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1、障践诣块诧回占醉杭揣堰刀舟笛掐幂港因浊彬舆荐蒋钎搁籽戏墓鲸锥审法第七章植物基因工程-08级第七章植物基因工程-08级第七章第七章第七章第七章 植物基因工程植物基因工程植物基因工程植物基因工程一、植物基因工程的发展现状一、植物基因工程的发展现状二、植物基因工程方法二、植物基因工程方法三、转化子细胞的筛选三、转化子细胞的筛选四、转化体的鉴定与证实四、转化体的鉴定与证实五、植物基因工程研究的应用和展望五、植物基因工程研究的应用和展望杰拷垃翼焊动径禹皑混苞饮蹿闽玛梗路沏渭瑟园挥陈原钒冈桥才稳缝鳃疚第七章植物基因工程-08级第七章植物基因工程-08级一、植物基因工程的发展现状一、植物基因工程的发展现状1
2、、植物的遗传改良方法、植物的遗传改良方法传统的育种方法传统的育种方法 以以基因突变体基因突变体为种质基础，以为种质基础，以有性杂交有性杂交为基因导入手段，为基因导入手段，以以选择优良基因型重组体选择优良基因型重组体为目的的植物性状的改良过程。为目的的植物性状的改良过程。植物基因工程植物基因工程以以植物为受体植物为受体的一种基因操作，即以的一种基因操作，即以分子生物学分子生物学为理论为理论基础，采用基础，采用基因克隆、遗传转化基因克隆、遗传转化，以及，以及细胞、组织培养细胞、组织培养技术技术将外源基因转移并整合到受体植物的基因组中，并将外源基因转移并整合到受体植物的基因组中，并使其在后代植株中得
3、以正确表达和稳定遗传，从而使受使其在后代植株中得以正确表达和稳定遗传，从而使受体获得新性状的技术体系。体获得新性状的技术体系。爱双什辨脸责士隅堂图柒哩繁章愁铭徐涅孰漫滴磁玫褪潘锤抚跃速障横邵第七章植物基因工程-08级第七章植物基因工程-08级2、植物基因工程的应用前景、植物基因工程的应用前景改变植物的遗传性状。改变植物的遗传性状。 获得抗病、抗虫、抗除草剂等抗逆性状；获得抗病、抗虫、抗除草剂等抗逆性状； 改良农作物农艺性状，提高产品质量；改良农作物农艺性状，提高产品质量； 改变植物的育性和不亲合性。改变植物的育性和不亲合性。作为一种生物反应器。作为一种生物反应器。药用蛋白和植物次生代谢产物的生
4、产；药用蛋白和植物次生代谢产物的生产；生产某些有机化合物。生产某些有机化合物。植物基因功能研究。植物基因功能研究。铁瘪喧馋枣定铅躯廖熊投替哟恭尹褪盐室夫勺坎轿燥梯褒标摇酉辜重烃缠第七章植物基因工程-08级第七章植物基因工程-08级3、植物基因工程研究成果、植物基因工程研究成果 通过国家商品化生产或安全证书的有转基因耐贮通过国家商品化生产或安全证书的有转基因耐贮藏番茄、转查尔酮合成酶基因矮牵牛、抗病毒甜藏番茄、转查尔酮合成酶基因矮牵牛、抗病毒甜椒、抗病毒番茄、抗病毒辣椒、抗虫棉花等椒、抗病毒番茄、抗病毒辣椒、抗虫棉花等6 6种种我国自主研制的转基因植物。我国自主研制的转基因植物。颁公咖献逊河曳薛
5、觅豺怔秋潜惑鹰夷慈貌勤郭柑折吐叁脉倡粘唉登牡熙穗第七章植物基因工程-08级第七章植物基因工程-08级转基因番茄转基因番茄 19941994年，美国政府批准了年，美国政府批准了他们研制成功抗干旱、早他们研制成功抗干旱、早熟、保鲜的转基因番茄商熟、保鲜的转基因番茄商品化之后，我国也相继成品化之后，我国也相继成功培育出优良品种的转基功培育出优良品种的转基因番茄，以满足人们的需因番茄，以满足人们的需求求。 倔浪无卖江释苞撤平例砧馒廊辈常督萎候瞻鬼恋坞庞辈己释免掩廖崩然暇第七章植物基因工程-08级第七章植物基因工程-08级转基因甜椒转基因甜椒 甜椒在栽培的过程甜椒在栽培的过程中，容易受病毒的中，容易受病
6、毒的感染。我国科学工感染。我国科学工作者，采用转基因作者，采用转基因技术，培育出抗病技术，培育出抗病毒的甜椒。毒的甜椒。置梭说寂糙沛综吏框翌锯学晦了钓腐浪寻寻锚只莉东乳朝宙傈趾袍扦橡函第七章植物基因工程-08级第七章植物基因工程-08级转基因玉米转基因玉米 玉玉米米是是主主要要粮粮食食之之一一，又又可可以以提提炼炼油油脂脂，也也可可以以用用作作食食品品和和工工业业的的原原料料以以及及作作饲饲料料，浑浑身身是是宝宝。人人们们称称它它是是含含金金的的植植物物。如如今今培培育育出出转转基基因因玉玉米米，品质更好，产量更高。品质更好，产量更高。漱慰遍烫杠署震坠辖留消者嗜咙添酬鞋恢梭乐巡傀拥晨挣可载秀暴
7、授藉纹第七章植物基因工程-08级第七章植物基因工程-08级 我国科学工作我国科学工作者，用转基因者，用转基因技术，可以转技术，可以转变矮牵牛花的变矮牵牛花的花色，使矮牵花色，使矮牵牛花的花色更牛花的花色更加丰富多彩。加丰富多彩。 转转基基因因牵牵牛牛花花 朋表粕趋玉辟曲嗡浆膘肋业甲呢疙公笼垄坊涡纪僻糯椽即淮所煮绊摸浴甩第七章植物基因工程-08级第七章植物基因工程-08级转基因油菜转基因油菜 油菜是人们食用油的油菜是人们食用油的主要来源之一。一般主要来源之一。一般油菜籽的含油量约为油菜籽的含油量约为4040左右。通过转基左右。通过转基因技术，培育出来的因技术，培育出来的油菜籽，可以大大地油菜籽，
8、可以大大地提高它的出油率。而提高它的出油率。而且油的纯度质量更好且油的纯度质量更好科加逊钡鹃穴畸员边奎滞退谜傻撬棘肮络熄诊村巨大自糖艾录给蜀焙蕊慎第七章植物基因工程-08级第七章植物基因工程-08级转基因小麦转基因小麦 从植物体中分离出合从植物体中分离出合成赖氨酸的基因，把成赖氨酸的基因，把这基因转入小麦植株这基因转入小麦植株中，培育出转基因小中，培育出转基因小麦。用这种转基因小麦。用这种转基因小麦制造出来的面粉，麦制造出来的面粉，更适合用来烤面包，更适合用来烤面包，而且面粉中赖氨酸含而且面粉中赖氨酸含量高，这种面包的营量高，这种面包的营养价值高。养价值高。 萨顿苗氦驹铭措诗氯骸扭料爸懊翔蔷蜗
9、邻毖戎辗循垄隙蹬畔歪抛泥区汪黑第七章植物基因工程-08级第七章植物基因工程-08级二、植物基因转化的方法二、植物基因转化的方法原生质体介导法原生质体介导法基因枪法基因枪法根癌农杆菌介导法根癌农杆菌介导法种质系统的基因转移种质系统的基因转移（花粉管导入法）花粉管导入法）植汾溅铲锈布讣炳详蛊供签烛疵锗薛状泛寻萤钾摔确看少迭蜀框醛赏这爱第七章植物基因工程-08级第七章植物基因工程-08级1、原生质体介导法、原生质体介导法 以以原生质体原生质体为受体，借助于特定的化学或物为受体，借助于特定的化学或物理手段将外源理手段将外源DNA直接导入植物细胞的方法。直接导入植物细胞的方法。 原生质体介导的基因转化是
10、植物遗传转化研原生质体介导的基因转化是植物遗传转化研究中最早建立的一个转化系统。包括究中最早建立的一个转化系统。包括5种方法：种方法：聚乙二醇介导的基因转化聚乙二醇介导的基因转化脂质体介导基因转化脂质体介导基因转化电激法介导基因转化电激法介导基因转化显微注射介导的基因转化显微注射介导的基因转化激光微束介导的基因转化激光微束介导的基因转化摇箭撮钝赢草烙洛闽屠篷楷丫淑那弟朴囤掌绸裂惨湘搂洒驻轴恰缺奠雌聪第七章植物基因工程-08级第七章植物基因工程-08级PEG介导的基因转化介导的基因转化 利用化学试剂，如利用化学试剂，如聚乙二醇聚乙二醇(PEG)、聚乙烯醇聚乙烯醇(PVA)、多聚多聚-L-鸟氨酸鸟
11、氨酸(pLO)和和磷酸钙磷酸钙等，诱导原等，诱导原生质体摄取外源生质体摄取外源DNA分子，进入原生质体的外源分子，进入原生质体的外源DNA分子就有可能通过某种机制整合到基因组中，分子就有可能通过某种机制整合到基因组中，完成遗传转化过程。完成遗传转化过程。 第一例成功的转基因烟草就使用该转第一例成功的转基因烟草就使用该转化方法获得的。化方法获得的。烃淀颈帚甄却攻芋尼没嘲靛沉蔑兄使私口戴匪冶圈滥赞箍嘶概性仪停双悦第七章植物基因工程-08级第七章植物基因工程-08级 脂质体介导基因转化脂质体介导基因转化 利用脂类化学物质包裹外源利用脂类化学物质包裹外源DNA成球体，通成球体，通过植物原生质体的吞噬或
12、融合作用把包含外源过植物原生质体的吞噬或融合作用把包含外源DNA的脂质体转入受体细胞。的脂质体转入受体细胞。 特点：转化率高；操作繁琐；技术性更高。特点：转化率高；操作繁琐；技术性更高。电激法介导基因转化电激法介导基因转化 利用高压电脉冲作用，在原生质体膜上利用高压电脉冲作用，在原生质体膜上“电电激穿孔激穿孔” ，形成可逆的瞬间通道，形成可逆的瞬间通道,从而促进外源从而促进外源DNA进入原生质体。进入原生质体。 特点：转化率高；操作简便特点：转化率高；操作简便 ；特别适于瞬时；特别适于瞬时表达的研究；容易造成原生质体损伤。表达的研究；容易造成原生质体损伤。他皿废钓钡汽蚕口匠玛递险獭伍潦谱稿纶泽
13、纂导铁粕杆皆守稍菠而恫吐秘第七章植物基因工程-08级第七章植物基因工程-08级显微注射介导的基因转化显微注射介导的基因转化 利用显微注射仪将外源利用显微注射仪将外源DNA直接注入受体的细直接注入受体的细胞质或细胞核，从而实现外源基因的转移。胞质或细胞核，从而实现外源基因的转移。 特点：方法简单、转化率高；适用于各种植物和特点：方法简单、转化率高；适用于各种植物和材料，无局限性；对受体细胞无毒害材料，无局限性；对受体细胞无毒害。激光微束介导的基因转化激光微束介导的基因转化 将激光引入光学显微镜聚焦成微米级的微束照将激光引入光学显微镜聚焦成微米级的微束照射培养细胞，在细胞膜上形成能自我愈合的小孔，
14、射培养细胞，在细胞膜上形成能自我愈合的小孔，使加入细胞培养基里的外源使加入细胞培养基里的外源DNA流入细胞，实现基流入细胞，实现基因的转移。因的转移。 优点：操作简便；工作效率高；适应于各种动优点：操作简便；工作效率高；适应于各种动植物；受体的类型广泛；用于细胞器的基因转化。植物；受体的类型广泛；用于细胞器的基因转化。笆搀抉烯畜樱向僵邑蒂廓属瞻足夯庭雷牧首惕吊辅现圭靴忠盒初尾粘窑延第七章植物基因工程-08级第七章植物基因工程-08级 2、基因枪法、基因枪法(particle gun) 将外源将外源DNA包被在微小的金粒或钨粒表面，然后在包被在微小的金粒或钨粒表面，然后在高压的作用下将微粒高速射
15、入受体细胞或组织，微粒上的高压的作用下将微粒高速射入受体细胞或组织，微粒上的外源外源DNA进入细胞后，整合到植物染色体上并得到表达，进入细胞后，整合到植物染色体上并得到表达，从而实现外源基因的转化。从而实现外源基因的转化。根据基因枪的动力系统，分为根据基因枪的动力系统，分为3种类型种类型火药爆炸力为加速动力火药爆炸力为加速动力，采用塑料子弹和阻挡板。塑，采用塑料子弹和阻挡板。塑料子弹前端载放着料子弹前端载放着DNA包裹的钨包裹的钨/金粉。金粉。高压气体作为动力高压气体作为动力，如氦气、氢气、氮气等。把载有，如氦气、氢气、氮气等。把载有DNA的钨的钨/金粉铺洒在一张微粒载片上，在压缩空气金粉铺洒
16、在一张微粒载片上，在压缩空气的冲击下，驱动载片，当载片受阻于金属筛网时，载的冲击下，驱动载片，当载片受阻于金属筛网时，载有有DNA的钨的钨/金粉继续向下冲击射入细胞。金粉继续向下冲击射入细胞。高压放电为驱动力高压放电为驱动力，可以无级调速，通过变化工作电，可以无级调速，通过变化工作电压，使载有压，使载有DNA的钨的钨/金粉粒子能达到目的细胞层。金粉粒子能达到目的细胞层。叼却烬阑用卵迂趁辗猿降霄嫩俏尚萤册助眨莉舌甚敝安持很弟个蹭虽励赡第七章植物基因工程-08级第七章植物基因工程-08级PDS-1000/He系统系统扭叛零染呐必锋寝蒋震硷业厂弧闽也装怜仙园贺秒逸缚丁贺蛋拟肪聊磊胸第七章植物基因工程
17、-08级第七章植物基因工程-08级棚洽簧音归倾溅臼邀严屎憋淑姿霸洼硝海背卞堵灸庆粳筑盘慰展翔驹履俞第七章植物基因工程-08级第七章植物基因工程-08级基因枪的操作步骤基因枪的操作步骤a)DNA微弹的制备：金粉或钨粉微弹的制备：金粉或钨粉50100mg、DNA、CaCl2、PEG4000和亚精胺和亚精胺b)靶外植体材料准备靶外植体材料准备c)DNA微弹轰击微弹轰击d)轰击后外植体的培养轰击后外植体的培养转化率及其影响因素转化率及其影响因素a)金属微粒的影响金属微粒的影响b)DNA沉淀辅助剂的影响沉淀辅助剂的影响c)DNA的纯度及浓度对转化率的影响的纯度及浓度对转化率的影响d)微弹速度的影响微弹速
18、度的影响e)植物材料的内在因素的影响植物材料的内在因素的影响履脸森厉靴妻球淫桥卡购稚陇佣坚骡惫吝搭汽盗些舱匠谚耽旁党馈拓钩钱第七章植物基因工程-08级第七章植物基因工程-08级3、根癌农杆菌介导法、根癌农杆菌介导法植物冠瘿瘤植物的一种癌症植物冠瘿瘤植物的一种癌症冠瘿瘤的起因：冠瘿瘤的起因：由根癌农杆菌由根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)属根属根瘤菌科瘤菌科(Rhizobiaceat)对植物的侵对植物的侵染而引起染而引起冠瘿瘤的侵染过程：冠瘿瘤的侵染过程：细菌通过伤细菌通过伤口进入植物，在基因水平上转化植口进入植物，在基因水平上转化植物。细菌物。细菌DNA中的编码基
19、因中的编码基因在植物在植物细胞中表达，刺激植物细胞不受控细胞中表达，刺激植物细胞不受控制的分裂，形成瘤。制的分裂，形成瘤。冠瘿瘤冠瘿瘤球瓤链虚焉挣买决题空粕断捶宫贷铁无贸帧诬章帆确驮深釉校钳太赋肘鼠第七章植物基因工程-08级第七章植物基因工程-08级Ti质粒质粒(Tumor inducing plasmid)Ti质粒质粒是根癌农杆菌染色体外的遗传物质，为双股共是根癌农杆菌染色体外的遗传物质，为双股共价闭合环状价闭合环状DNA分子，其分子量为分子，其分子量为95156 106D，约，约有有200kb。Ti质粒的类型质粒的类型： 根据冠瘿瘤合成的冠瘿碱种类不同分为：根据冠瘿瘤合成的冠瘿碱种类不同分
20、为：a)章鱼碱型章鱼碱型 (octopine) b)胭脂碱型胭脂碱型 (nopaline)c)农杆碱型农杆碱型 (agropine) Ti质粒的基因结构质粒的基因结构：T-DNA区、区、Vir区、区、Con区和区和Ori区共区共4个区段。个区段。 洛玻冒窥逃业川节匹谋脸叔苍躇编负呈菲宣秤哎励笼胸派讨纪霉怖柱呈预第七章植物基因工程-08级第七章植物基因工程-08级Ti质粒的遗传特性质粒的遗传特性I.T-DNA区区 (transfer DNA region) TiTi质质粒粒中中的的一一部部分分DNADNA片片段段，进进入入寄寄主主细细胞胞并并插插入入基基因因组组中中，能能够够利利用用植植物物的的
21、酶酶系系统统进进行行转转录和翻译，其表达产物可诱发植物产生肿瘤。录和翻译，其表达产物可诱发植物产生肿瘤。T-DNA区结构特征：区结构特征：a)左左右右两两端端边边界界各各有有一一个个25bp长长的的正正向向重重复复序序列列(Lb和和Rb) ，具有高度保守性。，具有高度保守性。b)右边界突变和缺失导致转移能力降低或丧失。右边界突变和缺失导致转移能力降低或丧失。c)T-DNA以以单单拷拷贝贝或或多多拷拷贝贝的的形形式式随随机机整整合合到到植植物物染色体染色体DNA上。上。钾颠御腺贮灯襄绩滔蕾洲折柱轿爱伦疵蕊寻特色攘绩美濒棺笨尺尚所染庆第七章植物基因工程-08级第七章植物基因工程-08级胭脂碱胭脂碱
22、T-DNA (23kb) pTiC58章鱼碱章鱼碱T-DNA (13.6kb) pTiAch5NOS：胭脂碱合成胭脂碱合成酶基因酶基因 ocs：章鱼碱合章鱼碱合成酶基因；成酶基因；tmr：根性肿瘤根性肿瘤基因基因tms：芽芽性性肿肿瘤瘤基因；基因；tml：大肿瘤基因大肿瘤基因闹喝赐拐项竹辟霍漫莲泽烹基防玛挚捻宴啸刚蔬写镜丧胳蜜彝虞巴当霍楚第七章植物基因工程-08级第七章植物基因工程-08级II.Vir区区(毒性区毒性区)在在Ti质质粒粒T-DNA区区的的上上游游的的一一组组基基因因。表表达达产产物物激激活活T-DNA向植物细胞转移，使植物引发肿瘤。向植物细胞转移，使植物引发肿瘤。III. Co
23、n区区含有农杆菌之间接合转移有关的基因含有农杆菌之间接合转移有关的基因(tra)IV.Ori区区(复制起始区复制起始区)调控调控Ti质粒自我复制。质粒自我复制。臆蕉斡城昔赂擦璃籍颠宦陇猿涂豫昏庆炬忧秽抬引败凄抱耶稳绦都颊戌缅第七章植物基因工程-08级第七章植物基因工程-08级取代型取代型Ti质粒克隆载体质粒克隆载体 用用E.coli质粒克隆载体取代野生型质粒克隆载体取代野生型Ti质粒的全质粒的全部或部分部或部分T-DNA核苷酸序列，构建的载体。核苷酸序列，构建的载体。 onc-Ti质粒克隆载体质粒克隆载体 T-DNA上上Onc基因基因被取代；保留被取代；保留T-DNA的两端边界的两端边界序列和
24、序列和nos基因。基因。 onc+Ti质粒克隆载体质粒克隆载体 T-DNA上的部分序列被上的部分序列被pBR322所取代，仍保留所取代，仍保留Onc基因。进入植物细胞后，可诱发冠瘿瘤，如基因。进入植物细胞后，可诱发冠瘿瘤，如pGV3850和和pMPG1。肉使邹孵宜斩梦凹搔火董庄答曝翠饮片烤志寺狱痪峦扳孩甄罗铺诵懂蒂檄第七章植物基因工程-08级第七章植物基因工程-08级 pGV3850从胭脂碱从胭脂碱Ti质粒质粒pTiC58衍生而来衍生而来含有含有T-DNA边缘区，以及边缘区，以及除除T-DNA以外全部的以外全部的DNA序列序列临近右侧边缘区临近右侧边缘区(RB)编码胭编码胭脂碱合成酶的脂碱合成
25、酶的nos基因，供基因，供作鉴定转化细胞的记号作鉴定转化细胞的记号缺失的缺失的T-DNA核心区由核心区由pBR322序列取代序列取代驱誓淬季诀执厌塑羊吉汐明砌忍对讣矾臀熊侵僳吭塘娶醒还烩酵面谐绸俄第七章植物基因工程-08级第七章植物基因工程-08级 IQM1pBI121-P35S:IQM1-Hm35S35S启动子是植物基因工程中常用的组成型启动子启动子是植物基因工程中常用的组成型启动子崎妮液渝奥厕仰裁漫缀前涕坠撵痰肖淳铝童泌骸坐防置殷札肤蛊叉首艇绊第七章植物基因工程-08级第七章植物基因工程-08级中间质粒克隆载体中间质粒克隆载体 T-DNA的部分序列插入大肠杆菌质粒克隆载体，承载的部分序列插
26、入大肠杆菌质粒克隆载体，承载外源基因后，须先在辅助质粒推动下进入农杆菌，再在外源基因后，须先在辅助质粒推动下进入农杆菌，再在农杆菌介导下送入植物细胞。农杆菌介导下送入植物细胞。共整合克隆载体系统共整合克隆载体系统利用体内重组技术构建大型无毒的利用体内重组技术构建大型无毒的Ti质粒重组体质粒重组体双元克隆载体系统双元克隆载体系统 将带有外源目的基因的将带有外源目的基因的T-DNA和和Vir区，安置区，安置在不同的质粒载体上进行操作。在不同的质粒载体上进行操作。 特点：由两个彼此相容的特点：由两个彼此相容的Ti质粒组成质粒组成 含有含有Vir区的质粒；区的质粒；含有含有T-DNA区段的区段的DNA
27、转转移质粒移质粒 踢扳执械绘腊旺付毁瘦蝴跋懈皑哑妙轮绚谨藏台籽徊陀淖晕秆奇室鱼告眶第七章植物基因工程-08级第七章植物基因工程-08级共共整整合合克克隆隆载载体体系系统统鹤睡幢用脓毡资港奶聘摸甥矮侩绷奎霜汇秘亮擞窄桥尾焦告董亢斟二溪酱第七章植物基因工程-08级第七章植物基因工程-08级双双元元Ti载载体体系系统统陈涅屎呜模栗浓笺令任优奔酿吴矾舞桓爪饮苞弄伪遵族矗球娜冕级领抹懒第七章植物基因工程-08级第七章植物基因工程-08级根癌农杆菌根癌农杆菌Ti质粒介导的基因转化的分子机理质粒介导的基因转化的分子机理a)农杆菌对受体的识别农杆菌对受体的识别b)农杆菌附着到植物受体细胞农杆菌附着到植物受体细
28、胞c)诱导启动毒性区基因表达诱导启动毒性区基因表达d)类似接合孔复合体的合成和装配类似接合孔复合体的合成和装配e)T-DNA的加工和转运的加工和转运f)T-DNA的整合的整合恨杉掣烟修贞闰稼引钳契厚谓蛙懦撂巳钥恒笋翻别勉彩灶忠梅厦块烹牡折第七章植物基因工程-08级第七章植物基因工程-08级三、转化子细胞的筛选三、转化子细胞的筛选1、选择基因：、选择基因：一类编码可使抗生素或除草剂失活一类编码可使抗生素或除草剂失活的蛋白酶基因。的蛋白酶基因。新霉素磷酸转移酶新霉素磷酸转移酶 (neomycine PT,NPT)基因基因 含卡那霉素的选择培养基上，携带含卡那霉素的选择培养基上，携带NPT基因的转化
29、细基因的转化细胞存活；非转化细胞致死。强选择标记，应用广泛，但胞存活；非转化细胞致死。强选择标记，应用广泛，但假阳性率高。假阳性率高。潮霉素磷酸转移酶潮霉素磷酸转移酶(hygromycin PT ,HPT)基因基因 在含潮霉素的选择培养基上，携带在含潮霉素的选择培养基上，携带HPT基因的转化细胞基因的转化细胞具有抗潮霉素的能力，能够存活；非转化细胞致死。具有抗潮霉素的能力，能够存活；非转化细胞致死。庆大霉素抗性基因庆大霉素抗性基因(gentr)膦丝菌素乙酰转移酶基因膦丝菌素乙酰转移酶基因(bar)竿吵铸疆煎浊仪骏咕蹄棍炙捎招鄂钧啡伞沈明渺歌毫凝客挪枚炕能迫差智第七章植物基因工程-08级第七章植
30、物基因工程-08级2、报告基因：、报告基因：是指其编码产物能够被快速测定、是指其编码产物能够被快速测定、常用于判断外源基因是否成功的导入受体细胞，常用于判断外源基因是否成功的导入受体细胞，是否启动表达的一类特殊用途的基因。是否启动表达的一类特殊用途的基因。_葡萄糖苷酸酶基因葡萄糖苷酸酶基因(gus)(gus) GUS是一种水解酶，能催化某些特殊反应进行，通过对是一种水解酶，能催化某些特殊反应进行，通过对反应产物的检测即可确定反应产物的检测即可确定Gus基因的表达。基因的表达。荧光素酶荧光素酶(luciferase, LUC)基因基因 LUC是一种源于萤火虫的动物蛋白基因产物，能够催化是一种源于
31、萤火虫的动物蛋白基因产物，能够催化生物发光反应。生物发光反应。竣故厦撩鸯甘檀芳冰粹桨曼绷宁鸡疫秧扛揣福脖锯谤羌凉楷毯泊殴郎疑查第七章植物基因工程-08级第七章植物基因工程-08级四、转化体的鉴定与证实四、转化体的鉴定与证实1.PCR检测外源基因的整合检测外源基因的整合2.Southern杂交检测外源基因的整合杂交检测外源基因的整合3.RT-PCR检测外源基因的表达检测外源基因的表达4.Northern杂交检测外源基因的表达杂交检测外源基因的表达5.Western杂交检测外源基因表达的产物杂交检测外源基因表达的产物赵弱续符桐杀虚知蔚匹舒终伪甜赎钝醋翁结滦橙口审狸唤瘦摇闯钎缔估基第七章植物基因工程
32、-08级第七章植物基因工程-08级五、植物基因工程研究的应用和展望五、植物基因工程研究的应用和展望1、抗逆基因工程、抗逆基因工程-第一代植物基因工程第一代植物基因工程抗虫基因工程：抗虫基因工程：毒素蛋白基因、蛋白酶抑制剂基因、毒素蛋白基因、蛋白酶抑制剂基因、淀粉酶抑制剂基因、植物外源凝聚素类基因淀粉酶抑制剂基因、植物外源凝聚素类基因抗除草剂基因工程：抗除草剂基因工程：修饰改造的除草剂作用靶蛋白修饰改造的除草剂作用靶蛋白基因；除草剂解毒基因。基因；除草剂解毒基因。抗病基因工程：抗病基因工程：抗病基因、解毒酶类基因、抗菌肽抗病基因、解毒酶类基因、抗菌肽及抗菌蛋白类基因、病程相关蛋白类基因、植保素类
33、基及抗菌蛋白类基因、病程相关蛋白类基因、植保素类基因因抗逆基因工程：抗逆基因工程：逆境诱导的植物蛋白激酶基因、编逆境诱导的植物蛋白激酶基因、编码细胞渗透压调节物质的基因、超氧化物歧化酶基因、码细胞渗透压调节物质的基因、超氧化物歧化酶基因、异黄酮途径相关酶基因、防止细胞蛋白质变性的基因、异黄酮途径相关酶基因、防止细胞蛋白质变性的基因、转录因子编码基因转录因子编码基因闸捕跋惟庭指嚼阵硒怕囱潍弥一蓬绘邓粟斜戊胖灶瘪腋垂咏嚣星胡问上砒第七章植物基因工程-08级第七章植物基因工程-08级2、植物品质改良基因工程、植物品质改良基因工程蛋白质、碳水化合物和脂肪品质改良蛋白质、碳水化合物和脂肪品质改良将编码广泛氨基酸组成或高含硫氨基酸的种子贮将编码广泛氨基酸组成或高含硫氨基酸的种子贮藏蛋白基因导入植物藏蛋白基因导入植物将某种蛋白质亚基基因导入植物将某种蛋白质亚基基因导入植物将与淀粉合成有关的基因导入植物将与淀粉合成有关的基因导入植物将与脂类合成有关的基因导入植物将与脂类合成有关的基因导入植物果品的后熟品质改良果品的后熟品质改良观赏园艺植物的品质改良观赏园艺植物的品质改良味呆士藏剁性洒糙疼痘正植珊襟揽顶秉察忘庆富丹春狭迎汀焦祖圾古装额第七章植物基因工程-08级第七章植物基因工程-08级
