并可引起人中并可引起人类感染感染 举例：例：结核分枝杆菌核分枝杆菌 炭疽杆菌炭疽杆菌 SARS冠状病毒冠状病毒 呼吸道传播
2、呼吸道传播w气溶胶（气溶胶（aerosol)是指固体或液体微粒是指固体或液体微粒稳定地定地悬浮于气体介浮于气体介质中形成的胶溶状中形成的胶溶状态分散体系分散体系w其中的气体介其中的气体介质为连续相，通常相，通常为空气空气w其中的微粒其中的微粒为分散相，成份复分散相，成份复杂，大小，大小不一不一呼吸道传播呼吸道传播w按微粒的大小按微粒的大小粒径粒径10m的称的称为为可吸入可吸入颗颗粒，又因粒，又因其重量其重量轻轻，在空气中漂浮的，在空气中漂浮的时间长时间长而称而称为飘尘为飘尘 粒径粒径10m的因重力作用而迅速下沉的因重力作用而迅速下沉而成而成为为降降尘尘消化道摄入传播消化道摄入传播w经消化道消化
3、道摄入入传播的微生物主要存在于播的微生物主要存在于粪便、食物等中，可引起人便、食物等中，可引起人类消化道感消化道感染染 举例：志例：志贺菌属菌属细菌菌 沙沙门菌属菌属细菌菌 葡萄球菌属葡萄球菌属细菌菌消化道摄入传播消化道摄入传播w经消化道消化道摄入入传播的胃播的胃肠道感染可道感染可发生在生在 无意无意识的手的手-口途径口途径污染染时 传染性液体染性液体喷溅入口入口时 在在实验室室进食、食、饮水水时 经血传播经血传播w经血血传播的微生物是存在于血液中并可引播的微生物是存在于血液中并可引起人起人类疾病的生物病原体疾病的生物病原体 举例：例：HBV HCV HIV 疟原虫原虫 梅毒螺旋体梅毒螺旋体
4、经血传播经血传播w被被经血血传播的病原体感染的患者血液、或有播的病原体感染的患者血液、或有可可见的血的血污染的体液；以及精液、阴道分泌染的体液；以及精液、阴道分泌物、物、 关关节液、内液、内脏器官周器官周围液体等可液体等可传播血播血传病原体病原体w经血血传播而致的感染主要播而致的感染主要发生在生在 针刺意外刺意外时 锐器刺器刺伤时 蚊虫、蚊虫、动物叮咬物叮咬时 破破损的皮肤或粘膜的皮肤或粘膜污染染时 临床实验室内小气候临床实验室内小气候w临床床实验室由于其室由于其规模、建筑布局、周模、建筑布局、周围环境、内部分隔、境、内部分隔、设备、人、人员拥挤程程度度及通及通风条件等的不同而有不同的室内条件
5、等的不同而有不同的室内小气候，小气候，并可能并可能导致致实验室内病原体的室内病原体的浓度增加度增加,使使实验室内感染机会明室内感染机会明显大于大于室外室外临床实验室内小气候临床实验室内小气候w临床床实验室在工作室在工作过程中可能造成程中可能造成实验室室环境的境的污染，如离心、混匀、接种、染，如离心、混匀、接种、制片、移液、加制片、移液、加样等均可等均可产生气溶胶生气溶胶污染，染，标本本喷溅等可直接等可直接污染皮肤粘膜及染皮肤粘膜及实验台面和地面等台面和地面等w另外，另外，啮齿动物、昆虫等也都可携物、昆虫等也都可携带并并传播微生物病原体，播微生物病原体，给实验室工作人室工作人员健康健康带来威来威
6、胁临床实验室内小气候临床实验室内小气候w临床床实验室的室的标本或生物材料中可能携本或生物材料中可能携带的潜在病原微生物往往是未知而多的潜在病原微生物往往是未知而多样的的w根据根据处理和理和检测的的标本不同、本不同、检测目的目的和方法不同，和方法不同，临床床实验室藏匿的具有潜室藏匿的具有潜在感染能力的微生物的种在感染能力的微生物的种类、数量和存、数量和存在形式亦不同在形式亦不同微生物危害评估微生物危害评估w当建当建设使用使用传染性或有潜在染性或有潜在传染性材料染性材料的的实验室前，必室前，必须进行微生物危害行微生物危害评估。估。w确定确定对象微生物象微生物应在那一在那一级的生物安全的生物安全防防
7、护实验室中室中进行操作。行操作。w制定相制定相应的操作的操作规程，程，实验室管理制度室管理制度和和紧急事故急事故处理方法，必理方法，必须形成形成书面文面文件并件并严格遵守格遵守执行。行。实验室生物安全防护水平实验室生物安全防护水平w一一级防防护屏障屏障 是指生物安全柜和个人是指生物安全柜和个人防防护装装备等构成的防等构成的防护屏障屏障w二二级防防护屏障屏障 是指是指实验室的室的设施施结构构和通和通风系系统等构成的防等构成的防护屏障屏障实验室生物安全防护水平实验室生物安全防护水平w根据使用的一根据使用的一级和二和二级防防护屏障的不同，屏障的不同，实验室生物安全防室生物安全防护水平（水平（bios
8、afety level,BSL）分）分为四四级。w按防按防护水平由低到高排列即：水平由低到高排列即：一一级生物安全水平（生物安全水平（BSL-1）二二级生物安全水平（生物安全水平（BSL-2）三三级生物安全水平（生物安全水平（BSL-3）四四级生物安全水平（生物安全水平（BSL-4）实验室生物安全防护水平实验室生物安全防护水平w不同不同级别的生物安全防的生物安全防护实验室都是基室都是基于确保于确保处理特定理特定传染性病原体染性病原体时的工作的工作人人员和和环境的安全而境的安全而进行行设计的的实验室生物安全防护水平实验室生物安全防护水平wBSL-1是是围护屏障水平和生物安全屏障水平和生物安全级别
9、最低的生物最低的生物实验室，在室，在该级别实验室中室中进行的操作都是在室内开放空行的操作都是在室内开放空间进行的行的w在其中活在其中活动所涉及的生物因子所涉及的生物因子应是已知是已知不引起健康成人感染的微生物不引起健康成人感染的微生物w但是但是应注意注意这些微生物也些微生物也许有可能引起有可能引起幼儿、老人或免疫抑制患者的机会感染幼儿、老人或免疫抑制患者的机会感染 实验室生物安全防护水平实验室生物安全防护水平wBSL-2主要用于主要用于处理中度危理中度危险的病原体，的病原体，如沙如沙门菌属和乙型肝炎病毒等菌属和乙型肝炎病毒等w这些病原体可能通些病原体可能通过意外的意外的经口口摄入或入或经皮肤、
10、粘膜暴露而感染皮肤、粘膜暴露而感染w在遵守在遵守标准操作程序的情况下，准操作程序的情况下，这些病些病原体的原体的处理可在开放理可在开放实验台台进行行w但是，如但是，如预期有期有发生生喷溅或可或可产生气溶生气溶胶胶时应使用生物安全柜等使用生物安全柜等 实验室生物安全防护水平实验室生物安全防护水平wBSL-3是是为应对主要通主要通过气溶胶气溶胶传播的播的病原微生物如病原微生物如结核分枝杆菌等的核分枝杆菌等的实验室室操作而操作而设计的的wBSL-3有有严格的操作格的操作规程和程序，使用程和程序，使用一一级和二和二级防防护屏障，同屏障，同时对于于诸如通如通风系系统都有特殊的要求都有特殊的要求实验室生物
11、安全防护水平实验室生物安全防护水平wBSL-4用于可引起致命疾病的病原体的用于可引起致命疾病的病原体的处理和理和实验操作操作w这些病原体（如出血些病原体（如出血热病毒）可能通病毒）可能通过气溶气溶胶胶传播的或者没有有效的疫苗播的或者没有有效的疫苗预防或没有有防或没有有效的治效的治疗方法方法wBSL-4实验室的室的实验操作一般地操作一般地应在在级生物生物安全柜内安全柜内进行，或由身着正行，或由身着正压防防护服的工作服的工作人人员进行操作行操作处理理wBSL-4实验室室应是完全独立的是完全独立的实验室，其通室，其通风系系统和和废弃物弃物处理亦理亦应完全独立完全独立 实验室生物安全防护水平实验室生物
12、安全防护水平w实验室生物安全防室生物安全防护可粗略的分可粗略的分为w呼吸道呼吸道传播微生物的防播微生物的防护（主要指（主要指对气气溶胶的防溶胶的防护）w其他途径其他途径传播微生物的防播微生物的防护（主要指（主要指经血液、血液、经消化道或消化道或经啮齿动物等途径物等途径传播的微生物的防播的微生物的防护）个体防护装备个体防护装备w鞋套、帽子、合适的口罩、手套、鞋套、帽子、合适的口罩、手套、护目目镜、常常规实验服、背开式隔离衣、服、背开式隔离衣、连体防体防护服服等等穿穿戴戴防防护护用用品品流流程程 穿工作服（衣、裤）穿工作鞋 戴（防护）口罩穿隔离衣戴第一层手套 戴第二层手套戴帽子必要时洗手必要时戴防
13、护眼镜、面罩BSL-2实验室个体防护实验室个体防护摘摘脱脱防防护护用用品品流流程程 摘外层手套脱隔离衣 摘帽子摘里层手套脱工作服、鞋摘（防护）口罩必要时消毒手套若有摘防护眼镜、面罩规范洗手临床实验室岗位安全风险临床实验室岗位安全风险w采血采血岗位位:针刺、刺、喷溅、气溶胶气溶胶污染染污染染w呼吸道呼吸道标本采集本采集岗位：位：飞沫和气溶胶沫和气溶胶污染染w标本运送、本运送、接收接收岗位：容器表面位：容器表面污染、染、标本泄露和本泄露和泼洒洒污染染w标本离心本离心岗位：离心管破碎或盛装位：离心管破碎或盛装过满造成造成标本泄漏、离心本泄漏、离心结束前的制束前的制动过程中、可程中、可产生大量具有潜在
14、感染性的气生大量具有潜在感染性的气溶胶溶胶颗粒粒w其他其他岗位：位：标本本污染、泄露、气溶胶染、泄露、气溶胶污染染临床实验室岗位安全风险临床实验室岗位安全风险酶联免疫吸附免疫吸附试验、胶体金免疫、胶体金免疫试验、免、免疫凝集疫凝集试验检测岗位位w气溶胶气溶胶污染染使用加使用加样枪或滴管加或滴管加样时可可产生气溶胶粒子，特生气溶胶粒子，特别在吹出最后在吹出最后一滴液体一滴液体时；手工洗；手工洗涤时可可产生气溶胶生气溶胶粒子粒子w泄露和泄露和泼洒洒污染染手工加手工加样可可发生生样本滴落本滴落污染台面等；加染台面等；加样时可可发生反生反应板表面板表面污染；洗板染；洗板时可可发生洗液生洗液污染反染反应
15、板表面；板表面；标本管破裂、本管破裂、倾倒可倒可产生血生血液外泄液外泄临床实验室岗位安全风险临床实验室岗位安全风险细菌学菌学标本接种、本接种、鉴定定岗位位w泄露和泄露和泼洒洒污染染容器破裂可造成容器破裂可造成标本泄本泄露；容器露；容器倾倒可造成倒可造成标本本泼洒；洒；临床采集床采集标本本时可可发生容器外表面生容器外表面污染；接种染；接种时可造成可造成标本滴落本滴落污染台面等；在手工开盖染台面等；在手工开盖时可可发生生标本本污染手指或染手指或环境；制境；制备涂片涂片时可可污染手染手指或指或环境境w气溶胶气溶胶污染染取菌取菌环接种可接种可产生气溶胶粒生气溶胶粒子子污染；制染；制备涂片和涂片和悬液可
16、液可产生气溶胶粒子生气溶胶粒子污染；染；标本本处理理过程中的离心、重程中的离心、重悬浮等可浮等可产生气溶胶粒子生气溶胶粒子污染染各类紧急情况处理各类紧急情况处理手部清洗消毒手部清洗消毒w推荐使用肘推荐使用肘动式或者自式或者自动式洗手开关式洗手开关w流流动水冲洗手部多次，然后用液体皂滴在手上，反复撮手，水冲洗手部多次，然后用液体皂滴在手上，反复撮手，在用水在用水彻底冲洗底冲洗w清洗完清洗完毕再用干再用干净的的纸巾或手巾擦干巾或手巾擦干w可用可用75%的酒精擦手来清除双手的的酒精擦手来清除双手的轻度度污染染w在没有洗手池的地方，可以使用含酒精的在没有洗手池的地方，可以使用含酒精的“免洗免洗”手部清
17、手部清洁产品代替品代替刺伤、切割伤或擦伤应急处理刺伤、切割伤或擦伤应急处理w 保持保持镇静，立即停止静，立即停止实验，脱掉手套。，脱掉手套。w 用清水或肥皂水清洗用清水或肥皂水清洗伤口。口。w 尽量尽量挤出出伤口口处的血液，取出急救箱，用碘酒或的血液，取出急救箱，用碘酒或75%的的酒精擦洗酒精擦洗伤口适当的包扎。口适当的包扎。w 及及时就医，告知医生受就医，告知医生受伤原因及可能的微生物原因及可能的微生物污染，必染，必要要时要要进行医学行医学处理。理。w 向向实验室安全室安全员报告，告，进行事故行事故记录。生物安全柜内溢出处理生物安全柜内溢出处理w 处理溢洒物理溢洒物时不要将不要将头伸入安全柜
18、内，也不要将伸入安全柜内，也不要将脸直接直接面面对前操作口，而前操作口，而应处于前于前视面板的后方。面板的后方。w 选择消毒消毒剂时需要考需要考虑消毒消毒剂对生物安全柜的腐生物安全柜的腐蚀性。性。w 如果溢洒的量不足如果溢洒的量不足1ml时，可直接用消毒，可直接用消毒剂浸湿的浸湿的纸巾擦巾擦拭。拭。w 如溢洒量大或容器破碎，按操作如溢洒量大或容器破碎，按操作规程消毒。程消毒。w 如果溢洒物流入生物安全柜内部，如果溢洒物流入生物安全柜内部，则视情况，如需要可情况，如需要可对生物安全柜生物安全柜进行熏蒸。行熏蒸。衣物污染衣物污染w 尽快脱掉最外尽快脱掉最外层防防护衣，并注意防止感染物衣，并注意防止
19、感染物质进一一步步扩散。散。w 将已将已污染的防染的防护服放入黄色垃圾袋内，待高服放入黄色垃圾袋内，待高压灭菌菌w 脱掉手套，到脱掉手套，到污染区出口洗手染区出口洗手w 更更换防防护服和手套服和手套w 必要必要时对发生生污染及脱防染及脱防护服的地方服的地方进行消毒行消毒处理理w 如果内衣被如果内衣被污染，染，应立即脱掉易立即脱掉易污染的衣物，消毒染的衣物，消毒处理理皮肤粘膜被污染皮肤粘膜被污染w感染性液体外溢到皮肤感染性液体外溢到皮肤（1）立即停止工作，脱掉手套）立即停止工作，脱掉手套（2）用）用75%的酒精的酒精进行皮肤消毒行皮肤消毒（3）再用大量水冲洗）再用大量水冲洗w感染性液体感染性液体
20、溅入眼睛入眼睛（1）立即停止工作，脱掉手套）立即停止工作，脱掉手套(2 ) 迅速到迅速到缓冲区用洗眼器冲洗冲区用洗眼器冲洗（3）用生理）用生理盐水冲洗水冲洗 w两种情况都两种情况都应做适当的做适当的预防治防治疗和医学和医学观察，并察，并报告告实验室安全室安全员进行事故行事故记录离心机内有感染性物质破裂的处离心机内有感染性物质破裂的处理理 w 离心机正在运行离心机正在运行时发生破裂或生破裂或怀疑疑发生破裂，生破裂，应关关闭电源，源， 密密闭30分分钟使气溶胶沉淀，离心机停止后使气溶胶沉淀，离心机停止后发生破裂，生破裂，应立即盖上盖子密立即盖上盖子密闭30分分钟。w带结实的手套或口罩（避免吸入气溶
21、胶）的手套或口罩（避免吸入气溶胶）w使用使用镊子清理玻璃碎片，或用子清理玻璃碎片，或用镊子子夹着的棉花来清理。着的棉花来清理。w破碎的离心管及离心筒、破碎的离心管及离心筒、转轴或或转子都子都应放在无腐放在无腐蚀性性的、的、对相关微生物具有相关微生物具有杀灭作用的消毒作用的消毒剂内浸泡内浸泡60分分钟以以上。上。微生物实验室的消毒要求微生物实验室的消毒要求 w实验室如果室如果发现微生物微生物污染了染了实验环境境应立即停立即停下下实验，用，用实验前前备好的消毒好的消毒剂进行消毒行消毒处理。理。w如如实验室被空气和气溶胶室被空气和气溶胶传播的微生物播的微生物污染，染，应立即关立即关闭实验室室进行消毒
22、行消毒处理。理。w盛装盛装污染微生物染微生物实验耗材的容器耗材的容器应有足量的消毒有足量的消毒剂，用，用过的耗材立即侵泡在消毒的耗材立即侵泡在消毒剂中。中。w实验结束后束后应立即立即对实验环境境进行消毒行消毒处理，擦理，擦洗、消毒工作台面、地面，开启紫外洗、消毒工作台面、地面，开启紫外线灯等照射灯等照射1小小时以上。以上。微生物实验室的消毒要求微生物实验室的消毒要求w实验废弃物弃物应立即立即进行行灭菌或消毒灯无害化菌或消毒灯无害化处理。理。w实验人人员在在实验结束后束后应立即清洗消毒双手，必立即清洗消毒双手，必要要时应洗澡，更衣。洗澡，更衣。w对需消毒的物品需消毒的物品应采取采取彻底的消毒措施
23、，不留死底的消毒措施，不留死角。角。w用消毒用消毒剂浸泡消毒浸泡消毒时要保要保证消毒物品全部浸没在消毒物品全部浸没在消毒消毒剂中。中。w用消毒用消毒剂擦拭消毒擦拭消毒时要要 保保证所有需要消毒的表面所有需要消毒的表面都被均匀的擦拭到都被均匀的擦拭到w所有消毒方法均所有消毒方法均应保保证消毒消毒时间常用消毒方法常用消毒方法A.实验室内空气的消毒：室内空气的消毒：1.一般可加一般可加强开窗通开窗通风换气，条件气，条件许可可时采用采用排气扇人工机械通排气扇人工机械通风，做到每小，做到每小时换气气10-15次。次。2.紫外紫外线灯管适用于室内空气，物体表面的消灯管适用于室内空气，物体表面的消毒。常用的
24、室内毒。常用的室内悬吊式紫外吊式紫外线灯灯对室内空气室内空气消毒消毒时安装的数量安装的数量为平均每立方米，照射平均每立方米，照射时间不少于不少于30分分钟。B.实验室地面物体表面消毒：室地面物体表面消毒：实验室、室、办公室等公室等场所地面要湿式拖所地面要湿式拖扫，禁止禁止干拖干干拖干扫。可用。可用0.1%过氧乙酸拖地或氧乙酸拖地或0.2%-0.5% 过氧乙酸氧乙酸喷洒或拖地消毒洒或拖地消毒剂的用量不的用量不少于少于100ml每立方米，拖把每立方米，拖把应专用，用，污染区和清染区和清洁区不得混用。区不得混用。常用消毒方法常用消毒方法C.物体表面的消毒物体表面的消毒：1.实验台面、桌子、椅子、凳子
25、、床台面、桌子、椅子、凳子、床头柜、柜、门把手、把手、实验记录夹等可用等可用0.2%-0.5%的的过氧乙酸氧乙酸喷洒或有效洒或有效氯为 的含的含氯消毒消毒剂喷洒、擦拭，消毒作用洒、擦拭，消毒作用10-15min。2.若若实验室台面等明室台面等明显被被传染性染性标本本污染，染，应立即用立即用0.2%-0.5%的的过氧乙酸氧乙酸喷洒或有效洒或有效氯为的含的含氯消毒消毒剂喷洒洒于于污染表面，保持染表面，保持30-60min。常用消毒方法常用消毒方法D.一般一般实验器材的消毒器材的消毒：1.凡直接或凡直接或间接接触接接触临床床标本或本或实验微生物的器材均微生物的器材均应视为有有传染性，均染性，均应作消
26、毒作消毒处理。金属器材、玻璃器皿可用理。金属器材、玻璃器皿可用压力蒸汽和干燥力蒸汽和干燥灭菌的方法使用于耐高温、高湿的医用器菌的方法使用于耐高温、高湿的医用器械和物品的械和物品的灭菌。菌。2.玻璃器材使用玻璃器材使用过的玻璃吸管、的玻璃吸管、试管、离心管、玻片、玻管、离心管、玻片、玻璃棒、三角瓶和平皿等璃棒、三角瓶和平皿等应立即浸入有效立即浸入有效氯为的含的含氯消毒消毒剂中中1小小时以上，消毒后用超声波清洗的方法洗以上，消毒后用超声波清洗的方法洗净沥干，使干，使用前再用前再进行高行高压灭菌菌处理。理。常用消毒方法常用消毒方法临床实验室生物安全防护临床实验室生物安全防护w教育和提高工作人教育和提高工作人员的安全意的安全意识w严格遵守操作格遵守操作规程程w正确使用防正确使用防护用品和用品和设备w合理分区和布局合理分区和布局w强化通化通风换气气w重重视医医疗废弃物弃物处理理THANK YOU FOR YOUR ATTENTION
