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1、1/chapter第三篇 细菌学各论第二篇 细菌学各论 畜牧兽医学院 冯新2/chapter第三篇 细菌学各论u 第第七七章章 革兰氏阳性球菌革兰氏阳性球菌第一节第一节第一节第一节 葡萄球菌属葡萄球菌属葡萄球菌属葡萄球菌属第二节第二节第二节第二节 链球菌属链球菌属链球菌属链球菌属第三节第三节第三节第三节 肠球菌属肠球菌属肠球菌属肠球菌属3/chapter第三篇 细菌学各论u 第一节第一节 葡萄球菌属葡萄球菌属(StaphylococcusStaphylococcus)圆形、直径圆形、直径0.51.5m 、排列成葡萄串状。用青霉排列成葡萄串状。用青霉素可诱导成素可诱导成L型。无芽孢,型。无芽孢,
2、无鞭毛,有的形成荚膜或无鞭毛,有的形成荚膜或黏液层。革兰氏阳性,需黏液层。革兰氏阳性,需氧或兼性厌氧,无运动力。氧或兼性厌氧,无运动力。 一般特征一般特征金黄色葡萄球菌普通金黄色葡萄球菌普通培养基上菌落形态培养基上菌落形态4/chapter第三篇 细菌学各论 Staphylococcus Staphylococcus aureusaureus金葡菌显微照片金葡菌显微照片金葡菌扫描电镜照片金葡菌透射电镜照片5/chapter第三篇 细菌学各论 过去按产生的色素分为过去按产生的色素分为3 3种:金黄色种:金黄色葡萄球菌葡萄球菌、白色白色葡萄球菌葡萄球菌、柠檬色、柠檬色葡萄球菌葡萄球菌。 19741
3、974年分为年分为3 3种种 :金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球:金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌。菌、腐生葡萄球菌。 伯吉氏系统细菌学手册伯吉氏系统细菌学手册19861986年将葡萄球菌属年将葡萄球菌属分为分为2020多种多种 ;详见详见page83page83表表7-17-1。 二、分类二、分类6/chapter第三篇 细菌学各论7/chapter第三篇 细菌学各论金黄色葡萄球菌(金黄色葡萄球菌(Staphylococcus Staphylococcus aureusaureus)1. 培养及生化特性培养及生化特性 在普通琼脂平板形成湿润、光滑、在普通琼脂平板形成湿润、光滑、隆起的圆形
4、菌落,直径隆起的圆形菌落,直径1-2mm,有时可达,有时可达4-5mm。菌落。菌落颜色依菌株而异,初呈灰白色,继而为金黄色。在血液颜色依菌株而异,初呈灰白色,继而为金黄色。在血液琼脂平板形成的菌落较大,产溶血素的菌株多为病原菌,琼脂平板形成的菌落较大,产溶血素的菌株多为病原菌,在菌落周围呈现明显的在菌落周围呈现明显的溶血。溶血。常见的致病菌多为金黄色葡萄球菌。常见的致病菌多为金黄色葡萄球菌。金黄色葡萄球的金黄色葡萄球的溶血溶血8/chapter第三篇 细菌学各论2.抗原及变异抗原及变异 葡萄球菌细胞壁上的抗原构造比较复杂,葡萄球菌细胞壁上的抗原构造比较复杂,含有多糖及蛋白质两类抗原。含有多糖及
5、蛋白质两类抗原。多糖抗原多糖抗原 具有型特异性。具有型特异性。蛋白抗原蛋白抗原 人源菌株都含有人源菌株都含有葡萄球菌蛋白葡萄球菌蛋白A(SPA),来自,来自动物源菌株则少见。动物源菌株则少见。SPA能与人、猴能与人、猴 猪、犬及几乎所有哺乳动物的免疫球猪、犬及几乎所有哺乳动物的免疫球蛋白的蛋白的Fc端结合,结合后的端结合,结合后的IgG仍能与相应抗原特异性仍能与相应抗原特异性反应。用于免疫学及诊断技术(协同凝集试验)。反应。用于免疫学及诊断技术(协同凝集试验)。SPA与与IgG结合形成的复合物在机体内具有生物学作用(趋结合形成的复合物在机体内具有生物学作用(趋化性、抵抗吞噬、损伤血小板等)。化
6、性、抵抗吞噬、损伤血小板等)。9/chapter第三篇 细菌学各论3.抵抗力及药物敏感性抵抗力及药物敏感性 在无芽孢菌中,葡萄球菌的在无芽孢菌中,葡萄球菌的抵抗力较强。在干燥的脓汁或血液中可存活抵抗力较强。在干燥的脓汁或血液中可存活2-3个月,个月,8030min才能杀死。对龙胆紫、洗必泰、消毒净、才能杀死。对龙胆紫、洗必泰、消毒净、新洁尔灭、度米芬等敏感。对磺胺类、青霉素、金霉新洁尔灭、度米芬等敏感。对磺胺类、青霉素、金霉素、红霉素、新霉素等抗生素敏感,但易产生耐药性。素、红霉素、新霉素等抗生素敏感,但易产生耐药性。 4.致病性及毒力因子致病性及毒力因子 金色葡萄球菌可产生多种毒素金色葡萄球
7、菌可产生多种毒素和酶,故致病性强。常引起化脓性疾病(创伤感染、和酶,故致病性强。常引起化脓性疾病(创伤感染、脓肿、乳腺炎、败血症、脓毒败血症等)及毒素性疾脓肿、乳腺炎、败血症、脓毒败血症等)及毒素性疾病(被葡萄球菌污染的食物或饲料可引起人或动物的病(被葡萄球菌污染的食物或饲料可引起人或动物的食物中毒性疾病)食物中毒性疾病) 。10/chapter第三篇 细菌学各论毒力因子毒力因子:葡萄球菌蛋白:葡萄球菌蛋白A、荚膜、毒素及酶。、荚膜、毒素及酶。 毒素毒素 溶血素,与牛羊的坏疽性乳腺炎有关,溶血素,与牛羊的坏疽性乳腺炎有关,它还导致白细胞等崩解。它还导致白细胞等崩解。毒素是不耐热的蛋白质,毒素是
8、不耐热的蛋白质,对多种哺乳动物红细胞有溶血作用,而从动物分离的对多种哺乳动物红细胞有溶血作用,而从动物分离的菌株常见菌株常见溶血素。溶血素。 肠毒素肠毒素 引致人类食物中毒,引致人类食物中毒,表现呕吐、腹泻。耐热抗酸,表现呕吐、腹泻。耐热抗酸,能经受能经受10030min或或胃蛋白酶的水解。胃蛋白酶的水解。11/chapter第三篇 细菌学各论凝固酶凝固酶 能使含有抗凝剂的家兔或人的血浆凝固,能使含有抗凝剂的家兔或人的血浆凝固,称为凝固酶。凝固酶耐热,经称为凝固酶。凝固酶耐热,经10030min或高压灭或高压灭菌仅降低少量活性。菌仅降低少量活性。 凝固酶有助致病菌株抵御宿主体内吞噬细胞和杀凝固
9、酶有助致病菌株抵御宿主体内吞噬细胞和杀菌物质的作用,同时也使感染局限化。检测葡萄球菌物质的作用,同时也使感染局限化。检测葡萄球菌的凝固酶是鉴别菌株的重要指标,致病株多数为菌的凝固酶是鉴别菌株的重要指标,致病株多数为凝固酶阳性。凝固酶阳性。12/chapter第三篇 细菌学各论耐热核酸酶耐热核酸酶 100作用作用15min不失去活性,由致不失去活性,由致病株产生。此酶能迅速分病株产生。此酶能迅速分解核酸,利于病菌扩散。解核酸,利于病菌扩散。目前将该酶的检测作为鉴目前将该酶的检测作为鉴定致病菌株的重要指标值定致病菌株的重要指标值之一。之一。此外,还可产生溶纤维蛋此外,还可产生溶纤维蛋白酶、透明质酸
10、酶,又称白酶、透明质酸酶,又称为扩散因子。为扩散因子。金黄色葡萄球的耐热核酸酶试验金黄色葡萄球的耐热核酸酶试验13/chapter第三篇 细菌学各论5.微生物学诊断微生物学诊断(1)涂片染色镜检)涂片染色镜检 取脓汁、渗出液、乳汁、血液,取脓汁、渗出液、乳汁、血液,中毒症取剩余食物等。将病料涂片染色镜检。中毒症取剩余食物等。将病料涂片染色镜检。(2)分离培养鉴定)分离培养鉴定 将病料划线接种于将病料划线接种于5绵羊或绵羊或兔血液琼脂平板,兔血液琼脂平板,37 培养培养18-24h,菌落金黄色,菌落金黄色,周围呈溶血圈者多为致病菌株。进一步鉴定还要做周围呈溶血圈者多为致病菌株。进一步鉴定还要做凝
11、固酶试验、分解甘露醇试验,阳性者多为致病菌。凝固酶试验、分解甘露醇试验,阳性者多为致病菌。必要时可做动物试验。必要时可做动物试验。 14/chapter第三篇 细菌学各论15/chapter第三篇 细菌学各论u 第二节第二节 链球菌属链球菌属 (Streptococcus) 链球菌种类多、分布广。有些可致人或动物的各种化脓链球菌种类多、分布广。有些可致人或动物的各种化脓性疾病、肺炎、乳腺炎、败血症等。性疾病、肺炎、乳腺炎、败血症等。一、分类一、分类 按溶血性分为按溶血性分为、 3类。类。型溶血链球菌型溶血链球菌 在菌落周围形成不透明的草绿色溶血环,在菌落周围形成不透明的草绿色溶血环,红细胞未完
12、全溶解,血红蛋白变成绿色。此菌致病力不强,红细胞未完全溶解,血红蛋白变成绿色。此菌致病力不强,多为机会致病菌。多为机会致病菌。型溶血链球菌型溶血链球菌 菌落周围形成完全透明的溶血环,红细胞菌落周围形成完全透明的溶血环,红细胞完全溶解。这类菌致病力强,常引起人及动物各种疾病。完全溶解。这类菌致病力强,常引起人及动物各种疾病。型溶血链球菌型溶血链球菌 菌落周围无溶血现象。一般为非致病菌。菌落周围无溶血现象。一般为非致病菌。16/chapter第三篇 细菌学各论17/chapter第三篇 细菌学各论二、形态与染色二、形态与染色 链球菌呈圆形或卵圆形,直径小于链球菌呈圆形或卵圆形,直径小于2.0um,
13、常排列成链状或成双。肉汤内生长的链球菌常,常排列成链状或成双。肉汤内生长的链球菌常呈长链排列,革兰氏阳性,多有荚膜。呈长链排列,革兰氏阳性,多有荚膜。三、培养及生化特性三、培养及生化特性 多为兼性厌氧菌。致病菌营养要求较高,普通培养基中多为兼性厌氧菌。致病菌营养要求较高,普通培养基中生长不良,需添加血液、血清、葡萄糖等。在血液琼脂生长不良,需添加血液、血清、葡萄糖等。在血液琼脂平板上长成直径平板上长成直径0.1-1.0mm,灰白色,表面光滑,边缘,灰白色,表面光滑,边缘整齐的小菌落。多数致病菌株有溶血性。整齐的小菌落。多数致病菌株有溶血性。 18/chapter第三篇 细菌学各论19/chap
14、ter第三篇 细菌学各论化脓性链球菌普通化脓性链球菌普通培养基上菌落形态培养基上菌落形态链球菌酸乳酪培养基上形态链球菌酸乳酪培养基上形态20/chapter第三篇 细菌学各论四、致病性四、致病性 致病性链球菌可产生多种毒素或酶,可致病性链球菌可产生多种毒素或酶,可致人及多种动物的很多疾病,化脓感染、肺炎、乳房致人及多种动物的很多疾病,化脓感染、肺炎、乳房炎等。炎等。溶血素溶血素 分为对氧敏感溶血素分为对氧敏感溶血素O(SLO)和对氧稳定溶和对氧稳定溶血素血素S(SLS)两种,称溶血性。两种,称溶血性。致热外毒素致热外毒素 旧名红疹毒素,主要由旧名红疹毒素,主要由A群链球菌产生,群链球菌产生,致
15、人猩红热,小剂量皮内注射家兔可引起局部红疹,致人猩红热,小剂量皮内注射家兔可引起局部红疹,大剂量注射可致全身红疹。大剂量注射可致全身红疹。其他其他 不同致病菌株,可产生链激酶(溶纤维蛋白不同致病菌株,可产生链激酶(溶纤维蛋白酶),透明质酸酶等,其性质作用类葡萄球菌酶),透明质酸酶等,其性质作用类葡萄球菌 。21/chapter第三篇 细菌学各论 细胞壁脂磷壁酸细胞壁脂磷壁酸(LFA)与菌体吸附于宿主黏膜有关。与菌体吸附于宿主黏膜有关。其荚膜成分、其荚膜成分、M蛋白等具有抗吞噬作用。蛋白等具有抗吞噬作用。五、抵抗力五、抵抗力 本属细菌的抵抗力不强。对青霉素、磺本属细菌的抵抗力不强。对青霉素、磺胺
16、类药物敏感,易产生耐药性。胺类药物敏感,易产生耐药性。六、免疫性六、免疫性 链球菌的抗原结构比较复杂,机体感染链球菌的抗原结构比较复杂,机体感染后有多种抗体产生,已知抗后有多种抗体产生,已知抗M蛋白的抗体具有保护作蛋白的抗体具有保护作用,用,M蛋白有多种抗原型,各型间缺乏有效的交叉保蛋白有多种抗原型,各型间缺乏有效的交叉保护。我国研制的猪、羊链球菌疫苗有较好的免疫效果。护。我国研制的猪、羊链球菌疫苗有较好的免疫效果。 22/chapter第三篇 细菌学各论七、微生物学诊断七、微生物学诊断 病料(脓汁、乳汁、血液、组织)涂片染色镜检,见病料(脓汁、乳汁、血液、组织)涂片染色镜检,见革兰氏阳性、具
17、荚膜、成对或链状排列的球菌,可作革兰氏阳性、具荚膜、成对或链状排列的球菌,可作初步诊断。初步诊断。 确诊需用血液琼脂平板分离培养,观察菌落、溶血等确诊需用血液琼脂平板分离培养,观察菌落、溶血等特征,并进行生理生化试验。用群、型特异性血清作特征,并进行生理生化试验。用群、型特异性血清作血清学试验,对病原菌定群或定型。血清学试验,对病原菌定群或定型。八、主要致病菌八、主要致病菌 马链球菌兽疫亚种马链球菌兽疫亚种 无乳链球菌、停乳链球菌、乳房链球菌无乳链球菌、停乳链球菌、乳房链球菌 化脓链球菌、肺炎链球菌、猪链球菌化脓链球菌、肺炎链球菌、猪链球菌23/chapter第三篇 细菌学各论24/chapt
18、er第三篇 细菌学各论猪链球菌:猪链球菌:是猪链球菌病的重要致病菌,并可感是猪链球菌病的重要致病菌,并可感染人而致死。染人而致死。(一一)病原病原1.链球菌共有链球菌共有20个群个群(从从A-V),数百,数百个血清型,主要感染人类的是个血清型,主要感染人类的是A.B群群和肺炎链球菌;主要感染猪的有和肺炎链球菌;主要感染猪的有D.L.R.S.T.U.V群群2. 猪溶血性链球菌猪溶血性链球菌2型型(Swine streptoo_cosis)3.链球菌为链球菌为G+球菌成对、短链状排列球菌成对、短链状排列25/chapter第三篇 细菌学各论( (二二) )传播途径传播途径1.1.主要经过破损皮肤传
19、播主要经过破损皮肤传播: :屠宰、加工、饲养、贩运屠宰、加工、饲养、贩运感染感染/ /病病/ /死猪过程中死猪过程中, ,通过破损皮肤接触通过破损皮肤接触, ,感染猪感染猪2 2型型链球菌。炎夏、潮湿链球菌。炎夏、潮湿, ,皮肤多有裸露皮肤多有裸露, ,时有搔挠时有搔挠, ,造成造成皮肤抓痕皮肤抓痕, ,接触病猪后感染。接触病猪后感染。2.2.消化道辅助消化道辅助: : 食入没有煮烂熟透的病死猪肉感染。食入没有煮烂熟透的病死猪肉感染。( (三三) )潜伏期潜伏期 从皮肤破损接触或食入病肉起到发病从皮肤破损接触或食入病肉起到发病1.1.最短数小时最短数小时2.2.最长最长7 7天天3.3.平均平
20、均2-32-3天天26/chapter第三篇 细菌学各论( (四四) )临床表现临床表现1.1.普通型表现普通型表现: :急起高热、畏寒、头痛、头昏、腹痛、急起高热、畏寒、头痛、头昏、腹痛、 腹泻、乏力、不适。腹泻、乏力、不适。2.2.可致猪脑膜炎、关节炎、心内膜炎、多发性浆膜炎、可致猪脑膜炎、关节炎、心内膜炎、多发性浆膜炎、流产和局部脓肿。流产和局部脓肿。27/chapter第三篇 细菌学各论u 第八章第八章 肠杆菌科肠杆菌科第一节第一节第一节第一节 埃希菌属埃希菌属埃希菌属埃希菌属第二节第二节第二节第二节 沙门菌属沙门菌属沙门菌属沙门菌属第三节第三节第三节第三节 耶尔森菌属耶尔森菌属耶尔森
21、菌属耶尔森菌属第四节第四节第四节第四节 其他肠道杆菌属其他肠道杆菌属其他肠道杆菌属其他肠道杆菌属 ( (克雷伯菌属、变形杆菌属、爱德华菌属克雷伯菌属、变形杆菌属、爱德华菌属克雷伯菌属、变形杆菌属、爱德华菌属克雷伯菌属、变形杆菌属、爱德华菌属) )28/chapter第三篇 细菌学各论本科共同特性为:革兰氏阴性、无芽孢的本科共同特性为:革兰氏阴性、无芽孢的兼性厌氧菌。共兼性厌氧菌。共2828属、属、110110种。多为正常种。多为正常肠道菌群成员。沙门氏菌属、埃希菌属和肠道菌群成员。沙门氏菌属、埃希菌属和耶尔森菌属的部分成员对人和动物有广泛耶尔森菌属的部分成员对人和动物有广泛的致病性,在公共卫生
22、和兽医临床有重要的致病性,在公共卫生和兽医临床有重要意义。意义。 29/chapter第三篇 细菌学各论u 第一节第一节 埃希菌属埃希菌属 ( (EscherichiaEscherichia) ) 本属现有本属现有5个种,其中最重要的种是大肠埃希菌个种,其中最重要的种是大肠埃希菌(E.coli),俗称大肠杆菌,下分血清型。本菌,俗称大肠杆菌,下分血清型。本菌系人和温血动物肠道内正常菌群成员之一。大系人和温血动物肠道内正常菌群成员之一。大肠杆菌常被用作粪便直接或间接污染的检测指肠杆菌常被用作粪便直接或间接污染的检测指标。本菌还是分子生物学和基因工程中重要的标。本菌还是分子生物学和基因工程中重要的
23、实验材料和研究对象。实验材料和研究对象。30/chapter第三篇 细菌学各论一、形态染色特性一、形态染色特性 大肠杆菌为革兰氏阴性无芽孢的大肠杆菌为革兰氏阴性无芽孢的杆菌,大小杆菌,大小0.4-0.7 um2-3um,两端钝圆、散在,两端钝圆、散在,周生鞭毛可运动,多有菌毛。周生鞭毛可运动,多有菌毛。31/chapter第三篇 细菌学各论E. coli on 伊红美蓝琼脂上呈金属绿色伊红美蓝琼脂上呈金属绿色E. coli on麦康基琼脂上呈麦康基琼脂上呈粉红色菌落粉红色菌落二、培养及生化特性二、培养及生化特性 本菌为兼性厌氧菌,在普通培养本菌为兼性厌氧菌,在普通培养基上生长良好,在营养琼脂上
24、,形成圆形凸起、光滑、基上生长良好,在营养琼脂上,形成圆形凸起、光滑、湿润、半透明、灰白色菌落,径约湿润、半透明、灰白色菌落,径约2-3mm;本菌大多可;本菌大多可以发酵乳糖产酸产气,麦康凯琼脂上形成红色菌落;在以发酵乳糖产酸产气,麦康凯琼脂上形成红色菌落;在伊红美蓝琼脂上产生黑色带金属闪光的菌落;一些致病伊红美蓝琼脂上产生黑色带金属闪光的菌落;一些致病性菌株在绵羊血平板上呈性菌株在绵羊血平板上呈溶血。溶血。32/chapter第三篇 细菌学各论抗原类抗原类型型 数量数量 性质性质 O抗原 173种 特异性决定于LPS的特异多糖侧链的结构,是一种耐热菌体抗原。 K抗原 80种 多存在于荚膜或被
25、膜中,个别位于菌毛中。K88、K99是两种蛋白质K抗原外,其余均为多糖K抗原。是一种热不稳定抗原。 H抗原 56种 是一类不耐热的鞭毛蛋白抗原。刺激机体产生高效价凝集抗体。 血清型表示法:O8:K23(L):H19 三、抗原及血清型三、抗原及血清型33/chapter第三篇 细菌学各论四、致病性四、致病性 条件性大肠杆菌、病原性大肠杆菌。条件性大肠杆菌、病原性大肠杆菌。 与动物疾病有关的病原性大肠杆菌可分为五类:产与动物疾病有关的病原性大肠杆菌可分为五类:产肠毒素大肠杆菌肠毒素大肠杆菌(ETEC)、肠出血性大肠杆菌、肠出血性大肠杆菌(EHEC)、肠、肠致病性大肠杆菌致病性大肠杆菌(EPEC)、
26、肠侵袭性大肠杆菌、肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)及肠及肠聚集型大肠杆菌聚集型大肠杆菌(EAEC)。34/chapter第三篇 细菌学各论五、微生物学诊断五、微生物学诊断 分离与鉴定程序可参见图分离与鉴定程序可参见图8-1。(PAGE 106)1. 采病料分离培养采病料分离培养 败血症病例采集内脏组织(肝败血症病例采集内脏组织(肝脾肾等),对幼畜腹泻及猪水肿病病例应取其各段脾肾等),对幼畜腹泻及猪水肿病病例应取其各段小肠内容物或黏膜刮取物以及相应肠段的肠系膜淋小肠内容物或黏膜刮取物以及相应肠段的肠系膜淋巴结,分别在麦康凯平板和血平板上划线分离培养。巴结,分别在麦康凯平板和血平板上划线分离培养。2.
27、 可疑菌落生化鉴定可疑菌落生化鉴定 挑取麦康凯平板上的红色菌挑取麦康凯平板上的红色菌落或血平板上呈落或血平板上呈溶血溶血(仔猪黄痢与水肿病菌株仔猪黄痢与水肿病菌株)的典的典型菌落几个,分别转种三糖铁(型菌落几个,分别转种三糖铁(TSI)培养基和普通)培养基和普通琼脂斜面做初步生化鉴定和纯培养。琼脂斜面做初步生化鉴定和纯培养。35/chapter第三篇 细菌学各论3. 纯培养物抗原鉴定纯培养物抗原鉴定 将将TSI琼脂反应模式符合埃琼脂反应模式符合埃希氏菌属的生长物或其相应的普通斜面纯培养物做希氏菌属的生长物或其相应的普通斜面纯培养物做O、K抗原鉴定。抗原鉴定。4. 检测毒力因子检测毒力因子 确定
28、其属于何类致病性大肠杆菌。确定其属于何类致病性大肠杆菌。六、防治六、防治 目前已有菌苗,包括抗粘附素的含单价或多价菌毛目前已有菌苗,包括抗粘附素的含单价或多价菌毛抗原的灭活全菌苗或亚单位苗;抗肠毒素的类毒素苗;抗原的灭活全菌苗或亚单位苗;抗肠毒素的类毒素苗;表达一种或两种粘附素以及同时表达粘附素和肠毒素表达一种或两种粘附素以及同时表达粘附素和肠毒素的基因工程菌苗等。用这些菌苗免疫怀孕母畜后,均的基因工程菌苗等。用这些菌苗免疫怀孕母畜后,均能使其后代从初乳中获得抗体而被动保护。能使其后代从初乳中获得抗体而被动保护。36/chapter第三篇 细菌学各论u第二节第二节 沙门氏菌属沙门氏菌属( (S
29、almonellaSalmonella) )一、主要特征一、主要特征 沙门氏菌属是一群革兰氏阴性无芽孢杆菌,沙门氏菌属是一群革兰氏阴性无芽孢杆菌,通常都以周生鞭毛运动。在三糖铁琼脂上常产生通常都以周生鞭毛运动。在三糖铁琼脂上常产生H2S,大多沙门氏菌不发酵乳糖。,大多沙门氏菌不发酵乳糖。 绝大多数沙门氏菌对人和动物有致病性,能绝大多数沙门氏菌对人和动物有致病性,能引起人和动物的多种不同临床表现的沙门氏菌病,引起人和动物的多种不同临床表现的沙门氏菌病,并为人类食物中毒的主要病原之一,在医学、兽并为人类食物中毒的主要病原之一,在医学、兽医和公共卫生上均十分重要。医和公共卫生上均十分重要。 沙门氏菌
30、血清型复杂,有沙门氏菌血清型复杂,有2 500种以上。种以上。37/chapter第三篇 细菌学各论一、形态及染色特性一、形态及染色特性 形态染色特性与同科其他形态染色特性与同科其他菌属相似,呈杆状,菌属相似,呈杆状,0.7-1.5umX2.0-5.0um,革,革兰氏阴性。除雏沙门氏菌和鸡沙门氏菌无鞭毛不兰氏阴性。除雏沙门氏菌和鸡沙门氏菌无鞭毛不运动外,其余均有周生鞭毛可运动,大多数有菌运动外,其余均有周生鞭毛可运动,大多数有菌毛。毛。38/chapter第三篇 细菌学各论二、培养及生化特性二、培养及生化特性 本属大多数细菌的培养特性本属大多数细菌的培养特性与埃希氏菌属相似。沙门氏菌在肉汤琼脂
31、上生长贫瘠,与埃希氏菌属相似。沙门氏菌在肉汤琼脂上生长贫瘠,形成较小的菌落。在肠道菌鉴别或选择性培养基上,形成较小的菌落。在肠道菌鉴别或选择性培养基上,大多数菌株因不发酵乳糖而形成无色菌落。大多数菌株因不发酵乳糖而形成无色菌落。Salmonella on S.S. Agar Salmonella on麦康基琼麦康基琼脂上为无色菌落脂上为无色菌落39/chapter第三篇 细菌学各论 抗原抗原类类型型 数量数量 性性质质 O抗原 58种 特异性决定于LPS的特异多糖侧链的结构,是一种耐热多糖抗原。 K抗原 (Vi抗原) N-乙酰-D-半乳糖胺糖醛酸聚合物。 H抗原 63种 蛋白质性鞭毛抗原。 血
32、清型表示法:O8:K23(L):H19 三、抗原及变异三、抗原及变异40/chapter第三篇 细菌学各论四、致病性类型四、致病性类型 根据对宿主嗜性不同,可根据对宿主嗜性不同,可将沙门氏菌分成三群。将沙门氏菌分成三群。第一群第一群具有高度专嗜性沙门氏菌,它们只对人或具有高度专嗜性沙门氏菌,它们只对人或某种动物产生特定的疾病。例如鸡白痢和鸡伤寒某种动物产生特定的疾病。例如鸡白痢和鸡伤寒沙门氏菌仅使鸡和火鸡发病,马流产、牛流产和沙门氏菌仅使鸡和火鸡发病,马流产、牛流产和羊流产等沙门氏菌;猪伤寒沙门氏菌仅侵害猪。羊流产等沙门氏菌;猪伤寒沙门氏菌仅侵害猪。第二群第二群是在一定程度适应于特定动物的偏嗜
33、性沙是在一定程度适应于特定动物的偏嗜性沙门氏菌,如猪霍乱和都柏林沙门氏菌,分别是猪门氏菌,如猪霍乱和都柏林沙门氏菌,分别是猪和牛羊的致病菌。和牛羊的致病菌。第三群第三群是泛嗜性沙门氏菌,它们有广泛宿主谱,是泛嗜性沙门氏菌,它们有广泛宿主谱,能引起人和各种动物的沙门氏菌病,具有重要的能引起人和各种动物的沙门氏菌病,具有重要的公共卫生意义。如鼠伤寒和肠炎沙门氏菌等。公共卫生意义。如鼠伤寒和肠炎沙门氏菌等。41/chapter第三篇 细菌学各论六、毒力因子六、毒力因子 沙门氏菌毒力因子有多种,主要有脂沙门氏菌毒力因子有多种,主要有脂多糖多糖(LPS) 、肠毒素、细胞毒素及毒力基因。、肠毒素、细胞毒素
34、及毒力基因。七、免疫性七、免疫性 体液抗体与细胞免疫在抗沙门氏菌感染体液抗体与细胞免疫在抗沙门氏菌感染中都很重要。中都很重要。 认为细胞免疫在抗沙门氏菌感染中具有重要作用。认为细胞免疫在抗沙门氏菌感染中具有重要作用。八、微生物学诊断八、微生物学诊断 未污染病料未污染病料 直接接种普通琼脂、血琼脂或鉴别培直接接种普通琼脂、血琼脂或鉴别培养基平板分离细菌;养基平板分离细菌; 污染材料污染材料 如饮水、粪便、饲料、肠内容物和已败如饮水、粪便、饲料、肠内容物和已败坏组织等,常需要增菌培养基增菌后再行分离。坏组织等,常需要增菌培养基增菌后再行分离。42/chapter第三篇 细菌学各论九、防制九、防制
35、目前的疫苗多限于预防各种家畜特有的沙目前的疫苗多限于预防各种家畜特有的沙门氏菌病,例如猪副伤寒、马流产以及牛、羊的都柏门氏菌病,例如猪副伤寒、马流产以及牛、羊的都柏林等沙门氏菌的灭活菌苗。林等沙门氏菌的灭活菌苗。43/chapter第三篇 细菌学各论u第三节第三节 耶尔森菌属耶尔森菌属( (YersiniaYersinia) ) 本菌属由革兰氏阴性、运动本菌属由革兰氏阴性、运动或不运动的多形性短小杆菌组或不运动的多形性短小杆菌组成。除鼠疫菌无鞭毛外,其余成。除鼠疫菌无鞭毛外,其余成员在成员在22-28培养时有动力,培养时有动力,但但37培养则无动力。代表菌培养则无动力。代表菌种为鼠疫耶尔森菌,
36、简称鼠疫种为鼠疫耶尔森菌,简称鼠疫杆菌。杆菌。 本菌属现有本菌属现有11个种,对人和个种,对人和动物有致病性的主要有三个种:动物有致病性的主要有三个种:鼠疫耶尔森菌、假结核耶尔森鼠疫耶尔森菌、假结核耶尔森菌、小肠结肠炎耶尔森菌。菌、小肠结肠炎耶尔森菌。耶尔森菌电镜照片耶尔森菌电镜照片44/chapter第三篇 细菌学各论45/chapter第三篇 细菌学各论46/chapter第三篇 细菌学各论47/chapter第三篇 细菌学各论u 第第九九章章 弧菌科(弧菌科(VibrionaceaeVibrionaceae)第一节第一节第一节第一节 弧菌属弧菌属弧菌属弧菌属第二节第二节第二节第二节 气单
37、胞菌属气单胞菌属气单胞菌属气单胞菌属48/chapter第三篇 细菌学各论u第一节第一节 弧菌属(弧菌属(VibrioVibrio)副溶血性弧菌副溶血性弧菌 本菌具嗜盐性,本菌具嗜盐性,存在于海产品,人食用污染本存在于海产品,人食用污染本菌的鱼、贝类引致食物中毒。菌的鱼、贝类引致食物中毒。一、形态及培养特性一、形态及培养特性 菌体多菌体多形性,可为弧状、杆状或丝状。形性,可为弧状、杆状或丝状。一端有鞭毛,革兰氏染色阴性。一端有鞭毛,革兰氏染色阴性。菌落中等大小,培养菌落中等大小,培养24h时直时直径约径约2mm。嗜。嗜Na+,可在含,可在含7.5NaCl的培养基生长。的培养基生长。亚洲霍乱分离
38、的逗点状弧菌亚洲霍乱分离的逗点状弧菌49/chapter第三篇 细菌学各论二、致病性二、致病性 本菌的致病株绝大多数能产生本菌的致病株绝大多数能产生溶血毒素,裂解人、兔等红细胞,因此可用溶血毒素,裂解人、兔等红细胞,因此可用溶血反应区分致病株与非致病株,称之为神溶血反应区分致病株与非致病株,称之为神奈川试验。奈川试验。人食用本菌污染的海鱼、贝类等常引致食物中毒,人食用本菌污染的海鱼、贝类等常引致食物中毒,潜伏期潜伏期2-36h,表现为水样腹泻、呕吐及发热,一,表现为水样腹泻、呕吐及发热,一般能很快康复。近年来从我国人工养殖发病死亡的般能很快康复。近年来从我国人工养殖发病死亡的海鱼、贝类等也分离
39、到本菌。海鱼、贝类等也分离到本菌。三、微生物学诊断三、微生物学诊断 取病人粪便或可疑食品接种嗜取病人粪便或可疑食品接种嗜盐菌选择培养基或盐菌选择培养基或SS平板。挑取可疑菌落进一步作平板。挑取可疑菌落进一步作生化试验,最后检测其毒素作神奈川试验等,也可生化试验,最后检测其毒素作神奈川试验等,也可用用PCR等技术在基因水平检测毒素。等技术在基因水平检测毒素。50/chapter第三篇 细菌学各论u第二节第二节 气单胞菌属(气单胞菌属(AeromonasAeromonas)本属一些种类细菌对鱼类、禽类、哺乳动物及本属一些种类细菌对鱼类、禽类、哺乳动物及人类有致病性,是鱼类最常见的致病菌。人类有致病
40、性,是鱼类最常见的致病菌。类志贺气单胞菌类志贺气单胞菌气单胞菌引起的鱼病气单胞菌引起的鱼病51/chapter第三篇 细菌学各论u 第十章第十章 巴氏杆菌科及相关属巴氏杆菌科及相关属第一节第一节第一节第一节 巴氏杆菌属巴氏杆菌属巴氏杆菌属巴氏杆菌属第二节第二节第二节第二节 曼氏杆菌属曼氏杆菌属曼氏杆菌属曼氏杆菌属第三节第三节第三节第三节 里氏杆菌属里氏杆菌属里氏杆菌属里氏杆菌属第四节第四节第四节第四节 放线杆菌属放线杆菌属放线杆菌属放线杆菌属第五节第五节第五节第五节 嗜血杆菌属嗜血杆菌属嗜血杆菌属嗜血杆菌属第六节第六节第六节第六节 泰勒菌属泰勒菌属泰勒菌属泰勒菌属52/chapter第三篇 细
41、菌学各论u 第一节第一节 巴氏杆菌属巴氏杆菌属(P Pasteurellaasteurella) 本属细菌已报道有本属细菌已报道有20多种,多杀性巴氏杆菌是本多种,多杀性巴氏杆菌是本属中最重要的畜禽致病菌。属中最重要的畜禽致病菌。 多杀性巴氏杆菌多杀性巴氏杆菌 本菌是引起多种畜禽巴氏杆菌病本菌是引起多种畜禽巴氏杆菌病(亦称出血性败亦称出血性败血症血症)的病原体,主要使动物发生出血性败血病或传的病原体,主要使动物发生出血性败血病或传染性肺炎。染性肺炎。一、形态及染色一、形态及染色 为球杆状或短杆状菌,两端钝圆,为球杆状或短杆状菌,两端钝圆,大小为大小为0.25-0.4um *0.5-2.5um。
42、单个存在,有时成。单个存在,有时成双排列。双排列。53/chapter第三篇 细菌学各论 病料涂片用瑞氏染色或美蓝染色时,可见典型的两极病料涂片用瑞氏染色或美蓝染色时,可见典型的两极着色,即菌体两端染着色,即菌体两端染 色深中间浅,无鞭毛,不形成芽色深中间浅,无鞭毛,不形成芽孢,新分离的强毒菌株有荚膜。革兰氏染色阴性。孢,新分离的强毒菌株有荚膜。革兰氏染色阴性。二、培养及生化特性二、培养及生化特性 需氧或兼性厌氧菌。对营养要需氧或兼性厌氧菌。对营养要求较严格。在普通培养基上生长贫瘠,在麦康凯培养求较严格。在普通培养基上生长贫瘠,在麦康凯培养上不生长。在加有血液、血清或微量血红素的培养基上不生长
43、。在加有血液、血清或微量血红素的培养基中生长良好。最适温度为中生长良好。最适温度为37,pH7.2-7.4。在血清琼脂乎板上培养在血清琼脂乎板上培养24h,可长成淡灰白色、闪光的,可长成淡灰白色、闪光的露珠状小菌落。在血琼脂平露珠状小菌落。在血琼脂平板上,长成水滴样小菌落,板上,长成水滴样小菌落,无溶血现象。无溶血现象。多杀性巴氏杆菌血琼脂平板培养菌落形态多杀性巴氏杆菌血琼脂平板培养菌落形态54/chapter第三篇 细菌学各论 三、血清型三、血清型 本菌主要以其菌体抗原和荚膜抗原区本菌主要以其菌体抗原和荚膜抗原区分血清型,前者有分血清型,前者有6个型,后者分为个型,后者分为16个型。我国分个
44、型。我国分离的禽多杀性巴氏杆菌以离的禽多杀性巴氏杆菌以5:A为多,其次为为多,其次为8:A。四、抵抗力四、抵抗力 本菌抵抗力不强。在阳光中暴晒本菌抵抗力不强。在阳光中暴晒1min,或在,或在5615min或或 60 10min,可被杀死。厩,可被杀死。厩肥中可存活肥中可存活1个月,埋入地下的病死鸡尸,经个月,埋入地下的病死鸡尸,经4个月个月仍残留活菌。在空气干燥中仍残留活菌。在空气干燥中2-3d可死亡。对青霉素、可死亡。对青霉素、链霉素、磺胺类及许多新的抗菌药物敏感。链霉素、磺胺类及许多新的抗菌药物敏感。 冻干菌种在低温中可保存长达冻干菌种在低温中可保存长达26年。年。55/chapter第三
45、篇 细菌学各论五、致病性与免疫性五、致病性与免疫性 本菌是多种动物的重要病原菌。本菌是多种动物的重要病原菌。对鸡、鸭、鹅、野禽,猪、牛、羊、马、兔等都可致对鸡、鸭、鹅、野禽,猪、牛、羊、马、兔等都可致病,急性型呈出血性败血症迅速死亡;亚急性型呈出病,急性型呈出血性败血症迅速死亡;亚急性型呈出血性炎症见于黏膜关节等部位;慢性型呈萎缩性鼻炎血性炎症见于黏膜关节等部位;慢性型呈萎缩性鼻炎(猪、羊猪、羊)、关节炎及局部化脓性炎症等。实验动物中、关节炎及局部化脓性炎症等。实验动物中小鼠极易感染。可致禽霍乱、猪肺疫等病。小鼠极易感染。可致禽霍乱、猪肺疫等病。 D血清型的某些菌株能产生一种耐热的外毒素,用血
46、清型的某些菌株能产生一种耐热的外毒素,用此毒素接种猪可复制典型的猪萎缩性鼻炎此毒素接种猪可复制典型的猪萎缩性鼻炎(AR),证明,证明AR由产毒素的本菌与波氏杆菌混合感染所致,本菌起由产毒素的本菌与波氏杆菌混合感染所致,本菌起主导作用。主导作用。56/chapter第三篇 细菌学各论 杀禽亚种的致病力与其内毒素有关,可致禽霍乱,杀禽亚种的致病力与其内毒素有关,可致禽霍乱,表现出血性败血症状。表现出血性败血症状。 动物患病痊愈后,可获得较强的免疫。国内外已动物患病痊愈后,可获得较强的免疫。国内外已研制出多种灭活、弱毒菌苗。该菌的高免多价血清研制出多种灭活、弱毒菌苗。该菌的高免多价血清具有良好的紧急
47、预防和治疗作用。具有良好的紧急预防和治疗作用。六、微生物学诊断六、微生物学诊断1显微镜检查显微镜检查 采取渗出液、心血、肝、脾、淋巴采取渗出液、心血、肝、脾、淋巴结、骨髓等新鲜病料涂片或触片,以碱性美蓝液或结、骨髓等新鲜病料涂片或触片,以碱性美蓝液或瑞氏染色液染色,显微镜检查,如发现典型的两极瑞氏染色液染色,显微镜检查,如发现典型的两极着色的短杆菌,结合流行病学及剖检,可作初步诊着色的短杆菌,结合流行病学及剖检,可作初步诊断。断。57/chapter第三篇 细菌学各论2分离培养分离培养 用血琼脂平板和麦康凯琼脂同时进用血琼脂平板和麦康凯琼脂同时进行分离培养,麦康扎培养基上不生长,在血琼脂上行分
48、离培养,麦康扎培养基上不生长,在血琼脂上生长良好,菌落不溶血,革兰氏染色为阴性球杆菌。生长良好,菌落不溶血,革兰氏染色为阴性球杆菌。必要时进一步做生化试验。必要时进一步做生化试验。3动物试验动物试验 用病料研磨制成悬液,或用分离培用病料研磨制成悬液,或用分离培养菌,皮下注射小鼠、养菌,皮下注射小鼠、 家兔或鸽,动物多在家兔或鸽,动物多在2448h内死亡。内死亡。 可用抗血清或单克隆抗体进行血清学试验鉴定荚可用抗血清或单克隆抗体进行血清学试验鉴定荚膜抗原和菌体抗原型。膜抗原和菌体抗原型。58/chapter第三篇 细菌学各论七、防治七、防治 猪群检测血清抗体,淘汰阳性猪,猪群检测血清抗体,淘汰阳
49、性猪,建立净化猪群。鸡猪均可注射灭活疫苗预防。建立净化猪群。鸡猪均可注射灭活疫苗预防。也可用抗菌素防治。也可用抗菌素防治。59/chapter第三篇 细菌学各论u 第十一章第十一章 革兰氏阴性需氧杆菌革兰氏阴性需氧杆菌第一节第一节 布氏杆菌属布氏杆菌属第二节第二节 假单胞菌属假单胞菌属第三节第三节 伯氏菌属伯氏菌属第四节第四节 波氏菌属波氏菌属第五节第五节 军团菌属军团菌属第六节第六节 弗朗西斯菌属弗朗西斯菌属第七节第七节 摩拉菌属摩拉菌属第八节第八节 不动杆菌属不动杆菌属60/chapter第三篇 细菌学各论u 第一节第一节 布氏杆菌属布氏杆菌属(Brucella) 布氏杆菌又名布鲁氏菌,是
50、多种布氏杆菌又名布鲁氏菌,是多种动物和人布氏杆菌病的病原,不仅动物和人布氏杆菌病的病原,不仅危害畜牧生产,而且危害人类健康。危害畜牧生产,而且危害人类健康。一、形态及染色特性一、形态及染色特性 细菌呈球形、细菌呈球形、球杆形或短杆形,新分离者趋向球球杆形或短杆形,新分离者趋向球形。形。0.5-0.7um*0.6-1.5um,多单,多单在。不形成芽孢和荚膜,无鞭毛不在。不形成芽孢和荚膜,无鞭毛不运动,革兰氏阴性。经柯氏或改良运动,革兰氏阴性。经柯氏或改良Z-N、改良、改良K氏等鉴别染色法染成氏等鉴别染色法染成红色,可与其他细菌相区别。红色,可与其他细菌相区别。布氏杆菌布氏杆菌61/chapter
51、第三篇 细菌学各论二、培养及生化特性二、培养及生化特性 此属细菌专性需氧,在初代此属细菌专性需氧,在初代分离培养时尚需分离培养时尚需5-10CO2。最适生长温度。最适生长温度37,最适,最适pH为为6.6-7.4。血清和血液可促进其生长。血清和血液可促进其生长 。三、种和生物型三、种和生物型 该属包括该属包括6个种个种20个生物型,即马个生物型,即马尔他布氏杆菌生物型尔他布氏杆菌生物型1-3 、流产布氏杆菌生物型、流产布氏杆菌生物型1-9 、猪布氏杆菌生物型、猪布氏杆菌生物型1-5、绵羊布氏杆菌、沙林鼠布、绵羊布氏杆菌、沙林鼠布氏杆菌和犬布氏杆菌。氏杆菌和犬布氏杆菌。四、抗原性四、抗原性 分为
52、属内抗原与属外抗原,属内抗原分为属内抗原与属外抗原,属内抗原包括包括A、M及及R抗原等表面抗原。属内抗原:抗原等表面抗原。属内抗原: A抗原与抗原与M抗原抗原 其抗原决定簇位于细胞壁的脂多其抗原决定簇位于细胞壁的脂多糖蛋白复合物上,为外露的多糖链部分。光滑型布糖蛋白复合物上,为外露的多糖链部分。光滑型布氏杆菌具有氏杆菌具有A和和M两种表面抗原。两种表面抗原。 R抗原抗原 为细胞壁低蛋白含量的脂多糖复合物,为细胞壁低蛋白含量的脂多糖复合物,是大多数非光滑型布氏杆菌的共同抗原决定簇。是大多数非光滑型布氏杆菌的共同抗原决定簇。62/chapter第三篇 细菌学各论五、变异性五、变异性 绵羊种和犬种布
53、氏杆菌是天然的绵羊种和犬种布氏杆菌是天然的R型型种,其他种为种,其他种为S型。布氏杆菌最常见的变异是型。布氏杆菌最常见的变异是S-R变变异,此种变异很少发生回变。异,此种变异很少发生回变。六、抵抗力六、抵抗力 本菌对外界环境的抵抗力较强,在污本菌对外界环境的抵抗力较强,在污染的土壤和水中可存活染的土壤和水中可存活1- 4个月,皮毛个月,皮毛2 - 4个月,个月,乳、肉食品中约乳、肉食品中约2个月,粪便中个月,粪便中120d,流产胎儿中,流产胎儿中至少至少75d,子宫渗出物中,子宫渗出物中200d。 但对湿热的抵抗力但对湿热的抵抗力不强,不强,60加热加热30min或或70 5min即杀死,煮沸
54、即杀死,煮沸立即死亡。对消毒剂的抵抗力也不强。立即死亡。对消毒剂的抵抗力也不强。七、致病性七、致病性 本菌不产生外毒素,但有毒性较强的本菌不产生外毒素,但有毒性较强的内毒素。此内毒素是细胞壁的脂多糖内毒素。此内毒素是细胞壁的脂多糖(LPS)成分。成分。63/chapter第三篇 细菌学各论 本属细菌可感染的动物种类极多,目前查知者本属细菌可感染的动物种类极多,目前查知者已有已有60多种,包括马、牛、猪、绵羊、山羊、骆多种,包括马、牛、猪、绵羊、山羊、骆驼、鹿、兔、犬等各种家畜、野生哺乳动物、啮驼、鹿、兔、犬等各种家畜、野生哺乳动物、啮齿动物、鸟类、爬虫类、两栖类和鱼类。可引起齿动物、鸟类、爬虫
55、类、两栖类和鱼类。可引起人和多种动物的布病(子宫炎、输卵管炎、睾丸人和多种动物的布病(子宫炎、输卵管炎、睾丸炎、关节炎等),是一种重要的人兽共患病,病炎、关节炎等),是一种重要的人兽共患病,病理过程慢长,经济危害极大。布氏杆菌可引起豚理过程慢长,经济危害极大。布氏杆菌可引起豚鼠、小鼠和家兔等实验动物感染,豚鼠最为易感。鼠、小鼠和家兔等实验动物感染,豚鼠最为易感。 64/chapter第三篇 细菌学各论 光滑型的流产布氏杆菌入侵机体黏膜屏障后,被吞光滑型的流产布氏杆菌入侵机体黏膜屏障后,被吞噬细胞吞噬成为胞内寄生菌,并在淋巴结生长繁殖形噬细胞吞噬成为胞内寄生菌,并在淋巴结生长繁殖形成感染灶。一旦
56、侵入血流,则出现菌血症。成感染灶。一旦侵入血流,则出现菌血症。 在不同种别和生物型,甚至同型细菌的不同菌株之在不同种别和生物型,甚至同型细菌的不同菌株之间,毒力可有相当差异。对豚鼠致病性顺序是马尔他间,毒力可有相当差异。对豚鼠致病性顺序是马尔他布氏杆菌布氏杆菌猪布氏杆菌猪布氏杆菌流产布氏杆菌流产布氏杆菌沙林鼠布氏杆沙林鼠布氏杆菌菌犬布氏杆菌犬布氏杆菌绵羊布氏绵羊布氏 杆菌。杆菌。八、微生物学诊断八、微生物学诊断 布氏杆菌病常表现为慢性或隐性布氏杆菌病常表现为慢性或隐性感染,其诊断和检疫主要依靠血清学检查及变态反应感染,其诊断和检疫主要依靠血清学检查及变态反应检查。检查。65/chapter第三
57、篇 细菌学各论1. 细菌学检查细菌学检查 病料最好用流产胎儿的胃内容物、病料最好用流产胎儿的胃内容物、肺、肝和脾以及流产胎盘和羊水等。也可采用阴道肺、肝和脾以及流产胎盘和羊水等。也可采用阴道分泌物、乳汁、血液、精液、尿液以及急宰病畜的分泌物、乳汁、血液、精液、尿液以及急宰病畜的子宫、乳房、精囊、睾丸、附睾、淋巴结、骨髓和子宫、乳房、精囊、睾丸、附睾、淋巴结、骨髓和其他与局部病变的器官。其他与局部病变的器官。 显微镜检查显微镜检查 病料直接涂片,作革兰氏和柯兹洛病料直接涂片,作革兰氏和柯兹洛夫斯基染色镜检。若发现革兰氏阴性、鉴别染色为夫斯基染色镜检。若发现革兰氏阴性、鉴别染色为红色的球状杆菌或短
58、小杆菌,即可作出初步的疑似红色的球状杆菌或短小杆菌,即可作出初步的疑似诊断。诊断。66/chapter第三篇 细菌学各论 分离培养鉴定分离培养鉴定 无污染病料可直接划线接种于适宜无污染病料可直接划线接种于适宜培养基,培养基,5-10CO2环境,环境,37培养。每培养。每3d观察观察1次,如有细菌生长,可挑选可疑菌落细菌鉴定。次,如有细菌生长,可挑选可疑菌落细菌鉴定。2.血清学检查血清学检查 有多种检查方法,血清中布氏杆菌有多种检查方法,血清中布氏杆菌抗体检查和病料中布氏杆菌检查两类方法。抗体检查和病料中布氏杆菌检查两类方法。 检测细菌检测细菌 用已知抗体可检查病料中是否存在布用已知抗体可检查病
59、料中是否存在布氏杆菌,或分离培养物是否为布氏杆菌,比细菌学氏杆菌,或分离培养物是否为布氏杆菌,比细菌学检查法简便快速,因而具有较大实用价值。常用方检查法简便快速,因而具有较大实用价值。常用方法有荧光抗体技术、反向间接血凝试验、间接炭凝法有荧光抗体技术、反向间接血凝试验、间接炭凝集试验以及免疫酶组化法染色等。集试验以及免疫酶组化法染色等。67/chapter第三篇 细菌学各论 检测抗体检测抗体 动物在感染布氏杆菌动物在感染布氏杆菌7-15d可出现抗体,可出现抗体,检测血清中的抗体是布氏杆菌病诊断和检疫的主要检测血清中的抗体是布氏杆菌病诊断和检疫的主要手段。在实际工作中,最好用一种以上的方法相互手
60、段。在实际工作中,最好用一种以上的方法相互配合。国内常用玻板凝集试验、虎红平板凝集试验、配合。国内常用玻板凝集试验、虎红平板凝集试验、乳汁环状试验进行现场或牧区大群检疫,以试管凝乳汁环状试验进行现场或牧区大群检疫,以试管凝集试验和补体结合试验进行实验室最后确诊。集试验和补体结合试验进行实验室最后确诊。3变态反应检查变态反应检查 皮肤变态反应一般在感染后的皮肤变态反应一般在感染后的2025d出现,因此不宜作早期诊断。本法适于动物出现,因此不宜作早期诊断。本法适于动物的大群检疫,主要用于绵羊和山羊,其次为猪。的大群检疫,主要用于绵羊和山羊,其次为猪。68/chapter第三篇 细菌学各论 检测时,
61、将布氏杆菌水解素检测时,将布氏杆菌水解素0.2m1注射于羊尾根注射于羊尾根皱襞部或猪耳根部皮内,皱襞部或猪耳根部皮内,24及及48h后各观察反应后各观察反应一次。若注射部发生红肿,即判为阳性反应。此一次。若注射部发生红肿,即判为阳性反应。此法对慢性病例的检出率较高,且注射水解素后无法对慢性病例的检出率较高,且注射水解素后无抗体产生,不妨碍以后扒血清学检查。抗体产生,不妨碍以后扒血清学检查。 凝集反应、补体结合反应和变态反应出现的时凝集反应、补体结合反应和变态反应出现的时间各有特点。即动物感染布氏杆菌后,首先出现间各有特点。即动物感染布氏杆菌后,首先出现凝集反应,消失较早;其次出现补体结合反应,
62、凝集反应,消失较早;其次出现补体结合反应,消失较晚;最后出现变态反应,保抖时间也较长。消失较晚;最后出现变态反应,保抖时间也较长。为了彻底消除各类病畜,应同时使用三种方法进为了彻底消除各类病畜,应同时使用三种方法进行综合诊断。行综合诊断。 69/chapter第三篇 细菌学各论九、免疫防治九、免疫防治 菌苗接种虽有显著效果,但欲根除菌苗接种虽有显著效果,但欲根除此病,则尚须严格执行畜群全面检疫及淘汰病畜的此病,则尚须严格执行畜群全面检疫及淘汰病畜的措施。已有的菌苗种类很多,我国创制和应用的菌措施。已有的菌苗种类很多,我国创制和应用的菌苗有羊型和猪型两种弱毒菌苗。苗有羊型和猪型两种弱毒菌苗。 羊
63、型羊型5号号(M5)弱毒活菌苗弱毒活菌苗 对牛、山羊、绵羊和对牛、山羊、绵羊和鹿布氏杆菌病的预防没果较好。采取皮下注射或气鹿布氏杆菌病的预防没果较好。采取皮下注射或气雾方式,免疫期可达雾方式,免疫期可达1-1.5年。其缺点为对怀孕动年。其缺点为对怀孕动物可致流产而禁用,对接触气雾的人员可引起较严物可致流产而禁用,对接触气雾的人员可引起较严重反应。培育出重反应。培育出M590株,具有良好的安全性和优株,具有良好的安全性和优秀的免疫原性。秀的免疫原性。70/chapter第三篇 细菌学各论猪型猪型2号号(S2)弱毒活菌苗弱毒活菌苗 毒力弱,生物性状稳定,毒力弱,生物性状稳定,免疫原性好,对猪、绵羊、山羊、牦牛、牛等较好免疫原性好,对猪、绵羊、山羊、牦牛、牛等较好的免疫效果,可接种任何年龄的动物,甚至可以接的免疫效果,可接种任何年龄的动物,甚至可以接种怀孕动物而不引起流产。免疫方法有口服种怀孕动物而不引起流产。免疫方法有口服(饮水饮水)、气雾和皮下注射气雾和皮下注射(羊也可作肌肉注射羊也可作肌肉注射)3种。免疫期种。免疫期为为1-2年。年。