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1、血清总蛋白（血清总蛋白（TP）测定）测定与线性范围试验与线性范围试验邹佳峻邹佳峻一、双缩脲法测定血清总蛋白一、双缩脲法测定血清总蛋白（TP）二、线性范围试验二、线性范围试验1.1.实验目的：实验目的：掌握双缩脲法测定蛋白质含量的原理、方法掌握双缩脲法测定蛋白质含量的原理、方法熟悉熟悉722分光光度计的使用分光光度计的使用了解了解TP测定的临床意义测定的临床意义一、一、双缩脲法测定血清总蛋白双缩脲法测定血清总蛋白（TP）+Cu2+ OH-2.2.实验原理：实验原理：CO(NH2) 2 + CO(NH2) 2缩合缩合H2N-OC-NH-CO-NH2紫红色化合物紫红色化合物（1）双缩脲反应：）双缩脲
2、反应： OH-蛋蛋白白质质分分子子中中的的肽肽键键 + + 铜铜离离子子 紫紫红红色色复复合合物物 （-CO-NH-） Cu2+紫紫色色复复合合物物在在540nm波波长长有有特特定定的的吸吸收收峰峰，其其颜颜色色的的深深浅浅（吸吸光光度度）与与蛋蛋白白质质的的浓浓度度在在一定范围内一定范围内成正比。成正比。此此反反应应和和2个个尿尿素素分分子子缩缩合合后后生生成成的的双双缩缩脲脲在在碱碱性性溶溶液液中中与与Cu2+作作用用生生成成紫紫红红色色复复合合物物的反应相似，故称双缩脲反应。的反应相似，故称双缩脲反应。（2 2）双缩脲法测定）双缩脲法测定TP的原理的原理 3.3.实验材料：实验材料：试剂
3、：试剂：（1 1）商品双缩脲试剂）商品双缩脲试剂 （2 2）自配双缩脲试剂）自配双缩脲试剂 （3 3）血清样品）血清样品 （4 4）总蛋白标准液（）总蛋白标准液（70.0g/L70.0g/L）器材：器材：试管、加样枪、吸量管试管、加样枪、吸量管 、722722分光光分光光度计、水浴箱度计、水浴箱4.4.实验方法：实验方法：取取5 5支试管，按下表操作：支试管，按下表操作：另取另取5支试管，按下表操作：支试管，按下表操作：5.5.实验结果：实验结果：参考值：参考值： 6082g/L结合实验数据分析结果进行讨论结合实验数据分析结果进行讨论, ,用用SPSS13.0SPSS13.0分析两组数据间有无
4、统计学意义（配对分析两组数据间有无统计学意义（配对t t检验）检验）。 6.6.总蛋白测定的临床意义：总蛋白测定的临床意义：（1 1）血清总蛋白浓度增高见于：）血清总蛋白浓度增高见于： a.a.蛋白质合成增加（如多发性骨髓瘤）；蛋白质合成增加（如多发性骨髓瘤）； b.b.血浆浓缩（如呕吐、严重腹泻、高烧）。血浆浓缩（如呕吐、严重腹泻、高烧）。（2 2）血清总蛋白浓度降低见于：）血清总蛋白浓度降低见于： a.a.蛋白质合成障碍（如肝严重受损）；蛋白质合成障碍（如肝严重受损）； b.b.蛋蛋白白质质丢丢失失增增加加（如如严严重重烧烧伤伤、肾肾病病综综合合征）；征）； c.c.营营养养不不良良或或消
5、消耗耗增增加加（如如低低蛋蛋白白饮饮食食、严严重结核病、甲亢）；重结核病、甲亢）； d.d.血液稀释。血液稀释。配对样本是指配对样本是指同一样本同一样本进行两次测试所获得进行两次测试所获得的两组数据，或对的两组数据，或对两个完全相同两个完全相同的样本在不的样本在不同条件下进行测试所得的两组数据。同条件下进行测试所得的两组数据。SPSS13.0操作：操作：1、录入数据；、录入数据；2、选择菜单：、选择菜单：Analyze Compare Means Paried-Sample T Test3、生成统计结果，查看、生成统计结果，查看P“sig.(2-tailde)”（值（值（P值值0.05，可以认为两种方法的结果，可以认为两种方法的结果差别无显著性差异；差别无显著性差异；PRegression Linear 8、选择自变量选择自变量（X），），因变量因变量（Y）：将将“因变量因变量”选入选入“Dependent”下框内，下框内，“自自变变量量”选选入入“Independent”下下框框，点点击击“OK” 9、生成分析结果生成分析结果“Regression”并标注并标注 ：
