酶工程 2酶的发酵生产

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1、第二章 酶的发酵生产第一节第一节 酶生物合成的基本理论酶生物合成的基本理论第二节第二节 酶发酵生产常用的微生物酶发酵生产常用的微生物第三节第三节 发酵工艺条件及控制发酵工艺条件及控制第四节第四节 酶发酵动力学酶发酵动力学第五节第五节 动植物细胞培养生产酶动植物细胞培养生产酶第一节第一节 酶生物合成的基本理论酶生物合成的基本理论一、RNA的生物合成转录二、蛋白质的生物合成翻译三、酶生物合成的调节一、一、RNARNA的生物合成的生物合成转录转录转录是以转录是以DNADNA为模板,以核苷三磷酸为模板,以核苷三磷酸为底物,在为底物,在RNARNA聚合酶(转录酶)的聚合酶(转录酶)的作用下,生成作用下,

2、生成RNARNA的过程。的过程。转录速度表达式转录速度表达式? ?二、蛋白质的生物合成二、蛋白质的生物合成翻译翻译翻译:以翻译:以mRNAmRNA为模板,以氨基酸为底物,在为模板,以氨基酸为底物,在核糖体上通过各种核糖体上通过各种tRNAtRNA,酶和辅助因子的酶和辅助因子的作用,合成多肽的过程。作用,合成多肽的过程。四个阶段四个阶段1 1、氨基酸活化生成氨酰、氨基酸活化生成氨酰tRNAtRNA2 2、肽链合成的起始肽链合成的起始3 3、肽链的延伸、肽链的延伸4 4、肽链合成的终止、肽链合成的终止思考思考: :密码子偏爱性与翻译速率密码子偏爱性与翻译速率? ?第二节第二节 酶发酵生产常用的微生

3、物酶发酵生产常用的微生物(酶的生产菌种)(酶的生产菌种)一、产酶菌种的要求一、产酶菌种的要求二、常用的产酶微生物二、常用的产酶微生物三、利用微生物产酶的优点三、利用微生物产酶的优点四、高纯菌种的获取四、高纯菌种的获取一、产酶菌种的要求一、产酶菌种的要求1、发酵周期短,产量高;、发酵周期短,产量高;2、容易培养和管理;、容易培养和管理;3、产酶稳定性好,不易变异退化,不易被感染;、产酶稳定性好,不易变异退化,不易被感染;4、有利于酶的分离和纯化;、有利于酶的分离和纯化;5、安全性可靠,非致病菌。、安全性可靠,非致病菌。二、常用的产酶微生物二、常用的产酶微生物1、枯草芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌(Bac

4、illus subtilis)2、大肠杆菌、大肠杆菌(Escherichia coli)3、黑曲霉、黑曲霉(Aspergillus niger)4、米曲霉、米曲霉(Aspergillus oryzae)5、青霉、青霉(Penicillium)6、木霉、木霉(Trichoderma)7、根霉、根霉(Rhizopus)8、毛霉、毛霉(Mucor)9、链霉菌、链霉菌(Streptomyces)10、啤酒酵母、啤酒酵母(Saccharomyces Cerevisiae)11、假丝酵母、假丝酵母(Candida)微生物发酵法微生物发酵法微生物微生物酶酶微生物种类繁多,制备出微生物种类繁多,制备出微生物种

5、类繁多,制备出微生物种类繁多,制备出的酶种类齐全,几乎所有的的酶种类齐全,几乎所有的的酶种类齐全,几乎所有的的酶种类齐全,几乎所有的酶都能从微生物中得到酶都能从微生物中得到酶都能从微生物中得到酶都能从微生物中得到微生物繁殖快、生产周期微生物繁殖快、生产周期微生物繁殖快、生产周期微生物繁殖快、生产周期短、培养简便,并可以通过短、培养简便,并可以通过短、培养简便,并可以通过短、培养简便,并可以通过控制培养条件来提高酶的产量控制培养条件来提高酶的产量控制培养条件来提高酶的产量控制培养条件来提高酶的产量微生物具有较强的适应性和微生物具有较强的适应性和微生物具有较强的适应性和微生物具有较强的适应性和应变

6、能力,可以通过适应、诱应变能力,可以通过适应、诱应变能力,可以通过适应、诱应变能力,可以通过适应、诱导、诱变以及基因工程等方法导、诱变以及基因工程等方法导、诱变以及基因工程等方法导、诱变以及基因工程等方法培育出新的产酶高的菌株培育出新的产酶高的菌株培育出新的产酶高的菌株培育出新的产酶高的菌株优点优点商品酶的主要商品酶的主要生产方法生产方法微生物发酵法高产高产优良优良菌株菌株培养培养和和繁殖繁殖代谢代谢和和积累积累分离分离和和纯化纯化酶制剂酶制剂酶的发酵技术酶的发酵技术微生物发酵法产酶微生物产酶微生物菌种菌种保藏保藏机构机构自自然然界界研究研究或或生产生产机构机构温泉森林森林深海火山火山土壤土壤

7、产酶微生物的来源国外菌种保藏机构国外菌种保藏机构ATCC(American Type Culture Collection)美国典型菌种保藏中心NRRL (Agricultural Research Service Culture Collection)美国农业研究菌种保藏中心 DSMZ (Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH) 德国微生物菌种保藏中心NBRC (NITE Biological Resource Center)日本技术评价研究所生物资源中心ATCCATCC (American Type Cultu

8、re Collection)美国典型菌种保藏中心ATCC 主要从事农业、遗传学、应用微生物、免疫学、细胞生物学、工业微生物学、菌种保藏方法、医学微生物学、分子生物学、植物病理学、普通微生物学、分类学、食品科学等的研究。该中心保藏有藻类111株,细菌和放线菌16865株,细胞和杂合细胞4300株,丝状真菌和酵母46000株,植物组织79株,种子600株,原生动物1800株,动物病毒、衣原体和病原体2189株,植物病毒1563种。NRRLAgricultural Research Service (ARS) Culture Collection原为原为Northern Regional Resea

9、rch LaboratoryNRRL是由美国农业部农业研究中心支持的政府性质的菌种保藏中心。主要从事农业、应用微生物、基因工程、工业微生物、菌种保藏方法、环境保护、分子生物学、食品安全、普通微生物、分类学的研究。该中心保藏有细菌10500株,真菌45000株,酵母14500株,放线菌9500株。 DSMZDSMZ (Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH) 德国微生物菌种保藏中心DSMZ成立于1969年,是德国的国家菌种保藏中心。该中心一直致力于细菌、真菌、质粒、抗菌素、人体和动物细胞、植物病毒等的分类、鉴定和保藏

10、工作。该中心是欧洲规模最大的生物资源中心,保藏有细菌9400株,真菌2400株,酵母500株,质粒300株,动物细胞500株,植物细胞500株,植物病毒600株,细菌病毒90株等。 NBRCNBRC (NITE Biological Resource Center)日本技术评价研究所生物资源中心NBRC是由日本经济部、商业部、工业部支持的半政府性质菌种保藏中心。 原为IFO ( Institute for Fermentation, Osaka,大阪发酵研究所)。主要从事农业、应用微生物、菌种保藏方法、环境保护、工业微生物、普通微生物、分子生物学等的研究。该中心保藏有细菌1446株,真菌568

11、株,酵母164株。这些菌种主要来自本国的其它菌种保藏中心。国内菌种保藏机构国内菌种保藏机构ACCC 中国农业微生物菌种保藏管理中心CGMCC 普通微生物菌种保藏管理中心AS中国科学院微生物研究所CICC 工业微生物菌种保藏管理中心IFFI轻工业部食品发酵工业科学研究所微生物发酵法微生物的筛选微生物的筛选粗筛粗筛菌种菌种分离分离含菌含菌样品样品采集采集产酶产酶性能性能微微生生物物优良优良微生物微生物诱变诱变基因工程基因工程其它方法其它方法微生物发酵法酶的生产过程培养基发酵方法发酵控制通气供氧分离纯化精制微生物发酵法酶的发酵生产方式固体发酵液体深层发酵固体发酵表面培养或曲式培养以麸皮、米糠等为基本

12、原料,加入适量的无机盐和水作为培养基进行产酶微生物菌种培养的一种培养技术浅盘培养转鼓培养多用通风式厚层培养固体发酵技术原理微生物发酵法微生物发酵法固体发酵法设备简单,便于推广,特别适合于霉菌的培养和产酶发酵条件不易控制、物料利用不完全、劳动强度大、容易染菌等优点缺点不适于胞内酶的生产液体深层发酵浸没式发酵利用液体培养基,在发酵罐内进行的一种搅拌通气培养方式液体发酵技术原理酶制剂生产的主要培养方式原料的利用原料的利用率和酶的产率和酶的产量都较高,量都较高,培养条件容培养条件容易控制易控制微生物发酵法常用的酶制剂-1常用的酶制剂-2酶的生物合成酶的生物合成酶的生物合成受酶的生物合成受基因基因和和代

13、谢物代谢物的双重控制的双重控制基因基因决定形成酶决定形成酶分子的化学结构分子的化学结构代谢物代谢物(酶反应的底(酶反应的底物、产物或类似物)物、产物或类似物)控制和调节酶的合成控制和调节酶的合成诱变或基因工程诱变或基因工程来培育优良品种来培育优良品种工艺调控工艺调控生产工艺生产工艺- -工艺流程工艺流程- -胞外胞外生产工艺生产工艺- -工艺流程工艺流程- -胞内胞内生产工艺生产工艺 培养基培养基生长因子生长因子 酶生产时需要供给微生物生长所需的氨基酸、酶生产时需要供给微生物生长所需的氨基酸、维生素、嘌呤碱和嘧啶碱等生长因子。一般通过加入玉米浆、酵维生素、嘌呤碱和嘧啶碱等生长因子。一般通过加入

14、玉米浆、酵母膏、麸皮、米糠,以及豆饼等来提供。例如:添加含有生长因母膏、麸皮、米糠,以及豆饼等来提供。例如:添加含有生长因子的大豆酒精提取物,可使米曲酶的蛋白酶产量提高子的大豆酒精提取物,可使米曲酶的蛋白酶产量提高1.91.9倍。倍。产酶促进剂产酶促进剂 少量加入之后能显著增加酶产量的物质。一少量加入之后能显著增加酶产量的物质。一般都是酶的般都是酶的诱导物诱导物或或表面活性剂表面活性剂。例如纤维素能诱导纤维素酶,。例如纤维素能诱导纤维素酶,吐温吐温8080可提高多种酶的产量。表面活性剂提高酶产量的作用机制可提高多种酶的产量。表面活性剂提高酶产量的作用机制目前还未完全了解,使用时必须考虑其对微生

15、物是否有毒性。生目前还未完全了解,使用时必须考虑其对微生物是否有毒性。生产上提高胞外酶的活力,一般都采用非离子表面活性剂。产上提高胞外酶的活力,一般都采用非离子表面活性剂。碳源、氮源、无机盐碳源、氮源、无机盐生产工艺生产工艺 工艺控制工艺控制pHpH值的影响及控制值的影响及控制 酶生产的合适酶生产的合适pH pH 通常和酶反应的最适通常和酶反应的最适pHpH值相接近。生成值相接近。生成碱性蛋白酶的芽孢杆菌宜在碱性环境下培养;生产酸性蛋白酶的碱性蛋白酶的芽孢杆菌宜在碱性环境下培养;生产酸性蛋白酶的青霉和根霉应在酸性环境下培养。青霉和根霉应在酸性环境下培养。温度控制温度控制 为了有利于菌体生长和酶

16、的合成,可进行变温生产。例如为了有利于菌体生长和酶的合成,可进行变温生产。例如枯草杆菌枯草杆菌AS1.398AS1.398进行中性蛋白酶生产时,培养温度从进行中性蛋白酶生产时,培养温度从3131o oC C逐渐升逐渐升温至温至4040o oC C,然后再降温至,然后再降温至3131o oC C进行培养,产量提高进行培养,产量提高66%66%。重组重组E. coli一般先一般先3C培养,加诱导剂后培养,加诱导剂后2C产酶。产酶。生产工艺生产工艺 工艺控制工艺控制生长期与产酶的关系生长期与产酶的关系 微生物生长期与产酶有一定的关系,因菌种而异常。如微生物生长期与产酶有一定的关系,因菌种而异常。如曲

17、霉的蛋白酶当菌体生长进入对数生长期时大量分泌;芽孢杆菌曲霉的蛋白酶当菌体生长进入对数生长期时大量分泌;芽孢杆菌的碱性蛋白酶在对数生长期末大量形成芽孢时才生成。的碱性蛋白酶在对数生长期末大量形成芽孢时才生成。通气搅拌的影响通气搅拌的影响 酶生产所用的菌种一般都是需氧微生物,培养时都需要酶生产所用的菌种一般都是需氧微生物,培养时都需要通气搅拌。一般,通气量少对霉菌的孢子萌发和菌丝生长有利,通气搅拌。一般,通气量少对霉菌的孢子萌发和菌丝生长有利,对酶生产不利。因此必须根据不同的需要控制不同时期的通气量。对酶生产不利。因此必须根据不同的需要控制不同时期的通气量。 生产工艺生产工艺 提取提取发酵液预处理

18、发酵液预处理酶的沉淀或吸附酶的沉淀或吸附(盐析法、有机溶剂沉淀法或(盐析法、有机溶剂沉淀法或白土或活性氧化铝吸附)白土或活性氧化铝吸附)干干 燥燥(收集沉淀进行干燥磨粉,加入适当的稳定剂、填(收集沉淀进行干燥磨粉,加入适当的稳定剂、填充剂等制成酶制剂;或在酶液中直接加入适当的稳充剂等制成酶制剂;或在酶液中直接加入适当的稳定剂、填充剂,直接进行喷雾干燥)定剂、填充剂,直接进行喷雾干燥)酶的提取:酶的提取: 酶制剂产品酶制剂产品液体酶液体酶固体酶固体酶生产工艺生产工艺造粒造粒酶粒是在大型连续运转的水平酶粒是在大型连续运转的水平混合机内生产出来的。提取的混合机内生产出来的。提取的酶与盐、纤维素及其他

19、成分混酶与盐、纤维素及其他成分混合形成合形成0.5mm0.5mm大小的粒状物。然大小的粒状物。然后用一种聚合体包裹,以防止后用一种聚合体包裹,以防止酶尘在使用过程中可能引起的酶尘在使用过程中可能引起的致敏危险。致敏危险。造粒对顾客及包含酶的最终产造粒对顾客及包含酶的最终产品来说,都是一种非常有效和品来说,都是一种非常有效和安全的运输固态酶的方式。安全的运输固态酶的方式。用多聚体包裹酶以减少用多聚体包裹酶以减少酶尘引起的致敏危险。酶尘引起的致敏危险。生产工艺生产工艺生产废渣处理生产废渣处理生产废渣实际上是有益于环境生产废渣实际上是有益于环境的。可被用做当地农田的肥料。的。可被用做当地农田的肥料。

20、确保所有的微生物均经灭活之确保所有的微生物均经灭活之后才能从生产车间中运出。将后才能从生产车间中运出。将含硅藻土、培养基和微生物的含硅藻土、培养基和微生物的发酵液经加热及用碳酸钙进行发酵液经加热及用碳酸钙进行处理。处理后的发酵液废渣最处理。处理后的发酵液废渣最终为可持续性工业解决方案做终为可持续性工业解决方案做出了贡献。出了贡献。即使是生产废渣也是即使是生产废渣也是有用的;它们可以用有用的;它们可以用作肥料。作肥料。将生产废渣用做肥料将生产废渣用做肥料 生产工艺生产工艺-中性蛋白酶工艺流程中性蛋白酶工艺流程提高酶产量的方法提高酶产量的方法 酶合成的调节机制:在正常情况下,酶合成的调节机制:在正

21、常情况下,酶产量受酶合成调节机制的控制,要提酶产量受酶合成调节机制的控制,要提高酶产量必须打破这种调节控制。酶合高酶产量必须打破这种调节控制。酶合成主要取决于转录水平的调节,原核生成主要取决于转录水平的调节,原核生物中普遍公认的调节机制是操纵子理论。物中普遍公认的调节机制是操纵子理论。打破酶合成调节限制的方法:打破酶合成调节限制的方法:1 1、通过条件控制提高酶产量:、通过条件控制提高酶产量: 添加诱导物添加诱导物 降低阻遏物浓度降低阻遏物浓度2 2、通过基因突变提高酶产量:、通过基因突变提高酶产量: 使诱导型变为组成型,使阻遏型变为去阻遏型使诱导型变为组成型,使阻遏型变为去阻遏型3 3、其它

22、提高酶产量的方法:、其它提高酶产量的方法: 添加表面活性剂添加表面活性剂 添加产酶促进剂添加产酶促进剂第四节第四节 酶发酵动力学酶发酵动力学发酵动力学:主要研究在发酵过程中细胞生发酵动力学:主要研究在发酵过程中细胞生长速率,产物形成速率以及环境因素对速率长速率,产物形成速率以及环境因素对速率的影响;在酶的发酵生产中的影响;在酶的发酵生产中, ,研究酶发酵动研究酶发酵动力学对于了解酶生物合成模式;发酵条件的力学对于了解酶生物合成模式;发酵条件的优化控制优化控制, ,提高酶产量具有重要的理论指导提高酶产量具有重要的理论指导意义。意义。酶生物合成模式:根据酶的合成与细胞生长酶生物合成模式:根据酶的合

23、成与细胞生长的关系,可以把酶生物合成模式分为的关系,可以把酶生物合成模式分为4 4种类种类型:同步合成型,延续合成型,中期合成型型:同步合成型,延续合成型,中期合成型和滞后合成型。和滞后合成型。4同步合成型:同步合成型:又称生长偶联型又称生长偶联型, ,是指酶合成与细是指酶合成与细胞生长同步进行,当细胞生长进入对数期时,酶胞生长同步进行,当细胞生长进入对数期时,酶也大量合成;当细胞进入稳定期时也大量合成;当细胞进入稳定期时, ,酶的合成也酶的合成也停止。停止。4延续合成型:延续合成型:酶的合成伴随着细胞生长而开始,酶的合成伴随着细胞生长而开始,但在细胞生长进入稳定期后但在细胞生长进入稳定期后,

24、 ,酶的合成仍将延续酶的合成仍将延续较长一段时间。较长一段时间。4中期合成型:中期合成型:酶的合成在细胞生长一段时间后才酶的合成在细胞生长一段时间后才开始,而在细胞生长进入稳定期后开始,而在细胞生长进入稳定期后, ,酶的合成也酶的合成也终止。终止。4滞后合成型:滞后合成型:只有当细胞生长进入稳定期后才开只有当细胞生长进入稳定期后才开始酶的合成并大量积累。始酶的合成并大量积累。浓度浓度时间时间(h)细胞浓度酶浓度细胞浓度酶浓度酶浓度酶浓度细胞浓度细胞浓度A.A.同步合成型同步合成型; ; B.B.延续合成型延续合成型; ; C.C.中期合成型中期合成型; ; D.D.滞后合滞后合成型成型ABCD

25、酶生物合成模式酶生物合成模式 影响酶生物合成模式的因素主要是mRNA和培养基中存在的阻遏物: mRNA稳定性高的,可以在细胞停止生长后继续合成相应的酶; mRNA稳定性差的,随着细胞生长停止而终止酶的合成; 不受阻遏物阻遏的,可随着细胞生长而开始酶的合成;受阻遏物阻遏的,要在细胞生长一段时间或进入稳定期后解除阻遏,才能开始酶的合成。 在酶的工业生产中,为了提高酶产在酶的工业生产中,为了提高酶产率和缩短发酵周期率和缩短发酵周期, ,最理想的酶合成模式最理想的酶合成模式是延续合成型;对于其它类型的酶是延续合成型;对于其它类型的酶, ,要在要在菌种选育和工艺条件上加以调节;对于菌种选育和工艺条件上加

26、以调节;对于同步合成型,尽量提高同步合成型,尽量提高mRNAmRNA的稳定性,的稳定性,如降低发酵温度如降低发酵温度; ;对于滞后合成型对于滞后合成型, ,尽量尽量减少阻遏物;对于中期合成型,要从提减少阻遏物;对于中期合成型,要从提高高mRNAmRNA稳定性和解除阻遏两方面进行。稳定性和解除阻遏两方面进行。第五节第五节 动植物细胞培养生产酶动植物细胞培养生产酶 利用动植物细胞培养生产各种天然物质,是生利用动植物细胞培养生产各种天然物质,是生物工程的一个新领域,物工程的一个新领域,2020世纪世纪8080年代以来,利用植年代以来,利用植物细胞培养生产的有用产物已达物细胞培养生产的有用产物已达10

27、0100多种,其中酶制多种,其中酶制剂有剂有1010多种。多种。 包括糖苷酶包括糖苷酶( (胡萝卜细胞,胡萝卜细胞,1981)1981),过氧化物酶,过氧化物酶( (甜菜细胞,甜菜细胞,19831983;大豆细胞,;大豆细胞,1989)1989)等。呈现出良等。呈现出良好的发展前景好的发展前景.一、动植物细胞的特点一、动植物细胞的特点: :1 1、体积比微生物大;、体积比微生物大;2 2、对剪切力敏感;、对剪切力敏感;3 3、生长和代谢速率低,生长倍增时间和发、生长和代谢速率低,生长倍增时间和发 酵周期长;酵周期长;4 4、动物细胞营养要求复杂;、动物细胞营养要求复杂;5 5、发酵产物不同、发

28、酵产物不同二、植物细胞培养和发酵二、植物细胞培养和发酵1 1、植物细胞发酵技术和特点:、植物细胞发酵技术和特点:发酵特点(与直接提取分离相比较而言):发酵特点(与直接提取分离相比较而言):(1 1)提高产率;)提高产率;(2 2)缩短周期)缩短周期; ;(3 3)易于管理、减轻劳动强度;)易于管理、减轻劳动强度;(4 4)提高质量。)提高质量。2 2、植物细胞发酵技术、植物细胞发酵技术( (I)I)高产细胞系的选择:高产细胞系的选择: 主要有以下几个途径:主要有以下几个途径:材料选择,克隆选择,抗性选择,诱变选择材料选择,克隆选择,抗性选择,诱变选择, ,细胞工程和基因工程选择;细胞工程和基因

29、工程选择;( (II)II)影响产物产量的因素:影响产物产量的因素: 材料来源材料来源, ,培养基培养基成分,光照和温度,成分,光照和温度,pHpH,细胞形态分化程度等细胞形态分化程度等; ;( (III)III)提高产物产量的途径:提高产物产量的途径: 选择高产细胞系,选择高产细胞系,控制细胞生长和分化程度,加入诱导物或前体,控制细胞生长和分化程度,加入诱导物或前体,两相培养和产物释放,毛状根培养技术。两相培养和产物释放,毛状根培养技术。( (IV)IV)植物细胞培养系统专用的生物反应器。植物细胞培养系统专用的生物反应器。3 3、植物细胞发酵产酶的工艺条件控制、植物细胞发酵产酶的工艺条件控制

30、(1 1)植物细胞生长和发酵所使用的培养基:)植物细胞生长和发酵所使用的培养基:大量无机盐、维生素和植物激素、无机氮大量无机盐、维生素和植物激素、无机氮源、碳源(蔗糖)源、碳源(蔗糖), ,如如MSMS培养基和培养基和B B5 5培养基培养基(2 2)温度和)温度和pHpH值值(3 3)通风与搅拌)通风与搅拌(4 4)前提的添加)前提的添加(5 5)刺激剂的应用)刺激剂的应用三、动物细胞发酵三、动物细胞发酵1 1、动物细胞可以生产多种具有较高价值的药物,特、动物细胞可以生产多种具有较高价值的药物,特 别是疫苗、激素、单克隆抗体和酶等。别是疫苗、激素、单克隆抗体和酶等。 由动物细胞培养生产的酶有

31、胶原酶,血纤蛋白溶由动物细胞培养生产的酶有胶原酶,血纤蛋白溶酶原活性剂等。酶原活性剂等。2 2、动物细胞培养方法:、动物细胞培养方法: 悬浮培养;固定化细胞培养悬浮培养;固定化细胞培养3 3、动物细胞发酵工艺条件的控制、动物细胞发酵工艺条件的控制作业题:简述一种酶制剂的开发过程!1. 名词解释:酶的发酵生产、固定化细胞发酵、发酵动名词解释:酶的发酵生产、固定化细胞发酵、发酵动力学力学2. 酶发酵生产的方式有哪些?(根据细胞培养方式的不酶发酵生产的方式有哪些?(根据细胞培养方式的不同)同)3. 酶发酵生产常用的微生物有哪些?简介产酶性质。酶发酵生产常用的微生物有哪些?简介产酶性质。4. 简述发酵工艺条件是如何调节控制的。简述发酵工艺条件是如何调节控制的。5. 提高酶产量的措施有哪些?提高酶产量的措施有哪些?6. 酶生物合成的模式有哪些?酶生物合成的模式有哪些?7. 简述固定化细胞发酵产酶的特点及其工艺条件的控制。简述固定化细胞发酵产酶的特点及其工艺条件的控制。8. 简述植物细胞发酵技术及其产酶工艺条件的控制。简述植物细胞发酵技术及其产酶工艺条件的控制。9. 动物细胞培养和发酵所得动物功能蛋白有哪些?动物细胞培养和发酵所得动物功能蛋白有哪些?

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